LHQ 蛋白质工程的崛起

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,基因工程的实质：,将一种生物的基因转移到另一种生物体内，后者可以产生它本来不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状。,生物产生的天然蛋白质是在长期进化过程中产生的，它的结构和性能不能完全满足人类生产生活的需要。,一、蛋白质工程崛起的缘由,满足人类生产和生活的需要,例如：,改造,干扰素（半胱氨酸）,体外很难保存,干扰素（丝氨酸）,体外可以保存半年,玉米中赖氨酸含量比较低,天冬氨酸激酶,（,352,位的苏氨酸）,二氢吡啶二羧酸合成酶（,104,位的天冬酰胺）,天冬氨酸激酶,（异亮氨酸）,二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）,玉米中赖氨酸含量可提高数倍,改造,改造,蛋白质工程就是为了生产出符合人类生产和生活需要的蛋白质，甚至是自然界不存在的蛋白质。,二、蛋白质工程的基本原理,2,、蛋白质工程流程图：P27,1,、原理：基因改造,蛋白质,三维结构,氨基酸序列,多肽链,基因,DNA,预期功能,DNA,合成,分子设计,mRNA,生物功能,转录,翻译,中心法则？,P27讨 论,折叠,3,、蛋白质工程概念：P27,二、蛋白质工程的基本原理,1、目标：根据人们对,功能的特定需,求，对蛋白质的,进行分子设计。,2、原理：改造基因（基因,或基因,）。,3、流程：,预期蛋白质功能,设计,推测应有的,序列找到对应的,序列。,蛋白质,结构,修饰,合成,预期 的蛋白质结构,氨基酸,脱氧核苷酸,（,二,）蛋白质工程的主要步骤通常包括：,（,1,）从生物体中分离纯化目的蛋白；,（,2,）测定其氨基酸序列；,（,3,）借助核磁共振和,X,射线晶体衍射等手段，尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构,;,（,4,）设计各种处理条件，了解蛋白质的结构变化，包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响；,（,5,）设计编码该蛋白的基因改造方案，如,点突变,；,（,6,）分离、纯化新蛋白，功能检测后投入实际使用。,蛋白质工程的,实质,蛋白质工程是指以,蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系,作为基础，通过,基因修饰或基因合成,，对,现有,蛋白质进行改造，或制造一种,新,的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。,蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的,第二基因工程。,蛋白质工程的实质是对编码蛋白质的基因进行改造。,（一）蛋白质工程的内容,蛋白质工程的内容主要有两方面：一是根据需要设计具有特定氨基酸序列和空间结构的蛋白质；二是确定蛋白质的化学组成及空间结构与生物功能之间的关系。,实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质的结构和功能的关系。,三、蛋白质工程的进展和前景,1,、前景诱人：如用此技术制成的,，具有,、耗电少和,的特点。,2,、难度很大：主要是目前科学家对大多数蛋白质的,的了解还很不够。,电子元件,体积小,效率高,高级结构,旁栏思考题,你知道人类蛋白质组计划吗？它与蛋白质工程有什么关系？我国科学家承担了什么任务？,人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后，,生命科学乃至自然科学领域,一项重大的科学命题。,2001,年，国际人类蛋白质组组织宣告成立。之后，该组织正式提出启动了两项重大国际合作行动：一项是,由中国科学家牵头,执行的,“,人类肝脏蛋白质组计划,”,；另一项是以美国科学家牵头执行的,“,人类血浆蛋白质组计划,”,，由此拉开了人类蛋白质组计划的帷幕。,？,“人类肝脏蛋白质组计划”是国际上,第一个人类组织器官的蛋白质组计划，,由我国贺福初院士牵头，这是中国科学家第一次领衔的重大国际科研协作计划，总部设在,北京,，目前有,16,个国家和地区的,80,多个实验室报名参加。它的科学目标是揭示并确认肝脏的蛋白质，为重大肝病预防、诊断、治疗和新药研发的突破提供重要的科学基础。,人类蛋白质组计划的深入研究将是对蛋白质工程的有力推动和理论支持。,2.,对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？,答：毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造，主要原因如下：,（,1,）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。,（,2,）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。,旁栏思考题,讨 论,答,：（,1,）每种氨基酸都有对应的三联密码子，只要查一下遗传密码子表，就可以将上述氨基酸序列的编码序列查出来。但是由于上述氨基酸序列中有几个氨基酸是由多个三联密码子编码，因此其碱基排列组合起来就比较复杂，至少可以排列出,16,种,，可以根据学过的排列组合知识自己排列一下。首先应该根据三联密码子推出,mRNA,序列为,GCU,（或,C,或,A,或,G,）,UGGAAA,（或,G,）,AUGUUU,（或,C,），再根据碱基互补配对规律推出脱氧核苷酸序列：,CGA,（或,G,或,T,或,C,）,ACCTTT,（或,C,）,TACAAA,（或,G,）。,（,2,）确定目的基因的碱基序列后，就可以根据人类的需要改造它，通过人工合成的方法或从基因库中获取。,异想天开,能不能根据人类需要的蛋白质的结构，设计相应的基因，导入合适的细菌中，让细菌生产人类所需要的蛋白质食品呢？,理论讲可以，但目前还没有真正成功的例子。一些报道利用细菌生产人类需要的蛋白质往往都是自然界已经存在的蛋白质，并非完全是人工设计出来而自然不存在的蛋白质。主要原因是蛋白质的高级结构非常复杂，人类对蛋白质的高级结构和在生物体内如何行使功能知之甚少，很难设计出一个崭新而又具有生命功能作用的蛋白质，而且一个崭新的蛋白质会带来什么危害也是人们所担心的。,蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同？,？,答：,基因工程是遵循,中心法则,，,从,DNAmRNA蛋白质折叠产生功能,，,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。,蛋白质工程是按照以下思路进行的：,确定蛋白质的功能,蛋白质应有的高级结构,蛋白质应具备的折叠状态,应有的氨基酸序列,应有的碱基排列，可以创造自然界不存在的蛋白质。,注意：蛋白质工程的原理应该是中心法则的逆推。,项目,基因工程,蛋白质工程,操作起点,操作核心,过程,目标,结果,联系,目的基因,预期的蛋白质功能,基因表达载体,基因,获取目的基因,构建表达载体,导入受体细胞,目的基因的检测与表达,预期蛋白质功能,设计蛋白质结构,推测氨基酸序列,推测核苷酸序列,合成,DNA,表达出蛋白质,定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品,定向改造或生产人类所需的蛋白质,生产自然界中已有的蛋白质,蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因的修饰或基因的合成。,生产自然界没有的蛋白质,酶工程就是将酶或者微生物,细胞,，动植物细胞，,细胞器,等在一定的,生物反应,装置中，利用酶所具有的,生物催化,功能，借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门,科学技术,。它包括,酶制剂,的制备，酶的固定化，酶的修饰与改造及酶反应器等方面内容。酶工程的应用，主要集中于食品工业，轻工业以及医药工业中。,1,、基因工程的应用,（,1,）基因工程的实质：将一种生物的,转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的,，进而表现出新的,。,（,2,）基因工程的不足：在原则上只能生产自然界已存在的,。,2,、天然蛋白质的不足,天然蛋白质是生物在长期,过程中形成的，它们的,符合特定物种,的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。,3,、蛋白质工程的目的,生产符合人类生产和生活的需要的,。,练习,基因,蛋白质,性状,蛋白质,进化,结构和功能,生存,蛋白质,1,关于生物体内存在的天然蛋白质，下列说法不正确的是（）,A,是生物在长期进化过程中形成的,B,它们的结构和功能符合特定物种生存的需要,C,构成天然蛋白质的氨基酸目前发现的有,20,种,D,一定完全符合人类生产和生活的需要,练习检测,D,练习检测,2,蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（）,氨基酸结构,B,蛋白质空间结构,C,肽链结构,D,基因结构,练习检测,3,下列关于蛋白质工程的说法错误的是（）,A,蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类的需要,B,蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构,C,蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子,D,蛋白质工程与基因工程密不可分，又被称为第二代基因工程,练习检测,4,、以下关于蛋白质工程的说法正确的是（）,A,、蛋白质工程以基因工程为基础,B,、蛋白质工程就是酶工程的延伸,C,、蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造,D,、蛋白质工程只能生产天然的蛋白质,练习检测,5,、蛋白质工程的基本流程正确的是（）,蛋白质分子结构设计,DNA,合成,预期蛋白质功能,根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列,A,B,C,D,练习检测,6,、蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出来的第二代基因工程，其结果产生的蛋白质是（）,A,氨基酸种类增多,B,氨基酸种类减少,C,仍为天然存在蛋白质,D,可合成天然不存在蛋白质,7,、关于蛋白质工程的进展和应用，下列说法不正确的是（）,A,科学家通过对胰岛素的改造，已使其成为速效药品,B,生物和材料科学家正积极探索将蛋白质工程应用于微电子方面,C,蛋白质工程技术已经非常成熟，目前正被大力推广应用,D,蛋白质工程是一项难度很大的工程，目前成功的例子不多,练习检测,C,8,、,T4,溶菌酶的稳定性大大提高的根本原因是（）,A,控制,T4,溶菌酶合成的基因的一个位点发生突变,B,控制,T4,溶菌酶合成的,mRNA,上的密码子发生变化,C,T4,溶菌酶中一个氨基酸发生了替换,D,T4,溶菌酶中的第,3,位氨基酸由异亮氨酸变为半胱氨酸,练习检测,A,9,、下列不属于蛋白质工程成果的是（）,A,改造酶的结构，提高酶的热稳定性,B,生产出鼠,人嵌合抗体,C,将,tPA,分子中的天门冬酰胺替换为谷氨酰胺,D,蛋白质酶洗衣粉容易洗掉或除奶渍、血渍,练习检测,D,