疱疹病毒课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,病原生物学教研室,Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University,医学微生物学,Medical Microbiology,第,24,章 人类疱疹病毒,疱疹病毒（,Herpes viruses）,有包膜,双链线状,DNA,病毒,二十面立体对称，核衣壳外脂蛋白膜,大多可在二倍体细胞复制，明显,CPE,在感染细胞核内形成包涵体,仅次于流感病毒的引起人类病毒性疾病的病原体,病毒,亚科,潜伏细胞,单纯疱疹病毒型,(HSV-1),感觉神经节,单纯疱疹病毒型(,HSV-2),感觉神经节,水痘带状疱疹病毒(,VSV),感觉神经节,EB,病毒(,EBV),B,淋巴细胞,巨细胞病毒(,CMV),巨细胞、淋巴细胞、分泌腺,人疱疹病毒6，7 型,巨细胞、淋巴细胞、分泌腺,人疱疹病毒,8,型,淋巴组织,疱疹病毒的结构,疱疹病毒基因组的特点,疱疹病毒的复制,疱疹病毒的感染,增殖感染,潜伏感染,整合感染,先天感染,疱疹病毒共同特点,1、病毒为球形，立体20面体，线性双链,DNA,，披膜，包膜，表面刺突,2、除,EB,病毒外，均能在人二倍体细胞核内复制，产生明显的细胞病变，核内有嗜酸性包涵体，形成多核巨细胞,3、感染类型：增殖性感染、潜伏性感染、整合感染和先天性感染,单纯疱疹病毒（,herpes simplex virus，HSV）,基因组有四种异构体（,L,、,S,）,两种血清型,HSV1,、,HSV2,病毒包膜有1,1,种糖蛋白,（,gBgM）,gB gD,吸附有关；,gD,与融合有关，是,HSV1,、,HSV2,的共同抗原，而,gC gG,是型特异性抗原。,gE-gJ,与扩散及免疫逃避有关,.gH,gI,是重要致病蛋白；,控制病毒从细胞核膜出芽释放（,gH）,诱导细胞融合（,gC）,诱生中和抗体(,gD,最强),免疫逃避(,gC,gE).,细胞毒作用（已知的,HSV,糖蛋白均可）,单纯疱疹病毒,可在多种细胞中增殖,:,人胚肺、人胚肾,出现,CPE,、嗜酸性核内包涵体,动物感染范围广泛：家兔、豚鼠、小鼠,流行病学,普遍易感,，,多为隐性感染,病人和健康带毒者是传染源,亲密,接触,与性接触为主要的传播途径,HSV-1,一般通过口腔或污染的手及飞沫感染,HSV-2,一般通过性接触传播,病变部位：,HSV-1,多腰部以上,HSV-2,多腰部以下及生殖器,HSV-1,与,HSV-2,所致疾病的比较,单纯疱疹病毒,原发感染,唇疱疹,齿龈炎,生殖器疱疹,潜伏感染和复发,HSV,原发感染产生免疫力,部分病毒可沿神经髓鞘到达三叉神经节（,HSV1,）和骶神经节（,HSV2,）,以潜伏状态与机体处于相对平衡，不引起临床症状,各种非特异性刺激下，潜伏的病毒激活增殖,病毒沿神经纤维索下行至感觉神经末梢，至附近表皮细胞内继续增殖，引起复发性局部疱疹,特点,是每次复发病变往往发生于同一部位,，最常见在唇鼻间皮肤与粘膜交界处出现成群的小疱疹,先天性感染,垂直传播或分娩时感染,HSV-2,与宫颈癌的关系,有生殖器疱疹者，宫颈癌发病率高,宫颈癌患者,HSV-2,抗体阳性率高,宫颈癌脱落细胞中可查到,HSV-2,抗原,HSV-2,可使细胞转化并诱生肿瘤,两者好发部位相似,宫颈癌细胞中有,HSV-2,基因片段及特异,mRNA,存在,免疫性,原发感染后,1,周左右血中可出现中和抗体,3-4,周达高峰，可持续多年,细胞免疫起更重要作用,NK,细胞可特异性杀死,HSV,感染细胞,抗体介导的,ADCC,效应亦可将,HSV,感染细胞裂解,细胞毒性,T,细胞和各种淋巴分子（如干扰素等）在抗,HSV,感染中也有重要意义,微生物学检查,病毒分离,采取病人口腔、宫颈、阴道分泌液等,接种易感细胞中培养12天,细胞肿胀，变圆，相互融合等病变，可作初步诊断,抗原检测,用,IFA、ELISA,等方法直接检测细胞内或,分泌液中抗原,，快速诊断,HSV,感染。,抗体检测,补体结合试验，,ELISA,抗体，可用于原发感染诊断,复发感染时很难观察到抗体效价上升,检测脊髓液抗体，对神经系统,HSV,感染有重要意义,防治原则,预防,避免同患者接触,防止医院内感染,剖腹产预防新生儿感染,HSV,有致癌可能性，减毒活疫苗和死疫苗不宜用于人体,包膜蛋白（提纯的,gG、gD）,亚单位疫苗,基因重组疫苗,、,多肽疫苗,治疗,国内用,HSV gC gD,单克隆抗体制成滴眼液，用于治疗疱疹性角膜炎，取得显著疗效,无环鸟苷（,ACV）,及,脱氧鸟苷,对疱疹病毒选择性很强的药物,水痘-带状疱疹病毒（,VZV）,人是,VZV,的唯一自然宿主,皮肤,是病毒的主要靶细胞,可由同一种病毒引起两种不同的病症,儿童初次感染引起,水痘,潜伏体内的病毒受到某些刺激后复发引起,带状疱疹,，多见于成年人和老年人,VZV,的基本性状,基本性状与,HSV,相似,只有一个血清型,对一般实验动物不敏,感，在人胚成纤维细,胞中增殖，并缓慢产,生细胞病变,水痘,(,Chicken Pox,),病毒,经呼吸道、结膜、皮肤等处侵入人体,先在局部淋巴结增殖,进入血液散布到各个内脏继续大量增殖,2,3,周潜伏期,皮肤广泛发生丘疹，水疱疹和脓疱疹,带状疱疹（,Shingles,）,儿童时期患过水痘愈合,病毒潜伏在,脊髓后根神经节或脑神经感觉神经节,中,机体免疫力下降等条件刺激,病毒沿感觉神经轴索下行,该神经所支配的皮肤细胞内增殖,在皮肤上沿着感觉神经的通路发生串联的水疱疹，形似带状,微生物检查及防治,水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般不需作微生物学诊断,VZV,减毒活疫苗预防水痘感染和传播有良好效果,治疗可用无环鸟苷、阿糖腺苷和高剂量干扰素,巨细胞病毒（,cytomegalovirus，CMV）,感染的细胞肿大，并具有巨大的核内包涵体，故名,CMV,具有典型的疱疹病毒形态，其,DNA,结构也与,HSV,相似,有高度的种特异性，人巨细胞病毒（,HCMV,）只能感染人,病毒在细胞培养中增殖缓慢，复制周期长,核内包涵体呈,“猫头鹰眼”,状,CMV,的包涵体,巨细胞病毒,立即早期,IE,蛋白（,1H,）：调节蛋白,早期,E,蛋白（,24H,）：功能蛋白,晚期,L,蛋白（,36H,）：结构蛋白,检测,E,、,IE,蛋白可用于早期快速诊断,致病性,通常呈隐性感染,，,少数感染者有临床症状,可长期带毒形成潜伏感染,潜伏部位,常在唾液腺,、,乳腺、肾等,传播途径有接触感染,、,先天感染,、,血源性感染,、,性感染等,所致疾病,先天性感染,通过胎盘侵袭胎儿。早产、流产、永久必性智力低下、耳聋和脉络视网膜炎等,围产期感染,多无临床症状，,可表现为迁延性肺炎或肝功能损伤,接触感染,亚临床型,输血感染,输血后的单核细胞增多症和肝炎,免疫功能低下时的感染,肝炎、间质性肺炎、视网膜炎、脑炎,细胞转化与致癌潜能,宫颈癌、结肠癌等,中,CMV DNA,检出率高,免疫性,主要是细胞免疫,微生物学检查,尿等标本离心沉淀，姬姆萨染色镜检，检查巨大细胞及核内和浆内嗜酸性包涵体,分离培养可将标本接种于人胚肺纤维母细胞中,，,培养,24,小时后用,DNA,探针进行原位杂交，检测,CMV DNA,葡聚糖液提取外周血单核细胞，制成涂片，加,CMV,单克隆抗体，采用免疫酶或荧光染色，检测细胞内抗原,ELISA,检测,lgM,抗体和,lgG,抗体，适用于早期感染和流行病学调查,PCR,治疗与预防,丙氧鸟苷（,ganciclovir DHPG,）有防止,CMV,扩散作用,耐丙氧鸟苷的,CMV,感染可选用磷甲酸钠，但效果比前者差,CMV,病毒活疫苗致癌潜能的问题有待解决,CMV,包膜糖蛋白的亚单位疫苗是研究的方向,EB,病毒（,Epstein-Barr virus，EBV）,Epstein,和,Barr,于,1964,年首次成功地将,Burkitt,非洲儿童淋巴瘤细胞时发现，故名,形态结构与其它疱疹病毒相似,主要,侵犯,B,细胞,在,B,细胞内引起两种形式的感染,增殖性感染 非增殖性感染,不同感染状态时表达的抗原不同,EBV,的增殖性感染,病毒增殖，感染细胞溶解死亡,增殖性感染相关抗原,EBV,早期抗原（,EA,）,非结构蛋白，具,DNA,多聚酶活性,EBV,衣壳抗原（,VCA,）,与病毒,DNA,组成,EBV,的核衣壳,EBV,膜抗原（,MA）,EBV,的中和抗原（,gp320）,EBV,非增殖性感染,包括：,潜伏感染,病毒基因组处于潜伏状态,感染的,B,细胞的“转化”或“永生化”,可被激活而转为增殖性感染,恶性转化,转化的,B,细胞受到某些条件的,促发，可发生染色体易位并致,癌变,潜伏感染相关抗原,EBV,核抗原（,EBNA）,感染和转化的,B,细胞核内均可检出,潜伏感染膜蛋白（,LMP,）,潜伏感染,B,细胞的表面抗原,致病性,EB,病毒在人群中广泛感染,我国,3,5,岁儿童感染率达90%以上,主要通过,唾液传播,，也可经输血传染,EB,病毒在口咽部上皮细胞内增殖，然后感染,B,淋巴细胞,感染,B,细胞进入血循环可造成全身性感染,病毒可长期潜伏,所致疾病,传染性单核细胞增多症,非洲儿童淋巴瘤（即,Burkitt,淋巴瘤）,鼻咽癌,传染性单核细胞增多症,一种急性淋巴组织增生性疾病,，,多见于青春期初次感染,EBV,后发病,三个典型症状为发热、咽炎和颈淋巴结肿大,随病情发展可出现肝脾肿大、肝功能异常，外周血单核细胞增多，并出现异型淋巴细胞（可杀伤表面有,EBV,抗原表达的,B,细胞）,非洲儿童淋巴瘤（即,Burkitt,淋巴瘤）,于中非,、,新几内亚和美洲温热带地区呈地方性流行,多见于,5,12,岁儿童,好发部位为颜面、腭部,所有,BL,病人血清均含,EBV,抗体，其中,80%,以上滴度高于正常人,在肿瘤组织中发现,EBV,基因组,鼻咽癌,我国南方（广东,、,广西）及东南亚是鼻咽癌高发区,多发生于,40,岁以上中老年人,EBV,与,鼻咽癌,在所有病例的癌组织中有,EBV,基因组存在和表达,病人血清中有高效价,EBV,抗原的,lgG,和,lgA,抗体（主要,VCA,和,EA,）。病情好转后，这些抗体的滴度也随之下降,EBV,与鼻咽癌,(1),鼻咽癌活检组织均可检出,EBV,的,DNA,和,EBNA,(2),病人血清中有高效价,EBV,特异的,VCA-IgA,或,EA-IgA,抗体,(3),鼻咽癌细胞在裸鼠传代中有完整的,EBV,形式,(4),鼻咽粘膜尚未发生恶变前已经查出这些抗体，治疗后好转者，抗体效价下降,微生物学检查,EBV,分离培养困难,可用核酸杂交和,PCR,等方法检测细胞内,EBV,基因组及其表达产物,血清学诊断,EBV,特异性抗体的检测,检测病毒,VCA-IgA,或,EA-IgA,抗,体，滴度1：5,1,：10有诊断,意义,异嗜性抗体凝集试验,用于传染性单核白细胞增多症的,辅助诊断,防治原则,我国用基因工程方法构建的同时表达,EBV gp320,和,HBsAg,的疫苗，重点使用在鼻咽癌高发区,gp320,膜蛋白疫苗，正在英国大学生患者中作小规模接种，以期观察该疫苗是否能降低传染性单核细胞增多症的发病率,其它疱疹病毒,HHV-6,对,T,细胞有高度的亲嗜性,HHV-6,具疱疹病毒的典型特征,可感染多种细胞，生长缓慢，,CPE,可对幼儿及免疫力低下者致病,从标本中分离到,HHV-6,可确认,其它疱疹病毒,HHV-7,与,HHV-6,相似，可致幼儿急疹,HHV-8,是,KS,的致病因子,