临床血液分析技术基础

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/11/3,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/11/3,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/11/3,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/11/3,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/11/3,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,临床血液分析技术基础,鄂钢医院检验科 梅玉峰,2020/11/3,1,内容,一、概述,二、标本采集,三、测定方法原理,四、直方图,五、参考区间,六、临床意义,七、,CRP,在临床血液分析应用,2020/11/3,2,一、概述,2020/11/3,3,什么是临床血液学,化验项目名称：血常规（血,Rt),临床血液学在所有的医学实验室里扮演着最重要的角色，是医生在做出诊断前最先开出的化验项目。,化验目的：检测全血各细胞成分的数量、比例、体积、结构和形态、分类情况及异常细胞等,2020/11/3,4,血液的一般检查（血常规检查）是对血液,中的有形成分,（红细胞、白细胞和血小板,),的数量和质量进行检测。包括全血细胞计,数和白细胞的分类计数。,CBC+DF+,Ret,2020/11/3,5,二、标本采集,2020/11/3,6,2020/11/3,7,采血顺序,(,according to,CLSI,recommendation),（ 安 全 头 盖 ）,促凝剂,+,分离胶,促凝剂,3.2%,柠檬酸钠,与血样比,19,肝素锂,肝素钠,EDTA-K,2,EDTA-K,3,氟化钠,+,草酸钾,氟化钠,+ EDTA,3.8%,柠檬酸钠,与血样比,14,2020/11/3,8,标本采集与要求,抗凝剂 ：,EDTA-K2,静脉采血方法 ：,4,小时内测定,毛细血管采血方法 ：半小时内测定,手指血与静脉血有差异，条件允许尽可能静脉采血,尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数于站位时增加）、一定时间和近似生理条件下采血,2020/11/3,9,三、测定方法原理,2020/11/3,10,血细胞分析：计数,+,分类,PLT,血小板参数,PLT,计数,MPV,平均血小板体积,Pct,血小板压积,PDW,血小板分布宽度,WBC,白细胞参数,WBC,计数,WBC,分类计数,NE,中性粒细胞,LY,淋巴细胞,MO,单核细胞,EO,嗜酸性粒细胞,Baso,嗜碱性粒细胞,RBC,红细胞参数,RBC,计数,HGB,血红蛋白,Hct,细胞压积,RDW,红细胞分布宽度,MCV, MCH, MCHC,RET,网织红细胞,NRBC,有核红细胞,2020/11/3,11,数量：,手工计数法,仪器法（电阻抗分析为主）,分类：,显微镜人工分类法,自动分类计数仪分类方法,测定方法,2020/11/3,12,库尔特原理,“,当一个不良导体颗粒，例如血细胞，通过两个电极之间时，导致电路的电阻抗发生变化。”,-,华莱士.库尔特,1947,根据血细胞,非传导性,的性质,，以对电解质溶液中悬浮颗,粒在通过计数小孔时引起的,电阻变化进行检测为基础，,来进行血细胞计数和体积测,定，这种方法也被称为,库尔特原理,2020/11/3,14,血细胞分析仪类别,（,WBC,）三分类血细胞分析仪,库尔特原理,分类,WBC,三分群：,LY,(Baso),MO,(EO),NE,（,WBC,）五分类血细胞分析仪,VCS,3D,2D,库尔特原理,+,细胞化学染色,激光流式细胞检测,+,细胞化学染色,MAPSS,（多角度偏振光散射）,2020/11/3,15,VCS,技术,是库尔特五分类血球仪对白细胞分类的专利技术，即分类时不需传统的染色方法，只采用三个物理量,VOLUME,（体积）,、,CONDUCTIVITY,（传导性）,、,SCATTER,（激光）,将五种白细胞分开的技术。,流体动力聚焦的流式通道,近于原态的白细胞在鞘液的包裹下通过流式通道道检测；将重叠限制到最低限度。,三种能量同时作用于一个细胞，总共计数,8192,个颗粒。,VCS,技术,四、直方图,2020/11/3,17,直方图的由来,在小孔计数时仪器获得细胞的数量和大小(体积)的信息，再进一步分类整理，得到在各种不同体积下相应的数量分布，反应在坐标上,坐标横轴表示细胞大小，以,fl(,飞升),为单位,坐标纵轴表示相应数量,2020/11/3,18,直方图的应用,一,.,白细胞直方图形,(1),可显示检测标本中是否存在形态异常细胞或各类细胞比例异常,决定是否推片检查,(2),根据图形,判断仪器工作状态；,二,.,血小板直方图,可帮助分析被检查的血小板体积大小分布状态,帮助判断结果能否报告；,三,.,红细胞直方图,可帮助判断治疗效果,疾病的诊断和鉴别诊断有较大的临床价值。,2020/11/3,19,红细胞直方图,典型的红细胞直方图上，可以看到两个细胞群体：,1细胞主群 从50,fL,开始，两侧对称呈正态分布的曲线，又称“主峰”；,2大细胞群 在主群右侧，又称“足趾部”，是一些红细胞二聚体、三聚体、多聚体的混合物。,红细胞直方图应用举例(1),- 巨幼红细胞性贫血,大细胞性贫血，直方图上表现为右移,2020/11/3,21,红细胞直方图应用举例(2),- 缺铁性贫血,小细胞性贫血，直方图上表现为左移,2020/11/3,22,红细胞直方图应用举例(3),- 再生障碍性贫血(输血后),输血后，红细胞表现出两个细胞亚群，在直方图上表现为两个细胞峰。,该病例中左峰为输入的正常人红细胞峰；右峰为患者自身的红细胞峰。,2020/11/3,23,白细胞直方图,小细胞,单个核细胞,粒细胞,数量,体积,fl,2020/11/3,24,白细胞直方图亚群分布,在上图，可以看到三个明显的亚群分布：,小 细 胞 群：,以淋巴细胞为主，分布在35 90,fL；,单个核细胞群 ：,以单核细胞为主，分布在90 160,fL；,粒 细 胞 群,：,以中性粒细胞为主，分布在160 450,fL。,2020/11/3,25,粒细胞峰明显变大，淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时，如果中性粒细胞发生中毒性改变，粒细胞峰可,向左移动或向右延伸,白细胞直方图应用举例(,1,),-,中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低,2020/11/3,26,白细胞直方图表现为粒细胞峰明显变小，淋巴细胞峰明显变大,白细胞直方图应用举例(2),-,中性粒细胞比例减低或淋巴细胞比例增高,2020/11/3,27,在单个核细胞区出现一个明显的峰，其大小与单核细胞比例增高的程度有关。增高仅表示,可能,是单核细胞增高，也,可能,是嗜酸性粒细胞或幼稚细胞等，因此，必须涂片染色后经显微镜确认。,白细胞直方图应用举例(,3,),-,单核细胞比例增高,2020/11/3,28,血小板的细胞直方图,可反映血小板数及,MPV,等参数。,可判断影响因素,2020/11/3,29,血小板细胞直方图,血细胞分析仪通常在,2,30fl,范围分析血小板，正常血小板主要集中在于,2,20fl,范围内，一般在,25,30fl,之间的某一点与横坐标重合，直方图是一条呈对数正态分布的,光滑曲线,。,2020/11/3,30,曲线峰右侧右移，在大于,30fl,的某一点与横坐标重合，,MPV,明显增高。如果血小板数减低，可见于,ITP,及体外循环时；如果血小板数升高，见于脾切除术后。如果血小板数正常，可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等,血小板直方图应用举例(,1,),-,大血小板直方图,2020/11/3,31,曲线峰右侧左移，在小于,20fl,的某一点与横坐标重合，,MPV,值明显减低。如果血小板数减低，可见于,AIDS,病毒感染和脾亢等；如果血小板数正常，可见于慢性再障；如果血小板数升高，可见于反应性血小板增多症。,血小板直方图应用举例(,2,),-,小,血小板直方图,2020/11/3,32,曲线峰变低，如果以, 20,个的血小板聚集为主，则曲线峰变低、变平，右侧抬高不明显。此时，在白细胞直方图的,35fl,处有一个小峰。见于标本采集不当或,EDTA,依赖性血小板聚集等,血小板直方图应用举例(,3,),-,聚集的血小板直方图,2020/11/3,33,在曲线峰的右侧抬起并上扬，不与横坐标重合。可见于,IDA,或发生溶血的标本,。,血小板直方图应用举例(,4,),-,小红细胞干扰的血小板直方图,2020/11/3,34,分析仪白细胞分类与镜检关系,1.,镜检是细胞形态分析的最终手段,（金标准）,，仪器,只是筛选工具，具有特异诊断意义的形态变化必须镜检,2.,分析仪某些结果可为镜检提供,筛选手段,，降低假阳性和,假阴性结果，提高镜检效率，保证医疗质量（报警）,3.,分析仪某些参数是对,镜检的补充,(MPV RDW PDW ),2020/11/3,35,为了保证血液分析结果准确，特别是形态分析,原则上每个血液标本都采用镜检,，,但目前化验室人员少，工作量大，每天有几十甚至于几百个标本需要及时报告，要使用规范的镜检及时地发出报告是困难的，最好寻找一个简单、快速的方法进行过筛，即将完全正常的标本筛去后，对异常的标本进行规范性镜检。,血液分析仪提供了过筛的手段。筛选不是取消镜检而是为了更好的镜检,.,36,为什么提出镜检筛选,2020/11/3,36,适合中国人群的,Coulter,血细胞分析仪复片参考规则,由北京和睦家医院，北京人民医院，温州医学院附一院共同进行的,大样品多中心研究,参加仪器：,MAXM, GENS, LH750,根据中国实验室实际情况，缩减至,23,条,考虑中国人群血细胞正常参考范围以及常规工作习惯。,对新规则进行了再次临床验证，没有漏掉血液病，复检率与国际报道相当,论文已发表：国际血细胞复检规则在贝克曼库尔特系列血细胞分析仪上的应用及改进方案。中华检验医学杂志，,2008,，,31,（,7,）：,758-762.,2020/11/3,37,2020/11/3,38,五、参考区间,2020/11/3,39,2020/11/3,40,2020/11/3,41,六、临床意义,2020/11/3,42,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,(,一,),红细胞及血红蛋白增多,多次检查成年男性红细胞,6.010,12,/L,，血红蛋白,170g/L,；成年女性红细胞,5.510,12,/L,，血红蛋白,160g/L,即为增多。可分为：,1,、,相对性增加,因血浆容量减少，使红细胞容量相对增加。见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤、尿崩症、甲亢危象、糖尿病酮症酸中毒等。,2020/11/3,43,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,2,、,绝对性增加,红细胞增多。按病因可分为：,(1),继发性红细胞增多症：,血中红细胞生成素增多致。,a,、红细胞生成素,(EPO),代偿性增加,：因缺氧血氧饱和度降低红细胞增多。生理性,EPO,见于胎儿及,新生儿、高原地区居民,。病理性,EPO,见于慢阻肺、肺心病、发绀型先心、异常血红蛋白病。,2020/11/3,44,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,b,、,EPO,非代偿性,增加：肿瘤或肾脏疾病,EPO,，见于肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、肾胚胎细胞癌、肾上腺皮质腺癌、子宫肌瘤、肾盂积水及多囊肾。,(2),真性红细胞增多症,骨髓慢性良性增殖性疾病，部分病人可继发骨纤，转变为白血病。,2020/11/3,45,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,(,二,),红细胞及血红蛋白减少,（,1,）,生理性减少,：婴幼儿及,15,岁以前的儿童约低,10-20,；部分老年人，妊娠中、晚期。,（,2,）,病理性减少,：各种贫血,2020/11/3,46,白细胞检测,2020/11/3,47,细胞类型,百分数,(,),中性粒细胞,(N),杆状核,(st),0-5,分叶核,(sg),50-70,嗜酸性粒细胞,(E),0.5-5,嗜碱性粒细胞,(B),0-1,淋巴细胞,(L),30-40,单核细胞,(M),3-8,图示,白细胞检测,中性粒细胞,1,、形态及正常值,2,、临床意义,1),中性粒细胞增多,生理性,：下午较上午高，孕后期、分娩时、剧烈运动或劳动后、饱餐或淋浴后、高温、严寒均可暂时升高。,2020/11/3,49,白细胞检测,病理性,：,a,、,急性感染,：尤化脓性球菌感染为最常见原因。但严重感染、,G-,杆菌感染可不高；,b,、,严重的组织损伤,或大量血细胞破坏：外伤、大手术、烧伤、急性心梗、严重血管内溶血；,c,、急性,大出血,；,d,、,急性中毒,：代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒、尿毒症及妊毒症；急性化学药物中毒如急性铅、汞及安眠药中毒；生物性中毒如昆虫毒、蛇毒等。,e,、,白血病,、骨髓增殖性疾病和恶性肿瘤。,2020/11/3,50,白细胞检测,2),中性粒细胞减少,a,、感染：,G-,杆菌、病毒、原虫,。,b,、,血液病,：再障、骨髓增生异常综合征、骨,转移癌等。,c,、理化因素：,射线,、苯、铅、氯霉素等。,d,、单核吞噬细胞系统功能亢进：,脾亢,等。,e,、,自身免疫性疾病,：,SLE,、甲亢等。,2020/11/3,51,白细胞检测,3),中性粒细胞核象变化,a,、,核左移,：外周血不分叶核,5,称核左移。见于感染、急性失血、急性中毒及急性溶血、白血病及类白血病；,b,、,核右移,：外周血中分叶大于等于,5,叶的核超过,3,称核右移。见于巨幼贫、造血功能衰退、抗代谢药及炎症恢复期。,2020/11/3,52,中性粒细胞核象变化,白细胞检测,淋巴细胞,1,、淋巴细胞增多,80,60,40,淋巴细胞 ,0 2 4 6,年龄,(,岁,),100,80,60,40,20,淋巴细胞 ,0 2 4 6 8,年龄,(,岁,),婴儿出生时淋巴细胞,35,，以后逐渐升高，,4,6,岁时淋巴细胞比例逐渐降低达成人水平。,2020/11/3,54,白细胞检测,病理性：,1),感染性疾病：病毒、百日咳、梅毒及弓形体等；,2),肿瘤性疾病：急淋、慢淋、淋巴瘤；,3),急性传染病的恢复期；,4),移植排斥反应：再障、粒细胞减少症核粒细胞缺乏症时淋巴细胞比例增高，但绝对值不高。,2020/11/3,55,白细胞检测,2,、,淋巴细胞减少,主要见于应用肾上腺皮质激素、烷化剂、抗淋巴细胞球蛋白以及放射线损伤、免疫缺陷病、丙种球蛋白缺乏症等。,2020/11/3,56,白细胞检测,嗜酸性粒细胞,1,、嗜酸性粒细胞增多,1),过敏性疾病,：支气管哮喘、荨麻疹等；,2),寄生虫病,：肺吸虫病及血吸虫病等；,3),皮肤病,：湿疹、天疱疮等；,2020/11/3,57,白细胞检测,4),血液病：慢粒、淋巴瘤等；,5),某些恶性肿瘤：如肺癌；,6),某些传染病：猩红热；,7),其他：风湿病、垂体前叶功能减低等。,2,、嗜酸性粒细胞,减少,：,伤寒,、大手术、烧伤、长期用肾上腺皮质素后，临床意义不大。,2020/11/3,58,白细胞检测,嗜碱性粒细胞,1,、,嗜碱性粒细胞增多,1),过敏性疾病：过敏性结肠炎、类风关及红斑等；,2),血液病：慢粒、骨纤及嗜碱性粒细胞白血病；,3),恶性肿瘤：转移癌；,4),其他：糖尿病、结核、流感、天花。,2,、嗜碱性粒细胞,减少无临床意义,2020/11/3,59,白细胞检测,单核细胞增多,1,、,生理性增多,：婴幼儿、儿童；,2,、病理性增多：,a,、感染：感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染恢复期、,结核病,；,b,、某些血液病：粒缺恢复期、淋巴瘤等。,2020/11/3,60,七、,CRP,在临床血液分析应用,2020/11/3,61,C,反应蛋白,C-,反应蛋白,（,c-reactive protein,，,CRP,）,C,反应蛋白（,CRP,）是一种急性时相反应蛋白，是肝脏在身,体,发生急性炎症时产生和释放的一种急性期反应物，可作为急性炎症标志物。,感染,IL-1 IL-6 TNF- TGF- INF-,激素肝脏新陈代谢状态,CRP,2020/11/3,62,常规反应蛋白,严重细菌感染,一般细菌感染,病毒或细菌感染,CRP 50mg/L,CRP 20-50mg/L,CRP 10-20mg/L,CRP,作为一般感染的检测指标：,2020/11/3,63,鉴别细菌或病毒感染,监测疾病的治疗过程,CRP mg/L,2020/11/3,64,项目名称,检测结果,临床应用建议,高敏,CRP,心血管疾病,3.0mg/L,心血管疾病危险性评估为高危险性，建议给予抗炎和抗栓同时治疗,新生儿,3.0mg/L,提示新生儿感染,常规,CRP,儿童,30mg/L,细菌感染,成人,1020mg/L,提示可能病毒感染,在抗生素治疗时,CRP,应降至此水平以下,如病程尚短，不能排除细菌感染，应数小时后再复查,2050mg/L,提示细菌或者病毒感染,50100mg/L,通常是细菌感染,100mg/L,提示败血症或侵袭性感染等严重感染,病毒感染基本可排除,150mg/L,第一个,72,小时，,CRP150mg/L,提示可能为坏死性胰腺炎,2020/11/3,65,科室,疾病应用,呼吸科,呼吸道感染、肺部感染,(,细菌性,),、肺肿瘤、肺结核、肺梗塞、肺脓疡、脓胸等,儿科,儿童和婴幼儿的各种炎症感染性疾病的诊断和鉴别,消化科,胆囊炎、肝脓疡、腹膜炎、恶性肿瘤等,泌尿科,肾盂肾炎、肾盂炎、膀胱炎、肾周围脓肿、癌等,妇科,多种常见妇科炎症及妇科手术前后的临床检测，治疗监测,口腔科,牙周炎、颌面部的感染、颌面部损伤、种植外科、重症监护、病房的院内感染监测以及拔牙手术前后检测,肿瘤科,恶性肿瘤的辅助诊断、肿瘤患者化疗后的监测、肿瘤手术前后的临床检测,心内科,心血管炎症病变检测，对心血管疾病预后作用的监测,其他科室,胶原病、过敏性及自身免疫性疾病的活动期,(,风湿,SLE,、类风湿等,),、传染病、败血病及其他恶性肿瘤,2020/11/3,66,67,谢,谢,2020/11/3,67,