微生物常用仪器2

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食品微生物检验常用的仪器,一、常用仪器及其使用,显微镜,冰箱,超净工作台、杀菌锅,离心机,水浴锅、培养箱,烘箱或干燥箱,匀质器,各种玻璃器材,(一)显微镜,普通,显微镜,的保养,1,、观察完后,移去观察的载玻片标本。,2,、用过油浸镜的,应先用擦镜纸将镜头上的油擦去,再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭,2,3,次,最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。,3,、转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。,4,、将镜身下降到最低位置,调节好镜台上标本移动器的位置,罩上防尘套。,数字显微镜,(二)、培养箱,智能隔水恒温培养箱,隔水培养箱,电热培养箱,生化培养箱,卧式恒温振荡培养箱,电热恒温培养箱,1,、普通恒温培养箱,智能培养箱,微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能,镜面不锈钢内胆,外门内层用一层门,观察箱内情况时不影响箱内温度。,9000,系列隔水式加热方式,具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。,隔水式培养箱,隔水式培养箱数字控温,不锈钢内胆,俗称水夹套培养箱。温度均匀,断电后仍能保持较长时间恒温。,电热恒温培养箱,2,、生化培养箱,3,、二氧化碳培养箱,培养箱的配置和使用,配置:,22,(),、,30,(),、,37,()培养箱各一个,使用注意事项:,(1),箱内不能放入过热或过冷的物品,取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。,(2),内放一杯水,以保持湿度。,(3),培养物不能放在最底层,也不得放置过于拥挤。,(4),每月消毒一次,先用,3%,的来苏尔液涂布消毒,再用清水擦净。,(5),不得当烘箱使用。,4,、水浴锅,(,1,),37 ,和,42 ,水浴锅,24,小时工作;,(,2,)其余水涡锅用后关掉电源;,(,3,)水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水,使用时请注意水位。,配置:,37 ,、,42 ,、,56 ,各一个,匀浆机,(三)匀质器,高速匀浆机,无菌均质器,无菌均质器,该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理,特别适合于微生物检测样本的制备,具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点,样本装在特制的一次性无菌均质袋中,不与仪器接触,预防交叉污染。,(四)、超净工作台,三大类 型:,侧流式、直流式和外流式,垂直流超净工作台,水平单向流洁净工作台,超净台的使用和注意事项,1,、使用前先打开紫外灯照射,紫外线照射时间,4060,分钟;,2,、使用中,有机玻璃罩受到污染,严禁用酒精棉球擦拭,请用含水棉布檫拭;,3,、请保持超净台整洁,不要堆积杂物;,4,、使用完毕,勿忘关闭煤气开关或酒精灯;,5,、请做好使用记录。,6,、如遇故障,除记录在册外,还应及时与有关人员联系,尽早排除故障。,7,、学期开始做无菌试验一次,以保证净化台正常使用。平时可根据情况,定期做无菌试验,以测定净化台是否符合无菌要求。,(五)、离心机,离心机的类型:,普通离心机,高速离心机,超速离心机,类型,普通离心机,高速离心机,超速离心机,最大转速,(r/min),6000,25000,可达,75000,以上,最大,RCF,(,g,),6000,89000,可达,510000,以上,分离形式,固液沉淀,固液沉淀分离,密度梯度区带分离或差速沉降分离,转子,角式和外摆式转子,角式、外摆式转子等,角式、外摆式、区带转子等,仪器结构性能和特点,速率不能严格控制,多数室温下操作,有消除空气和转子间摩擦热的制冷装置,速率和温度控制较准确、严格。,备有消除转子与空气摩擦热的真空和冷却系统,有更为精确的温度和速度控制、监测系统、有保证转子正常运转的传动和制动装置等。,应用,收集易沉降的大颗粒(如,RBC,、酵母细胞等),收集微生物、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小细胞器(如核糖体)、蛋白质等大分子。,主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等甚至能分开分子大小相近的同位素标记物,15,N-DNA,和未标记的,DNA,。,台式高速冷冻离心机,差速沉降(沉淀)法:,密度梯度离心法:,转子,许多离心机可以配用不同大小的离心管,只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶,/,适配器相配的转子。,1,水平转子:盛样品的离心管放在吊桶内,以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机,其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时,减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。,2,角式转子:许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短,沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。,3,垂直管转子:用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。,转子:(,a,)水平转子;(,b,)固定转角转子;(,c,)垂直离心管转子,(六)、灭菌器,干热灭菌器,湿热灭菌器,1,、电烘箱,(干燥箱),用途:,用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。,玻璃器皿等物的灭菌,温度,160165,,灭菌,2,小时。,玻璃器材的干热灭菌方法,(1),将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后,用报纸包好,或装入特制的铁筒中。,(2),将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中,彼此间留有一定的空隙以便流通空气。,(3),关紧箱门,打开排气孔接上电源。,(4),待箱内空气排出到一定程度时,关闭上排气孔,继续加热至一定温度后,调节温度控制旋钮固定温度,在,16,0,1,6,5,保持,2,小时即可。,(5),待自然降温冷却后,(60,以下,),才能开门取出玻璃,器皿。,2,、高压灭菌锅,用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。,种类:手提式、立式、卧式杀菌锅,不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(电热),全自动高压灭菌器,大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法,放干消毒锅内的剩余水,加入纯净水至最高水位;,放入物品,关上消毒锅门;冷凝阀开,1,圈;消毒钮顺时针拨至“关”;,选择所需的杀菌压力,0.07,、,0.11,或,0.14Mpa,后;开启电源;,当温度达到,100,左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止;,当消毒室温度达到所需温度时开始计时,到时间后关闸。,使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项,A,:为避免烫伤,只有当温度降低到,70,以下时放可小心的打开消毒锅门。,B,:为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门,所以当消毒室温度低于,70,时就可慢慢把门打开。,C,:根据消毒物品选择排气方式:,(,1,),.,如有液体(营养液等)请选择慢排。,(,2,),.,如只有废品等可选择快排。,手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法,(,1,)、关好排水阀门放入清水至标度为止,。,(,2,)、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中,关上器盖。,(,3,)、通电加温,同时打开排气活门,排尽锅内的空气,再关闭活门。,(,4,)、,当达到所需温度时开始计时,并在此温度下保持所需的时间。,(,5,)、稍微打开一点排气活门,使锅内蒸气缓慢排除,。,(,6,)、,当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时,立即打开锅盖取出物品。,(,7,)、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。,思考题,干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何,?,电热烘箱和高压锅如何操作,?,各有哪些使用注意事项,?,3,、滤菌器,MF75,快速抽滤器,方便过滤,1000ml,容量的培养液、缓冲液等,可直接保存和分装。可高温灭菌。,Nalgene,可反复用抽滤装置,(七)、普通冰箱冰柜,1,、 取用冰箱冰柜内物品尽可能快,取完后及时将有用物品放回原处;,2,、 关冰柜门时应轻轻合上,同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好,;,3,、冰柜内的不要样品应及时清理。,菌落计数器,自动细菌菌落测定分析仪,1,、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化,或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化,快速测定样品中细菌含量数目。,2,、适用于各种食品,制药,石化工厂的微生物品质管理,取代传统方法将侦测时间由,3-5,天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。,快速自动菌数导电测定仪,细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作,避免人工操作的误差,数据精确,省时省力。是您作细胞研究的好助手,是研究细胞的更高层次的选择,细胞,/,颗粒分析计数仪,空气微生物检测仪,适合,CGMP,药厂,食品加工厂,医院手术防,无尘无菌室室,Class100100000,之等级,微粒子落塵计数器,二、常用玻璃仪器及用具,1,、移液管,1ml,,,2ml,,,5ml,,,10ml,,,25ml,(一)量器类,2,、容量瓶,50ml,,,100ml,,,250ml,,,500ml,,,1000ml,3,、量筒,容量(,ml,),10,、,25,、,50,、,10,、,25,、,500,、,1000,、,2000,固定体积移液器,数字型可调移液器,P,型,4,、微量取样器,(二)、其他常用玻璃器皿,3.5cm,7cm,,,9cm,,,15cm,1,、培养皿,2,、试管,各种试管的使用,13,mm,X100,mm,:生化反应及凝集反应,15,mm,X150,mm,:斜面培养,18,mm,X180,mm,:检样稀释,型号,150ml,,,200ml,,,250ml,,,500ml,,,1L,,,2L,,,3L,3,、三角瓶,烧杯,容量(,ml,):,30,、,50,、,100,、,150,、,250,、,400,、,600,、,1000,、,2000,、,3000,三、玻璃器皿的清洗和灭菌,(,一,),、新购的玻璃器皿,1,、先用热肥皂水刷洗,流水冲净。,2,、再浸泡于的盐酸中数小时,最后用流水冲净。,(,二,),、用过的玻璃器皿,1,、含油脂器材的清洗,(,1,)、单独高压灭菌;,(,2,)、趁热倒去污物;,(,3,)、倒放在铺有吸水纸的篮子上,置,100 ,烘箱中烤,0.5h;,(,4,)、再用,5%,的碳酸氢钠水煮两次,再用肥皂水刷洗干净。,2,、含菌试管的清洗,高压灭菌后,肥皂水刷洗干净,烘干或晾干备用。,3,、含菌平皿的灭菌,(,1,)、底盖分开放,放入桶中,高压灭菌;,(,2,)、趁热倒去污物;,(,3,)、肥皂水刷洗干净,烘干或晾干备用。,一、常用仪器及其使用,显微镜,冰箱,超净工作台、杀菌锅,离心机,水浴锅、培养箱,烘箱或干燥箱,匀质器,各种玻璃器材,(一)显微镜,普通显微镜的保养,1,、,观察完后,移去观察的载玻片标本。,2,、用过油浸镜的,应先用擦镜纸将镜头上的油擦去,再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭,23,次,最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。,3,、转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。,4,、将镜身下降到最低位置,调节好镜台上标本移动器的位置,罩上防尘套。,数字显微镜,(二)、培养箱,智能隔水恒温培养箱,隔水培养箱,电热培养箱,生化培养箱,卧式恒温振荡培养箱,电热恒温培养箱,1,、普通恒温培养箱,智能培养箱,微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能,镜面不锈钢内胆,外门内层用一层门,观察箱内情况时不影响箱内温度。,9000,系列隔水式加热方式,具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。,隔水式培养箱,隔水式培养箱数字控温,不锈钢内胆,俗称水夹套培养箱。温度均匀,断电后仍能保持较长时间恒温。,电热恒温培养箱,2,、生化培养箱,3,、二氧化碳培养箱,培养箱的配置和使用,配置:,22,(),、,30,(),、,37,()培养箱各一个,使用注意事项:,(1),箱内不能放入过热或过冷的物品,取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。,(2),内放一杯水,以保持湿度。,(3),培养物不能放在最底层,也不得放置过于拥挤。,(4),每月消毒一次,先用,3%,的来苏尔液涂布消毒,再用清水擦净。,(5),不得当烘箱使用。,4,、水浴锅,(,1,),37 ,和,42 ,水浴锅,24,小时工作;,(,2,)其余水涡锅用后关掉电源;,(,3,)水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水,使用时请注意水位。,配置:,37 ,、,42 ,、,56 ,各一个,匀浆机,(三)匀质器,高速匀浆机,无菌均质器,无菌均质器,该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理,特别适合于微生物检测样本的制备,具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点,样本装在特制的一次性无菌均质袋中,不与仪器接触,预防交叉污染。,(四)、超净工作台,三大类 型:,侧流式、直流式和外流式,垂直流超净工作台,水平单向流洁净工作台,超净台的使用和注意事项,1,、使用前先打开紫外灯照射,紫外线照射时间,4060,分钟;,2,、使用中,有机玻璃罩受到污染,严禁用酒精棉球擦拭,请用含水棉布檫拭;,3,、请保持超净台整洁,不要堆积杂物;,4,、使用完毕,勿忘关闭煤气开关或酒精灯;,5,、请做好使用记录。,6,、如遇故障,除记录在册外,还应及时与有关人员联系,尽早排除故障。,7,、学期开始做无菌试验一次,以保证净化台正常使用。平时可根据情况,定期做无菌试验,以测定净化台是否符合无菌要求。,(五)、离心机,离心机的类型:,普通离心机,高速离心机,超速离心机,类型,普通离心机,高速离心机,超速离心机,最大转速,(r/min),6000,25000,可达,75000,以上,最大,RCF,(,g,),6000,89000,可达,510000,以上,分离形式,固液沉淀,固液沉淀分离,密度梯度区带分离或差速沉降分离,转子,角式和外摆式转子,角式、外摆式转子等,角式、外摆式、区带转子等,仪器结构性能和特点,速率不能严格控制,多数室温下操作,有消除空气和转子间摩擦热的制冷装置,速率和温度控制较准确、严格。,备有消除转子与空气摩擦热的真空和冷却系统,有更为精确的温度和速度控制、监测系统、有保证转子正常运转的传动和制动装置等。,应用,收集易沉降的大颗粒(如,RBC,、酵母细胞等),收集微生物、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小细胞器(如核糖体)、蛋白质等大分子。,主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等甚至能分开分子大小相近的同位素标记物,15,N-DNA,和未标记的,DNA,。,台式高速冷冻离心机,差速沉降(沉淀)法:,密度梯度离心法:,转子,许多离心机可以配用不同大小的离心管,只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶,/,适配器相配的转子。,1,水平转子:,盛样品的离心管放在吊桶内,以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机,其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时,减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。,2,角式转子:,许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短,沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。,3,垂直管转子:,用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。,转子:(,a,)水平转子;(,b,)固定转角转子;(,c,)垂直离心管转子,(六)、灭菌器,干热灭菌器,湿热灭菌器,1,、电烘箱,(干燥箱),用途:,用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。,玻璃器皿等物的灭菌,温度,160165,,灭菌,2,小时。,玻璃器材的干热灭菌方法,(1),将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后,用报纸包好,或装入特制的铁筒中。,(2),将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中,彼此间留有一定的空隙以便流通空气。,(3),关紧箱门,打开排气孔接上电源。,(4),待箱内空气排出到一定程度时,关闭上排气孔,继续加热至一定温度后,调节温度控制旋钮固定温度,在,16,0,1,6,5,保持,2,小时即可。,(5),待自然降温冷却后,(60,以下,),才能开门取出玻璃,器皿。,2,、高压灭菌锅,用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。,种类:手提式、立式、卧式杀菌锅,不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(电热),全自动高压灭菌器,大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法,放干消毒锅内的剩余水,加入纯净水至最高水位;,放入物品,关上消毒锅门;冷凝阀开,1,圈;消毒钮顺时针拨至“关”;,选择所需的杀菌压力,0.07,、,0.11,或,0.14Mpa,后;开启电源;,当温度达到,100,左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止;,当消毒室温度达到所需温度时开始计时,到时间后关闸。,使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项,A,:为避免烫伤,只有当温度降低到,70,以下时放可小心的打开消毒锅门。,B,:为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门,所以当消毒室温度低于,70,时就可慢慢把门打开。,C,:根据消毒物品选择排气方式:,(,1,),.,如有液体(营养液等)请选择慢排。,(,2,),.,如只有废品等可选择快排。,手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法,(,1,)、关好排水阀门放入清水至标度为止,。,(,2,)、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中,关上器盖。,(,3,)、通电加温,同时打开排气活门,排尽锅内的空气,再关闭活门。,(,4,)、,当达到所需温度时开始计时,并在此温度下保持所需的时间。,(,5,)、稍微打开一点排气活门,使锅内蒸气缓慢排除,。,(,6,)、,当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时,立即打开锅盖取出物品。,(,7,)、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。,思考题,干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何,?,电热烘箱和高压锅如何操作,?,各有哪些使用注意事项,?,3,、滤菌器,MF75,快速抽滤器,方便过滤,1000ml,容量的培养液、缓冲液等,可直接保存和分装。可高温灭菌。,Nalgene,可反复用抽滤装置,(七)、普通冰箱冰柜,1,、 取用冰箱冰柜内物品尽可能快,取完后及时将有用物品放回原处;,2,、 关冰柜门时应轻轻合上,同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好,;,3,、冰柜内的不要样品应及时清理。,菌落计数器,自动细菌菌落测定分析仪,1,、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化,或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化,快速测定样品中细菌含量数目。,2,、适用于各种食品,制药,石化工厂的微生物品质管理,取代传统方法将侦测时间由,3-5,天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。,快速自动菌数导电测定仪,细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作,避免人工操作的误差,数据精确,省时省力。是您作细胞研究的好助手,是研究细胞的更高层次的选择,细胞,/,颗粒分析计数仪,空气微生物检测仪,适合,CGMP,药厂,食品加工厂,医院手术防,无尘无菌室室,Class100100000,之等级,微粒子落塵计数器,二、常用玻璃仪器及用具,1,、移液管,1ml,,,2ml,,,5ml,,,10ml,,,25ml,(一)量器类,2,、容量瓶,50ml,,,100ml,,,250ml,,,500ml,,,1000ml,3,、量筒,容量(,ml,),10,、,25,、,50,、,10,、,25,、,500,、,1000,、,2000,固定体积移液器,数字型可调移液器,P,型,4,、微量取样器,(二)、其他常用玻璃器皿,3.5cm,7cm,,,9cm,,,15cm,1,、培养皿,2,、试管,各种试管的使用,13,mm,X100,mm,:生化反应及凝集反应,15,mm,X150,mm,:斜面培养,18,mm,X180,mm,:检样稀释,型号,150ml,,,200ml,,,250ml,,,500ml,,,1L,,,2L,,,3L,3,、三角瓶,烧杯,容量(,ml,):,30,、,50,、,100,、,150,、,250,、,400,、,600,、,1000,、,2000,、,3000,三、玻璃器皿的清洗和灭菌,(,一,),、新购的玻璃器皿,1,、先用热肥皂水刷洗,流水冲净。,2,、再浸泡于的盐酸中数小时,最后用流水冲净。,(,二,),、用过的玻璃器皿,1,、含油脂器材的清洗,(,1,)、单独高压灭菌;,(,2,)、趁热倒去污物;,(,3,)、倒放在铺有吸水纸的篮子上,置,100 ,烘箱中烤,0.5h;,(,4,)、再用,5%,的碳酸氢钠水煮两次,再用肥皂水刷洗干净。,2,、含菌试管的清洗,高压灭菌后,肥皂水刷洗干净,烘干或晾干备用。,3,、含菌平皿的灭菌,(,1,)、底盖分开放,放入桶中,高压灭菌;,(,2,)、趁热倒去污物;,(,3,)、肥皂水刷洗干净,烘干或晾干备用。,4,、含菌吸管的清洗,(,1,)、把含菌吸管投入,3%,的来苏尔液内浸泡,30min,以上杀菌;,(,2,)、用肥皂水洗涤一次;,(,3,)、最后用清水冲洗干净即可。,5,、载玻片及盖玻片的清洗,(,1,),将载玻片及盖玻片分别浸入,5 %,的来苏尔液内浸泡过夜,取出水洗干净;,(,2,),盖片用软布擦干即可;,(,3,),染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸,10min,,再用肥皂水刷洗干净,最后用,95%,的酒精浸泡片刻,晾干备用。,(三)、玻璃器材的灭菌,(,1,)清洗后烘干;,(,2,)加塞包扎;,(,3,)灭菌,:,干热灭菌,:160 165,烘箱中烤,2h,湿热灭菌,:121 20min,思考题,1,、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题,?,2,、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题,?,3,、如何正确使用超净台,?,4,、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌,?,5,、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法,6,、,如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌,?,感谢您的关注,
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