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Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,专题,5,DNA,和蛋白质技术,课题,1,DNA,的粗提取和鉴定,专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取和鉴定,1,讨论,2,:如何证明他们是遗传物质?,讨论,3,:怎样才能将细胞内的这些物质分离出来?,讨论,1,:构成生物体的遗传物质是什么?,讨论2:如何证明他们是遗传物质?讨论3:怎样才能将细胞内的,2,1,、提取生物大分子的基本思路,选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子,2,、生物大分子,主要指蛋白质、酶和核酸,3,、提取,DNA,的基本思路,利用,DNA,与,RNA,、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取,DNA,,去除其他成分,基础知识,提取,DNA,的方法,1、提取生物大分子的基本思路2、生物大分子3、提取DNA的基,3,4,、,DNA,的溶解性,DNA,和蛋白质等其他成分在不同浓度的,NaCl,溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使,DNA,充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,根据,DNA,在,NaCl,溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下,,DNA,的溶解度最小?,DNA,在,NaCl,溶液中的溶解度是如何变化的,?,在,NaCl,溶液浓度低于,0.14 mol/L,时,,DNA,的溶解度随,NaCl,溶液浓度的增加而逐渐降低;在,0.14 mol/L,时,,DNA,溶解度最小;当,NaCl,溶液浓度继续增加时,,DNA,的溶解度又逐渐增大。,如何通过控制,NaCl,溶液的浓度使,DNA,在盐溶液中溶解或析出?,当氯化钠的物质的量浓度为,2 mol,L,时,,DNA,的溶解度最大,浓度为,0,14 mol,L,时,,DNA,的溶解度最低。利用这一原理,可以使,DNA,在盐溶液中溶解或析出,4、DNA的溶解性根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,4,6,、,DNA,在酒精溶液中的溶解性,DNA,不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以将,DNA,与蛋白质进一步分离,7,、,DNA,对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是对,DNA,没有影响,大多数蛋白质不能忍受,60,80C,的高温,而,DNA,在,80C,以上才会变性,洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对,DNA,没有影响,6、DNA在酒精溶液中的溶解性7、DNA对酶、高温和洗涤剂的,5,DNA的粗提取与鉴定课件,6,(一)实验材料的选取,(一)实验材料的选取,7,(二)破碎细胞,获取含,DNA,的滤液,讨论:为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液讨论:为什么加入蒸馏水能使,8,2,、植物细胞,植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜,实例:提取洋葱,DNA,时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行从分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液,2、植物细胞实例:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定,9,讨论:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?,(三)去除滤液中的杂质,为了纯化提取的,DNA,需要将滤液作进一步处理,讨论:此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?,答:可能含有核蛋白、多糖和,RNA,等杂质,讨论:如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?(三)去除,10,为什么反复地溶解与析出,DNA,,能够去除杂质,为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质,11,DNA的粗提取与鉴定课件,12,(四),DNA,的析出与鉴定,(四)DNA的析出与鉴定,13,DNA的粗提取与鉴定课件,14,1,、以血液为实验材料时,每,100ml,血液中需要加入,3g,柠檬酸钠,防止血液凝固。,2,、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧,DNA,分子的断裂,导致,DNA,分子不能形成絮状沉淀。,3,、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。,1、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸,15,DNA的粗提取与鉴定课件,16,1,、许多人企求着生活的完美结局,殊不知美根本不在结局,而在于追求的过程。,2,、慢慢的才知道:坚持未必就是胜利,放弃未必就是认输,。给自己一个迂回的空间,学会思索,学会等待,学会调整。人生没有假设,当下即是全部。背不动的,放下了;伤不起的,看淡了;想不通的,不想了;恨不过的,抚平了。,3,、在比夜更深的地方,一定有比夜更黑的眼睛。,4,、一切伟大的行动和思想,都有一个微不足道的开始。,5,、从来不跌倒不算光彩,每次跌倒后能再站起来,才是最大的荣耀。,6,、这个世界到处充满着不公平,我们能做的不仅仅是接受,还要试着做一些反抗。,7,、一个最困苦、最卑贱、最为命运所屈辱的人,只要还抱有希望,便无所怨惧。,8,、有些人,因为陪你走的时间长了,你便淡然了,其实是他们给你撑起了生命的天空;有些人,分开了,就忘了吧,残缺是一种大美。,9,、照自己的意思去理解自己,不要小看自己,被别人的意见引入歧途。,10,、没人能让我输,除非我不想赢!,11,、花开不是为了花落,而是为了开的更加灿烂。,12,、随随便便浪费的时间,再也不能赢回来。,13,、不管从什么时候开始,重要的是开始以后不要停止;不管在什么时候结束,重要的是结束以后不要后悔。,14,、当你决定坚持一件事情,全世界都会为你让路。,15,、只有在开水里,茶叶才能展开生命浓郁的香气。,16,、别想一下造出大海,必须先由小河川开始。,17,、不要让未来的你,讨厌现在的自己,困惑谁都有,但成功只配得上勇敢的行动派。,18,、人生最大的喜悦是每个人都说你做不到,你却完成它了!,19,、如果你真的愿意为自己的梦想去努力,最差的结果,不过是大器晚成。,20,、不忘初心,方得始终。,1、许多人企求着生活的完美结局,殊不知美根本不在结局,而,17,
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