仿制药研究与评价的总体思路

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,（,1,）,仿制药研究与评价的总体思路,（,2,）,仿制药制备工艺研究与工艺验证的技术要求,及评价要点,（,3,）,仿制药质量研究及质量标准建立的技术要求,与评价要点。,（,4,）,仿制药杂质的方法学研究与评价,1,请大家将手机调至,“,振,动,”,档,！,谢谢您的配合！,2,简短自我介绍,毕业后,至今,在上海市药品检验所化学室工作,经历了,“,1998,年,2002,年的强仿期,”,和,“20032006,仿制药疯狂期,”,2003,年,8,月, 2004,年,2,月,赴日本国立医药品食品卫生研究所药品部（相,当于我国的中检所化药室）进修,2008,年,11,月, 2009,年,1,月,借调至中检所起草,2010,年版药典,溶出度,试验,指导原则（新增）,3,日常致力于的事业,发表了,30,多篇方,法类、思路类文章。,(1),如何建立,HPLC(TLC),法建立有关物质测,定方法；,(2),溶出度研究系列文章,今年伊始、在国内最为知名的药学网站,丁,香园,“,药物分析版,”,上创立,“,溶出度研究,”,子版，由,本人主持。,每日回复来自全国业内人士的来电来信皆在半,小时以上。,4,本人工作感悟,本人收集国家新药审评中心发补资料予以研读。,一定要详尽、反复地阅读国家新药审评中心颁布的,各类指导原则。,每日必浏览国家药监局、国家新药审评中心、中检,所、药典会网站。,注意文献查询。药典、维普数据库、,PDR,书。, 许多原研药专利过期后，均可在日文网站上查询到,相当深入的内容，值得借鉴、可以一试！,5,本人工作感悟,工作中一定要注重思考，带着问题去学习、有的放矢地,去攻读，多观察、多领会，日积月累、潜移默化之中就会水,到渠成、瓜熟蒂落！,思维要开放、活跃，不要固步自封、按部就班，因循守,旧。,讲述研究生期间，聆听学校大师级老师谆谆教诲的感,悟！,一定要不断思考，注意查询文献，收集各方面信息，培,养自身的专业素养与专业敏感度，不要怕遇到问题，越是遇,到问题、将其解决，就越能不断提高与进步。,6,药品作为高科技产品的体现,“,药品作为高科技产品,”,的体现主要是在固体制,剂上，其他主流剂型的研制、开发与生产均较固,体制剂简单；且由于液体制剂的局限性，导致目,前国际上的药品发展趋势愈发集中于固体制剂。,评价仿制药与原研药质量一致并生物等效是提,高仿制药质量的关键！,7,我国是原料药的,“,生产大国,”,、,原料药生产给自然生态环境带来的影响以及其自身,局限性，体现了我国制药工业的,“,悲哀,”,只有制剂才能被称作,为,“,药,”,，原料药是不被列入,“,药品,”,的、它甚至可以与化工原料,“,合并同类,”,！,将原料药制成（固体）制剂、并工业化大生产的过,程则是一个极为复杂、系统、高科技的过程；制剂的,优劣是用人体生物利用度,(BA),的高低来评价的。,却是制剂上的,“,蕞尔小国,”,8,成为原料药出口大国是十分悲哀的事,情！,一个,“,小小,的药片（制剂）,”,让众多的,国外企业获利颇丰、,“,白花花的银子,”,流出国门！,（爱国情怀、进口药增幅迅猛！）,9,目前国内制剂现状,我国国产固体制剂有高达十几万个批准文号；其中,绝大部分产品均是仿制品，同类产品有几十家、上百,家生产的已不足为奇、比比皆是。,生物药剂学分类系统中的二四类产品，有相当一,部分药品的临床效果与进口原研品均存在一定的或较大,的差距，即生物利用度较低。,所以、该学习班十分具有意义！,10,本人赴东瀛国家药检所求学归来后的感悟,深入学习了该国开展的,薬品品質再評価工,程,和,“,为新药,/,仿制药研发设立,的高技术门槛,”,之,理念，颇值得我国借鉴与效仿。,充分意识到溶出度检测技术重要性，深谙了溶,出度作为固体制剂的,“,灵魂,”,，从药品最初,研发到,最终临床使用整条脉络中所起到的,“,龙脉,”,作用！,11,对质量标准中各项指标的深入剖析,含量（均匀度）没有任何技术含量。,深入讲述制剂生产过程,仅是将一物件使成,均匀状后按照一定规格制作而已。,阐述含量与生物利用度几近无关的根据所在。,一定牢固树立,“,吃药不是吃含,量、而是吃生物利,用度,”,的科,学理念！,12,对质量标准中各项指标的深入剖析,有关物质与毒副作用的关系,能够建立起准确测定杂质的检验方法固然重要，,但与主药在体内吸收的重要性相比就显得无足轻重,了。因为如果主药尚无有效吸收、主体吸收，即便,有,12%,杂质存在也无关痛痒了！除非一些明确,的、毒性较强的杂质。,毒副作用的引起往往由低劣辅料所致！,13,溶出度技术才是,随着人们对溶出度的不断研究与深入，对其认,识与理解亦在不断发展与变化着。现今，该试验不,仅具有为建立体内外相关性而设立的理念，且还已,成为证明药物体内释放特性的一种简单、廉价而不,失严谨的实验室检测方法。,“,固体制剂内在品质的灵魂与核心所在,”,！,14,“,在多种,pH,值溶出介,质中溶出曲线的测定,”,该手段更是成为,“,剖,析,”,和,“,肢解,”,原研固体制剂内,在品质的一种擘肌分理、抽丝剥茧的重要手段；成,为固体制剂内在品质呈现于外在表象的一种,“,映射,”,与,“,载体,”,。,同时，对于关系到有可能影响到药物生物特性的,各类变更评价也至关重要。亦可在评估不同来源的,同一制剂内在品质差异性方面发挥重要作用。,该项技术愈来愈受到各方面的瞩目与期待！,绝非一个介质、一个时间点、一个限度的测定！,15,体内生物利用度的差异,体外溶出曲线的不同,疗 效 的 优 劣,制,剂,的,优,劣,关键、核心,16,通过讲述厨房、碗筷和馒头的关系来阐述,(1) “GMP”,很大程度上讲，是对硬件的要求，与,“,溶出度试,验关系不大！,(2) “,溶出,”,是专业知,识、专业技术的比拼，是属于纯,“,软件,”,范畴的。,“,GMP”,是属于纯,“,硬件,”,范畴的！,(3) “,后,GMP,时代,”,我们做,些什么？,(4) “,认证,”,就是发达国家套,在非发达国家身上的枷,锁！,17,仿制药研发思路与理念,1,、查询文献，原研产品所有的相关信息。,选择品种要慎重：列举盐酸米诺环素和硫普罗宁注射液。,2,、获取不同时间段市场上流通的多批号原研制剂,3,、测定多批号原研制剂的多条溶出曲线、有关物质及含,量，确定波动范围；,同时，取原研制剂，自行进行,“,影响因素试验、加速试验,和长期稳定性试验,”,，以观测原研制剂内在品质的变化，达,到进,一步剖析与肢解原研制剂的目的，即换一角度对原研制,剂进行深刻理解！,18,仿制药研发思路与理念,4,、设计多处方、优化处方，尽可能地使体外多条溶出曲线,与原研制剂产品一致，并注意生产规模。,5,、随即抽取工艺放大后的样品与原研制剂产品一并进行生,物等效性试验。,6,、如失败，寻找体外溶出度差异，是肯定可以找到（如找,不到，讲述美国药典之所以罗列七个方法的原因所在与,河南,天方药业的实例,）。,7,、在该具有差异的体外溶出度条件下，再次予以深入研,发，直至该差异消除，同时验证其他条件下溶出曲线的一致,性，皆为良好时、再次进行,BE,试验。,19,由于制剂技术为药品的核心技术，在原研药厂高,度保密情况下，仿制药厂在仿制时在技术上的深入,与突破便显得尤为重要。要想了解原研制剂内在品,质的具体情况以及其中所蕴涵的高科技，就需要采,用一种可测定的、客观、科学、易于重现的评价手,段来予以表达与诠释，从而指导研发人员朝着一个,正确的方向去研制、去攻关；溶出度试验便是目前,达到该目标的一种最为有效、最为重要的,“,武器,”,！,溶出度检测技术在仿制药研发中的重要意义,20,溶出度检测技术在仿制药研发中的重要意义,？,如何提高,BE,试验成功率？,(1),体外（多条溶出曲线）一致、体内多数情况一致。,(2),体外不一致、体内多数情况下不一致。,(3) BE,试验成功、体内一致，并不意味着仿制制剂临,床疗效就一定与原研制剂相当。,(4) BE,试验失败、体内不一致，肯定会在体外某个溶,出度试验条件下找到两者间显著性差异的情况。,21,使用该药品的患,者是特定人群吗,?,溶 出 度 试 验,是,普通受,试者,是,体 内 研 究,是,在低转度和所有介质中，,溶出曲线均一致吗,?,否,针对性受试者,否,在中性介质条件下,溶出曲线一致吗？,否,胃酸缺乏受试者,22,如何科学有效地建立起两者相关性？,如何确定溶出度试验条件、参数？,如何提高生物等效性试验的成功率？,对溶出度的研,究，又再一次,体现了日本人,“,师夷长技以,制夷,”,特点,！,关键是,23,介绍发达国家先进作法,日本,日本橙皮书：,参比制剂生产厂家、溶出度试验参,数、四条标准溶出曲线、该制剂质量标准中溶出度,试验与测定方法、该原料药的物理化学性质（主要,有解离常数、在四种溶出介质中的溶解度以及在水,中、不同,pH,值的液体,中和光照条件下的溶液稳定性,等）。,24,卡马西平片四条溶出曲线,桨板法、,75,转、在四种介质中，,5,分钟和,30,分钟时分别取样测定,，限度分别为不得,过,60%,和不得少于,70%,。,我国药典,桨板法、,150,转、,0.1mol/L,盐酸,1000ml,、,60min,、,65,25,尼群地平片四条溶出曲线,桨板法、,100,转、在四种介质中（其中均含,0.15,的吐温,-80,），,45,分钟，限度均为,70%,中国药典：桨板法、,100,转、,0.1mol/L,盐酸,溶液乙醇,(70:30) 900ml,，,60,分钟，,60%,。,26,奥美拉唑肠溶片四条溶出曲线,pH,4.0,6.0,间的,研究国,内几乎无人,去做！国产肠溶衣,缺陷所在。,27,茶 碱 缓 释 片,桨板法、,50,转、在四,种介质中,28,硝苯地平缓释片,29,30,31,由于多,pH,值溶出,曲线的绘制已成为剖析和表达,固体制剂内在品质的重要手段，故对溶出曲线比较,的科学评价愈发重要。,目前，由于美国和日本等国的官方机构均已认定,采用模型非依赖方法之一的,“,相似因子比较法,(,2,)”,比较溶出行为的相似性。,亦可根据实际情况增加其他方法（如研发时）。,溶出曲线描绘的具体实施步骤,32,(1),酸性药物制剂,pH,值分别为,1.0,或,1.2,、,5.56.5,、,6.87.5,和水；,(2),中性或碱性药物,/,包衣制剂,pH,值分别为,1.0,或,1.2,、,3.05.0,、,6.8,和水；,(3),难溶性药物制剂,pH,值分别为,1.0,或,1.2,、,4.04.5,、,6.8,和水；,(4),肠溶制剂,pH,值分别为,1.0,或,1.2,、,6.0,、,6.8,和水；,【,缓控释制剂,】,pH,值分别为,1.0,或,1.2,、,3.0,5.0,、,6.8,7.5,和水。,溶出曲线描绘具体实施步骤,溶出介质的选择,【,普通制,剂,】,33,装置的选择,桨板法,/50,转或转篮法,100,转起板，酌情增加转速。,表面活性剂加入浓度,浓度研究应从,0.01,(w/v),起点、按照,1,、,2,、,5,级别,逐步增加，不建议采用,3.0%,以上的浓度；,溶出曲线描绘具体实施步骤,34,溶出曲线的测定,（用于剖析原研制剂时）,测定时间点的设定,普通制剂为,5,、,10,、,15,、,20,、,30,、,45,、,60,、,90,、,120,分钟，此后每隔,1,小时直至,6,小时止。,缓释制剂为,15,、,30,、,45,、,60,、,90,、,120,分钟，,3,、,4,、,5,、,6,、,8,、,10,、,12,、,24,小时,结束时间点的设定,在酸性介质中最长测定时间为,2,小时，在其他各,pH,值,介质中普通制剂为,6,小时，缓控释制剂为,24,小时。,连续两点的溶出率达,90%(,缓释制剂或,85%),以上、,且相差在,5%,以内则可,提前结束。,35,1,+,i,=,1,(,R,t,T,t,),2,计 算 公 式,R,t,和,T,t,分别表示两制剂在第,n,个取样点的平均累积溶出率。,n,对于计算结果的贡献尤甚！,=,50log,100,n,n,f,2,36,溶出曲线的比较,计算时间点的确定,计算时所选取的时间点间隔无需相等，但两制剂所取时间,点必须一致；且计算时间点应不少于,3,个；由于该计算结果,有依赖于比较时间点个数的特性，,故在溶出率,85%,（调释制,剂,80%,以上）以上的时间点应不多于一个。,建议研究者可依据参比制剂溶出率的具体情况，选取溶出,率间隔相近的,45,个（如为缓控释制剂可为,46,个）时间点,进行计算。,37,溶出曲线的比较,对于所选时间点溶出结果变异系数的规定,第一选取时间点溶出结果的变异系数应不得过,20%,，自第二时间点至最后时间点溶出结果的变异,系数应不得过,10%,。如超出，应,从仪器适用性、样,品均一性、方法可行性的角度考虑予以解决。,分别列举实例,38,比较时间点溶出量平均差异,2%,5%,10%,15%,20%,因子临界值,2,83,65,50,41,36,判断结果的依据,通常，当,2,数值介于,50100,时被认为两条曲线相,似。该数值限定是基于两条比较曲线上任一比较时,间点溶出量平均差异限度不大于,10%,的考虑。,溶出量平均差异与相应,2,因子临界值表,39,对于规定时间内未达到溶出量在,85%,以上的溶出度试验,条件如何放宽？,转速增加至,75,转、不建议采用,100,转（讲述原因），或添,加表,面活性剂，直至规定时间内最终溶出量达,85%,以上、,即可结束。目前倾向采用增加表面活性剂的作法。以上手,段仍未果、才增加转速至,100,转。,绝不容许添加有机溶剂！,通过以上手段、对原研制剂予以了抽丝剥茧般的逐层剖,析！,溶出曲线描绘具体实施步骤,40,应以尽可能地在多,pH,值溶出介质中具有,较高的溶出量或尽,可能地在多,pH,值溶出介质,中具有缓释释放特性为出发点，来,筛选制剂处方、工艺或辅料等影响生物特性的制剂因素，并,寻找到能够区分出这些因素优劣的溶出度试验条件。然后再,逐步通过动物试验来予以佐证这种体外区分在动物体内生物,利用度的差异，从而建立起体内外相关性；并最终依据以上,原则科学、合理、系统化地拟定质量标准。,溶出度技术应用于,“,创新药,”,和,“,更改,剂型,”,时的贡献,41,“,工艺放大,”,才是核心、才是关键！,对原料药、液体制剂和固体制剂分别阐述。,尤对于固体制剂而言、放大才最能体现工业药剂,学的水平，这一点是我国最为薄弱关键。列举浙江,华海、海正、北京赛科实例！上海爱的发制药的缓,释微丸技术亦如此！,制备工艺研究与工艺验证的技术要求及评价要点,42,1,、反应设备的改变对反应条件的影响：,2,、反应溶剂的选择、改变和革除：,3,、搅拌与传质：,4,、热量传导：,5,、所用原材料、试剂、溶剂级别的改变对反应影响,原料药工艺研究与放大应注意的要点,43,6,、新生成杂质的研究与控制,尤其在新化合物研制过程中更需注意、完善过程。,7,、有机溶剂残留量控制,讲述质量标准中的残留溶剂应如何拟定、切勿自缚手脚！,8,、晶型控制,讲述西咪替丁原料与制剂的晶型问题。,9,、三废处理,原料药工艺研究与放大应注意的要点,44,通过,有关物质、,色泽、,渗透压,pH,值、,等参数的检测予以制御。,液体制剂工艺研究与放大应注意的要点,45,用于生物等效性试验（,BE,试验）或临床试验用样,品的生产规模应至少为,10,万片或今后最大生产规模,的,1/10,（两者可选择小规模的）！,此处重点讲述日本仿制药申报技术要求细节：,关,键三点的制御措施,，从而,“,四两拨千斤般,”,撬动固体,制剂内在品质的提高！引申至东瀛的,“,药品品质再评,价工程,”,，简单讲述该工程的意,义与技术背景。,固体制剂工艺研究与放大应注意的要点,46,生产规模,溶出曲线一致性与其后,BE,试验的关联性,如不一致、如何酌情予以评判？橙皮书中如何收,载？如何理解？（着重讲述）,市场监督采用溶出度曲线来评定,日本仿制药,关键三点,制御措施,47,药物在一个长时间生产过程中，出于各种各样的目的,可能会发生众多变更，如处方变更、工艺变更、生产规,模变更（放大或缩小）、原辅料来源变更、生产场地变,更等情况。以上这些变更在一定范围内的变化是否会影,响到该药物的生物特性，,亦可通过比较变更前后产品体,外溶出曲线的方法来予以科学评估与预测，,从而佐证变,更前后是否需要再进行,BA,或,BE,研究。,有关物质检测,亦应不容忽视,比较变更前后是否,有变化？,对于各类变更的评价,48,依然是,通过对产品溶出曲线的测定，,来予以,评,评出生产工艺过程是否予以了严格控制；还可通过,批间,/,批内样品溶出曲线的比较，考察和辨明这些,样品内在质量是否有所改变,。,值得一提的是：在质量研究稳定性考核中，对,于考核各时间点样品内在品质是否有所变化亦可通,过溶出曲线的测定和比较予以知晓和确证。,对于生产工艺稳定性、批间,/,批内以及,稳定性考核样品,内在质量均一性的评价,49,一定要摒弃掉,“,仿制药就是仿,标准,”,的错误理,念，要充分领会国家药监局新药审评中心提倡的,“,仿产品不是仿标准,”,的精神与内涵！,原质量标准一定要参照，但绝非机械地生搬硬,套，不假思索地拿来，一定要予以科学、辩证的分,析。,质量研究及质量标准建立的技术要求与评价要点,50,剂予以解析,（溶出曲线、有关物质、水分）,！,列举尼莫地平片英国药典质量标准溶出度试验条件、,辛伐他汀片有一,10,分钟的溶出延迟滞后期、,非那雄胺片原研制剂研制时发生爆炸事例！,二甲双胍原料药与辅料的保密性问题、,罗氏芬,注射用头,孢曲松钠，不存在生物利用度,问题、竟然也会出现临床疗效较为明显的差异？为何？,质量研究及质量标准建立的技术要求与评价要点,剖析途径列举：,从多角度、多层次，多途径对原研制,51,中国药典,“,盐酸布比卡因含量测定质量标准,”,取本品,适量（约相当于盐酸布比卡因,25mg,），加色谱用硅藻土约,15g,与,10,氢氧化钠溶液,0.5ml,，搅拌均匀使呈疏松颗粒,状，填装于垂熔玻璃漏斗,（或色谱柱）中，用温热氯仿液抽,滤提取,7,次，每次,20ml,，使抽提完全；提取液置,250ml,锥形,瓶中，将氯仿蒸至近干，加冰醋酸,40ml,与萘酚苯甲醇指示,液,5,滴，用高氯酸滴定液,(0.02mol/L),滴定至溶液显绿色，并,将滴定的结果用空白,试验校正。每,1ml,高氯酸滴定液,(0.02mol/L),相当于,6.498mg,的,C,18,H,28,N,2,OHCl,。,方法费时费力，且易造成提取不完全，同时色谱用硅藻土,的价格液也较为昂贵。,“,仿产品不是仿标准,”,实例,52,美国药典和英国药典,“,盐酸布比卡因含量测,定质,量标准,”,采用高效液相色谱法测定：精密量取,本品适量，加水稀释制成每,1ml,中含,0.5mg,的溶,液，精密量取,20,l,注入液相色谱仪，记录色谱图；,另取盐酸布,比卡因对照品适量，同法测定，按外标,法以峰面积计算，即得。,C18,柱、乙腈,-,磷酸盐缓冲,液,(65:35),为流动相，检测波长为,263nm,。,方法简便易行，测定准确。,“,仿产品不是仿标准,”,实例,53,质量标准绝非一成不变、完全可根据该产品在不,同时间段所呈现出的特性，予以科学、客观的修改,与完善！,在,“,质量源于设计（,QbD,）,”,理念得到普遍重,视的,今天，质量标准的作用非但没有受到削弱，反而益,显其重要性，质量作为产品的内在品质是抽象的，,只有通过质量标准的检验才能将产品的内在质量展,示出来、体现出来、映射出来！,质量标准的渐进性与完善性,54,原料药必须拟定、即便没有降解产物，亦需要通过控制合,成中间体限度来控制合成工艺。,制剂质量标准拟定依据要根据由原料药制成制剂后和制剂,稳定性放置时间段是否有变化来确定（着重讲述、并讲述,14,号资料稳定性考核必须给出测定数据的重要性，以便观测,“,变化,”,）。如无变化、则制剂质量标准中则可不拟定有关物,质检查项,注射剂一定要拟定！即便没有变化、为保证使用安全亦要,拟定！）。,质量标准中有关物质拟定原则,55,引申讲述崩解时限与溶出度的关系、,质量标准中应如何拟定？,对于生物药剂学分类系统中的第一类药物、高溶解性、高,渗透性药物（如磷酸氯喹、盐酸氯喹、硫酸氯喹），如果该,药品的普通制剂在进行溶出度研究时，在转篮法,/100,转或桨,板法,/50,转的条件下，可在多,pH,值溶出介质中（至少四种以,上）具有,15,分钟溶出量均不低于,85%,的特性，则可考虑向国,家相关部门申请豁免生物等效性试验；,且在质量标准中仅考,虑进行崩解时限的控制。,56,申请豁免生物等效性试验的条件,除满足以上条件外，还应满足：,(1),该制剂中的辅料量与主药量相比，不能过,大；,(2),且辅料中不能加入表面活性剂；,(3),活性成分应为宽治疗指数药物；,(4),同一制剂不同规格的速释制剂。,洛索洛芬钠片就是一个很好的例证！,57,第一、对比分析法,仿制药中的杂质可以采用相同分析方法（如,HPLC,研究方,法），与参比制剂进行对比研究,。如杂质水平相当，那么可,以认为该杂质得到合理控制。,第二、科学文献和主要代谢物法,如果已定性杂质的水平得到科学文献的充分论证，那么该,杂质的限度就无需进一步论证。此外，如果某杂质本身也是,原料药在体内的主要代谢物，通常也认为该杂质已得到合理,控制。,仿制药有关物质研究思路,58,第三、遗传毒性研究法,考虑到遗传毒性试验既费时间又代价不菲，此法,一般是在前两种方法都无法对杂质合理研究论证才,采取的方法。这项研究可以采用含拟控制杂质的制,剂或原料药，也可以使用分离得到的杂质直接进行,研究。,仿制药有关物质研究思路,59,a.,分别检测原研制剂与仿制制剂，将得到的有关物质测定图,谱予以比对研究。同时，采用,DAD,检测器对各检出峰予以紫,外图谱的扫描，确证一致性，如能用导数光谱确证更佳，比,液质联用方便、快捷、廉价！,b.,如仿制制剂中的每一个杂质均为超出原研制剂，则可结束,研究。,c.,如仿制制剂中有超过原研制剂含量的杂质，但仍小于原研,制剂质量标准所要求的限度值，则可结束研究。,仿制药有关物质研究思路,60,d.,如仿制制剂中有超过原研制剂的已知杂质，并超,出原研制剂质量标准所要求的限度值，则需对制剂,工艺重新予以研究。这便是,“,将原研制剂的影响因,素试验和加速试验用于仿制制剂处方工艺研究的一,个重要体现,”,！,但如该杂质本身就是原料药的主要代谢物，则可,根据实际情况予以酌情放宽限度,（列举英国药典技术壁垒的实例）。,仿制药有关物质研究思路,61,e.,如仿制制剂中出现原研制剂中从未有的杂质（此,处强调为,0.1%,以上的未,知杂质），首先应确证来,源，是降解产物、还是原料药带过来的合成中间,体。如为后者、权衡该原料药质量标准未知杂质限,度值和原研制剂质量标准未知杂质限度值后酌情拟,定、即可。,仿制药有关物质研究思路,62,f.,如为新降解产物、则需进行深入研究。首先予以,定性，知晓结构式，并应推测出主成分在何条件下,较易降解出该杂质，然后通过查阅相关文献，对该,杂质的限度值予以充分论证。如查询不到、则只好,进行体内遗传毒性的研究了。根据实验数据、科学,合理地确定限度值。,仿制药有关物质研究思路,63,从检测方法来讲、主要有,HPLC,法与,TLC,法，还有少部分,GC,法。讲述两法优缺点，绝不要有,“,HPLC,法一定优于,TLC,的,”,错,误理念,！,一味地将,TLC,法改为,HPLC,法！,英国药典中就,有数个品种采用两法检测有关物质的做法。,讲述,TLC,法检,测时，应建立,“,梯度对照,”,理念！通过,“,半定,量,”,概,念对稳定性考核样品予以科学评估！绝不要有,“,小于自,身稀释对照溶液主成分斑点即可,”,的简单懒散理念！,有关物质检测方法,64,此处着重讲述归一化法与自身对照法的优缺点、如,何灵活运用该两方法，获得事半功倍的工作效果。,穿插线性试验原理、线性试验意义，并列举实例。,对于未知杂质、不降解杂质，,采用主成分自身稀释法,65,P,P,HO,(1),怪异结构式 唑来膦酸的结构式：,(2),梯度洗脱时，柱效亦不是正常体现，高达,2,万，故无需,拟定。,(3),该组分几乎位于死体积出峰、在色谱柱上几乎无保留出,峰时，亦不成线性。,O,O,OH,OH,OH,OH,N,N,66,1,、杂质对照品、定量法。,简便易行、不受耐受性因素的影响。,纯度无需特别高、只要能够得到准确纯度值即可。,资料中一定要提供该杂质对照品的精制方法与质量,标准。容量分析法消耗样品量较大、高效液相法存,在,“,同一波长下、各物质校正因子的不同,”,之缺陷,（此处着重讲述两法优缺点）。,最佳境界为,“,殊途同归,”,！,对于降解杂质，应予以着重关注,67,1,、杂质对照品、定量法。,推荐采用,HPLC,、归一化,法，波长的确定可通过,“,分别对所检测出的各物质通过二极管,阵列检测器,进行波长扫描，确定各物质吸收基本相同的波长予,以测定。通过最好能找到找到亦专属性强的容量分,析法，然后采用电位滴定予以佐证,HPLC,法结果。,引申至主成分对照品纯度验证，同样可以如此！,着重阐述！,对于降解杂质，应予以着重关注,68,2,、杂质对照品定位、主成分自身稀释法。,该法是在无法长期提供纯度较高、满足定量检测的杂质对,照品情况下采用。但仍能提供纯度不高、可供于定位的杂质,对照品。,此时、一定要知晓该杂质对于主成分的,“,校正因子,”,！在进,行质量研究时，,得到少部分已知准确纯度的该杂质对照品，,配制与主成分相同浓度的混合溶液，连续进样数次得到平均,峰面积，然后计算出各杂质对于主成分的校正因子。校正因,子在,0.91.1,间时便可忽略，范围外均应予以详注！,对于降解杂质，应予以着重关注,69,3,、不采用杂质对照品定位、采用相对保留时间的主成分自,身稀释法。,一定要确定色谱柱具体型号，否则极易导致定位错误，造,成误判！绝不推荐采用不确定色谱柱型号的行为，,“,无异于,自杀,”,，,“,不要害怕不批准,”,！此时、耐受性试验应对流动相,配比（水相有机相在,2%,以内的波动、调节的,pH,值在,0.1,以内,的波动）、柱温（,3040,范围内的波动）、流速,（,0.8ml/min1.4ml/min,的,波动）予以考察。但需要一一试,验，同时变化的,24,个试验予以验证即可。否则工作量巨,大、给分析人,员带来巨大压力、无休无止！,对于降解杂质，应予以着重关注,70,历史来源、又是,“,发,达国家套在非发达国家身上的技,术枷锁,”,！,首先测定未破坏前供试品溶液图谱。,然后进行,“,酸,、碱、氧化、热、光照,”,等条件的破,坏，可能会出现某一条件下极其稳定，完全可以，不是,一定要破坏出杂质！但绝不可能在任何一个条件下均稳,定，除非,“,金子、银,子,”,。,对于强破坏试验的科学理解,71,破坏出的杂质量最好为,20%30%,间（这也是不拟定破坏,具体程序的原因所在），并采用,DAD,检测器检测主成分峰纯,度，纯度系数应符合规定。如不,纯、说明包含杂质，讲述鉴,别方法、列举实例！,同时讲述,DAD,检测器的局限,性和波长扫描范围的确定应,知晓！一般情况下均不会推翻已建立的色谱条件。如检测主,成分峰不纯、降低流动相中有机相的比例,（引申至正相中醇类作为调节剂、微小比例的变化均会引,起较大波动的实例。讲述简便易行的配置方法，且无需过,滤、直接超声即可使用的技巧）。,对于强破坏试验的科学理解,72,作为企业的思考！,如何在全国众多的仿制产品中、脱颖而出，,独执牛耳？（取国外原发厂家产品比较各,pH,条件,下的溶出度曲线）,市场销售的切入点？是以价格取胜，还是以,技术取胜？（与其他各厂家产品的比较）,介绍以色列和印度的作法；扎扎实实地做好,仿制药、做好,“,普药,”,！（国内有厂家在进行）,73,寄,语,“,二次开发,”,、申请发改委的,“,单独定价,”,，不啻,是一个很好的发展方向！,（已有企业在行动，且已,有成功案例）,一些,“,有识之士,”,的企业还可学习,浙江华海药业,的成功案例，,申请美国,ANDA,批准或获取国外制剂加,工订单。曲线救国、最终形成自下而上的过程！,相信水到渠成、瓜熟蒂落的那一天一定能够到,来、也一定能够早日到来！,74,企,盼,我们共同来呼吁，希望国家相关部门尽快,提高质量标准、设立高技术门槛、只有这样,才能避免,“,低水平重复,”,、避免,“,落后淘汰先,进,”,，才能使优秀企业,“,脱颖而出,”,、专业人,才有用武之地,！行业发展才有希望！,75,十分高兴这两日与大家一起度过了难忘的时光！,期待着与您的进一步交流！,（谢 沐 风）,76,