实验七1人体barr小体制片及观察

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,遗 传 学 实 验,实验,七,退出,2024/11/27,1,人体barr小体的制片及观察,实验七,2024/11/27,2,三色猫（又叫做三玳瑁猫）,x连锁的基因失活,2024/11/27,3,1949年，MLBarr等人发现，在猫的雌性个体内，神经细胞核膜内缘有一染色很深的小体(后来定名为,x小体,或,Barr氏小体,、巴氏小体,)，而雄性个体细胞中则没有。,2024/11/27,4,2024/11/27,5,以后在人类女性口腔上皮,、,阴道上皮、皮肤、羊水等细胞中，也发现了类似的结构。,barr,小体的数目在正常女性中是X染色体数目减去一。经观察，X小体一般,1-1.5,微米，呈,三角形,或,卵圆形,。,2024/11/27,6,2024/11/27,7,2n=46(XX),2024/11/27,8,在人类，男性细胞核中很少或根本没有,barr,小体，而女性则有1个。,以后研究表明，,barr,小体就是,x,染色质异固缩,（细胞分裂周期中与大部分染色质不同步的螺旋化现象）的结果。,体育运动会上的性别鉴定主要采用,barr,小体方法。,2024/11/27,9,In 1961,British Geneticist,Mary Lyon,2024/11/27,10,Lyon假说（Lyon hypothesis）,正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条X染色体中只有一条在遗传上有活性，另一条在遗传上无活性。,X染色体的失活是随机的。,失活发生在胚胎发育早期，X染色体一经失活，其后代细胞中该染色体均处于失活状态。,2024/11/27,11,2024/11/27,12,胎儿性别和性染色体异常的患者,克氏,(,Klinefelters,),：,47，XXY,，,有一个巴氏小体,.,特纳氏,(,Turners,),：,45，XO,，,无,barr,小体。,如,XXY、XXYY,有1个巴氏小体，而,XXX,、,XXXY,有2个巴氏小体等。,2024/11/27,13,2n=47（,XXY,）,2024/11/27,14,人类的特纳氏（,Turner syndrome，,44+x）综合症,2n=45（,XO,）,2024/11/27,15,2024/11/27,16,2n=47(XXX),2024/11/27,17,一、实验目的,1学习和掌握人体barr小体的制片技术；,2观察barr小体；,3了解barr小体数目与人类性别畸形的关系；,4了解异固缩现象。,2024/11/27,18,二、实验材料,人体口腔上皮细胞,毛囊细胞,的根部,2024/11/27,19,四,、,实验器具和药品,实验器具：,显微镜、载片、盖片、无菌牙签等。,实验药品：,1、,1N或5N盐酸或浓盐酸和95乙醇 1：1的混合液,。,2、,改良苯酚品红染色液,。,2024/11/27,20,五、实验步骤,（一）,口腔粘膜细胞Barr氏小体显示方法,1,、,取材与固定,：,实验前用可食用水漱口，然后以无菌牙签刮取口腔颊部粘膜(第一次的刮取物弃去)，将刮取物均匀涂于载玻片上，放在空气中干燥。,2,、,染色与观察：,用改良苯酚品红染液染色1015分钟，倾斜载玻片，倒掉染液。用吸水纸轻轻擦拭干载玻片上的染液。放于显微镜下观察。,2024/11/27,21,注意,在制作的玻片标本中，选择细胞轮廓清楚、染色清晰，核大，核质呈均匀细网状的细胞100个，统计,barr,小体的频率(可与男性细胞对照观察)。,制片时，一定刮取细胞膜、核膜完整的,细胞核未解体的口腔粘膜细胞,。,2024/11/27,22,（二）,发根毛囊细胞Barr氏小体显色方法,1、,取材,：,取带有发根的头发，围绕发根部的1圈长2,-,3mm的白色物体，即是毛囊细胞团，将其放置于载片上。在毛囊细胞处滴加一滴浓盐酸和95乙醇1：1的混合液。约10min以后，可使毛囊细胞得到充分软化。以清水冲洗2-3遍，将酸解液冲洗干净。拿起上述发根的梢部，将其上毛囊细胞轻轻蹭于另一干净载片上即可达到转移的目的。,2024/11/27,23,2、染色：,可滴加1滴染液于待测细胞上，注意染液不可过多，以免细胞流失。约10min后，加盖玻片即可进行观察。,2024/11/27,24,注意,一,根发根的毛囊细胞可以转移到3,-,4张载片上，以达到充分利用实验材料的目的。,观察时又可以看到清晰的单层涂布细胞，便于观察统计。,取清洁的毛囊。,盐酸清洗干净。,2024/11/27,25,低倍镜下检出典型的可数细胞，其标准是：核质呈网状或细颗粒状分布；核膜清晰，核无缺损；染色适度；周围无杂菌。,barr小体,：一结构致密的小体，轮廓清楚，大小约1,m,左右，常附于核膜边缘或靠近内侧，形状为微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形等。,注意,2024/11/27,26,2024/11/27,27,女性细胞1,2024/11/27,28,女性细胞2,2024/11/27,29,女性细胞3,2024/11/27,30,六、实验作业,制作口腔上皮细胞和毛囊细胞barr小体玻片。,计算观察细胞中的barr小体比率。,思考,说明一个细胞中barr数目的多少与性别畸形有何关系？,2024/11/27,31,