输血科培训资料

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,输血科培训资料,一 复习：有关血型的简单知识与概念,血型,是人体血液的一种遗传性状，各种血液成分包括红细胞、白细胞、,血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异，受独特的,遗传基因控制。,由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系，称为,血型系统,。,血型被认为是指各种血液成分的遗传多态性标记。,“免疫血液学”在临床医学、人类学、遗传学、法医学、考古学等方面的应用日趋广泛，,尤其是在输血、器官移植、骨髓移植等临床实践中发挥着重要作用。,人类最重要的几个血型系统,红细胞血型系统,ABO,血型系统,Rh,血型系统,其他血型系统,白细胞抗原系统,血小板抗原及抗体,血清蛋白成分的抗原特异性,血型抗原与抗体的几个特性,A,或,B,抗原,在胚胎期及出生时便能检出，但敏感性较低，到,20,岁左右时,才达高峰。抗原性终身不变，但到老年敏感性有所下降。,ABO,血型系统,抗体,有免疫抗体和天然抗体之分。,抗体有抗,A,和抗,B,两种。,人在出生前尚未产生抗体，出生后,3-6,个月才开始出现，至青春期达高,峰。产生抗体的功能可延续终身，但其效价随着年龄增长而逐渐降低。,天然抗体可能是由一种无觉察的抗原刺激而产生。,血型抗体是免疫球蛋白，免疫性抗体主要是,IgG,，天然抗体主要是,IgM,。,ABO,血型分型原则,血型,红细胞上抗原,血清中抗体,A,A,抗,B,B,B,抗,A,O,无,抗,A,，抗,B,AB,A,、,B,无,血型鉴定前的准备,一、标本的采集,1.,红细胞悬液标本,门诊血型常用手指血做正定性。但现在已经不提倡了。,采集,EDTA-K,2,抗凝的静脉血,离心，取红细胞用生理盐水洗涤,配制红细胞悬液：,2,红细胞悬液用于抗体效价的测定；,5,红细胞悬液用于血型鉴定、交叉配血试验，,2.,血浆或血清标本,血型及配血标本的要求,护士根据送检单的要求，双人核对采集标本。,采集后立即送检。,输血科工作人员注意核对接收标本,两个小时内要完成血型的检验。,配血标本要三天内的。,标本要保存七天。,ABO,血型鉴定方法,血型鉴定,抗原,+,抗体反应,正向定型,（,direct typing,）,:,已知特异性抗体（标准血清） 检测红细胞上的未知抗原,反向定型,（,indirect typing):,已知血型的标准红细胞 检测血清中的未知抗体,ABO,血型正、反向鉴定及结果判断,鉴定,ABO,血型常用方法,1.,生理盐水凝集法,盐水介质,原理：,Ag+Ab AgAb,用生理盐水为介质，检测的是,IgM,性质抗体,玻片法,试管法,正定型血型鉴定操作程序图（玻片法）,血型鉴定,试管法,1,、每个被检者准备小试管,1,支，贴好名签，加入等渗盐水,1ml,。从毛细血管采血配成,5%,的红细胞悬液，注意血液不能凝结。,2,、每个被检者准备小试管,3,支，分别贴上,A,、,B,标签，并标上姓名，按标签分别加抗,A,、,B,抗体,2,滴。,3,、两管各加被检红细胞悬液,1,滴混匀。,4,、放在离心机内，用,10003000,转,/,分，,1,分钟，观察现象。,加被检红细胞悬液,加试剂抗体血清,离心,相对应的抗原抗体反应,观察结果,镜下的凝集与非凝集,反向定型,一、用途：当没有合适的标准血清，或用标准血清鉴定出现可疑结果时，可用此法核对。,二、标准红细胞悬液的配置：分别取已知敏感性高的标准,A,、,B,、,0,、三型 人的红细胞红洗涤三次，配成,5%,的红细胞悬液（若无标准红细胞，可用,5,个,A,型，,2,个,B,型，,2,个,O,型人红细胞，分别按型混合，代作已知标准红细胞）,三、方法,1,、从被检者静脉，制成血清或血浆。,2,、试管的准备，同标准血清鉴定法,3,、在,A,管放标准,A,型红细胞,1,滴，,B,管放标准,B,型红细胞,1,滴，在,O,型管放标准,o,型红细胞,1,滴。,4,、各加被检血清,2,滴，分别混匀，离心后判断结果同前。,ABO,血型正、反向鉴定及结果判断,在特殊环境，没有标准血清和标准红细胞，仅知一个,A,型（或,B,型）人时，若用血液，怎么来鉴定人的血型？,问题,已知,A,型红细胞,+,被检者血清,已知,A,型血清,+,被检得红细胞,2.,微柱凝胶技术,微柱凝胶技术是液相技术与固相技术的巧妙组合，是凝胶过滤技术、离心技术、红细胞凝集试验技术（特异性抗体抗原反应）的完美结合。通过对凝胶种类的选择和凝胶浓度的调节来控制分子筛孔径大小,使分子筛只允许游离红细胞通过,从而达到分辩凝集红细胞和非凝集红细胞的目的。,微柱凝胶技术是目前最易大规模推广、最适于常规试验的最好血型血清学试验技术。,微柱凝胶技术原理,当抗原抗体反应时红细胞发生凝集（包括已致敏的红细胞通过抗人球蛋白的桥连作用发生的凝集），在一定的离心力作用下，凝集的红细胞不能通过凝胶间隙而留在凝胶分离柱上层或分散在凝胶分离柱中，此为阳性反应；而未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶间隙而沉积于凝胶分离柱的底部，此为阴性反应。,微柱凝胶种类,（一）中性胶（又称空白胶，仅含有葡聚糖凝胶）：用做检测,IgM,抗体与相应抗原红细胞的反应。如,ABO,反定型。,（二）特异性胶（如加入过抗,-A,、抗,-B,、抗,-D,等特异性抗体的凝胶）：利用包被的抗体检测相应抗原。,（三）抗球蛋白胶（包被了单特异性或多特异性抗人球蛋白试剂的凝胶）。用于检测,IgG,抗体与相应抗原红细胞的反应。,微柱凝胶法做,ABO,、,Rh,血型实例,红细胞抗原与相应抗体在,微柱凝胶介质,中发生凝集发应,ABO,、,Rh,血型鉴定质量控制,1,、技术上的失误,假阴性,抗体试剂与红细胞比例不对应。,红细胞悬液过淡。,离心速度、时间不够。,忽略观察溶血现象，因溶血也是阳性反应。,假阳性,离心速度过大或离心时间过长。,使用了受到细菌污染的抗体试剂和盐水。,使用不干净的试管等。,造成假阳性或假阴性的人为原因：,标本张冠李戴。,未加入或使用了失效的试剂。,操作者不能正确识别和解释试验结果。,人为的书写错误。,2,、被检人血清标本的问题,婴儿及老年人，,4,6,月婴儿血清中,ABO,抗体很弱,疾病影响引起假凝集或弱凝集。,治疗措施的影响,3,、被检者红细胞的问题,红细胞上抗原位点过少或抗原性减弱如弱,A,、弱,B,亚型和白血症或恶性肿瘤患者,红细胞获得性异常，如,O,型或,A,型病人因肠道细菌感染使红细胞上获得类,B,抗原,细菌污染,正反定型结果不一致的解决办法,首先重复试验,，,不符则继续做下列试验。,（,1,）重新采集献血员和受血者的新鲜血液标本,（,2,）多次洗涤被测红细胞和标准红细胞,（,3,）用抗,A1,、抗,AB,检测红细胞。,（,4,）如怀疑血清中有抗,A1,，可用数份,A2,红细胞标本进行检验。,（,5,）如果试验结果未见凝集，应将正向及反向试验至少在室温在,40,放置,30min,，用显微镜检查核实。,（,6,）若怀疑是由于抗原减弱造成的正反定型不符，可进一步做木瓜酶试验、直接抗球蛋白试验、吸收放散试验等加以鉴别。,二、,Rh,血型,（,Rh,Rhesus monkey,的缩写）,2,、主要类型,Rh,阴性：,RBC,上无,Rh,（,D,）抗原,Rh,阳性：,RBC,上有,Rh,（,D,）抗原,1,、系统组成：,(1),抗原：,RhD,、,RhC,、,Rhc,、,RhE,、,Rhe,主要成分为多肽链,(2),抗体：抗,-D,、抗,-C,、抗,-c,、抗,-E,、抗,-e,性质：,IgG,性质,(3),基因：,RHD,和,RHCE,基因,3,、特点,（,1,）绝大多数为,IgG,抗体,Rh,阴性者接受,Rh,阳性血后通过免疫产生免疫性抗体。,（,2,）抗体可通过胎盘,其,抗原性强弱依次为,D,、,E,、,C,、,c,、,e,，以,D,抗原性最强。,我们称含,D,抗原的红细胞为,Rh,阳性，不含,D,抗原的为,Rh,阴性。我国人中,Rh,阴性者甚为少见。,（,3,）天然抗体极少。抗,D,抗体最常见,Rh,抗体,有完全抗体和不完全抗体两种。完全抗体在机体受抗原刺激初期出现，一般属,IgM,型，分子量大，不能通过胎盘，存留时间短。机体继续受抗原刺激，则出现不完全抗体，属,IgG,型，分子量小，可通过胎盘，存留时间长，常在完全抗体出现后出现，引起新生儿溶血病。,4,、,Rh,血型的鉴定,仅用,抗,D,血清,进行鉴定，粗略地分为,Rh,阳性和阴性两类。,鉴定方法,完全抗体：生理盐水凝集试验,不完全抗体：胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋白法等,5,、,Rh,血型系统的临床意义,Rh,血型系统所致的溶血性输血反应,：,第一次输血不必考虑,Rh,血型，第二次输血需考虑,Rh,血型是否相同。,新生儿,Rh,溶血病,：,Rh-,的母亲 若输过血，怀孕后其孕儿为,Rh+,者，孕妇的抗,Rh,的抗体，可通过胎盘导致胎儿溶血。第一次孕儿为,Rh+,，胎儿的,RBC,因某种原因,(,如胎盘绒毛脱落,),进入母体，或分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内产生抗,Rh,的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗,Rh,的抗体，通过胎盘导致胎儿溶血。,6,、,Rh,血型鉴定方法：,盐水法：单克隆,IgM,抗,D,，化学结合抗,D,凝聚胺法：,抗球蛋白法：经典法，改良法,酶法：菠萝酶，木瓜酶。,微柱凝胶法：,7,、临床意义,（,1,）,Rh,阳性和,Rh,阴性输血,（,2,）,Rh,HDN,（,3,）中国人,RH,基因多态性,二、抗体筛查,（卡式）,三、交叉配血试验,1.,交叉配血实验,分别将供血者的,RBC,与受血者的血清及供血者的血清与受血者的,RBC,进行的配合试验,2.,交叉配血实验的意义,（,1,）检验血型鉴定是否有误。,（,2,）检验血清中是否有不规则抗体。,（,3,）,“交叉配血”是保证输血安全的关键措施。,交叉配血试验主要方法,根据性质分：,（,1,）盐水配血试验（,2,）凝聚胺配血试验（,3,）抗人球配血试验（,4,）特殊配血试验等（酶法、特殊介质配血等）,根据方法分,（,1,）试管法（,2,）卡式（,3,）全自动,红细胞,红细胞,血清,血清,（主侧）,（次侧）,（供血者）,（受血者）,交叉配血试验示意图,两侧,均无凝集反应，可以输血。,主侧,有凝集反应，绝对不能输血。,次侧,有凝集反应，一般不宜输血。,结果判读,配血方法的选择,1,、,生理盐水法,：无输血史及妊娠史,2,、,间接抗人球蛋白法,：有反复输血史及妊娠史，尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿的妇女。,大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。,交叉配血的方法,供血者的红细胞,受血者血清,受血者的红细胞,供血者血清,（主侧）,（次侧）,均不凝集：配血相合,主侧凝集：配血不合,主侧不凝，次侧凝集：只在应激情况下少量缓慢，或使用洗涤,RBC.,卡式交叉配血试验,4,、输血原则,受血者与供血者的,ABO,血型及,RhD,相同。,已孕妇女和反复输血病人，须做抗体筛查。,交叉配血实验,谢 谢！,人有了知识，就会具备各种分析能力，,明辨是非的能力。,所以我们要勤恳读书，广泛阅读，,古人说“书中自有黄金屋。,”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识，,培养逻辑思维能力；,通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，,培养文学情趣；,通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。,有许多书籍还能培养我们的道德情操，,给我们巨大的精神力量，,鼓舞我们前进,。,谢谢！,