黄酮类化合物--鉴定

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第,6,章 黄酮类化合物,-,黄酮类的鉴定,鉴 定,一、薄层色谱法（,TLC,）,二、,纸色谱法（,PC),一、,薄层色谱法,一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。,（,1,）,硅胶薄层色谱,:,用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物,分离苷元常用展开剂：甲苯,-,甲酸甲酯,-,甲酸；氯仿,-,甲醇等。,（,2,）,聚酰胺薄层色谱,：分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。,展开剂：具有较强的极性，大多含有醇、酸或水,如：乙醇水（,3,：,2,），,水乙醇甲酸乙酰丙酮,(5:1.5:1:0.5),聚酰胺薄层,(,乙醇水）,二、纸色谱法（,PC),PC,适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。,黄酮苷：一般采用双向展开,7,黄酮类化合物的检识和结构鉴定,第一相展开采用醇性展开剂,如,:BAW,n-BuOH,:HOAc:H,2,O=4:1:5,上层,TBA,t-BuOH,:,HOAc,:H,2,O=3:1:1,水饱和,n-BuOH,层析行为,:,R,f,值,:,苷元,单糖苷,双糖苷,一般,:,苷元在,0.70,以上，而苷则小于,0.7,。,第二相展开采用水性展开剂,如：,26%,HOAc,水溶液,3%,NaCl,水溶液,HOAc,:,浓,HCl:H,2,O=30:3:10,层析行为,:,连接糖链越长,R,f,越大,(0.5);,苷元,R,f,较小，有的留在原点。,A,B,C,D,A,B,C,D,苷元,苷元,纸色谱,第,I,向 醇性展开剂 第,II,向 水性展开剂,（,BAW,、,TBA,、水饱和正丁醇）,（,28%HAc,、,3%NaCl,、,1%HCl,）,正相色谱,反相色谱,固定相（水）极性,流动相,（有认为是吸附原理）,Rf,规律：极性小的化合物,Rf,大,极性大的化合物,Rf,大,苷元,单糖苷,双糖苷,Rf,规律与左边相反,母核相同，二,-OH,三,-OH,四,-OH,五,-OH,黄酮,主要应用：苷元的分离鉴别,黄酮苷及花色素类的分离鉴别,双相色谱,9,纸层析（,PC,）：采用双向纸层析,。,苷元,:,平面型分子,:,黄酮,(,醇,),、查耳酮的,Rf,小,几乎留在 原点不动,(,R,f,0.02);,非平面型分子,:,二氢黄酮,(,醇,),、二氢查耳酮的,Rf,大,因亲水性较强,(,Rf,0.10-0.30),。,层析检查方法：,观察荧光,用紫外光灯照射看到有色斑点，,NH,3,处理 产生明显的色变。用,2%AlCl,3,甲醇液喷雾,UV,灯下呈亮黄色荧光斑点。,习题,有下列四种黄酮类化合物,A,、,R,1,R,2,H,B,、,R,1,H,R,2,Rha,C,、,R,1,Glc,R,2,H,D,、,R,1,Glc,R,2,Rha,比较其酸性及极性的大小,:,酸性,(),(),(),(),极性,(),(),(),(),比较这四种化合物在如下三种色谱中,Rf,值大小顺序,:,(1),硅胶,TLC(,条件,CHCl,3,MeOH,4:1,展开,),Rf,值,(),(),(),(),(2),聚酰胺,TLC(,条件,60%,甲醇,水展开,),Rf,值,(),(),(),(),(3),纸色谱,(,条件,8%,醋酸水展开,),Rf,值,(),(),(),(),