恒古骨伤愈

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一个有震撼力的产品,恒 古 骨 伤 愈,（,英文名：,OsteoKing 中文译名：,骨王,）,“,云,南 克 雷 斯,”,生产基地企业位于美丽的云南玉溪，冠以,“,克雷斯,”,之名，是取英文,“,Crystal,”,的译音，意为,“,水晶,”,，用水晶晶莹、剔透、高洁的本质，表达克雷斯制药不断追求高质量产品的心愿。,云南克雷斯制药,Yunnan Crystal Pharmaceutical Co,企业简介,云南克雷斯制药,制 造 中 心,营 运 中 心,百万级生产车间,自动灌装生产线,品质的保证,彝药“恒古骨伤愈”早年原为大理国御药院皇家御用药 。,上世纪,80年代末至90年代末在云南克雷斯制药的研发团队在各界医学专家的协作下，把这一古方用现代科学技术手段开发为一个完全具备现代化中药特点的科技医药产品，这一国家自然科学基金研究项目在治疗股骨头坏死、骨折、腰椎间盘突出症、骨关节炎方面有独特显著疗效。,目前对股骨头坏死的药物治疗对策,一、世界医药界公认骨坏死药物保守治疗的原则是：,降脂：,主要是他汀类药物,纤溶：,链激酶 、尿激酶 、重组葡激酶等酶制剂,抗凝：,低分子肝素类、,双香豆素类衍生物如华法林等,抗炎：,双氯芬酸类及其他抗炎镇痛口服、外用、栓剂药物,中国特色的辅助治疗药物：活血化瘀类中药的,二、目前药物保守治疗相对的局限性：,按上述治疗原则用药，西药需多种联合使用才能奏效，费用高， 长期使用毒副作用大，远期疗效并不理想。,三、,中医治疗的突破？,中医对股骨头坏死的认识,中医认为疾病发生原因为外因和内因，而且内因外因相互作用，使人体阴阳失去平衡，气血的失恒而生疾把股骨头坏死称为,“,髀枢痹,”,、,“,骨痹,”,、,“,骨萎,”,。其发生原因如下：外伤所致六淫侵袭邪毒外袭先天不足七情所伤。,中医认为与股骨头坏死病变关系最为密切的为,肝、脾、肾三脏。,肾,为先天之本，主骨生髓 ；,肝,主筋藏血，与肾同源，,两脏荣衰与共 ；,脾,胃为后天这本，万物生化之源，使脾健胃和，,若脾胃失健运，生化气血无源，则筋骨肌肉,皆无气以生。,恒古骨伤愈,合剂,曾用,名速效骨伤愈合剂,成分,三七，红花，人参，杜仲，黄芪，陈皮，洋金花，钻地风，鳖甲,功能,-补肝肾,活血益气，接骨续筋，消肿止痛，促进骨折愈合。,组方合理 、,针对病因,主治,-用于新鲜骨折及陈旧骨折，,股骨头坏死，,骨关节病，,腰椎间盘突出症,主药,道地的云三七,止血,别名：,开化三七、人参三七、田七、金不换、盘龙七。,品质以云南，贵州为上品，多年生宿根性草本植物,功能主治：,三七具有散瘀止血，消肿定痛之功效。,主治咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外伤出,血，胸腹刺痛，跌仆肿痛。,本草纲目云：,“,三七止血，散血，定痛。,”,现代药理：,1，该善血管内皮功能，抗血小板黏附，聚集,2，改善高凝状态，抗凝，抗血栓,3，改善血液成分，促进纤维蛋白原溶解,4，抗炎，镇痛,主药,藏红花,活血,别名,；红蓝草、,草红、刺红花、杜红花、,金红花,、番红花,菊,科植物,功能主治：,活血通径、散瘀止痛。,用于经闭、痛经、恶露不行、症瘕痞块、跌打,损伤,现代药理,；,1，红花油中含有较高的亚油酸，有降低血脂,及血清胆固醇、软化和扩张动脉、防止动,脉粥样硬化、增加血液循环,2，直接或部分对抗a-肾上腺素能受体的作用,而使血管扩张,3，红花黄色素有抗凝血作用,4，抗缺氧，抗炎，镇痛,主药人参,补气,常识；,原名,“,人生,”,，人参亦属五加科植物 ，中国称人参，产于,北美故名西洋或花旗 ，人参产于朝鲜的为高丽参,。,功能主治,：大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，益智安神,。,化学成分,:,人参中含有人参皂甙、多种氨基酸、糖类、低分子肽类、,有机酸、脂肪酸、维生素B、维生素C、菸酸、胆碱、果胶、,微量元素等。皂甙是人参生物活性的物质基础,现代药理,：,1、人参的,“,适应原,”,样作用：人参对物理的、化学的、生物的各种有害刺激有非特异性的抵抗能力，使紊乱的机能恢复正常，主要表现在血压、肾上腺、血糖方面的双向调节作用。,2、降脂作用。人参对高胆固醇饮食大鼠和高脂血症患者的血清LDL-C的增加和脂肪肝有改善作用，并能促进胆固醇的排泄，防止高胆固醇血症和动脉粥样硬化的形成。,3、血管内皮保护及扩张血管功能,4、对内分泌垂体,肾上腺皮质系统的作用，适量的人参使其功能增强，,发挥较强的抗炎、消肿和镇痛作用,主药,黄芪,补气,、血,又名：,棉芪，绵芪，绵黄芪，棉黄芪，黄蓍，黄耆，箭芪等。多年生草,本，豆科，国家三级保护植物，名贵中药材,。,渐危种 。,功用主治：,补气固表、利水退肿、脱毒生肌，益脾胃，补血、活血之,功效。,化学成分,:,含皂甙、多糖、多种氨基酸、叶酸及硒、锌、铜、钴、硅、,钼等多种微量元素。,现代药理：,1,，诱导机体产生干扰素，调节机体免疫功能。,2,，加强骨髓造血功能；增强心肌收缩力，改善微循环,指标，改善血液流变学指标。,3,，生肌，促进组织愈合作用，及抗骨质疏松作用,.,4,，有较好的消除水肿作用。能消除实验性肾炎蛋白尿,5,，,降压作用。,6,，用于,脾胃气虚，,经久不愈的溃疡等。,7,，较广泛的抗菌作用，保肝作用，调节血糖作用。,主,药,杜仲,补阳,异名,：,思仙，木绵、思仲，檰，石思仙，丝连皮、丝楝树皮，扯丝皮，丝棉,皮，玉丝皮，扯丝片。杜仲科杜仲属落叶乔木，是我国独有的植物,“,活,化石,”,，只有一科一属一种,。,功用主治,：补肝肾，强筋骨，安胎。,治腰脊酸疼，足膝痿弱，小便余沥，阴下湿痒，,胎漏欲堕，胎动不安，高血压。,化学成分,：,含杜仲胶，糖甙、生物碱、果胶、脂肪、树脂、有机酸、维生,素C、维生素E，维生素B及-胡萝卜素等，还含有很多人体必,须的微量元素，醛糖、绿原酸。,现代药理,：,1，杜仲具有愈伤作用,：杜仲叶可以致大鼠肉芽肿成熟及胶原在肉芽中沉积，促进伤口愈合进程。,2，杜仲具有抗骨质疏松作用：杜仲可以促进机体代谢和预防老年骨质疏松,美国航天局认为,杜仲可以用来预防宇航员由于太空失重而引起的骨骼和肌肉的衰退,。,3，杜仲具有抗补体的作用:抑制过度免疫起到抗炎镇痛作用,。,4，骨细胞增殖作用;杜仲叶提取物能促进体外培养骨细胞增殖和碱性磷酸酶的分泌，推测杜仲叶提取物有直接刺激成骨样增殖的成分,。,主药鳖甲,补阴,异名,：上甲，鳖壳，团鱼甲，鳖盖子。为鳖科动物中华鳖的背甲,功用主治,：具有滋阴潜阳、平肝熄风、软坚散结之功效。,化学成分,：本品含动物胶、骨胶原、角蛋白、,17种氨基基酸、,碳酸钙、磷酸钙、碘、维生素D及锌、铜、锰等微,量元素。,药理作用,：,1、强壮作用:鳖多糖能明显提高小鼠,耐缺氧能力,和抗冷冻作用，可延长小鼠游泳时间，有抗疲劳作用。,2、免疫促进作用:鳖多糖能显著提高小鼠空斑形成细胞的溶血能力，促进溶血素抗体生成；并增强小鼠迟发型超敏反应。,3、其它:本品能抑制结缔组织的增生，可消结块；有增加血浆白蛋白的作用。,三七红花组合,三,七,红,花,抗血小板聚集、粘附,降低纤维蛋白原,溶解血栓,抗凝、纤溶,改善血流变,抗凝血,改善红细胞变形性和聚集性,改善血液粘度与血浆粘度,人,参,杜,仲,三,七,红,花,活血化瘀改善微循环,降脂,红花、人参降脂、促排胆固醇,促进微循环，增加毛细血管通透性,清除骨坏死局部的代谢产物,加快软组织损伤修复及水肿吸收,减少炎性渗出物对神经末梢的刺激,消肿止痛促进骨坏死修复,组合药理,-强壮作用,人,参,黄,芪,三,七,强壮滋补作用,含有激活组织细胞的活性成分,抗损伤,抗缺氧,抗疲劳,抗高温,抗低温,中枢镇静镇痛,（适应原样作用）,所,有,成,分,丰富营养成分,骨修复的必备条件,蛋白质、有机酸：,角蛋白、,17种氨基酸、低分子肽类、有机酸、脂肪酸、醛糖、绿原酸,胶体物质：,杜仲胶、果胶、微量元素果胶、动物胶、骨胶原、树脂,维生素：,维生素,B、维生素C、维生素D维生素E，-胡萝卜素、胆碱、菸酸、生物碱,矿物质：,碳酸钙、磷酸钙、碘、及锌、铜、锰等微量元素,抗炎、镇痛,第二部份,药 理 研 究,药理研究结论证实本药具有：,增强垂体,-,肾上腺皮质系统功能的作用，抑制透明质酸酶、软骨素酶、前列腺素合成酶、,5-,羟色胺、组织胺等作用而发挥较强的抗炎、消肿和镇痛作用。,能扩张血管、降低外周阻力、增强全身血液循环。,通过抑制血栓烷,A,2,（,TXA,2,）合成酶，激活血小板的腺苷环化酶及抑制磷酸二脂酶的作用，使,TXA,2,的合成减少，细胞内的环磷酸腺苷（,cAMP,）含量增加而发挥抗血小板聚集和抑制血栓形成的作用。,能使骨膜成骨细胞活跃，骨痂生长及改建早，促进新骨细胞生成，迅速明显地促进骨折愈合，促进股骨头坏死的修复。,有些成分则通过特异阻断血管平滑肌的受体操作钙离子通道，阻断,Ca,2+,内流和细胞内,Ca,2+,释放，从而使外周血管扩张，对因病理因素刺激所致的痉挛小血管的扩张作用尤为显著，从而改善组织器官的微循环，改善受损组织细胞的供血供氧。,含有多种氨基酸、骨胶原及多种人体所需的微量元素，在骨伤、骨病的治疗过程中起着重要的作用，能促进骨折愈合、加快骨病康复，缩短病程。,上述诸多药理作用共同为股骨头坏死、腰椎间盘突出症、骨折、骨关节炎的治疗创造了极为有利的条件，保证了骨疾康复所必需的条件，改善人们生活质量，增加生命价值。,药物组成及药理研究小结,降脂,纤溶,抗凝,抗炎镇痛,提供骨再生的营养,针对病因促进骨的再生与修复,作用,第三部份,药 效 研 究,恒古骨伤愈合剂严格按国药准字的要求完成各项研究之后，为深入探其治病的作用机理，率先按国际标准应用现代生物化学、组织形态学、细胞超微结构、分子生物学研究基因调控水平等先进技术，经检测血脂变化、光镜、透射电镜、扫描电镜观察，免疫组化、原位杂交、实时荧光定量,PCR,等方法检测,VEGF,（血管内皮生长因子）,、,cbf1,（成骨特异性转录因子,-,核心结合因子 ）,和,BMP-2,(,骨形态发生蛋白,2-,促进骨再生,),基因表达变化，多层次深入研究，列为国家自然科学基金研究项目，获可喜研究成果，受到骨科界权威专家的高度赞誉，为中药治疗骨疾提供坚实的科学依据。,完成了如下试验：,对大鼠足跖注射蛋清致足肿胀的影响,对小鼠腹腔注射醋酸致毛细血管渗透性的影响,对小鼠热板刺激所致疼痛反应的影响,对小鼠腹腔注射醋酸致扭体反应的影响,对大鼠体内血栓形成的影响,对实验性骨折愈合的影响,对骨坏死兔模型血脂的影响,对兔骨坏死的组织学和细胞超微结构研究,对兔坏死股骨头内,VEGF,基因表达的影响,对兔坏死股骨头内,cbf1,基因表达的影响,对兔坏死股骨头内,BMP-2,基因表达的影响,1,、恒古骨伤愈合剂对蛋清致大鼠足跖肿 胀实验,结果显示：,该产品对蛋清致大鼠足跖肿胀有非常显著,的抑制作用。（,P,0.05,）,恒古骨伤愈合剂,对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响,n=8,组别,药物剂量,致炎后不同时间（小时）的足肿胀度（,ml,）,1,2,3,4,5,6,空白对照,0.3,0.880.03,0.790.04,0.740.03,0.650.04,0.600.04,0.500.03,阿斯匹林,0.3,0.700.04,0.650.04,0.600.04,0.540.04,0.450.04,0.340.05,恒古骨伤愈合剂,高,剂量,13.6,0.600.05,0.570.05,0.510.04,0.440.03,0.350.02,0.230.03,中,剂量,8.5,0.730.06,0.670.06,0.620.05,0.560.05,0.500.06,0.410.04,低,剂量,3.4,0.780.04,0.710.04,0.650.04,0.570.04,0.520.04,0.410.05,2,、恒古骨伤愈合剂对小鼠腹腔注射,0.7,醋酸致毛细血管通透性的实验,结果显示：,该产品具有显著地抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的作用。,恒古骨伤愈合剂,对小鼠腹腔注射,0.7%,醋酸致毛细血管通透性,的影响（,XSD,）,分组,n,药物剂量（,g/kg,）,尹文氏兰（,g/ml,）,P,空白对照,20,N.S15ml/kg,3.240.32,阿斯匹林,20,0.3,1.910.35,0.01,恒古骨伤愈合剂,高剂量,20,9.6,1.070.19,0.01,中剂量,20,6,1.570.36,0.01,低剂量,20,2.4,1.760.24,0.01,3,、恒古骨伤愈合剂对热板刺激小鼠痛阈 的实验,结果显示：,该产品对热板致痛有明显的镇痛作用。（,P,0.05),恒古骨伤愈合剂,对热板刺激小鼠痛阈的影响,XSD,（秒）,分组,n,药前痛阈,给药后不同时间痛阈,30,分,60,分,120,分,空白对照,20,18.22.1,17.82.5,17.52.2,18.12.6,阿斯匹林,20,18.42.7,25.62.8,25.82.9,25.82.5,恒 古骨伤愈合剂,高剂量,20,16.62.1,26.72.4,27.12.4,22.72.9,中剂量,20,17.02.1,23.73.0,24.53.1,22.62.3,低剂量,20,17.02.4,21.12.7,22.2,2.7,22.92.2,4,、恒古骨伤愈合剂对小鼠腹腔注射醋酸 致扭体反应的实验,结果显示：,该产品对化学致痛有显著的镇痛作用。,恒古骨伤愈合剂,对小鼠腔腹注射醋酸致扭体反应的影响,分组,n,给药剂量,扭体反应鼠数（只）,镇痛百分率,（,%,）,P,空白对照,20,N.S10ml/kg,19,索密痛,20,2,12,36.8,0.01,恒古骨伤愈合剂,高剂量,20,9.6,10,47.4,0.01,中剂量,20,6,12,36.8,0.01,低剂量,20,2.4,13,31.6,0.01,5,、恒古骨伤愈对大鼠体内血栓形成的实验,结果显示：,该产品具有明显抗体内血栓形成作用。,恒古骨伤愈合剂,对大鼠体内血栓形成的影响（,XSD,）,分组,n,药物剂量（,g/kg,）,血栓量（,mg,）,抑制率,（,%,）,P,空白对照,8,N.S10ml/kg,19.32.6,阿斯匹林,8,0.3,8.92.5,53.9,0.01,恒古骨伤愈合剂,高剂量,8,13.6,8.12.6,58,0.01,中剂量,8,8.5,11.32.3,41.5,0.01,低剂量,8,3.4,12.12.9,37.3,0.01,6,、骨折愈合实验：,用双锯片使家兔造成实验性完全性桡骨骨干骨折模型，断端缺损,3mm,，用阳性药对照，经过放射学检查、抗折力测定和病理组织学检查。,研究结论显示：具有明显的促进骨折愈合的作用。,空白对照组,12,天,骨折线清晰,阳性对照组,12,天,有少量骨痂形成,恒古骨伤愈给药组,12,天，有较多骨痂形成,空白对照组,28,天,局部少量性骨痂形成,阳性对照组,28,天,骨痂形成量有所增加,恒古骨伤愈给药组,28,天可见大量骨痂形成,空白对照组,40,天,有较多骨痂形成,阳性对照组,40,天,有大量骨痂形成,恒古骨伤愈给药组,40,天骨痂体积较前缩小，骨髓腔已相通，骨小梁连接,抗折力测定,研究结果显示：,空白对照组实验第,40,天的抗折力作用相当于阳 性药对照组的,28,天、相当于恒古骨伤愈组的,22,天。,空白对照组：,28,天骨折愈合病理组织切片骨性骨痂纤细、不规则。,阳性对照组：,28,天骨折愈合病理组织切片骨细胞不成熟。,恒古骨伤愈用药组：,28,天骨折愈合病理组织切片骨髓腔再通。,空白对照组：,40,天骨折愈合病理组织切片骨性骨痂不规则。,阳性对照组：,40,天骨折愈合病理组织切片骨内膜细胞增生。,恒古骨伤愈用药组：,40,天骨折愈合病理组织切片可见哈佛氏管内外环板及间盘,恒古骨伤愈用药组：,40,天骨折愈合病理组织切片骨小梁正常,病理组织学检查：,结果显示：该产品有明显的促进骨折愈合的作用，缩短病程。,7,、恒古骨伤愈对骨坏死兔模型血脂的影响,脂代谢紊乱是骨缺血坏死的重要原因。,本实验用新西兰大白兔，以两种不同的方法制作骨坏死动物模型，观察比较恒古骨伤愈对两种骨坏死兔模型血脂的影响。,方法一：,按周氏造模法，将新西兰大兔分为空白对照组（,A,组）、模型组（,B,组）和恒古骨伤愈组（,C,组），模型组和给药组肌肉注射醋酸泼尼松龙，造成股骨头坏死模型；,方法二：参照,Yamamoto,等的方法，将新西兰大白兔分为空白对照组（,A,组）、正常兔服用恒古骨愈组（,B,组）、模型组（,C,组）和恒古骨伤愈组（,D,组），模型组和恒古骨伤愈组采用大肠杆菌内毒素（,LPS,）加甲基强的松龙（,MPS,）造成股骨头坏死模型；,两种方法造模后，,恒古骨伤愈组按人与兔体表面积换算用药量，用恒古骨伤愈合剂灌胃,1,次,/2d,。测定血清胆固醇（,CHOL,）、甘油三酯（,TG,）和高密度脂蛋白（,HDL,）。,实验结果按统计学方法处理，使用,SPSS10.0,版统计软件、,t,检验和多变量方差分析处理各组计数数据，结果如下：,方法一的血脂变化,表,1,造模第,5,周及给药第,4,周 第,8,周各组血脂水平,(,S, mmol/L,）,指标,空白对照组,（,A,组）,模型组,（,B,组）,恒古骨伤愈组,（,C,组）,造模,第,5,周,CHOL,1.690.46,3.640.51,3.720.48,TG,0.940.35,9.030.89,9.230.81,HDL,0.590.13,0.320.12,0.370.11,给药,第,4,周,CHOL,1.920.34,3.190.24,1.700.56,TG,1.190.12,7.730.15,1.150.38,HDL,0.660.20,0.460.10,0.690.21,给药,第,8,周,CHOL,1.460.24,3.550.36,1.520.31,TG,0.980.17,1.770.25,0.880.16,HDL,0.630.19,0.430.14,0.830.12,（注：与,A,组比较,P,0.01,，与,B,组比较,P,0.01,）,方法二的血脂变化,表,2,造模第,4,周及给药第,4,周 第,8,周 第,12,周各组血脂水平,(,S, mmol/L,）,指标,A,组,B,组,C,组,D,组,造模,第,4,周,CHOL,1.120.24,1.050.17,1.590.23,1.530.35,TG,0.690.13,0.610.17,0.970.17,0.940.18,HDL,0.680.13,0.650.11,0.490.08,0.480.10,给药,第,4,周,CHOL,1.130.23,1.130.25,0.850.16,1.290.58,TG,0.680.15,0.830.18,0.650.08,0.900.36,HDL,0.700.12,0.440.17,0.500.10,0.950.32,给药,第,8,周,CHOL,1.120.26,1.120.24,0.950.26,0.790.15,TG,0.690.12,0.820.18,0.660.18,0.560.14,HDL,0.690.11,0.450.19,0.430.08,0.480.13,给药,第,12,周,CHOL,1.150.24,1.150.22,1.110.59,0.560.17,TG,0.660.14,0.850.20,0.560.39,0.440.11,HDL,0.660.12,0.460.16,0.560.11,0.360.03,（注：与,A,组比较,P,0.01,，与,B,组比较,P,0.01,）,结果显示：,骨坏死与脂代谢紊乱密切相关 ；,骨坏死模型兔均出现高脂血症；,恒古骨伤愈能使,CHOL,、,TG,量明显降低，,HDL,量明显升高，有很好的降脂作用。,8,、恒古骨伤愈合剂治疗骨坏死的组织学和细胞超微结构研究,本实验用新西兰大白兔，以两种不同的方法制作骨坏死动物模型（分组、造模、给药同实验,7,）观察恒古骨伤愈对两种骨坏死兔模型坏死股骨头组织学和细胞超微结构的影响。,仪器：,光学显微镜：,Leica-DM4000B,显微摄影系统（德国）,透射电子显微镜：,JEM-1011,型（日本电子公司）,扫描电子显微镜：,S-3000N,型（日本,HITACHI,公司）,HPIAS-1000,高清析度彩色图象分析系统（国产）,方法一的观察结果,A,组正常股骨头,B,组造模,10,周髓腔扩大，脂肪细胞融合，小梁变细、稀疏,C,组给药第,8,周,小梁表面成骨活跃,常规观察结果,光镜观察结果,A,组正常股骨头,（,B,组与,A,组相似）,B,组造模第,13,周软骨变,薄，小梁紊乱，有油腻感,C,组给药,8,周，软骨,厚度正常，脂肪较少,透射电镜观察结果,A,组正常骨细胞及骨基质,B,组造模,13,周小梁髓腔坏死,B,组造模,13,周髓腔出血,C,组给药第,8,周见较多新生骨并有钙盐沉着,C,组给药第,8,周新生骨细胞,方法二的观察结果,C,组造模第,4,周骨小梁,排列紊乱，有油腻感,C,组造模第,12,周油,腻感重，切时易碎,D组给药第12周,小梁紊乱黄腻感较轻,常规观察结果：其中,A,组（空白对照组）：同方法一的观察结果。,B,组（正常兔服用恒古骨伤愈组）：与,A,组相似。,光镜观察结果,A,组正常股骨头,（,B,组与,A,组相似）,C,组造模第,4,周小梁紊乱，较,细，稀疏，髓腔脂肪空泡多,D,组给药第,12,周,小梁表面新生骨多,透射电镜观察结果,C,组造模第,4,周骨坏死、,髓腔出血、胶原紊乱,C,组造模第,4,周骨,坏死、髓腔出血重,D,组给药第,12,周,新生骨形成小梁,D,组给药第,12,周新,生骨小梁与原小梁,D,组给药第,12,周毛细血管多,A,组,B,组相似，均为正常股骨头骨细胞及骨基质,扫描电镜观察结果：,A组正常骨小梁表面膜状结构,A组正常胶原纤维致密，排列规则,C,组造模第,16,周膜状结构破坏，成骨活跃,C,组造模第,4,周小梁变薄、变细，表面附着球蛋白样结构物,C组造模第4周胶原纤维稀疏紊乱,D,组给药第,12,周血管,D组给药第12周成骨活跃,D,组给药第,12,周膜状结构尚正常，成骨活跃,组织学和细胞超微结构观察的结果显示：,给恒古骨伤愈组变性的骨细胞较多，坏死的骨细胞较少；可见较多成骨细胞、破骨细胞、新生骨细胞及骨基质，并有钙盐沉着。扫描电镜观察，发现骨小梁表面的成骨细胞较多，骨小梁数目、厚薄、粗细，骨小梁表面的膜状结构的损伤，作为受力支架的骨矿质和骨基质表面胶原纤维情况等，恒古骨伤愈组均明显优于模型组。,恒古骨伤愈对兔骨坏死模型有明显促进坏死骨修复的作用。,9,、,恒古骨伤愈对兔坏死股骨头内,VEGF,基因表达的影响,VEGF,（,Vascular endothelial growth factor,，血管内皮生长因子）是功能最强大的血管生成调节因子，内源性,VEGF,在骨修复中起着十分重要的作用。,为了探索中药恒古骨伤愈合剂治疗骨坏死的作用机理，我们采用低剂量,LPS,加,MPS,模型，通过免疫组化、原位杂交和实时荧光定量,PCR,等技术，研究了恒古骨伤愈合剂对股骨头坏死修复过程中,VEGF,基因表达的影响。,免疫组化用：,VEGF(MAB-243) SP,免疫组织化学试剂盒,原位杂交用：,VEGF mRNA,寡核苷酸探针杂交试剂盒,实时荧光定量,PCR,用：,Opticon,荧光定量,PCR,仪（美国,MJ Research,公司）,分组：见实验,7,的方法二。,造模：见实验,7,的方法二。,给药：见实验,7,的方法二。,A,组免疫组化,VEGF RNA,表达阳性,SP 400,C,组免疫组化 造模第,16,周,VEGF mRNA,表达阴性,SP 400,D,组免疫组化 给药第,12,周,VEGF mRNA,表达弱阳性,SP 400,A,组原位杂交,VEGF RNA,表达阳性,200,C,组原位杂交 造模第,16,周,EGF mRNA,表达阴性,100,D,组原位杂交 给药第,12,周,EGF mRNA,表达弱阳性,200,免疫组化结果：,原位杂交结果：,实时荧光定量,PCR,结果,:,实验数据的收集由,MJ Research Opticon,荧光定量,PCR,反应仪自带软件完成，使用,SPSS10.0,版统计软件，采用单因素方差分析法进行数据比较。,在服药后第,12,周时，恒古骨伤愈组（,D,组）与模型组（,C,组）比较，,D,组股骨头内,VEGF mRNA,的表达量较,C,组明显增加，差别具有统计学意义（,p0.05,）。,结果显示：,VEGF,与骨修复密切相关，,VEGF,在骨的形成与修复改建中发挥着极重要的作用。,通过免疫组化、原位杂交和实时荧光定量,PCR,等技术检测并相互印证后所得到的结果是相互吻合的，恒古骨伤愈合剂可促进内源性,VEGF,在坏死股骨头内的表达 ，并能明显增加表达量。,恒古骨伤愈合剂对正常股骨头内,VEGF,的表达无影响。,10,、恒古骨伤愈合剂对兔坏死股骨 头内,cbf,1,基因表达的影响,cbf1 (core binding factor 1,核心结合因子,1),基因的表达在成骨细胞发育、分化和骨钙化形成过程中起着极其重要的分子开关作用。,为了探索恒古骨伤愈合剂治疗骨坏死的作用机理，我们采用了低剂量,LPS,加,MPS,模型，通过免疫组化和实时荧光定量,PCR,等技术，观察了恒古骨伤愈合剂对股骨头坏死修复过程中,cbf1,基因表达的影响。,免疫组化用：非生物素免疫组织化学试剂盒,实时荧光定量,PCR,用：,Opticon,荧光定,量,PCR,仪（美国,MJ Research,公司）,分组：见实验,7,的方法二。,造模：见实验,7,的方法二。,给药：见实验,7,的方法二。,A,组免疫组化,cbf1 mRNA,表达阳性,200,C,组免疫组化 造模第,16,周,cbf1 mRNA,表达阴性,400,D,组免疫组化 给药第,8,周,cbf1 mRNA,表达弱阳性,400,D,组免疫组化 给药第,12,周,cbf1 mRNA,表达弱阳性,400,免疫组化结果：,实时荧光定量,PCR,结果,:,实验数据的收集由,MJ Research Opticon,荧光定量,PCR,反应仪自带软件完成，使用,SPSS10.0,版统计软件，采用单因素方差分析法进行数据比较。,在服药后第,12,周时，,D,组与,C,组比较，,D,组股骨头内,cbf1 mRNA,的表达量较,C,组明显增加，差别具有统计学意义（,p0.05,）。,结果显示：,cbf1,基因是成骨特异性转录激活因子，在成骨细胞发育、分化和骨形成过程中起着至关重要的作用。,通过免疫组化和实时荧光定量,PCR,技术检测并相互印证后所得到的结果是相互吻合的，恒古骨伤愈合剂可促进,cbf1,在坏死股骨头内的表达来促进坏死骨的修复，并能明显增加表达量。,恒古骨伤愈合剂对正常股骨头内,cbf1,的表达无影响。,这是恒古骨伤愈合剂治疗骨坏死的又一主要作用途径。,11,、,恒古骨伤愈合剂对兔坏死股骨头内,BMP-2,基因表达的影响,BMP-2(Bone morphogenetic proteins-2,，骨形成蛋白,-2 ),基因的表达在成骨细胞分化和骨形成过程中起着关键作用。,为了探索恒古骨伤愈合剂治疗骨坏死的作用机理，我们采用了低剂量,LPS,加,MPS,模型，通过免疫组化、原位杂交和实时荧光定量,PCR,等技术，研究了恒古骨伤愈合剂对股骨头坏死修复过程中,BMP-2,基因表达的影响。,免疫组化用：,羊多克隆,BMP-2,抗体,原位杂交用：生物原位杂交试剂盒,实时荧光定量,PCR,用：,Opticon,荧光定,量,PCR,仪（美国,MJ Research,公司）,分组：见实验,7,的方法二。,造模：见实验,7,的方法二。,给药：见实验,7,的方法二。,A,组免疫组化,BMP-2mRNA,表达阳性,400,C,组免疫组化 造模第,16,周,BMP-2 mRNA,表达阴性,400,D,组免疫组化 给药第,12,周,BMP-2 mRNA,表达弱阳性,400,A,组原位杂交,BMP-2 mRNA,表达阳性,400,C,组原位杂交 造模第,16,周,BMP-2 mRNA,表达阴性,400,D,组原位杂交 给药第,12,周,BMP-2 mRNA,表达弱阳性,400,免疫组化结果：,原位杂交结果：,实时荧光定量,PCR,结果,:,实验数据的收集由,MJ Research Opticon,荧光定量,PCR,反应仪自带软件完成，使用,SPSS10.0,版统计软件，采用单因素方差分析法进行数据比较。,在服药后第,12,周时，恒古骨伤愈组（,D,组）与模型组（,C,组）比较 ，,D,组股骨头内,BMP-2 mRNA,的表达量较,C,组明显增加，差别具有统计学意义。（,p0.05,）,结果显示：,BMP-2,具有极强的诱导骨化的活性。,通过免疫组化和实时荧光定量,PCR,技术检测并相互印证后所得到的结果是相互吻合的，恒古骨伤愈合剂可促进,BMP-2,在坏死股骨头内的表达来促进坏死骨的修复，并能明显增加表达量。,恒古骨伤愈合剂对正常股骨头内,BMP-2,的表达无影响。,上述药效研究结论证实恒古骨伤愈：,具有明显的抗炎、消肿作用；,具有明显的镇痛作用；,具有抑制血栓形成，明显的改善血液循环及微循环的作用；,可使骨膜成骨细胞活跃，促进新骨细胞形成，促进坏死骨的修复作用；,有明显促进骨小梁的再生和成熟，增加骨密度；,具有降脂、抗凝、纤溶和抗炎等多种作用。,对防治骨疾术后,DVT,（深静脉血栓）及对受机械力损伤的静脉内皮细胞的保护及修复有显著作用。,可,促进内源性,VEGF,基因的表达,促进血管生成，明显提高成骨细胞活性并加速骨形成。,可,促进,cbf1,基因的表达,促进成骨细胞发育、分化、调控和骨钙化形成。,可,促进,BMP-2,基因的表达,而诱导骨化，刺激骨形成。,恒古骨伤愈对正常骨形态及其内,VEGF,、,cbf1,和,BMP-2,的表达无影响。,恒古骨伤愈合剂药效研究结论,研究结论证实,恒古骨伤愈从根本上,解决了治疗骨疾病治疗核心问题,降脂、纤溶、抗炎、抗凝,，改善骨供血状况及骨营养问题，促进,骨内源性,VEGF （血管内皮生长因子 ）,、,cbf1（成骨特异性转录因子 -核心结合因子,）和,BMP-2 (骨形态发生蛋白2-,促进骨再生,)基因,表达；增强成骨细胞活力，抑制破骨细胞，促进坏死骨修复从而能有效的使骨疾,(,股骨头坏死、腰椎间盘突出症、骨关节炎、骨折,)患者迅速康复。,信息来源：中国医药信息,(2006.07.12),恒古骨伤愈主治：,新鲜骨折及陈旧骨折,股骨头坏死,骨关节病,腰椎间盘突出症,四，多中心临床研究,一、股骨头坏死,二、骨折,三、腰椎间盘突出症,四、骨关节炎,经北京市积水潭医院、第一军医大学附属医院、第三军医大学附属医院、解放军昆明总医院、上海市第六人民医院、昆明医学院第一附属医院、四川省人民医院等全国多家三级甲等医院进行临床疗效观察，,临床研究结果统计如下：,治疗股骨头坏死、,腰间盘突出症,、骨关节病,腰间盘突出症,有效率达91.3%,有效率达83.9%,有效率达86.4%,疼痛改善效果（,97%,）,骨折肿胀改善效果（,95%,）,骨折治愈有效率（,98.6%,）,平均康复时间较临床骨科学的统计缩短一半,安 全 性 研 究,急性毒性实验,长期毒性实验,兴奋剂检测,重金属和有害元素检测,急性毒性实验显示：,小鼠半数致死量,LD,50,不能测出，最大耐受量达到成人,日服量,540倍（按体重换算）仍未见实验动物死亡。,长期毒性实验显示：,以成人用药量的,53倍、26.5倍、13.2倍(按体重换算),连续用药，对实验动物的血液学、血液生化学、各重,要脏器进行病理组织学检查，均未发现与药物相关的,病理变化。,经国家兴奋剂及运动营养测试研究中心检测：,本品不含兴奋剂及麻醉剂。,重金属和有害元素检测：,经美国、香港权威机构检测，本品符合国际标准。,结论证实：,本品,更安全可靠,。,临床研究证实恒古骨伤愈合剂具有,具有明显的抗炎、消肿作用；,具有明显的镇痛作用；,具有明显的改善血液循环及微循环的作用；,具有明显的促进骨折愈合及加速骨病康复的作用,用药安全。,临床研究结论与药效的研究结论相一致。,恒古骨伤愈合剂国内包装,恒古骨伤愈,(骨王)国际包装,我们的产品,-,骨病康复的希望,规格：,25ml*6瓶 每个疗程12天 按疗程服用,用法：,饭后,1小时 成人25ml两日一瓶 6-12岁 一次12ml,恒古骨伤愈具备现代中药特点：,一、速效：,相对于传统治疗方法,股骨头坏死患者,3-6月收到明显效果,骨折愈合时间缩短了一半,二、专效：,对股骨头坏死和新旧骨折效果明确,对,骨关节病、腰椎间盘突出症有辅助治疗作用,三、长效：,两天服用一次,-方便,四、高效：,针对病因一种药解决复杂的问题,2001,年,11,月骨王研发团队 图为经骨王治愈股骨头坏死,专家赴上海参加,“,国粹,”,名 的沪港文化交流中心姚秘书,优产品交流会。 长专程到展位向我企业参会,专家表示感谢。,2002,年,10,月，上海六院、同济医院、长征医院、长海医院、瑞金医院及上海第一医院进行学术交流，与会专家一致认为：骨王用客观、科学、实证的数据为临床提供了依据，在临床应用中有很高的实用价值和广阔的应用前景。,2003,年,5,月，云南省生物资源创新重点项目论证会上，与会医界及药界专家一致认为，该品种疗效确切，质量可控，安全可靠，是我省民族医药的精品，应列为云南省生物资源创新重点项目。,2004,年,4,月厦门药品交易会上，恒古骨伤愈（骨王）,倍受外商青睐。,2008,年,12,月,15,日荣获首批国家级高新技术企业，并于,2009,年,2,月,4,日在昆明参加云南省科技厅召开的颁证会议。,卫生部朱庆生副部长参加了云南克雷斯的捐赠仪式！,大灾面前有大爱,云南中国人民解放军第,478,医院也收治了很多的灾区伤员，云南克雷斯对此也进行了积极的捐助、捐赠，这是伤员康复返乡前与医务人员难舍难分的感人场面！恒古骨伤愈合剂因效果良好，也受到了灾区伤员的认可和感动！,继承与创新是科技文化的根本使命，理性与规范是科学的价值观核心，求真与献身是科学研究的本质特征，云南克雷斯制药研发团队正是遵循这一原则。,为此，产品进入美国市场后，深受医药界专家及患者的好评，美国,世界日报,、,美洲文汇报,、美国,医药报,纷纷发表了题为,“,耳听为虚、眼见为实,”,及,“,骨王在美上市引起轰动,”,等报道，恒古骨伤愈在美被誉为,“,骨王,”,、,“,中华第一骨药,”,、,“,一个有震撼力的产品,”,。美国英文版报纸、杂志,HSI,、,今日针炙,、,论坛,、,东方医药,等纷纷发表文章，介绍该产品的安全性和显著疗效。,以上是对恒古骨伤愈的简要介绍，,有不足之处请各位专家予以指正！,谢 谢 ！,云南克雷斯制药,