革兰阳性需氧杆菌课件

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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,革兰阳性需氧杆菌课件,*,第十,一,章,G,+,需氧杆菌,第一节 炭疽芽胞杆菌,炭疽是人畜共患病,由于疫苗接种和卫生条件改善,发病率明显下降,但可作为生物武器。炭疽一年均可发生。人通过食入病菌污染的食物;也可因接触带芽胞的皮毛、尘土、干燥菌粉邮件和吸入气溶胶而感染。可引起皮肤炭疽,胃肠炭疽,肺炭疽,可并发败血症和脑膜炎。,革兰阳性需氧杆菌课件,第十一章 G+需氧杆菌 第一节 炭疽芽胞杆,一、微生物特性,1.本菌为致病性细菌中最大的G+杆菌。两,端平截,无鞭毛,呈竹节状排列,芽胞位于,菌体中央,有毒菌株有荚膜。,2.为需氧或兼性厌氧菌,生长条件不严格,最适温度为3035,形成灰色、扁平干,燥、不溶血粗糙型菌落,边缘呈卷发状,使,明胶表面液化成漏斗状。有毒菌株在血琼脂,平板上可产生荚膜,用接种针挑取时呈粘丝,状。,革兰阳性需氧杆菌课件,一、微生物特性 1.本菌为致病性细菌中最大的G+杆菌。,3.细菌性抗原,(1)菌体多糖抗原耐热、耐腐败,经长时间煮,沸仍可与相应免疫血清发生沉淀反应,(Ascoli热沉淀反应)。抗原特异性不高,能,与其他需氧性芽胞杆菌发生交叉反应,应,用时应作综合分析。,(2)荚膜多肽抗原在体内有抗吞噬作用,称为,侵袭因子,有助于病菌在体内繁殖扩散,和建立感染。荚膜肿胀试验对鉴定本菌,有一定意义。,(3)芽胞抗原具有免疫原性和血清学诊断价,值。,革兰阳性需氧杆菌课件,3.细菌性抗原(1)菌体多糖抗原耐热、耐腐败,经长时间煮,4.炭疽毒素,由保护性抗原、致死因子和水肿因,子三种蛋白质形成的外毒素复合物,,后两者单独不能发挥生物活性作用,,都必须与保护性抗原组合才能引起实,验动物的水肿致死。,革兰阳性需氧杆菌课件,4.炭疽毒素 由保护性抗原、致死因子和水肿因革兰阳,5.抵抗力,本菌芽胞的抵抗力很强,在干燥土,壤或皮毛中常温下可存活数十年,传,染性可持续数十年之久。芽胞对碘及,氧化剂较敏感,1:2500碘液、0.5,过氧乙酸10min即杀死。,革兰阳性需氧杆菌课件,5.抵抗力革兰阳性需氧杆菌课件,1.取病灶深部标本或痰和血液;肠炭疽取,粪便或呕吐物;置65水溶30min,将非芽,胞菌杀死,保留芽胞活性再进行增菌和分离,培养。,2.直接镜检发现G+大杆菌、两端平截、竹,节状排列形成长链,并有明显荚膜,可见芽,胞,芽胞为卵圆形,位于菌体中央菌体不膨,大,可作初步报告。,3.分离培养 一般接种血琼脂平板,35、,18-24h后可观察到较大、灰白色、边缘不整,齐和有轻微溶血的菌落。,二、微生物检验,革兰阳性需氧杆菌课件,1.取病灶深部标本或痰和血液;肠炭疽取二、微生物检验,(1)形态学特征:包括镜检形态和菌落形态,(如上)。,(2)生化试验:能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗,糖。有些菌株迟缓发酵甘油和水杨素,,产酸不产气。能水解淀粉。不发酵鼠李,糖、半乳糖等其他糖类。能还原硝酸盐,为亚硝酸盐。VP试验不定。不产生吲哚,和硫化氢,不利用枸橼酸盐和分解尿素。,在牛乳中生长2-4天牛乳凝固后缓慢融,化。卵磷脂酶弱阳性、触酶阳性。,鉴定,革兰阳性需氧杆菌课件,(1)形态学特征:包括镜检形态和菌落形态鉴定革兰阳性需氧杆菌,取用37 、4-6h待检肉汤培养物,,涂布于普通琼脂平板,将AP631炭疽噬,菌体1滴,于平板中央划一直线,置37,18h,出现噬菌斑或噬菌带者为阳性,,每份标本应作2-3个同样的试验,同时,滴种肉汤液作阴性对照。,(3)噬菌体裂解试验,革兰阳性需氧杆菌课件,取用37 、4-6h待检肉汤培养物,(3)噬,将待检菌接种于含青霉素0.050.5U/ml,的培养基经37培养 6 h后,炭疽杆菌可,发生形态变化,显微镜下见大而均匀的,圆球状菌体呈成串样排列,类炭疽杆菌,无此现象。,(4)串珠试验,革兰阳性需氧杆菌课件,将待检菌接种于含青霉素0.050.5U/ml(4),将待检菌分别接种于青霉素5、10、100Uml的普通琼脂平板,37 培养24h,炭疽芽胞杆菌一般在含5Uml的青霉素平板上仍能生长,在含10、100Uml青霉素的平板上受到抑制而不生长。,(5)青霉素抑制试验,革兰阳性需氧杆菌课件,将待检菌分别接种于青霉素5、10、100Uml,将待检菌新鲜肉汤培养物0.1ml滴于预,温的兔血琼脂平板上,用L形玻棒均匀涂,布,干后用含青霉素1 U片纸片贴于平,板,3712h,低倍镜下观察,可见纸,片周围有一无菌生长的抑菌环,其外周青,霉素浓度低,菌体细胞壁受抑而成为串珠。,平板继续37孵育8-12h,测量抑菌环直径。,(6)串珠青霉素抑制联合试验,革兰阳性需氧杆菌课件,将待检菌新鲜肉汤培养物0.1ml滴于预(6)串,(7)重碳酸盐,生,长毒力试验,将待检菌接种于含O5NaHCO3,和10马血清的琼脂平板上,置10,CO2环境3724-48h,有毒株形成荚,膜,菌落呈粘液型,无毒株不形成荚,膜,呈粗糙型菌落。,革兰阳性需氧杆菌课件,(7)重碳酸盐生长毒力试验 将待检菌接种于含O5Na,炭疽芽胞杆菌是惟一具有致病力,致病,物质为炭疽毒素,故对该毒素的检测显得,十分重要 取纯培养接种于肉汤培养液37,24h,吸取0.1m1接种小鼠皮下,小鼠于7296h,发病并死亡 接种部位呈胶样水肿,肝脾肿,大出血,血液黑色且不凝固:取心血、肝脾,涂片染色镜检分离培养,可检出炭疽杆菌。,(8)毒素动物试验,革兰阳性需氧杆菌课件,炭疽芽胞杆菌是惟一具有致病力,致病(8)毒素动物,(9)植物凝集试验,炭疽杆菌菌体多糖是某些植物凝集,素受体,用凝集素试验检测炭疽杆菌。,常用的方法有荧光标记试验和酶联凝,集素吸附试验。本试验可与其他类炭,疽芽胞杆菌相鉴别。,革兰阳性需氧杆菌课件,(9)植物凝集试验 炭疽杆菌菌体多糖是某些植物凝集革兰,(五)药物敏感性试验,本菌对磺胺类、青霉素、链霉,素、四环素、红霉素、氯霉素和,环丙沙星均敏感,大多能抑制芽,胞和繁殖体的生长。,革兰阳性需氧杆菌课件,(五)药物敏感性试验 本菌对磺胺类、青霉素、链霉革兰,第二节 蜡样芽胞杆菌,属于需氧芽胞杆菌属中的一种革兰阳性杆菌,因在普通营养琼脂平板上能形成芽胞,其菌落表面粗糙似白蜡状,故名,简称蜡样杆菌。广泛分布于水、土壤、尘埃、淀粉制品、乳及乳制品等食品,并可在其中生长繁殖,引起食物中毒。近年来国内也有引起菌血症的报道。,革兰阳性需氧杆菌课件,第二节 蜡样芽胞杆菌 属于需氧芽胞杆菌属中的一种革兰,一、临床意义,蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒有腹泻型和呕吐型两型,由不耐热的和耐热的肠毒素引起,以夏秋季最为多见,中毒食物大多无腐败变质,表现为完全正常的感官性状,这点应引起注意。,革兰阳性需氧杆菌课件,一、临床意义革兰阳性需氧杆菌课件,二、微生物特性,1.G+大杆菌,多数呈链状排列。形成椭圆,形芽胞,位于菌体中心或次极端,不小,于菌体,引起食物中毒的菌株多为周毛菌,有动力,不形成荚膜。,2.为需氧或兼性厌氧,营养要求不高,在普,通平板上35生长良好。菌落较大,表面,粗糙似白蜡状,,革兰阳性需氧杆菌课件,二、微生物特性1.G+大杆菌,多数呈链状排列。形成椭圆革兰,3.能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、,水杨素、果糖等。能胨化牛乳,液化明胶。VP试验阳性,卵磷,脂酶阳性。,4.抵抗力强,能耐受10030min。,革兰阳性需氧杆菌课件,3.能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、革兰阳性需氧杆菌课件,1.采取可疑食物、粪便和呕吐物进行,检验,必须作活菌计数。暴露空气,中的食品都受本菌污染。,2.标本直接涂片革兰染色镜检,其形,态待征为G+大杆菌、呈链状排列、,芽胞圆形位于菌体中央或次极端,,不大于菌体。,三、微生物检验,革兰阳性需氧杆菌课件,1.采取可疑食物、粪便和呕吐物进行 三、微生物检验革兰阳性,将菌稀释液01ml注入空的无菌平皿,,将溶化冷至45营养琼脂适量倾人并立即,混均,冷凝后置35培养2448h,计数,产生蜡样光泽菌落乘以稀释倍数,即为每,毫升样品所含活菌数。认为10,5,个g或,ml时,即有发生食物中毒的可能。,3活菌计数,革兰阳性需氧杆菌课件,将菌稀释液01ml注入空的无菌平皿,3活菌计数,4.分离培养 为需氧或兼性厌氧,营养,要求不高,在普通营养琼脂平板上即,能生长,最适温度35,最适pH7.0-7.4,菌落表面有蜡光似毛玻璃状蜡样菌落,进行生化反应鉴定必要时做血清学鉴,定和噬菌体分型。,革兰阳性需氧杆菌课件,4.分离培养 为需氧或兼性厌氧,营养革兰阳性需氧杆菌课件,对氯霉素、红霉素和庆大,霉素敏感,对青霉素、磺胺类,和呋喃类耐药。,四、药物敏感性试验,革兰阳性需氧杆菌课件,对氯霉素、红霉素和庆大四、药物敏感性试验革兰,第二节 李斯特菌属,包括产单核细胞、伊氏、无害、,格氏、斯氏、威氏李斯特菌等,只,有产单核细胞李斯特菌对人和动物,致病。,革兰阳性需氧杆菌课件,第二节 李斯特菌属 包括产单核细胞、伊氏、无害、革兰阳性,广泛分布于自然界,常伴随EB病毒,引起传染性单核细胞增多症,也可引,起脑膜炎,菌血症等。污染奶制品引,起食物中毒。也可感染新生儿。致病,物质是溶血素和菌体表面成分。机体,上靠细胞免疫清除李斯特菌。,一、临床意义,革兰阳性需氧杆菌课件,广泛分布于自然界,常伴随EB病毒一、临床意义革兰阳性需,二、微生物特性,1,为G+短小杆菌,成双排列。偶尔可见双球状,有动力,不产生芽胞,在含血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖荚膜。、,2为兼性厌氧菌,营养要求不高,在含有血液、血清、腹水等培养基上生长更好。最适生长温度为3037,因在4能生长故可进行冷增菌。在血琼脂平板上于35经18-24h培养,形成狭窄的-溶血环,灰白色菌落。,革兰阳性需氧杆菌课件,二、微生物特性1为G+短小杆菌,成双排列。偶尔可见双球状,,3生化反应,可发酵多种糖类,如葡萄糖、果糖、蕈糖、麦芽糖和水杨素,产酸不产气,甲基红和V-P反应阳性,触酶阳性,可使石蕊牛乳缓慢产酸并使其脱色,能水解精氨酸产氨:不还原硝酸盐,不形成吲哚,不液化明胶和凝固血清,不分解尿素,有时可产生硫化氢。25有动力,37无动力或缓慢。,革兰阳性需氧杆菌课件,3生化反应可发酵多种糖类,如葡萄糖、果糖、蕈糖、麦芽糖和水,4抗原性,分为4个血清型,1型主要感染啮齿动物,各型对人类均可致病,但以1a和lb最为多见,本菌与葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌及大肠埃希菌等具有共同抗原、,5抵抗力,在土壤、粪便、饲料中能长期存活。耐盐耐碱耐酸。对热敏感,对般消毒剂敏感,70的乙醇5min即可杀 死本菌。,革兰阳性需氧杆菌课件,4抗原性分为4个血清型,1型主要感染啮齿动物,各型对人类均,三、微生物检验,1采集患者血液,脑脊液,分泌物或脓液,咽喉拭子;病死畜、禽病变组织等标本。,2标本直接检查 为G+小杆菌,多数菌体一端膨大。呈两极着色,易误认为双球菌。,3分离培养 将标本置4中冷增菌后再行分离,在血平板上形成较小圆形、光滑而有狭窄-溶血环的菌落。,革兰阳性需氧杆菌课件,三、微生物检验1采集患者血液,脑脊液,分泌物或脓液,咽喉拭,4.鉴定,当遇到25培养有动力的杆菌,而不符合G-杆菌鉴定时,应考虑到李斯特菌。,本菌因培养条件而呈链状,37培养动力阴性,CAMP试验阳性,常误判为B群链球菌,产单核细胞李斯特菌触酶试验为阳性。,本菌具有耐碱耐盐的特点,易误判为粪肠球菌,粪肠球菌为触酶试验阴性,而产单核细胞李斯特菌为阳性。,革兰阳性需氧杆菌课件,4.鉴定当遇到25培养有动力的杆菌,而不符合G-杆菌鉴定,5.药物敏感性试验,本菌对多种抗生素敏感,以氨苄青霉素为首选,尚有青霉素、链霉素、四环素、氯霉素和红霉素等敏感,对磺胺、杆菌肽和多粘菌素耐药。,革兰阳性需氧杆菌课件,5.药物敏感性试验 本菌对多种抗生素敏感,以氨苄青,第三节丹毒丝菌属,1,包括红斑丹毒丝菌、产单核细胞丹毒丝菌、扁桃体丹毒丝菌,其中红斑丹毒担菌是丹毒丝菌属中的代表菌种。,2红斑丹毒牡菌为红丹毒丝菌病的病原,主要发生在鱼类、家畜、家禽和兔类,人
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