白血病免疫分型课件

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,白血病/淋巴瘤免疫分型,临检血液 蒋能刚,白血病/淋巴瘤免疫分型临检血液 蒋能刚,1,应用目的：,确定淋巴系病变的起源和分化程度；,鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病；,确定髓系白血病各亚型；,对形态学分类不明细胞进行定性；,诊断急性未分化型白血病；,诊断急性混合细胞白血病；,诊断微小残留白血病或白血病浸润；,判断白血病/淋巴瘤预后。,应用目的：,2,流式细胞术(Flow Cytometry):,对高速流过检测区的单个细胞或生物颗粒进行多参数、快速分析（或分选）的一种技术。,流式细胞术(Flow Cytometry):,3,白血病免疫分型课件,4,数据显示方式：,单参数直方图,双参数二维点图,等高图,二维密度图,三维图,数据显示方式：,5,单参数直方图,双参数点图,单参数直方图双参数点图,6,荧光素,FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（,绿,）,PE（藻红蛋白）：575nm（,橙黄,）,PI(碘化丙啶）：620nm（,橙红,）,PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白）：675nm（,深红,）,APC(别藻兰蛋白）：660nm（,红,）,荧光素FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（绿）,7,检测物：,细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质,检测物：,8,CD（cluster of differentiation）：1982年起将识别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。,其他非CD系列抗原：如TCR、HLA等,CD（cluster of differentiation）,9,正常血细胞中的抗原表达特点,1.系列保守性,2.时序性,3.抗原表达量的模式化,正常血细胞中的抗原表达特点1.系列保守性,10,干细胞,嗜碱性细胞,嗜酸性细胞,定向髓系干细胞,红系,巨核系,粒单核系,粒系,单核系,CD36 CD71 CD235a,CD41 CD42a/b CD61,CD4 CD11b CD14,CD64 HLA-DR,CD36,CD15 CD71 CD16,(TDT CD7),CD34 CD117,CD13 CD33,CD38 MPO,CD34 CD13,CD33 CD117,MPO,干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞定向髓系干细胞红系巨核系粒单核系粒,11,抗原刺激,干细胞,早前B,前B,静止期B,Pro-B ALL,Pre-B ALL,Common-B ALL,CLL/SLL,免疫母细胞,浆细胞样淋巴细胞,大B细胞淋巴瘤,淋巴浆细胞淋巴瘤,外套细胞,滤泡区母细胞,中心母细胞,中心细胞,边缘带细胞,浆细胞,套细胞淋巴瘤,伯基特淋巴瘤,大B细胞淋巴瘤,滤泡淋巴瘤,边缘带淋巴瘤,骨髓瘤,TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD10 c-,TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD20 CD10+c-,TDT+CD34 cCD79a+CD19+CD20+CD10 c+,CD5+CD19+CD20 CD22+CD23+sIg+FMC7-,CD38 CD138 CD56 cIg CD19-CD45-,CD22+CD5-CD10-CD23-,CD22+CD10+FMC7+CD23,bcl-2+CD5-,CD19+CD20+CD22+CD38+IgM+sIg+,CD22+CD10+sIg+CD34-TDT-,CD5+CD22+sIg+FMC7+Cyclin D1+CD23-,CD22+bcl-6+CD10 CD5 CD30,抗原刺激干细胞早前B前B静止期BPro-B ALLPre-B,12,干细胞,胸腺期,胸腺期,TDT+,CD34+,CD2,cCD3,CD7,CD71,TDT+,CD34,CD1a,CD2,cCD3,CD7,CD4,CD8,胸腺期,TDT+,CD2,CD3,CD5,CD7,CD4/CD8,TCR,Precursor-T ALL,成熟T细胞各分化群,干细胞胸腺期胸腺期TDT+TDT+胸腺期TDT+Pre,13,造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的有无、表达强弱与血细胞的分化发育阶段密切相关，表现出与,细胞系列,及其,分化程度,相关的特性。,白血病免疫分型课件,14,白血病细胞中的抗原表达特点,表达模式基本与相应阶段正常细胞相似，还具有以下特点：,1.跨系表达,2.时相混乱,3.抗原表达量的改变,白血病细胞中的抗原表达特点 表达模式基本与相应阶段正常,15,免疫分型四种急性白血病,单表型急性白血病,表达某一个系列抗原为主的急性白血病,双表型/双克隆急性白血病,未分化型急性白血病,免疫分型四种急性白血病单表型急性白血病,16,各系急性白血病重要抗原指标,1.急性淋巴细胞白血病(AL),敏感性 特异性,B-ALL:,CD19 100%非特异,cCD79a 99%特异,T-ALL:,CD7 100%非特异,cCD3 100%特异,各系急性白血病重要抗原指标1.急性淋巴细胞白血病(AL),17,2.急性髓细胞白血病(AML),表达率 特异性,CD13 70%非特异,CD33 70%非特异,CD117 70%特异,cMPO 70%特异,2.急性髓细胞白血病(AML),18,错译表达（Ly+AML，My+ALL）：,白血病细胞表达非本系细胞抗原标志物，具有预后意义。,错译表达（Ly+AML，My+ALL）：,19,ALL,CD13，CD33t(9;22),AML,CD2+，DR-M3 t(15;17)，或RAR+，t(11;17),CD2+，DR+M4Eo inv(16)或 t(16;16),CD19+M0t(9:22)多见,M2t(8;21),TdT+,CD7+见于M0,CD56+M5/M4,ALL,20,双表型急性白血病记分系统,分值 B系 T系 髓系,2 cCD79a cCD3 cMPO,CD22 TCR,cIgM TCR,1,CD19 CD2 CD117,CD10 CD5 CD13,CD20 CD8 CD33,0.5 TdT TdT CD14,CD24 CD7 CD15,CD64,双表型急性白血病记分系统分值,21,部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型,CD5,CD10,CD19,CD22,CD23,HLA-DR,FMC7,SIg,CD11c,CLL,+,-,+,+/-,+,+,-,+,+/-,PLL,-,-,+,+,-,+,+,+,-,MCL,+,-/+,+,+,-,+,+,+,-,HCL,-,-,+,+,-,+,+,+,+,FCL,-,+,+,+,-/+,+,+/-,+,-,MZL,-,-,+,+,-,+,+,+,+/-,LPL,-,-,+,+,-/+,+,-/+,注：HCL CD103+CD25+,部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型 CD5CD10CD1,22,部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型,CD2,CD3,CD5,CD7,CD4,CD8,CD25,CD56,CD57,T-CLL/PLL,+,+,+,+,+/-,-/+,-,T-LGL,+,+,+/-,+/-,-,+,-,-/+,+,NK-LGL,+,-,-,-,+/-,-,+,-,ATL,+,+,+,-,+,+,肝脾T细胞淋巴瘤：CD2+CD3+CD7+TCR+CD16+/-CD56+/-CD8-/+,CD4-TCR-,部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD2CD3CD5CD,23,标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、淋巴结等。,标本要求：细胞有活性，最好不要超过48h。,标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹,24,光散射特征与细胞形态的关系,光散射特征与细胞形态的关系,25,淋巴,单核,粒细胞,CD45,CD45,M4/M5,M 3,正常,白血病,L13,M02,M6,M7,T,SSC,SSC,MM 非造血 来源细胞,CD45在免疫分型中的应用意义,原始,嗜碱,嗜酸,淋巴单核粒细胞CD45CD45M4/M5M 3正常白血病L1,26,正常骨髓,正常骨髓,27,AML-M1,AML-M2,AML-M3,AML-M4/M5,AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5,28,AML-M6,非造血细胞,非特异性染色（死亡细胞）,ALL,AML-M6非造血细胞非特异性染色（死亡细胞）ALL,29,分类不明细胞,分类不明细胞,30,B细胞克隆性,B细胞克隆性,31,结果报告,结果报告,32,白血病免疫分型其他方法：,酶-底物显色,荧光显微镜,白血病免疫分型其他方法：,33,谢谢,谢谢,34,