试剂配制方法

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,试剂配制方法,1,试剂(reagent):,一定量的（一种或多种）试药溶解在水或其他有机溶剂内供化学反应、分析化验、教学实验、研究试验等的溶液,。,化学试剂的分类,化学试剂数量繁多，种类复杂，通常根据用途分为,一般试剂、基础试剂、高纯试剂、色谱试剂、生化试剂、光谱纯试剂和指示剂等,。采用的标准为国家标准,(,标以,“,GB,”,字样,),和行业标准,(,标以,“,HG,”,字样,),。常用的试剂主要有一般试剂、基础试剂、高纯试剂和专用试剂等。,2,化学试剂纯度分类,优级纯(GR：Guaranteed reagent)，又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，,亦可作基准物质用，,使用,绿色,瓶签。,分析纯(AR)，又称二级试剂，纯度很高,99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，,如配制滴定液，用于鉴别及杂质检查等，,使用,红色,瓶签,。,化学纯(CP)，又称三级试剂， 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用,蓝色(深蓝色),标签。,实验试剂(LR：Laboratory reagent)，又称四级试剂。,杂质含量较高，纯度较低，在分析工作常用辅助试剂（如发生或吸收气体，配制洗液等）。,基准试剂 它的纯度相当于或高于保证试剂，通常专用作容量分析的基准物质。称取一定量基准试剂稀释至一定体积，一般可直接得到滴定液，不需标定，基准品如标有实际含量，计算时应加以校正。,光谱纯试剂（符号,S.P.,） 杂质用光谱分析法测不出或杂质含量低于某一限度，这种试剂主要用于光谱分析中。,色谱纯试剂 用于色谱分析。,生物试剂 用于某些生物实验中。,超纯试剂 又称高纯试剂,( 99.99%)。 纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂高纯试剂的杂质含量要比优级试剂低2个、3 个、4个或更多个数量级。因此，高纯试剂特别适用于一些痕量分析，而通常的优级纯试剂就达不到这种精密分析的要求。,3,试剂的质量以及使用是否得当，将直接影响到分析结果的准确性，因此作为检验人员应该全面了解试剂的性质、规格和适用范围，才能根据实际需要选用试剂，以达到既能保证分析结果的准确性又能节约经费的目的。,4,化学试剂保管,保存化学试剂的库房应该通风、干燥、冷暗。,化学试剂应该按照液体、固体分类放开存放，强酸、强碱试剂应该分开存放，做好标记。,剧毒药品专人保管，使用后记录用量。,易燃易挥发试剂除应盖好内塞外，还应用胶粘带密封。,生物制品、酶类制剂应该避光，冰箱低温保存。,5,试剂配制一般步骤,6,计算,溶液的浓度,质量浓度,体积浓度,质量分数,质量摩尔浓度,ppm浓度等,物质的量浓度,体积比浓度,克/升浓度等,质量浓度,:表示一定质量的溶液里溶质和溶剂的相对量,。,体积浓度,:,表示一定量体积溶液中所含溶质的量,。,质量浓度,的值不因温度变化而变化,体积浓度,的值随温度的变化而相应变化。,当量浓度,7,We help you discover life,质量浓度,组分Gi的质量浓度定义式为,式中 Gi混合物中组分i的质量，kg；,V混合物的体积，m,3,（L）。,单位体积混合物中某组分的质量称为该组分的质量浓度。,符号,表示，单位为,kg/,L,。,8,We help you discover life,质量浓度VS密度,质量浓度,就是溶液单位体积含,溶质,的质量，单位为克/升或者克/毫升。,溶液密度,就是溶液单位体积,溶液,的质量，单位为克/升或者克/毫升。,密度大于水的溶液，如硫酸溶液、氢氧化钠溶液，质量浓度越大，溶液密度越大。,密度小于水的溶液，如,氨水溶液,、,酒精,溶液，质量浓度越大，溶液密度越小。,9,质量分数,质量（重量）百分比浓度,100 克 溶液（溶剂+溶质）中含有溶质的克数。,一般不做特殊说明的百分浓度，就是指质量百分浓度，试剂厂生产的酸碱液体，常用此法。,10,将一瓶80g 溶质质量分数为10%的NaCl溶液平均分为2等份，每份溶液中溶质的质量分数为_；若将其中的一份溶液中溶质的质量分数减小一半，应加水_g，若将另一份溶液中溶质的质量分数增大一倍，应加入NaCl_g。,解析：根据溶液的均一性可知，无论将溶液怎么来分，只要条件不改变，其溶质的质量分数就不会发生变化。而当增加溶剂的质量时却能使溶质的质量分数变小，加 入溶质之后肯定能使溶液中溶质的质量分数增大。,在加水稀释的过程中溶质的质量是守恒的，由此稍作思考可知，所加水的质量应和对应溶液的质量一样多 （,40,）的时候，即可使原来,10%,的,NaCl,溶液的溶质质量分数减小一半（即,5,）；,在采用加入溶质的方法使溶液浓缩的时候，所加入的溶质质量可利用列方程的方法求得，但要注意，这部分溶质加入后，不仅溶质的质量增加了，同样也使溶液的质量增大了。若设加入的溶质质量为,x,，则由题意可得,（,x,40,10,）,（,40,x,）,20,解得，,x,5,。,答案：,10%,；,40,；,5,。,11,若溶质是固体：称取溶质的克数,称取溶质的克=需配置溶液的总重量需配置溶液的浓度,如何配制 10 （W/W）氢氧化钠溶液？,解析：其实就是,100g,溶液中含,10g,氢氧化钠。水在室温的比重接近,1,，所以试剂配制时，只需量取,90mL,水溶解。,12,若溶质是液体：应量取溶质的体积,需用溶剂的克=需配制溶液的总重量-（应取溶质的体积溶质的比重）,欲配制5%硫酸溶液（比重1.03）200mL，需量取98%浓硫酸（比重1.84）多少体积 ？,应取溶质的体积：,=,200*5%/98%=10.2ml,13,质量摩尔浓度（,b,B,）,1kg溶剂中所含溶质的摩尔数。,质量摩尔浓度常用来研究难挥发的非电解质稀溶液的性质，如：蒸气压下降、沸点上升、凝固点下降和渗透压。,优点是其量值不受温度的影响，缺点是使用不方便。,单位：,mol kg,14,市售过氧化氢（俗称双氧水）含量为30%，密度为1.11kgL-1。计算该溶液的质量摩尔浓度。,15,ppm（part per million）浓度,指溶质质量占全部溶液质量的百万分比,ppm浓度即百万分比浓度（10,6,）。,即1ppm=1,10,6,有些溶液极稀，用百分比浓度表示既不方便，又容易发生错误。例如，某溶液的浓度是0.0005%，改用ppm表示就是5ppm。,ppm浓度常用与微量分析、环境化学中。,16,波美度,(Be),指把波美比重计浸入所测溶液中，得到的度数。,波美比重计有两种：,重表，用于测量比水重的液体；,轻表，用于测量比水轻的液体。,当测得波美度后，从相应化学手册的对照表中可以方便地查出溶液的质量百分比浓度。,波美度数值较大，读数方便，所以在生产上常用波美度表示溶液的浓度。,17,体积浓度,体积百分浓度,体积比浓度,体积摩尔浓度,当量浓度,克/升浓度,18,体积百分浓度,简写：%（V/V）,100ml 溶液中所含溶质的体积（ mL ）数，一般用来表示溶质为液体的溶液，如各种浓度的酒精、甲醇溶液。,75 乙醇的配制？,乙醇的体积百分浓度是商业上表示酒类浓度的方法。白酒、黄酒、葡萄酒等酒类的“度”（以标示），就是指酒精的体积百分比浓度。例如：60%(V/V)的酒写成60。,体积百分比浓度属非法定单位，将被法定计量单位体积分数（）代替。,物质B的体积分数,B,是物质B的体积跟混合物的体积比。例如，把60mL酒精溶于水，配成100mL酒精溶液，该溶液的体积分数是0.60或6010,2,。,19,将4g NaOH固体溶于适量水，再稀释至500mL后所得到的溶液中NaOH的物质的量浓度是？（NaOH分子量为40）,配制100mL 1.0M NaCl溶液，思考：需要氯化钠固体多少克？（NaCl分子量为58.5）,C（,NaOH,）,=n/V=m/MV=4/40/0.5=0.2 mol/L,2. mNaCl,nM,CV,0.11.058.55.9(g),20,体积比浓度,指用溶质与溶剂的体积比表示的浓度。,如 1 ： 1 盐酸，即表示 1 体积量的盐酸和 1 体积量的水混合的溶液。,体积比浓度只在对浓度要求不太精确时使用。,21,市售过氧化氢（俗称双氧水）含量为30%，密度为1.11kgL-1。计算该溶液的物质的量浓度。,22,物质的量浓度（体积摩尔浓度）,概念：单位体积溶液中所含溶质B的物质的量，符号为C,B,。,表达式,：,常用单位,mol/L或mol L,-1,或M.,N,：,溶质,B,的物质的量，单位为,mol,；,V,：,溶液的体积，单位为,L,23,物质的量（n）、质量（m）、摩尔质量（M）之间的关系为：,24,摩尔质量（M）,单位物质的量的物质所具有的质量,称为摩尔质量(molar mass),当物质的质量以克为单位时,摩尔质量的单位为g/mol,在数值上等于该物质的,相对原子质量,或,相对分子质量,。,对于某一纯净物来说，它的,摩尔质量,是固定不变的，而物质的质量则随着物质的物质的量不同而发生变化。,25,26,物质的量浓度,误差分析,若,m,偏小则,c,偏低，若,m,偏大则,c,偏高；,若,V,偏小则,c,偏高，若,V,偏大则,c,偏低。,27,28,溶质质量分数为,w%,，密度为,g/mL,的某溶液中，其溶质的物质的量浓度的表达式,:,c,=,溶液中溶质的物质的量浓度,c,溶液的密度,g/mL,，其质量分数的表达式：,W,%,=,物质的量浓度与质量分数的换算,29,试分析下列操作会引起所配制溶液的物质的量浓度偏高还是偏低？,称取,NaOH,时动作过慢,溶解,NaOH,后未等溶液冷却就转移至容量瓶中,烧杯未用蒸馏水洗涤,转移溶液时有液体溅出,容量瓶未干燥，事先有少量蒸馏水,偏低,偏高,偏低,偏低,无影响,误差分析,30,当量浓度（N）,体积当量浓度,是原来国际通用的浓度之一，是根据,当量定律,来的。,如盐酸浓度为 0.1N ，表示 1L 溶液中含有 0.1 当量的盐酸,关于 N 与 M 的关系，即当量浓度与摩尔浓度关系，对不同的物质是不相同的。,如硫酸：一般写作 1MH,2,SO,4,=2N H,2,SO,4,，写作 M （12H,2,SO,4,） =0.1000 molL ，,如高锰酸钾：1 M KMhO,4,=5N KMnO,4, 一般写作 M （ 1 5KMnO,4,） =,0.1000 molL 。,某物质跟其它物质起化学反应时,该物质每转移一个电子所需的质量叫做该物质的当量。,31,克/升浓度,用1L溶液里所含溶质的克数来表示的溶液浓度，叫做克/升浓度。,在1L氯化钠溶液中含有氯化钠150g，氯化钠溶液的克/升浓度就是150g/L。,克/升浓度常用于电镀工业中配制电镀液。,32,溶液的配置,溶质+水,浓溶液加水稀释,浓溶液加稀溶液混合,溶质加稀溶液,稀溶液蒸发得到相应的浓溶液,33,稀释定律,稀释前后溶质的物质的量守恒,稀释前后溶质的质量守恒,34,哪种浓度的酒精消毒效果最好？,70%酒精杀菌力最强，它能使蛋白质脱水和变性，在35分钟内杀死细菌。因此，它用于消毒和防腐，适用于皮肤和器械、塑料制品等的消毒。,高浓度的酒精（95100%）能引起菌体表层蛋白质凝固，形成保护层，使酒精分子不易透入，因此杀菌能力反而弱。,35,比例浓度：,比例浓度是化验室里常用的粗略表示溶液,(,或混合物,),浓度的一种方法。包括,容量比浓度,和,质量比浓度,两种浓度表示方法。,36,比例浓度第一种表示： 容量比浓度,指液体试剂混合或用溶剂,(,大多数为水,),稀释时的表示方法。,例如,1+3(V,1,+V,2,),盐酸溶液，表示,1,体积市售盐酸与,3,体积蒸馏水相混而成的溶液。,37,比例浓度第二种表示： 质量比浓度,指两种固体试剂相互混合的表示方法。,例如,1+100(m,1,+m,2,),钙指示剂,氯化钠混合指示剂，表示,1,个单位质量的钙指示剂与,100,个单位质量的氯化钠相互混合。这是一种固体稀释方法。,38,2,、称量,电子天平,药匙,称量纸,试剂,39,取用试剂规则,为了达到准确的实验结果，取用试剂时应遵守以下规则，以保证试剂不受污染和不变质：,(1),试剂不能与手接触，要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂。,(2),绝对不准用同一种工具同时连续取用多种试剂,(3),试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将瓶放回原处,(4),已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。,40,电子天平的使用,校准 水平泡,称量试剂的天平应保持清洁、干燥，避免潮湿及腐蚀性气体的侵蚀。在进行称量操作时，被称取的试剂应置于称量纸上或其它器皿内，不可在盘中直接称量。,41,Cyagen Biosciences Inc.,NaOH,固体能否直接放在称量纸上称量呢？,易潮解或具有腐蚀性的药品必须放在玻璃器皿（如：烧杯）中称量，且动作要迅速。,42,化学试剂有效期,一般，化学性质稳定的物质，保存有效期就越长，保存条件也简单。,化学试剂的有效性，首先要根据化学试剂本身的,物理化学性质,作出,基本判断,，再对化学试剂的,保存状况,进行,表观观察,，然后根据,具体需要,来作出能否使用的结论。,43,化学试剂有效期,无机化合物,，只要妥善保管，包装完好无损，可以长期使用。但是，那些容易氧化、容易潮解的物质，在避光、荫凉、干燥的条件下，只能短时间（15年）内保存，具体要看包装和储存条件是否合乎规定。,有机小分子量化合物,一般挥发性较强，包装的密闭性要好，可以长时间保存。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等，在避光、荫凉、干燥的条件下，只能短时间（15年）内保存，具体要看包装和储存条件是否合乎规定。,有机高分子,，尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料，极易受到微生物、温度、光照的影响，而失去活性，或变质腐败，故此，要冷藏（冻）保存，而且时间也较短。,基准物质、标准物质和高纯物质,，原则上要严格按照保存规定来保存，确保包装完好无损，避免受到化学环境的影响，而且保存时间不宜过长。一般情况下，基准物质必须在有效期内使用。,44,3,、溶解,相关仪器：,研钵 玻璃棒 搅拌器 烧杯,加热：,水浴加热 直接加热,溶剂,注意在容器上盖表面皿，以防止液体蒸发。,45,溶剂,水,无水乙醇,PBS,BSA,有机溶剂,无机溶剂,46,溶剂的选择,溶解能力、挥发速度、安全性、经济性、来源性和贮存稳定性等。,一种好的溶剂必须要有良好的溶解性能，这可由溶解度参数和氢键指数判断。,47,有机溶剂,有机溶剂即是包含碳,原子,的有机化合物。溶剂通常拥有比较低的沸点、容易挥发或是可以由蒸馏来去除，从而留下被溶物。,有机溶剂是能溶解一些不溶于水的物质（如油脂、蜡、,树脂,、橡胶、,染料,等）的一类有机化合物。,特点是在常温常压下呈液态，具有较大的,挥发性,，在溶解过程中，溶质与溶剂的性质均无改变。,有机溶剂多数是容易燃烧的，当溶剂蒸气在空气中达到一定浓度时，会发生爆炸，必须注意溶剂的安全性。,大部分有机溶剂都有一定的毒性 个人防护,48,水,蒸馏水（Distilled Water ）,实验室最常用的一种纯水，虽设备便宜，但极其耗能和费水且速度慢，应用会逐渐减少。,蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物，但挥发性的杂质无法去除，如二氧 化碳、氨、二氧化硅以及一些有机物。,新鲜的蒸馏水是无菌的，但储存后细菌易繁殖；此外，储存的容器也很讲究，若是非惰性的物质，离子和容器的塑形物质会析 出造成二次污染。,去离子水（Deionized Water ）,应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子，把水里的阴阳离子都除掉的水，但水中仍然存在可溶性的有机物，可以污染离子交换柱从而降低其功效，去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。,双蒸水：ddH2O（Distillation-Distillation H,2,O）,经过2次蒸馏而得的水。,49,水,反渗水（Reverse osmosis Water）： 其生成的原理是水分子在压力的作用下，通过反渗透膜成为纯水，水中的杂质被反渗透膜截 留排出。反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点，利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体，细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质，但不 同厂家生产的反渗透膜对反渗水的质量影响很大。纯水（RO水）：也称纯水。即通过反渗透膜过滤后的水，反渗透膜的孔径一般为10A到100A之间，所以它能够去除95%以上的离子态杂质。,超纯水（Ultra-pure grade water）,既将水中的导电介质几乎完全去除，又将水中不离解的胶体物质、气体及有机物均去除至很低程度的水。其标准是水电阻率为18.2M-cm。但超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同，要根据实验的要求来确定，如细胞培养则对细菌和内毒素有要求，而HPLC则要求TOC低。,超纯水是时下纯度最高的水，其次是双级反渗透水（双级RO水）、双蒸水（ddH,2,O）、纯水（RO水）、蒸馏水。,50,评价水质的常用指标：,1、电阻率（electrical resistivity）,衡量实验室用水导电性能的指标，单位为M-cm，随着水内无机离子的减少电阻加大则数值逐渐变大。,实验室超纯水的标准:电阻率为18.2M-cm。,2、总有机碳（Total Organic Carbon ，TOC）,水中碳的的浓度，反映水中氧化的有机化合物的含量，单位为ppm 或 ppb。,3、内毒素（Endotoxin）,革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片，又称之为“热原”，单位cuf/mL。,51,Cyagen Biosciences Inc.,4,移液,52,容量瓶的规格,只能用来 配制一定体积的溶液,53,容量瓶的使用,54,Cyagen Biosciences Inc.,小结：容量瓶的使用六忌,一忌用容量瓶进行溶解（,体积不准确,）,二忌直接往容量瓶倒液（,洒到外面,）,三忌加水超过刻度线（,浓度偏低,）,四忌读数仰视或俯视（,仰视,浓度偏,低,，,俯视,浓度偏,高,）,五忌不洗涤玻璃棒和烧杯（,浓度偏低,）,六忌标准液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器）,55,俯视,或,仰视,刻度线对溶液浓度的影响,俯视,刻度线，实际加水量,未,到刻度线，使溶液的,体积偏小，,物质的量,浓度增大,；,仰视,刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的,体积偏大,，物质的量,浓度减小,。,56,5,、 定容,容量瓶,57,如果在定容时,因不小心使液面超过了容量瓶的刻度线,应该怎么办?,当摇匀后,竖直容量瓶发现液面低于刻度线,要不要补加蒸馏水?为什么?,58,6,、混匀,塞好瓶塞，用食指摁住瓶塞，用另一只手托住瓶底，把容量瓶反复倒转，使溶液混合均匀。,59,6 装瓶，贴标签,调节pH值（根据需要）,装瓶/分装,标签,60,非标准溶液标签,内容应包括标准溶液名称、浓度及单位、配制日期、配制人、编号等。,非标准溶液标签格式举例如下：,试剂名称：,试剂浓度：,配 制 人：,配制日期：,61,安全注意事项：,(1),分析实验室所用的溶液应用纯水配制，容器应用纯水洗,3,次以上。特殊要求的溶液应事先作纯水的空白值检验。,(2),每瓶试剂溶液必须有标明名称、浓度和配制日期的标签，标准溶液的标签还应标明标定日期、标定者。,62,安全注意事项：,(3),溶液要用带塞的试剂瓶盛装。见光易分解的溶液要装于棕色瓶中，挥发性试剂、见空气易变质及放出腐蚀性气体的溶液，瓶塞要严密。浓碱液应用塑料瓶装，如装在玻璃瓶中，要用橡皮塞紧，不能用玻璃磨口塞。,(4),配制硫酸、磷酸、硝酸等溶液时，都应把酸倒入水中，对于溶解时放热较多的试剂，不可在试剂瓶中配制，以免炸裂。,63,安全注意事项：,(5),用有机溶剂配制溶液时,(,如配制指示剂溶液,),，有时有机物溶解较慢，应不时搅拌，可以在热水浴中温热溶液，不可直接加热。易燃溶剂要远离明火使用，有毒有机溶剂应在通风柜内操作，配制溶液的烧杯应加盖，以防有机溶剂的蒸发。,64,安全注意事项：,(6),要熟悉一些常用溶液的配制方法。如配制碘溶液应加入适量的碘化钾（助溶稳定）；配制易水解的盐类溶液应先加酸溶解后，再以一定浓度的稀酸稀释，如氯化亚锡溶液的配制。,65,安全注意事项：,(7),不能用手接触腐蚀性及有剧毒的溶液。剧毒溶液应先作解毒处理，不可直接倒入下水道。,总之，溶液的配制是进行检验的一项基础工作，是保证检验结果准确可靠的前提。在检验方法标准中都规定了相应的配制方法。,66,药典、行业标准中有关概念及规定,一、试验温度,1.,水浴温度 除另有规定外，均指,98,100,；,2.,热水 系指,70,80,；,3.,微温或温水 系指,40,50,；,4.,室温 系指,10,30,；,5.,冷水 系指,2,10,；,6.,冰浴 系指约,0,；,7.,放冷 系指放冷至室温。,67,药典、行业标准中有关概念及规定,二、取样量的准确度,1.,试验中供试品与试药等“称量”或“量取”的量，均以阿拉伯数码表示，其精确度可根据数值的有效数位来确定，如称取“,0.1g”,，系指称取重量可为,0.06,0.14g,；称取“,2g”,，系指称取重量可为,1.5,2.5g,；称取“,2.0g”,，系指称取重量可为,1.95,2.05g,；称取“,2.00g”,，系指称取重量可为,1.995,2.005g,。,68,药典、行业标准中有关概念及规定,2,.“,精密称定”,系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。,3,.“,称定”,系指称取重量应准确至所取重量的百分之一。,4,.“,精密量取”,系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精密度要求。,5,.“,量取”,系指可用量筒或按照量取体积的有效位数选用量具。,6.,取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的,10%,。,69,谢谢！,70,