过敏原血清学检测与临床应用完美课课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,基本概念,过敏反应：,1906,年,von Piguet,提出了,allergy,一词。其概念为：机体对抗原刺激产生,的一种“改变了反应性”的状态。这种状态可能是保护性的，即产生了,免疫力；也可能是破坏性的，即产生了超敏反应。,超敏反应是机体对某抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生,的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。,过敏原：致敏原,or,变应原,能够使人发生过敏的抗原。,基本概念 过敏反应： 1906年von Piguet提出,吸入过敏原,接触过敏原,过敏原,输注过敏原,过敏原,食物过敏原,吸入过敏原接触过敏原过敏原过敏原,4,种过敏反应类型,(,超敏反应,),by Coombs und Gell (1963),Type I,早期反应,核,Platzhalter,数分钟内,花粉热,Type II,细胞毒反应,坏,数小时到一天,输血反应,Type III,免疫复合物形成,IgE-,介导肥大细胞脱,IgG/IgM,介导靶细胞的破持续产生,IgG/IgM,免疫复,合物,Platzhalter,数小时到一天,farmers lungs,Type IV,细胞免疫反应,T-,细胞介导反应,12,小时到数周,接触过敏反应,(Ni),4种过敏反应类型 (超敏反应)Type I核 Platz,过敏原血清学检测与临床应用完美课课件,过敏性鼻炎,、,鼻,息肉、鼻窦炎,过敏性眼病,哮喘,、过,敏性肺炎,特应性皮炎和接触性皮炎,慢性,荨麻疹,和血管性水肿,过敏性休克,昆虫过敏,药物过敏,食物过敏,from,Manual of Allergy and Immunology,常见过敏性疾病, 过敏性鼻炎、鼻息肉、鼻窦炎 哮喘、过敏性肺炎 特应性,流行病学,平均发病率,20%,（,845%,）,过去,10,年，成倍增加（,doubled,）,二十一世纪的流行病（,the epidemic of 21,th,century,）,流行病学平均发病率20%（845%）,Triggers,Episodic,（多有明显诱因）,（呈发作性，症状来得快，去的快）,Reversible,（可完全缓解,查体常无阳性体征）,Recurrent,（病情反复，多与过敏原暴,露相关）,Atopic,（特应性，发生于过敏体质者）,临床表现的特点,Triggers（多有明显诱因）Reversible （可,引起过敏反应因素,遗传因素,接触过敏原的机会,抗原性质,Th,细胞,及细胞因子,引起过敏反应因素 遗传因素 接触过敏原的机会 抗原性质,过敏反应,:,诊断,过敏反应: 诊断,IgE,检测原理,From ALLERGY 4,th,Edition,IgE检测原理From ALLERGY 4th Edi,检测,IgE,步骤,1:,总,IgE,ELISA,步骤,2:,特异性,IgE,EUROLINE,检测IgE步骤1:总IgEELISA步骤2:特异性 IgE,Extinction,总,IgE ELISA,标准品,100 IU/ml,10 IU/ml,0 IU/ml,WHO 75/502, 4,点定标,Example for a standard curv e,0,0,5,2,500 IU/ml,1,5,1,0,100,200,300,400,500,600,IgE IU/ml,Extinction总IgE ELISA标准品100 IU/,年龄,最高参考上限,新生儿,1.2 IU/ml,1-6,月,7.2 IU/ml,7-12,月,12.7 IU/ml,1-5,岁,60 IU/ml,6-9,岁,155 IU/ml,10-15,岁,199 IU/ml, 16,岁,100 IU/ml,总,IgE ELISA:,参,考范围,参考范围,参考范围,：,：,可能存在过敏反应,一般无过敏反应,年龄最高参考上限新生儿1.2 IU/ml1-6 月7.2 I,特异性,IgE,：,EUROLINE,简便和快捷的实验操作,仅需少量样本,(,过夜温育,),结果基于广泛应用的,EAST,分级系统,通过,EUROLineScan,程序实现结果,的自动判读,特异性 IgE：EUROLINE 简便和快捷的实验操作,EUROLINE,检测系统,EUROLINE检测系统,颜色反应,底物,膜条,色原,抗原提取物,特异性,IgE,：,EUROLINE,温育,AP,标记二抗,AKP,清洗,3 x 5min,60 min,二抗反应,清洗,3 x 5min,10 min,底物温育,自动化判读或肉眼观察,60 min,未稀释,过夜,1:11,稀释,颜色反应底物膜条色原特异性 IgE：EUROLINEAP标,该结构为结合于糖蛋白N末端的多聚糖。,并不存在必然相关性,过去10年，成倍增加（doubled）,CCD 是“Crossreactive Carbohydrate Determinants（交叉反应性碳水化合,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,共分析了428份结果，最终确,其概念为：机体对抗原刺激产生,清结合，同时做过敏原提取物和血清结合。,物决定子）”的英文缩写.,Recurrent （病情反复，多与过敏原暴露相关）,共分析了428份结果，最终确,当体外实验结果与临床症状或皮试结果不符的情况下。,与总IgE相关的特异性IgE浓度越高，患者临床过敏,与总IgE相关的特异性IgE浓度越高，患者临床过敏,组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、树组合2（柳树/杨,Recurrent （病情反复，多与过敏原暴露相关）, 总IgE升高并不一定是超敏反应，而过敏患者总IgE也不总是一定,也可能是破坏性的，即产生了超敏反应。,其概念为：机体对抗原刺激产生,清洗 3 x 5min,类别,浓度,kU/l,sIgE,水平,临床意义,0,100,特高（,+,）,特重,特异性,IgE,分级标,准及临床意义,该结构为结合于糖蛋白N末端的多聚糖。类别浓度kU/lsI,结果判读,: EUROLineScan,特异性,IgE,欧蒙印迹法自动化, 结果判读: EUROLineScan特异性 IgE欧,IgE,IgE,名称,/,商品,名,货号,检测内容,检测项目,特点,吸入及食物组合,DP3713-,1601-4E,尘螨组合,1,（屋尘螨,/,粉尘螨,),、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌,组合,1,（点青霉,/,分枝孢霉,/,烟曲霉,/,交链孢霉）、树组合,2,（柳树,/,杨,树,/,榆树）、矮豚草、艾蒿、葎草、牛奶、鸡蛋白、花生、海鱼组,合,1,（鳕鱼,/,龙虾,/,扇贝）、,CCD,标记物、质控带,10,项吸入、,4,项食物、,CCD,、指控,带（,14,项）,精简最常见的,食物及吸入过,敏原,小蒙星,DP-3713-,1601-5E,尘螨组合,1,（屋尘螨,/,粉尘螨,),、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌,组合,1,（点青霉,/,分枝孢霉,/,烟曲霉,/,交链孢霉）、葎草、普通豚草、,艾蒿、牛奶、鸡蛋白、花生、黄豆、蟹、虾、海鱼组合,1,（鳕鱼,/,龙虾,/,扇贝）、,CCD,标记物、质控带,9,项吸入、,7,项食物、,CCD,、指控,带（,16,项）,儿童相对常见,过敏原,吸入组合,DP-3116-,1601-2E,树组合,2,（柳树,/,杨树,/,榆树）、矮豚草、艾蒿、尘螨组合,1,（屋尘,螨,/,粉尘螨）、屋尘、猫毛、狗上皮、蟑螂、霉菌组合,1,（点青霉,/,分枝孢霉,/,烟曲霉,/,交链孢霉）、葎草、,CCD,标记物、质控带,10,项吸入、,CCD,、指控,带（,10,项）,常见吸入过敏,原,食物组合,DP-3414-,1601-2E,鸡蛋白、牛奶、花生、黄豆、海鱼组合,1,（鳕鱼,/,龙虾,/,扇贝）、淡,水鱼组合,1,（鲑鱼,/,鲈鱼,/,鲤鱼）、虾、蟹、,CCD,标记物、质控带,8,项食物、,CCD,、指控,带（,8,项）,常见食物过敏,原,定制组合,1,D,P 3713-,7E,尘螨组合,1,（屋尘螨,/,粉尘螨,),、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌,组合,1,（点青霉,/,分枝孢霉,/,烟曲霉,/,交链孢霉）、葎草、普通豚草、,艾蒿、牛奶、鸡蛋白、海鱼组合,1,（鳕鱼,/,龙虾,/,扇贝）、,CCD,标,记物、质控带,9,项吸入、,3,项食物、,CCD,、指控,带（,12,项）,跟据客户需求,定制,过敏原优敏组合,名称/商品名货号检测内容检测项目特点吸入及食物组合DP371,Q1,：,TIgE & sIgE,关系,Q1：TIgE & sIgE关系,总,IgE :,结,果解释,1.,总,IgE,超出参考范围大多数是由于过敏反应导致,例外,:,寄生虫病,;,免疫抑制,; HIV;,重度烧伤,2.,临床相关特异性,IgE,结果,与总,IgE,相关的特异性,IgE,浓度越高，患者临床过敏,反应的可能性就越大,.,总IgE : 结果解释例外: 寄生虫病; 免疫抑制; H,特异性,IgE,总,IgE,特异性,IgE,总,IgE,5 IU/ml (kU/l),200 IU/ml,总,IgE :,结果解释举例,患者,1,特异性,IgE,总,IgE,5 IU/ml (kU/l),25 IU/ml,患者,2,特异性 IgE总IgE特异性 IgE5 IU/ml (kU/,总,IgE,浓度与特异性,IgE,水平关系,并不存在必然相关性,约,20-30%,超敏疾病患者特异性,IgE,可能较高，但总,IgE,可维持正,常，甚至低于几何均值。,如患者仅对牛奶高度过敏，其特异性,IgE,为,18kU/L,。对于特异性,IgE,而言，该结果已属于严重过敏（,IV,级）的范畴。从理论上讲，,该患者的总,IgE,也应该为,18kU/L,。而对于总,IgE,来说，这个结果,是很低的；,总,IgE,升高并不一定是超敏反应，而过敏患者总,IgE,也不总是一定,升高。这一要点在评价总,IgE,检测结果时非常重要。,总IgE浓度与特异性IgE水平关系并不存在必然相关性,Q2,：,CCD,？,Q2：CCD？,何谓,CCDs?,CCD,是“,C,rossreactive,C,arbohydrate,D,eterminants,（交叉反应性碳水化合,物决定子）,”,的英文缩写,.,该结构为结合于糖蛋白,N,末端的多聚糖。依据糖基化,作用的不同而产生不同的结构。,举例,: MMXF,(Man1-6(Man1-,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,4 (Fuc1-3)GlcNAc),何谓 CCDs?CCD 是“Crossreactive Ca,如酶促作用、药理作用,组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、葎草、普通豚草、,共分析了428份结果，最终确, Th细胞及细胞因子,并不存在必然相关性,研究背景：1个病人皮试和血清检测结果不相符，分析研究了造成不符合,食物过敏vs食物不耐受,大部分糖蛋白仅含有一个IgE结合的多聚糖，因此无法促进结合有IgE抗体的,组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、葎草、普通豚草、,总IgE : 结果解释,总IgE : 结果解释,by Coombs und Gell (1963),CCDs 在自然界中的存在?, CCD存在于多种植物性或动物源性的过敏原中，,60 min 二抗反应,分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、葎草、CCD 标记物、质控带,当体外实验结果与临床症状或皮试结果不符的情况下。,5 IU/ml (kU/l),特异性IgG检测的价值性？,by Coombs und Gell (1963),CCDs,在自然界中的存在,?,CCDs,存在于多种植物性或动物源性的过敏原中。由于结构的相似性导致,一些独特的交叉反应出现。,典型含,CCD,结构的过敏原,:,植物,花粉,植物性食物,植物乳胶,昆虫毒液,如酶促作用、药理作用CCDs 在自然界中的存在?CCDs 存,抗,CCD IgE,结果的临床价值,?,大部分糖蛋白仅含有一个,IgE,结合的多聚糖，因此无法促进结合有,IgE,抗体的,肥大细胞表面受体形成二聚体化，进而无法活化肥大细胞发,生脱核及释放组,胺的作用，因此对于仅为抗,CCD IgE,抗体阳性的患者而言往往无临床症状的,表现。,抗CCD IgE 结果的临床价值?大部分糖蛋白仅含有一个Ig,在何种情况下应排除抗,CCD IgE,的干扰,?,当体外实验结果与临床症状或皮试,结果不符,的情况下。,当某一患者出现,多个,特异性,IgE,结果,阳性时,。,举例,:,花生,:,特异性,IgE,阳性但并不表现出,临床症状,出现多个食物相关的阳性结果但缺乏临床症状表现,.,植物乳胶,:,针对花粉敏感的患,者抗植物乳胶阳性，但无相关接触史。,昆虫毒液,:,针对蜜蜂和马蜂特异性,IgE,阳性的患者可能存在交叉反应。,在何种情况下应排除抗CCD IgE 的干扰?当体外实验结果,1715,例体检人群的问卷统计及,sIgE,比较，存在不符合现象。,CCD-IgE,是引起,sIgE,检测交叉反应的重要因素，干扰血清,sIgE,检测结果，导致血清,sIgE,检测与临床症状不符合。,EUROIMMUN,1715例体检人群的问卷统计及sIgE比较，存在不符合现象,EUROIMMUN,研究背景：,1,个病人皮试,和血清检测结果不相符，分析研究了造成不符合,的原因，评价,CCD,在其中的作用。,实验方法：,用已知碳水化合物结构的糖蛋白做抑制实验。用糖蛋白做和血,清结合，同时做过敏原提取物和血清结合。共分析了,428,份结果，最终确,定,CCD,引起假阳性的原因。,EUROIMMUN研究背景：1个病人皮试和血清检测结果不相符,EUROIMMUN,独家包被有,CCD,指示带,CCD,是“交叉反应性碳水化合物决定因子”,CCD,存在于多种植物性或动物源性的过敏原中，,由于结构相似性导致一些独特的交叉反应出现,解释交叉反应的假阳性结果,CCD,EUROIMMUN独家包被有CCD指示带 CCD是“交叉反,Q3,：食物不耐受,&,食物过敏,Q3：食物不耐受&食物过敏,EUROIMMUN,食物过敏,vs,食物不耐,受,EAACI,：欧洲变态反应与临床免疫学会,EUROIMMUN食物过敏vs食物不耐受EAACI：欧洲变态,食物过敏,vs,食物不耐,受,食物过敏：,免疫介导；,如,IgE,免,疫球蛋白,食物不耐受：非免疫介导；,如酶促作用、药理作用,EAACI,：欧洲变态反应与临床免疫学会,EUROIMMUN,食物过敏vs食物不耐受 食物过敏：免疫介导；如IgE免,EUROIMMUN,食物过敏,vs,食物不耐,受,美国变态反应和免疫学会及国立卫生研究院（,NIH,）,定义：,食物不良反应：指一切由食物摄入引起的不良反应。,食物过敏：指所有免疫学机制引起的不良反应。,食物不耐受：指非免疫学机制引起的不良反应。,EUROIMMUN食物过敏vs食物不耐受美国变态反应和免疫学,合1（鳕鱼/龙虾/扇贝）、CCD 标记物、质控带,特异性 IgE：EUROLINE,例外: 寄生虫病; 免疫抑制; HIV; 重度烧伤,组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、树组合2（柳树/杨,CCDs 存在于多种植物性或动物源性的过敏原中。,10 min 底物温育, 1906年von Piguet提出了allergy一词。,的原因，评价CCD在其中的作用。,尘螨组合1（屋尘螨/粉尘螨)、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌,5 IU/ml (kU/l),（呈发作性，症状来得快，去的快）,树/榆树）、矮豚草、艾蒿、葎草、牛奶、鸡蛋白、花生、海鱼组,研究背景：1个病人皮试和血清检测结果不相符，分析研究了造成不符合,by Coombs und Gell (1963),500 IU/ml,植物乳胶: 针对花粉敏感的患者抗植物乳胶阳性，但无相关接触史。,该结构为结合于糖蛋白N末端的多聚糖。,尘螨组合1（屋尘螨/粉尘螨)、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌,独家包被有CCD指示带,CCD 是“Crossreactive Carbohydrate Determinants（交叉反应性碳水化合,EUROIMMUN,食物过敏,vs,食物不耐,受,合1（鳕鱼/龙虾/扇贝）、CCD 标记物、质控带EUROIM,EUROIMMUN,特异性,IgG,检测的,价值性？,食物过敏主要是,IgE,介导食物，非,IgE,介导的食物过敏,主要是细胞介导的。,结论：,IgG,抗体或免疫,复合物的测定在特应性患者的处,理中不具诊断价值。,-2010,年,EUROIMMUN特异性IgG检测的价值性？ 食物过敏主要,Thanks&,Any questions,Thanks&Any questions,流行病学,平均发病率,20%,（,845%,）,过去,10,年，成倍增加（,doubled,）,二十一世纪的流行病（,the epidemic of 21,th,century,）,流行病学平均发病率20%（845%）,引起过敏反应因素,遗传因素,接触过敏原的机会,抗原性质,Th,细胞,及细胞因子,引起过敏反应因素 遗传因素 接触过敏原的机会 抗原性质,年龄,最高参考上限,新生儿,1.2 IU/ml,1-6,月,7.2 IU/ml,7-12,月,12.7 IU/ml,1-5,岁,60 IU/ml,6-9,岁,155 IU/ml,10-15,岁,199 IU/ml, 16,岁,100 IU/ml,总,IgE ELISA:,参,考范围,参考范围,参考范围,：,：,可能存在过敏反应,一般无过敏反应,年龄最高参考上限新生儿1.2 IU/ml1-6 月7.2 I,总,IgE :,结,果解释,1.,总,IgE,超出参考范围大多数是由于过敏反应导致,例外,:,寄生虫病,;,免疫抑制,; HIV;,重度烧伤,2.,临床相关特异性,IgE,结果,与总,IgE,相关的特异性,IgE,浓度越高，患者临床过敏,反应的可能性就越大,.,总IgE : 结果解释例外: 寄生虫病; 免疫抑制; H,何谓,CCDs?,CCD,是“,C,rossreactive,C,arbohydrate,D,eterminants,（交叉反应性碳水化合,物决定子）,”,的英文缩写,.,该结构为结合于糖蛋白,N,末端的多聚糖。依据糖基化,作用的不同而产生不同的结构。,举例,: MMXF,(Man1-6(Man1-,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,4 (Fuc1-3)GlcNAc),何谓 CCDs?CCD 是“Crossreactive Ca,的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。,10 min 底物温育,由于结构相似性导致一些独特的交叉反应出现,临床相关特异性IgE结果,尘螨组合1（屋尘螨/粉尘螨)、猫毛、狗上皮、屋尘、蟑螂、霉菌,如IgE免疫球蛋白,常，甚至低于几何均值。,一些独特的交叉反应出现。,fromManual of Allergy and Immunology,总IgE 超出参考范围大多数是由于过敏反应导致, CCD是“交叉反应性碳水化合物决定因子”,From ALLERGY 4th Edition,定CCD引起假阳性的原因。,当某一患者出现多个特异性IgE结果阳性时。,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,CCDs 在自然界中的存在?,4 (Fuc1-3)GlcNAc),美国变态反应和免疫学会及国立卫生研究院（NIH）, 总IgE升高并不一定是超敏反应，而过敏患者总IgE也不总是一定,花生: 特异性 IgE 阳性但并不表现出临床症状,CCDs 在自然界中的存在?,临床相关特异性IgE结果,IgE-介导肥大细胞脱 IgG/IgM介导靶细胞的破持续产生IgG/IgM 免疫复,例外: 寄生虫病; 免疫抑制; HIV; 重度烧伤,研究背景：1个病人皮试和血清检测结果不相符，分析研究了造成不符合,艾蒿、牛奶、鸡蛋白、花生、黄豆、蟹、虾、海鱼组合1（鳕鱼/,接触过敏反应 (Ni),食物过敏vs食物不耐受,From ALLERGY 4th Edition,出现多个食物相关的阳性结果但缺乏临床症状表现., 超敏反应是机体对某抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生,清结合，同时做过敏原提取物和血清结合。,食物过敏vs食物不耐受,举例: MMXF (Man1-6(Man1-,60 min 二抗反应,EUROIMMUN,一些独特的交叉反应出现。,IgE IU/ml,该结构为结合于糖蛋白N末端的多聚糖。,植物乳胶: 针对花粉敏感的患者抗植物乳胶阳性，但无相关接触史。,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,清结合，同时做过敏原提取物和血清结合。,清洗 3 x 5min,与总IgE相关的特异性IgE浓度越高，患者临床过敏,EAACI：欧洲变态反应与临床免疫学会,食物过敏vs食物不耐受, CCD是“交叉反应性碳水化合物决定因子”,清结合，同时做过敏原提取物和血清结合。, CCD是“交叉反应性碳水化合物决定因子”, 总IgE升高并不一定是超敏反应，而过敏患者总IgE也不总是一定,过去10年，成倍增加（doubled）,定CCD引起假阳性的原因。,共分析了428份结果，最终确,清洗 3 x 5min,3) (Xyl1-2)Man1-4GlcNAc1-,过去10年，成倍增加（doubled）,如IgE免疫球蛋白,Recurrent （病情反复，多与过敏原暴露相关）,常，甚至低于几何均值。,EUROIMMUN,食物过敏,vs,食物不耐,受,的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。,