理学抗体终

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,抗体（,antibody，Ab）,能与相应抗原特异性结合,并具有多种免疫学和生物学活性的蛋白质，也称为免疫球蛋白（,Immunoglobulin,Ig）。,包括膜型,Ig,和分泌型,Ig。,J,链,Ig,a,Ig,b,Ig,a,Ig,b,膜型,Ig（BCR）,分泌型,Ig,是跨膜分子,表达于,B,细胞表面,单体结构,单体或多聚体结构,是可溶性分子,存在于免疫血清和分泌液中,是体液免疫应答的效应分子,抗体分子的基本结构 及其多样性,Basic Structure and Diversity of Antibody Molecules,抗体分子的基本结构,：四肽链结构,由两条相同的,轻链,（,L,ight Chain）,和两条相同的,重链,（,H,eavy chain）,通过链间二硫键连结形成。,NH2（N,端）,COOH （C,端）,7-1,L,H,Carbohydrate,轻链和重链,轻链（,L,链）,链,链,重链（,H,链）:,根据其抗原性的差异，人类,Ig,的,H,链分为,重链决定,Ig,类及亚类,链,链,链,链,链,IgG IgA IgM IgD IgE,正常人,：2 ：1,轻链决定型别,型,型,可变区和恒定区,（,V,ariable region and,C,onstant region）,V,区：,V,L,、V,H,可变区（,V,区）,：,氨基酸种类、排列顺序差异较大，构成抗体的多样性,。,恒定区（,C,区）,氨基酸种类、排列顺序恒定,C,区：,C,L,、C,H,“三明治样”立体结构,抗体分子的立体结构,决定簇互补区,（complementarity-determinant region, CDR ）,抗体与抗原决定簇结合的位置,，又称为决定簇互补区（,CDR），,也是抗体分子的,独特型决定簇,(,Idiotypes of antibody molecules,Id,),的主要存在部位。,抗原决定簇,(,antigenic determinant,),又称表位,(,epitope,),抗原分子表面能与其抗体结合的部位称为抗原决定簇,，是免疫应答特异性的物质基础。,铰链区（,hinge region）,位于,CH,1,和,CH,2,之间，富含脯氨酸，易发生伸展和一定程度的移动,，,便于抗体更好地与抗原结合,;而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,。,铰链区,免疫球蛋白的辅助结构,J,链（,joining chain）,参与,IgA (H,2,L,2,),2,与,IgM (H,2,L,2,),5,连接,分泌片（,secretory piece, SP）,粘膜上皮细胞分泌,保护,sIgA,不被蛋白酶降解,介导,IgA,的转运,J,链,J,链,分泌链,单体、二聚体、五聚体,40,nm,抗 原,抗体,抗 原,IgG CH3,区：,可与单核-,M,细胞、,B,细胞、,NK,细胞、中性粒细胞上的,IgG-Fc,受体,结合,调理吞噬、,ADCC,。,IgG CH2,区：,补体结合点和通过胎盘的部位。,免疫球蛋白的水解片段,木瓜蛋白酶水解,裂解部位：铰链区二硫键,N,端侧,裂解片段：,2,Fab+Fc,Fc,Fab,Fab,（,f,ragment,a,ntigen,b,inding,）,可与抗原结合的片断,抗原结合价 = 1,特异性由,V,H,和,V,L,决定,不,能形成凝集或沉淀反应,Fc,段,（,f,ragment,c,rystallizable）,可结晶片段,多种生物 学功能,裂解部位：铰链区二硫键,C,端侧,裂解片段,F(ab,),2,+pFc,胃蛋白酶水解,pFc,F(ab,),2,F(ab,),2,：,具双价抗体活性,能形成凝集或沉淀反应,生物制品应用,pFc,：,无生物学活性的小碎片。,免疫球蛋白的功能区(结构域）,Ig,分子通过链内二硫键折叠或若干个能行使特定功能的球形单位，每个球形单位为一个,功能区。,L,链：,VL,区、,CL,区,H,链：,VH,区、,CH,1,区,CH,2,区,CH,3,区,CH,4,区(,IgM、IgE ),V,区,C,区,VL+VH,功能区：,抗原结合部位（2个）,CH3,功能区,：是,Ig,与其,Fc,受体结合的部位(固定细胞）,CL,和,CH,区,：具有同种异型抗体的遗传标记。（2个）,CH2,区,：,IgG,的补体结合点和通过胎盘的部位,功能区的作用,免疫球蛋白的功能,一、特异性结合抗原:中和外毒素、病毒，阻止细菌粘附于宿主细胞。,二、激活补体 ，发挥溶细胞活性,三、亲细胞性（固定细胞）,IgG Fc,受体（,Fc,R）,：,存在于单核-吞噬细胞、中性粒细胞、,NK,细胞、嗜酸性粒细胞、,B,细胞上,。与调理吞噬、,ADCC（,抗体依赖细胞介导的细胞毒作用）有关。,IgE Fc,受体（,Fc,R）,：,存在于肥大细胞和嗜碱性粒细胞膜上。与,I,型超敏反应有关。,四、通过胎盘和粘膜：,IgG,是唯一能穿过胎盘的免疫球蛋白，,sIgA,能穿过粘膜。,五、免疫调节功能,IgG,血清中含量最高、半衰期最长的抗体,唯一能通过胎盘的,Ig，,对新生儿抗感染起重要作用,再次应答的主要抗体 体内最重要的保护性抗体,具有多种功能：结合、凝集抗原中和细菌毒素、中和病毒激活补体调理吞噬能与,SPA,结合,免疫球蛋白类别及亚类的特性与功能,Properties of Antibody,Classes and Subclasses,IgG,分 子 的 四 种 亚 型,IgG1,IgG4,IgG3,IgG2,四种亚类的,IgG,分子在血清中的浓度不同,分子量最大的,Ig（,五聚体）,在个体发育过程中,最早出现的抗体,（胚胎发育晚期即可出现）,初次应答的主要抗体,近期感染的指标,激活补体、裂解细菌、调理吞噬等作用均比,IgG,更有效,不能通过血管进入组织。,血清,IgM,是五聚体结构，膜型,IgM（serfase IgM，sIgM）,是单体结构。,sIgM,是,BCR。,IgM,IgM,J,链,IgM,抗 体 结 构,分 泌 型,IgM,膜 型,IgM,sIgM,Ig,a,Ig,b,Ig,a,Ig,b,分泌型,IgA：,由两个,IgA,单体与,J,链和分泌片结合而成二聚体结构；是人体外分泌液中的主要抗体； ,由黏膜相关淋巴组织（,MALT）,产生,，对防御病原微生物入侵起重要作用，又称为,局部防御性抗体,。,在局部抗感染中发挥重要作用。,IgA,J,链,分泌链,有两型：血清,IgA（,单体）和分泌型,IgA（,二聚体）。,IgD,分 子 的 结 构,IgD,1、,血清,IgD,含量低。,2、,膜型,IgD,存在于成熟,B,细胞,表面，,为,BCR,，,是,B,细胞成,熟的标志。,IgE,分 子 的 结 构,IgE,血清,含量,最低,IgE,没有铰链区，有4个,CH,结构域（,CH14）,CH2、CH3,能够与肥 大细胞和嗜碱性粒细胞表面的,IgE- Fc,受体结合，,介导型超敏反应。与抗寄生虫感染有关。,不能固定补体,1,（,HBsAg-,乙肝病毒 表面抗原）为已经感染病毒的标志， 并不反映病毒有无复制、传染性强弱；,2,（,HBsAb-,乙肝病毒 表面抗体）为中和性抗体标志，是否康复或是否有抵抗力的主要标志。疫苗接种者，若仅此项阳性，应视为乙肝疫苗接种后正常现象。,3,（,HBeAg-,乙肝病毒,e,抗原）为病毒复制标志。持续阳性,3,个月以上则有慢性化倾向。,4,（,HBeAb-,乙肝病毒,e,抗体）为病毒复制停止标志。病毒复制减少，传染性较弱，但并非完全没有传染性；,5,（,HBcAb-,乙肝病毒核心抗体）为曾经感染过或正在感染者都会出现的标志。,1,、,3,、,5,为阳性，其他为阴性代表乙肝“大三阳”,1,、,4,、,5,为阳性，其他为阴代表乙肝“小三阳”,第六节 单克隆抗体和基因工程抗体,一、多克隆抗体（,polyclonal antibody,）,1.,定义 指由不同,B,细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。如:免疫血清（含多种特异性抗体）。,2.实际意义,（1）预防、治疗感染性疾病,（2）临床诊断,基因工程抗体,(,genetic engineering,antibody,),1.,定义 在,DNA,水平对,Ig,基因进行切割、拼接或修,饰，导入受体细胞表达的抗体。,2.举例,人,-,鼠嵌合抗体,(,chimeric antibody,),改型抗体,(,reshaped humanized antibody,),小分子抗体,双特异性抗体,(,bispecific antibody,),1,、绘制抗体结构示意图，标识各功能区。,2,、了解各功能区的生物学功能。,3,、抗原决定簇,4,、,Fab,片段,5,、免疫球蛋白（抗体）的功能。,6,、抗体分类 和各种抗体主要特性。,