植物组织培养基本操作图解

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,植物组培基本操作图解,植物组织培养的内容,植物组织培养包括以植物和它的离体器官、组织、细胞和原生质体为外植体的离体无菌培养，拥有几种不同水平的培养技术，即整体的、器官的、组织的、细胞和原生质的培养技术。,（,植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养,）,植物组织培养中的重要概念,愈伤组织：,指由植物的一种组织或器官经历脱分化形成的原始胚样组织，它具有再分化成为完整植物体的潜能；,外植体：,植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等；,无菌和消毒：,无菌操作要注意：每次操作前，将双手用酒精棉球擦拭消毒；解剖针、解剖刀等金属工具用火焰烧过灭菌，在酒精中冷却，再将酒精烧去方可使用；尽量减少无菌三角瓶和培养皿在空气中的暴露时间；所有无菌操作尽量快速完成，并请在酒精灯附近进行。,组 培 实 验 用 品,一、无菌苗的快速切繁,1,、点着酒精灯，双手擦拭消毒，打开长有无菌苗的三角瓶，三角瓶瓶口使用前后需在酒精灯外焰上烧过灭菌。,2,、用灭菌的镊子轻轻捏出幼苗，放在无菌的培养皿中，用灭菌的剪刀将主茎剪成若干,0.5-1cm,的小段，要求每段至少包含一个生长点，接入盛有,MS,培养基的三角瓶中，每一个切段必须直接接触培养基，三角瓶口重新烧过灭菌，并重新封好。,3,、在光照培养箱中，,25,，,16,小时光照条件下培养,4,周，可长成完整植株。,1,、点着酒精灯,2,、双手擦拭消毒,3,、剪刀灭菌,外焰,4,、酒精中冷却,5,、把酒精烧去,6,、打开三角瓶,铝箔纸的拿法,a,8,、瓶口在火焰上烧过,9,、铝箔纸的放法,11,、镊出苗,12,、放入培养皿中,13,、幼苗形态,生长点,14,、剪取茎段,15,、剪好的苗,培养皿的拿法,16,、茎段接种,a,17,、,茎段接种,b,18,、接种好的苗,a,19,、接种好的苗,b,20,、重新封好瓶口,a,21,、重新封好瓶口,b,22,、重新封好瓶口,c,二 愈伤组织的培养,、挑选生长健康的无菌叶或茎,，,在灭菌的培养皿中剪成,0.5-1cm,2,的小块或相当大小的茎段,(,造成伤口,), ,接种在盛有,MS,培养基的培养皿中将培养皿用封口膜封住。,、在光照培养箱中，,25,下,16,小时光照，培养两周，可形成愈伤组织。,1,、将苗剪出伤口,2,、剪好的叶片和茎段,3,、打开培养皿,5,、愈伤组织接种,6,、培养皿封口,三、苗的茎尖培养,、取幼苗,10,株，剪取,1cm,左右的茎尖浸入,70%,的酒精,1,分钟消毒液中,15,分钟无菌水冲洗,5,次灭菌的滤纸上吸干放入灭菌的培养皿。,、在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥，挑取带着两至三个叶原基的生长锥。移到盛有,B5,培养基的培育皿中，诱导愈伤组织形成，用封口膜将培养皿封好。,、在恒温培养箱中，,26,下,培养六周，可形成簇生芽丛。,1,、幼苗形态,2,、剪取茎尖,茎尖,3,、剪好的茎尖,4,、倒入,70%,酒精处理,1,分钟,5,、倒去酒精,6,、倒入消毒液,(,一般为升汞）处理,15,分钟,7,、倒去消毒液,8,、无菌水冲洗,5,次,9,、取出茎尖,10,、在滤纸上吸干水分,11,、双目解剖镜下解剖茎尖,显微解剖镜使用图解,目镜,放大倍数,旋钮,物镜,解剖载物台,焦距旋钮,底光源开关,上光源调节,旋钮,