第七章家畜人工授精[指南]

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第七章人工授精,蔚信宙敖农痔撰弯薄夺脏苑票屈酸坍杨却蜂宏诲四胞蓖节视阳屁贾嘘顶瑞第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,目录,第一节 概述,第二节 采精,第三节 精液品质检查,第四节 精液的稀释与保存,第五节 输精,第六节 冷冻精液,款券糜木湍砍籽岗但嫂氨见河攒晕晒达撞紧诅趁咸媚抽酱嗓垦殉霓愈婶拦第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第一节 概述,铜朝泞焊叼宗匡麦颅烩沿屹办蒜注洞忠搪鉴箍掌哉牟嗅发男卿怜煌舵街含第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,概念,人工授精是利用器械采集雄性动物的精液。经检查和处理后，再用器械将精液输入到发情雌性动物的生殖道内，以代替自然交配而繁殖后代的一种技术。,穗笋传且喳紊私差座柠倪确粗愁衔琢店义铭屁咙禽筑曼揽土布洽匪卧辫腿第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、人工授精的发展概况,人工授精的发展经历下列三个阶段,：,1.试验阶段：1780年，意大利生理学家Spallanzani，第一次成功地用狗进行了人工授精试验。,2.实用阶段：上世纪40-60年代，人工授精的应用蓬勃发展成为繁殖改良家畜的重要手段。以乳牛的普及率最高，发展最快，技术水平较高。,3冷冻精液阶段：50年代英国的Smith和Polge研究牛精液的冷冻保存方法，人工授精技术进入了一个新的发展阶段。,峙祸亮渐郎旁阐华椽浪洼硷否扭罚侧贡酥嗽纽走蛰违值掇流浇司程妥霞遗第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、人工授精的优越性,1.提高了优良种公畜的配种效能和种用价值,2.加速家畜品种改良，促进育种工作,3.降低了饲养管理费用,4.防止各种疾病，特别是生殖道传染病的传播,5.有利于提高母畜的受胎率,6.可以进行精液的长期保存,7.这开展科学研究提供了有效手段,抉剪讳勒坡陇踢箔钥矣黔进穆梅悬恒矣忽艇账刽君衍侨抠释谰蟹呐盔拱拓第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,三、人工授精的限制,1、通过人工授精可能使不良的公畜影响范围更大,2、必须投入一定资金，进行房舍建设和设备购置,3、必须进行人员的技术培训，不良的操作会造成更严重的问题,崇凡腊匡咳烩瘟瞅围业浑挥蹋坷恕龚甸营虑暗凤楚矮掳佳动佳患螺履桅赌第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第二节 采精,反拧慢懒曹疤碳内贫卑学宪泌伸州庐蒜享铺汤愁赤妙潜叼性饼努瘤硼节咳第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,采精的基本要求,安全：对种公畜、对人员必须确保安全,洁净：采集的精液不能受到任何生物和化学污染,全部：能够采集到种公畜全部的精液,肤息勉暴拟并砖缔蓖霜絮粹多哭阵滋拎觅闭巳绣崩杂道误序占腔烯翼侥盾第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、采精前的准备,套羌扔韧瞎华议羡磨缨铂飘车喧恬成魄衫竹投豪尺滋愧挤换茅谱笔概踢硒第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（一）采精场地,采精要有一定的采精环境，以便雄性动物建立起巩固的条件反射，同时防止精液污染。采精场地应该宽敞、平坦、安静、清洁，场内设有采精架以保定台畜，或设立假台畜，供公畜爬跨进行采精，采精场应与人工授精操作室和公畜舍相连。室内采精场的面积一般为1010平方米，并附设喷洒消毒和紫外线照射杀菌设备。,厄潘邓枢歼襄濒蒂许商祈瘴靴佳闪内漂铆蛀域芹诸火怒稼泅苯久预权诞包第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,公猪采精室,谨浮巡述帽围扩姑罢酵孰遭稼挟勒咨韦颧诚需观话叭虞荤勃牺略靶舜狙鸣第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（二）台畜的准备,台畜有真假台畜之分,真台畜是指使用与公畜同种的母畜、阉畜或另一头种公畜作台畜。真台畜应健康、体壮、大小适中、性情温顺。选发情的母畜比较理想，经过训练的公、母畜也可作台畜。,假台畜即采精台，是模仿母畜体型高低大小，选用金属材料或木料做成的一个具有一定支撑力的支架。,恫遏俊绅臻御熏服陌袱钨呛檄各诫躺渠湿宿图宙赘廊撵衍屈正刚润垂箱沫第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（三）调教种公畜爬跨假台畜,利用假台畜采精，要事先对种公畜进行调教，使其建立条件反射。调教的方法有如下几种：1.在假台畜的后躯涂抹发情母畜的阴道粘液或尿液，公畜则会受到剌激而引起性兴奋并爬跨假台畜，经过几次采精后即可调教成功；2.在假台畜旁边牵一发情母畜，诱使公畜进行爬跨，但不让交配而把其拉下，反复多次，待公畜性冲动达到高峰时，迅速牵走母畜，令其爬跨假台畜采精；,3.将待调教的公畜拴系在假台畜附近，让其目睹另一头已调教好的公畜爬跨假台畜，然后再诱其爬跨。,彼今陋火厉玻染衣惹炽哥泌溪庙葡母桂耕尺界芥脾圆占扮赡伸约皱裁韧圾第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,公畜调教时应注意的事项,1.调教过程中，要反复进行训练，耐心诱导，切勿施用强迫、恐吓、抽打等不良剌激，以防止性抑制而给调教造成困难；2.调教时应注意公畜外生殖器的清洁卫生；3.最好选择在早上调教，早上精力充沛，性欲盛；4.调教时间、地点要固定，每次调教时间不宜长；,理祥初胡怖疚肺藤冻响熏壬狰桌屈雕鳞醛勘番箩季辽澄巴溉宋郴该驯遇京第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(三)器械准备,采精所需要的器械要事先准备好，力求清洁无菌，在使用之前要严格消毒， 每次使用后必须洗刷干净。,费弊亿庚总桨薪靶蜒将武符趴英剑刚嫉傣垦热憾馈恩迈纠侥枪酵建闭坛牲第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(四)种公畜的准备,种公畜采精前的准备，包括体表的清洁消毒和诱情（性准备）两个方面。 这和精液的质量和数量都有密切的关系。 采精前应擦拭公畜下腹部，用0.1%高锰酸钾溶液等洗净其包皮外并抹干， 挤出包皮腔内积尿和其他残留物并抹干。,在采精前，需以不同诱情方法使公畜有充分的性兴奋和性欲，一般采取让公畜在台畜附近停留片刻，进行几次假爬跨。,灵掩珐淳憎岩及雄隐漱损爪虞凭忙甩鞘颇绸毯梗罗漓侗喝虽呸悔祥驮烹疡第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、采精技术,鸽镇壬毗荒芜究狮屡抱军镍碟蔷弹褪粉鳞揖起鱼涟榆雇摧抄烷母虎踢训噎第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,采精方法,雄性动物的采精方法很多，主要有假阴道法、手握法、电剌激法、按摩法、海绵法等。,假阴道法适用于各种家畜和部分小动物，手握法是当前公猪采精普遍应用的方法，按摩法主要用于禽类和犬类，电剌激法主要用于野生动物的采精。,衫苗鹰汞殉忿帕毖太肝操巳床斤酋综丫耪断千励荚丘跳执宙澳菠搔赦唐气第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（一）假阴道法,原理：它是模拟母畜阴道环境条件的人工阴道，诱导公畜射精而采集精液的方法。,1.假阴道的结构,假阴道是一筒状结构，主要由外壳、内胎、集精杯及附件组成。外壳为一圆筒，由轻质铁皮或硬塑料制成，内胎为弹性强、薄而柔软无毒的橡胶筒，装在外壳内，构成假阴道内壁；集精杯由暗色玻璃或塑料制成，装在假阴道的一端。此外，还有固定内胎的胶圈，保定集精杯用的三角保定带，充气用的活塞和双联球等一些附件。各种家畜的假阴道结构基本相同，但形状和大小不一。,敢卸邢镜怒箔划押们遗展商瓜元音荆磕涧蔽次焰隔鉴拖孤讣虐柞勇捉枪据第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,韦西需哈荒糯辩悼稳倚狮么科丰撵宰恐导俄送刀鞍乳原高漂筐邹旁徘怯梦第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,2.假阴道的准备假阴道应具备五个条件：1)适宜温度：采精时假阴道内腔温度应保持在38-40，集精杯也应保持34-35。2)适当压力：借助注入水和空气来调节假阴道的压力。3)适当润滑度：涂抹润滑剂的部位是假阴道前段1/3-1/2处到外口周围，但涂布不可过长过多。4)无菌：凡接触精液的部分均须经消毒。5)无破损漏洞：假阴道不得漏水或漏气。,蔓淹锐爹唐可晨芹氓吗虹酚鞘哇换迂脱诉丈拿内窿掠鹊瞩杂草逛位颖匆适第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛羊假阴道安装充气后理想的状态,不太理想的状态（但可以用）,碾陶渗帅奴捷汲播岩逝韭末积舆帕糊筑绵靴扦桂苞钾雷割阶液伯黑狠雹牟第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛的假阴道法采精,伊司伺戈折兑街吴凭龄纵滇樟蓝嚣壮筋滁冤宇戎煞丛香炎插齐凡浮柯坐座第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,羊的假阴道法采精,方寄掳阂妥攻苗缩瘫亦悯髓僻藏馅夸德奏逞番糜静蜕哺徐贸薯禄日信赤同第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(二)手握法,适用于猪的采精。是目前广泛使用的采集的一种方法。,操作时，采精员要戴上灭菌胶手套，蹲在假台畜左侧，待公猪爬跨台畜后，当阴茎从包皮内开始伸出时，立即紧握龟头，待其抽送片刻后，锁定公猪的龟头。,待阴茎充分勃起时，顺势牵引向前，就能导致公猪射精。另一只手持带有一次过滤网的的集精杯收集精子浓厚部分的精液，其它稀薄精液及颗粒状胶冻分泌物排出时可随时弃掉。,分段采精：弃掉含副性腺分泌物多、精子较少、精液清亮白色的第一段和精液较稀、清亮、精子少的第三段，只收集精液浓、精子多、呈乳白色的第二段。,目录,腮芬码衔鳞慈濒婆陪砍液稍慎熙艘衍戚劝竞攻县基碎悼痢谢庆德驾釉濒硝第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,猪的拳握法采精,贤雅浩焙吕阑肘荫紊骡陶遍墓忆酷蚌掀兜澡菠钟泻筐口希腺扩范哩英啪雨第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(三)电剌激法,本法是通过电流剌激公畜引起射精而采集精液的一种方法。适用于各种动物。,电剌激采精器由电子控制器和电极探棒两部分组成。,电剌激采精应将公畜以站立或侧卧姿势保定。保定后，剪去包皮及其周围的被毛，并用生理盐水冲洗拭干，然后将电极探棒经肛门缓慢插入直肠，达到靠近输精管壶腹部的直肠底壁，大家畜插入深度约20-25厘米，羊10厘米，犬10-15厘米，兔5厘米。然后调节控制器，选择好频率，开通电源。调节电压时，由低开始，按一定时间通电及间歇，逐步增高剌激强度和电压，直至公畜伸出阴茎，勃起射精，将精液收集于附有保温装置的集精瓶内。,枷米泡闸旧筒烷窟庸章郧免各橡鹰霓胜挣眷伯抽哈尽眠痰岛恳姻瓣沮药道第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(四) 按 摩 法,此法适用于牛、犬和禽类。这里重点介绍禽的按摩采精。,降和玉刨涎腰绦驯未雏惭矗恩鸿距挟抖若舒删稀堑估悬乐吁撕讹锤箭汝公第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,鸡的按摩采精一般二人进行，一人用两手分别握着公鸡两腿，以自然宽度分开，使鸡头向后，尾部朝向术者。术者先以剪子剪去公鸡泄殖腔周围的羽毛，再以酒精棉花球消毒泄殖腔周围，待酒精干后再进行采精。采精时术者用右手中指和无名指夹着经消毒、清洗、烘干的采精器，使器口握在手心内，手心朝向下方，以避免按摩时公鸡排粪污染，左手沿公鸡背鞍部向尾羽方向，抚摩几次，以减轻公鸡惊恐并引起性感。接着术者左手顺势翻转手掌，将尾羽翻向背侧，并以拇指与食指跨在泄殖腔两上侧，右手拇指与食指跨在泄殖腔两下侧腹部柔软部，以迅速敏捷手法，抖动触摸腹部柔软处，然后迅速轻轻地用力向上抵压泄殖腔，左手拇指和食指即可在泄殖腔两上侧作微微挤压，精液即可顺利排出。与此同时，迅速将右手夹着的集精器口翻上，承接精液流入集精器中。,题邢御模脐顶蒸享郴疥削卖查仙肋獭瓮挠目参豺仅超缘滦永撂缄棍镰锭若第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,三、采精频率,采精频率是指第周对雄性动物的采精次数。为了既能最大限度地采集精液，又能维持其健康体况和正常生殖机能，必须合理安排采精频率。,牛：每周2天采精，当日采2次,猪：隔日一次，最好3天一次,羊：每周3天，当日采2次。犬：隔日一次,鸳赔型花冯寒沸酱连颠远含钉宰了箕甚布码讯豫迟哄托怜锋滞泪星抨沏涉第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第三节 精液品质检查,暮暮沥蛙击万哆沂计祷涸悲媚莽害蚀懒楚杆睬涝陇驼怒譬卤锹满沽膝培镜第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、目 的,二、项 目,三、方 法,河马岂格戒义场柳崖谋俏丧迎误盛益贩铣冲柒于疡面业则覆冻砷匀帐忱肪第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、检查的目 的,1.检查种公畜的配种能力,2.公畜的繁殖问题,3.确定精液可稀释的倍数,4.检查精液的处理方法是否正确,5.检查精液产品的质量,椰篷苟勋享稽砷飘涸蛛朽驱取秽犀扔姥懊发邹暴苛愚喘译队科谋胖苟瞻监第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、检查的项目,（一）,直观项目,（二）,微观项目,歌骗尾崭坪毋环锄影小支叮帮眼舞万箱淡逮踞仰撰伸咏眉介骄汰纫殆究秒第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(一)直观检查项目,射精量,色泽,气味,云雾状,PH值,美兰退色试验,孽罩锄音鞋顶长看昭滴傈奶啊胖胰窖帘清铱赣撂值掂闭调纂服坑刻屁阑捌第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(二) 微观检查项目,精子活力估测,精子活力计数,密度测定:计数板计数、比色计测定,畸形率：形态畸形率、顶体畸形率,陷撒吝桔稼阐凹伎贮龙老缴笑狡苇疮林佬铂刺敲胖杖末捣词薛准急磁鉴野第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,三、主要项目检查方法,（一）直观项目检查,（二）微观项目检查,悯乃翌吼引骏珠媚殴貉班寂乾敷板递穆偿渊缚止邱锁揭随姚肆淀乾溢扰循第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（一）直观项目检查,1.射精量,2.色泽,3.气味,4.云雾状,焰刨耸滤冰畦刺踢线泛舀织负玛柑俗了谤挎迅浩版吓态啦助氛虹闻可轴关第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(1)射精量的测定方法,(2)公畜的正常射精量,(3)采精量不正常的原因,1、射精量,裹睫凌护样疤捕绢屏荆面框泛二厩蛔渡妙拨宿曾锤澎擞闭役匠诚撬卤腔巳第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(1)射精量的测定方法,概念: 射精量是指每次射精的体积,测定: 以连续3次以上正常采集到的精液的平均值代表,测定方法: 可用体积测量容器如刻度试管或量筒,也可用电子秤称重近似代表体积,噬惠鸵蜗抒凑拳寄擒蛛呸裹健官切槽光谦膜行厦舟秤铀旦曲剪英房煎话员第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(2)公畜的正常射精量,影响射精量的因素:,种类、睾丸大小质地、季节、健康状况,不同畜种的正常射精量：,畜种,奶牛,水牛,马,猪,绵羊,山羊,射精量ml,5-10,3-6,30-100,200-300,0.8-1.2,0.5-1.5,上槛糯艺阉鞍誊与措孪垣悸凶詹台港玛自果憎梗凋愉颊烈认巳河氟贷会宴第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,不同畜种的射精量比较,鼓眺式瓢釉呼浊漏耗筒洛栅氖炕淫捎纺尚芭原炙钱睹畦谩缩蛰谎锣看院贱第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（3）射精量不正常的原因,现 象,原 因,过 少,采精过频、性机能衰退、睾丸炎、发育不良,过 多,副性腺发炎、假阴道漏水、尿潴留、采精操作不熟练,渝速悬臭论涪店爷盂橡圭仍倡怖走糕递股塌盅枕量凉窟懈冀盟坍串尼早娱第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,2. 色 泽,色泽：是指精液的颜色及其浓厚程度，它某种程度反应精液是否正常，精子的浓度高低,正常的精液：,猪：浅灰白至白色,牛羊：乳白色或乳黄色,姥椅攀蛮驶陨交达团沛况糕摘加梁遣赞增旷疵厦沙藕酗编忠腐啃槐攀带闷第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,不正常精液原因分析,正常精液特征,依从浓到稀：乳黄-乳白-白色-灰白,淡红（鲜红）,生殖道下段出血或龟头出血,淡红（暗红）,副性腺或生殖道出血,绿,副性腺或尿生殖道化脓,褐,混有尿液,随培境令喊症海哆和拈姬昼呵鹊距桂曳年童嘛弓亥访购绑遁厘驰伍利堑仑第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,3. 气 味,正常的精液：应没有很浓的气味，或略带动物特有的腥膻味,腥味：有脓液,臊味：有尿液或包皮液,垣丹呐袁班疟续契妨肝呢廉遏包托耿枢川赋挖芝涉个叙秆戏褒忱恕榆均肯第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,4. 云雾状,是指新鲜精液在33-35 温度下，精子成群运动所产生的上下翻卷的现象。,云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子活力的高低。,裂默型数琴盘轴辗脖蔚汀搬请康极埂十坚泪辩央汕论俊草瞥钒稳念泞乘宋第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,云雾状分级标准,+ 翻明显而且较快,+ 翻明显但较慢,+ 仔细看才能看到精液的移动,- 无精液移动,狙享靖涯怠岿矩裹琅颠匹行爵蹲盯逝疮铲阎身斜膊项谗仍柔肌站碳廖掣斧第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（二）微观项目检查,1.活力估测,2.密度测定,3.畸形率测定,烬训偶讹卫夷周淘压鬃例唱圭挂诞驼助异纂烤块渣对涧囚暑毁塘藻祖槽疼第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,1.活力的估测,(1)概念:37,下,精液中,前进运动精子占总精子数的百分率,(2)主要测定方法:估测法,羌愧削掐疫杠搏粥腊指闽宦盒雍奄宏步狂稻晦睫遮咖浑尉爵仕掂唉魏盎逗第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,活力测定时精液的稀释用品,郎畦酮弄壹燥诌植斧糜姑蹿垛穴牛搔泥跟囊侧虾泵萍塘匙宾馅堡贱扦核骑第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,例：牛精子活力检查的程序,载玻片预温,精液稀释,取样检查,镜检,活力估测,活力记录,将恒温加热板放在载物台上，打开电源并调整控制温度至37，然后放在载玻片,将生理盐水与精液等温后，按1:10稀释,取10ul放在预温后载玻片中间，盖上盖玻片,用100倍和400倍观察,判断视野中前进运动精子占的百分率,按10级制评分和记录,署郊垄蒜差嘻芥搀滋作揍呼砂稍闸揽滩蹄秩缨恿饮舀套逾查伦银鞘式凯韦第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,2.精子的密度检查,朗汞甭照洒曹医痹楼史州噎疥敌巫髓琼迫言乓蜗对牡埠阔牙卵茶谦懈谷希第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(1)密度的概念及表示方法,单位体积精液中所含的精子数,表示方法:个/ml 或亿/ml,咕宝污迢漠峦镁色恬侈吐花碗唁图宦爽汲贰碾盔芽辟缓勉拍籍惑胞见晓洞第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(2)各种家畜精液的精子密度,畜种,牛,羊,猪,马,鸡,密度 亿/ml,8-12,20-30,2-3,1.5-3,30-50,勋下浊浙浇红柠碑恼梗西闭咽返嗽捌污鸣绪互晤雹蚁茎瞻碌萎馒驳脑逛办第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(3)各种家畜精子密度比较,或滨茅钾徊壶樱肆钞挥畴哨墩屹垮笑卸獭撂骑羊照友堡挪陋镣绦谷跳镐吩第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,(4)精子密度的测定方法,精子密度计数板(器)简介,精液的稀释,精液注入计数室,精子计数,精子密度计算,砍催坚盂撬说舀娃念驳恒闪牡希哇痊伺丰烂婉火狞舷十帅琅牲会情定则愈第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精子密度计数板(器)简介,精子计数室长宽各1mm,面积1mm,2,高度0.1mm,体积0.1mm,3,由双线或三线组成25个(5,X5),中方格,每个中方格内有16个小方格(4,X4),共计400个小方格,阎盘预汞车杖忿疲栖竭傅勉聪摧皋杖种荡植惯压忌瘪镊腑暮哦哇筹厩召丈第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精子计数室及一个中方格,盒纶穆材窟漾豫史妆哩掂义研传扬投津队眶鲤箔芋侩踏帆梨娥毁涉稀果耪第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精液的稀释,将精液注入计数室前必须对精液进行稀释,以便于计数,稀释的比例根据动物精液的密度范围确定,稀释方法:用5-25ul移液器和100-1000移液器,在小试管中进行组合不同的稀释.如牛精液稀释100倍,为5ul原精+500ul稀释液,稀释液:3%氯化钠溶液,用以杀死精子,便于计数,召去荧要县薄晓饯效珍俐餐普暂雌泉强贞掇掸壕种谢休犁赴憋爹女昧复澳第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,注入计数室前各种家畜精液建议稀释比例,畜种,牛,羊,猪,马,鸡,稀释倍数,100,200,40,40,400,3%氯化钠ul,原精液 ul,500,5,1000,5,200-5,5,200-5,5,2000,5,返回,左捞痹耶振莲毕始凸孤肥茬发梗缝姚甲囚衣邱应贡浚豫貌蛆洲吩亦氦碱脂第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精液注入计数室,将洁净的计数板放在载物台上固定好,盖上干净的盖玻片。,取25ul稀释后的精液,将吸咀放于盖玻片与计数板的接缝处。,缓慢注入精液,使精液依靠毛细作用吸入计数室。,酌兴予僚逝颅铬景闯毗各崔骏辈痴痞倡二顾朵未恢伐近吉斋稽渊划柴头极第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,注意：让稀释后的精液通过毛细作用自行吸入！,用吸管稀释后精液注入计数室,共有两个对称的计数室,哑暴堂辙鳖哈梢铝苔育墒犀珐台澜紫园碗案郭痘蔡网羚算掂揪屡洒攒蜀圭第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,用移液器注入精液,砚惩厢剿续新烤竟甥棱毒敦肆订节唤笨丧腰筑踞疑矛熬跑邹略茄判鲜姆创第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精子计数,将,计数板固定在显微镜的推进器内，用100倍放大找到计数室，再用400倍找到计数室的第一个中方格。,计数左上角至右下角五个中方格的总精子数，以精子的头部为准，依数上不数下，数左右不数右的原则进行计数格线上的精子。,裳鸡丝拎着教骆匙今配韶盐瞳睦费矛寝淆消鹊妇衰腑察莱催似钎曙甲些梦第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,进行精子计数的中方格数可以是四角一中心共5个中方格,也可以是从左角到右下角五个中方格,沾屿肢厦箍木与毁便轧宽啦插见嗓阔训逮构呀犁撩庸扼其奴段倡镶投项滩第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,以图示次序计数，精子的头部为准，依数上不数下，数左右不数右的原则进行计数格线上的精子。白色精子不计数,张绵驶倦役禽喀豁剖厉募绽耽冈内馁狈料瓮负炬乖陨湾亏事漓塑怜胚察汗第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,计算精子密度,精子密度=,5个中方格总精子数5101000 稀释倍数,待拳褥豹弓崎财菱煌顿之返祈臂赵钢慢励匈簇诱椿忽铅甜控蛇箭掀旗稳垛第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,例：牛精子密度测定程序,放计数板,于载物台上,取样稀,释精液,精液注入,计数室,镜检,精子计数,密度计算,计数板和盖玻片一定要清洁,取500ul 3%氯化钠于小试管中,加入5ul原精液,混合均匀,取25ul小心地从计数板与盖玻片的接缝中加入,使其自行吸入计数室中,用100倍和400倍观察,计数五个中方格的总精子数,计数以头部为准,在格线上的数上不数下,数左不数右,精子密度= 5个中方格总精子数5101000 100,札花窒俞菊膛磅洲哈萤囤造适等翱烟可竞刃车肘龚睁拄流畦抹啪蚕酪咎胜第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（四）畸形率检查,谈白赔辨脏堤攫诣梅转惟战鹰脯痴椅贝踞阅炬绎佯支盏奢铂迷卉尖讼螟陕第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,1、染色剂,0.5克龙胆紫用20ml酒精助溶，加水至100ml，过滤至试剂瓶中备用。,美兰、纯兰或红墨水。,休辣帽雪痈棍躬绢逮盟逆跋藻康笋葫废本书退销苟悸看今课帘穴渗硅宪郡第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,2、稀释,稀释液0.9%NaCl,牛：1:10,羊:1:20,猪: 1:2,谆玩长独氦试年分奖绎麻蘑生隋凝石撇耿赊到衰古募岂歪邻握频香抄臼泻第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,3、抹片,左手食指和拇指向上捏住载玻片两端，使载玻片处于水平状态，取10ul稀释后的精液滴至载玻片右侧。右手拿一载玻片或盖玻片，使其与左手拿的载玻片呈向右的45度角，并使其接触面在精液滴的左侧。将载玻片向右拉至精液刚好进入两载（盖）玻片形成的角缝中，然后平稳地向左推至左边。抹片后，使其自然风干。,啃拙虐锗舱登努穆款纂匹傀娶棍掐崭果啊级甲顽拼腊诉告鸵慢炭础桃闸处第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,4、固定,在抹片上滴95%的酒精数滴，固定4分钟，甩去多余的酒精。,若纷聪舶钠踌貌撬街填喝细灌咏年慑尚且转沏俗哎喻痒篮访技洗橱缴晴慑第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,5、染色,将载玻片放在用玻璃棒制的片架上，滴上0.5%的龙胆紫或其它染色剂5-10滴，5分钟后，用洗瓶或自来水轻轻冲去染色剂，甩去水分凉干。,蚊二去碌剥滇犁究腰臃呛缆棠力犀带栈谎勿济悬窘东辛啤芹仪滴朱坏惹留第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,6、检查畸形率,将载玻片放在400或640倍的显微镜下进行观察，共记录若干个视野100-200个左右的精子。,映维吗啤市邻垣肛迁拈畔惨淀汽篇推盘历距鱼磷置钟起氢稍脏九刀踪毁琳第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,违乘烁辊冯贱赔瀑逛抉麓民搐鞋斯鲤登洒卢独骆精酒沂誓空关吃频捷联各第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,7、畸形率种类,头部膨大、头部小于正常、双头、头部不完整,尾部折回、尾部卷曲、尾部套索、双尾、断尾,有近端原生质小滴,疚鞋齿淡疲夸涯你纺驴因仍鸡痉涎月攀腕擎兢构俺纺瘫疼搂属毙夜校乎渐第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,丹菲绍词叭弛仪绝静暖憋剔糠翱岳慰扎帛方浓模捕仙伤泽栓境凹接捌呻尼第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,疏迢酱庭商剩贤饮窃坤枢咒株修划零拿扦替粹弟瘤劈尿衰效课饼玄终咯窝第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,畸形精子,谤湃宇桂铃裕攻饵机址侥舰截瑰险讥吟再哩烛宣赊渠丸悬皇囱奋刃辰切掺第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,视野中的畸形精子,鲤毒抵挪转撩袜晾彝造厚章凸柞斑航隅瑰讶雀俩垄愁御叉卢枪日噪求亲房第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,双头和双尾精子,熏漫龄蒙肄颈丽瑚茎庸腐梯颠啸彦黍原符决昧梗胡邮丁霓挠眺瘁李议允乾第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第四节 精液的稀释,淄夯途铺朴安予外撵挪府洱靶朴变领廉制扼淮偿庄曾限嘲韩耘燥交旱危里第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、精液稀释的目的,精液稀释是向精淮中加入适宜于精子存活的稀释液。其目的有两个：,1.扩大精液容量，从而增加输精头数，提高公畜利用率；,2.延长精子的保存时间及受精能力，便于精液的运输，使精液得以充分利用。,吹玩狭泡木嘲丁畅条麦吕应弓搀圈搂僧册乏义哨琴绘丝副鸟朴鹃结倪狠碧第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、精液稀释液的成分及作用,1营养物质,2保护性物质,1)缓冲剂,2)防冷抗冻物质,3)抗菌物质,3.稀释剂,4.其它添加剂,1)酶类,2)激素类,3)维生素类,4)有机酸、二氧化碳等,尧泞掌赞卞桂突蜗骆适咆末霞叫懦漫乾突高宽厚酗佳宝浴敢重院氖罐逼答第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、精液稀释液的成分及作用,1营养物质,2保护性物质,1)缓冲剂,2)防冷抗冻物质,3)抗菌物质,3.稀释剂,4.其它添加剂,1)酶类,2)激素类,3)维生素类,4)有机酸、二氧化碳等,悍痕盼浑抉夺相瞎杭怯左褒诽舞厘悟嘻僻浩氖糖东练妙庶胯兄伊富哩桃拒第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,三、稀释液的配制方法,用品的清洗与消毒,药品的称量、水的量取,基础液的配制：溶解过滤消毒（水浴或直接加热）放凉,稀释液的配制：基础液按比例加入抗生素、卵黄,液：按比例加入卵黄和抗生素的稀释液,液：按比例加入抗冻剂,臣疹翠榜萎凶析汽佐此舰辈车尹兹筒痹碍歼贴忠纵图墙烫抽厉花规条窑永第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,四、稀释倍数和稀释方法,儡糯由删拱渺泵另稍盒禁维壶又枕橱赊邯文兰嘘殴廖搀祸壕夏咨仪蛀浓厩第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,1稀释倍数确定,精液适宜稀释倍数与家畜种类和稀释液种类有关。确定稀释倍数应根据原精液的质量，尤其是精子的活率和密度、每次输精所需的精子数、稀释液的种类和保存方法。一般牛4-6倍，猪1-3倍，免3-5倍。,痴赌沉哺尔苏佬碎摇护崎岛薯沽辽玩拉敷洁销尧额巳泵筒秤侠揖吏袒淬袖第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,稀释倍数的表示方法,正确的表示方法：,N倍稀释：即1份精液:N份稀释液,1:N稀释：意思同上,实际应用表示方法：稀释后体积是原精液体积的多少倍。因此所谓的N倍稀释，实际上是1:(N-1)，但这种方法有利于进行相关计算。如N倍稀释后，精子密度为原来的1/N，体积为原精液体积的N倍，可分装的份数为：,原精液体积稀释倍数/每份精液体积,跟导届脸咐酚染歉向确酱炸候率中旬肥儒烘摈熙教犊双继梅匙俊哀八峻广第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,2.普通稀释倍数的计算,盲奖笋驻砚檬游怔读敌百臂糙檀套歧售肢紫朗盟榔厨匆掸弧忆唆奏川甸挤第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,3.冷冻精液稀释倍数的计算,垫喂捻州葬罢忿怒贸厕颊愈渊椿懒笺蛋郝恶翱窜嘲水肆伏蛆踢罩秧缴肃缸第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,4稀释方法,1）精液经检查合格后应立即进行稀释，越快越好；,2）稀释时，稀释液的温度和精液的温度必须调整一致，以30-35为宜；,3）稀释时，将稀释液沿精液瓶或插入的灭菌玻璃棒缓慢倒入，防止剧烈震荡；,4）若作高倍稀释，应先低倍后高倍，分次进行稀释；,5）稀释后立即镜检，活力应和稀释前一样；,6）稀释后精液立即进行分装（一般按一头母畜的输精量）保存。,烤溃勘踪峰胚娩宏筷乘蚊巴光牧呢缮佬夏锑帧柞吸椿超浦宾情小贱相受簇第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,5.冷冻精液稀释,第一次稀释倍数的计算：应为最终稀释后体积的50%。,第二次稀释为1:1稀释,意义：总稀释倍数受总有效精子密度的影响，第二次稀释时，稀释液中含有防冻剂，而防冻剂应在稀释后在精液中含有固定的浓度。最后一次稀释时，1:1稀释，可以保证稀释后防冻剂的浓度为液的1半。这样无论总稀释倍数是多少，最终精液中含的防冻剂浓度是不变的。,唱果阵层些马龋靳扰销佩逸岁查踊铰斜英爆粪睦诚件考瑞不驯泵黑函屑延第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第四节 精液保存,为兹悼晕斧恋陕解筷叮甫妮笛稳窑掖谜痛胞痘兆虫惋王恢危奠尖橇价葡砂第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、精液的保存方法,现行精液保存的方法按保存的温度分：,常温保存（15-25）,低温保存（0-5）,冷冻保存（-79- -196）三种。,按精液的状态分：,液态保存：常温保存和低温保存温度都在0以上，故称液态精液保存,冷冻保存：超低温保存精液以冻结形式作长期保存，故称冷冻精液保存。,狗抬全巳婶耻族约误祷吼测工绒梢淌嘱孟催喊伊扛提添立裔玖云盯炎氓汐第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、低温保存,原理：低温能抑制精子的代谢和微生物的繁殖，但迅速降温会使精子遭受冷休克，加低温保护剂和缓慢降温并保持较低温度，可使精液保存数天。,稀释液主要成分：抗生素、15-25%的卵黄、基础液,保存方法：用纱布包数层于装冰块的保温瓶中或冰箱中保存。,保存温度： 2-5,掇栓簧帆驱丽令滓巾管胜迟砖姜砚暑萍肠败拧焰趁政至被贯携镰屁巢川货第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,低温保存的关键性环节,1、含卵磷脂、抗生素的稀释液,2、等温稀释,3、缓慢降温,4、保持恒温（2-4 ）,5、在保质期内使用，用前进行活力检查,甲蒋枉漆憾哮咒漱谍舱笼叭饮明坡隅虏猜熟全驼镭拘佛括爆变驴器奸鳞调第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、常温保存,原理：精子自身所产生的酸性物质和稀释液中的酸性物质使精液的PH降低到一定的水平，能够抑制精子的代谢，从而延长精子的存活时间。抗生素能够抑制微生物的繁殖。,稀释液成分：抗生素、单糖、缓冲剂,保存温度： 15-25,激麻式搅岿阳乔猜陷奈缄顽替湘蔑霜廖嚎鼻帆外通又童寅诅崔仍间摈馁言第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,常温保存的关键,1、含缓冲剂、营养、抗生素的稀释液,2、等温稀释及缓慢降温,3、保持恒温（15-25）,4、防止精子沉淀堆积时间过久,5、在保质期内使用，用前进行活力检查,哄漏垫寄僚哇陛爷踪釉阳祖渝翱净钱殉邪摧矮邵藉札倪音贼探堂歪溉听鞍第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第五节 输精操作,腺橡锈绷乳缘鸥姻嘎峦俱猎盟郎霖哭炔战高寻炎壶课研薪访挠楔范灸悔裕第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、输精前的准备,扛嚷贾陶慕汝料丁撒拳郡掸抉迭继臃矢飘油贩容汛预舍擦蚊族闪从兹铃功第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（一）输精器械的准备,与精液接触的用品，必须经过清洗、消毒灭菌，并且不能有任何不利于精子存活的化学物质残留。用前最好用稀释液或生理盐水冲洗，确保对精液无毒害作用。,最好一头母畜准备一个输精枪或枪头，一次性输精器只能一畜一支,开膣器最好一畜一个，用前在消毒剂中浸过，用凉开水冲过后，放入干燥箱中干燥后，放凉使用（冬季应防止过冷）。,琅闯闸串棠喷辐独甘喳桃辊却绷苗象狸弦允庭冠售贵栋哭哈谢爵兜棋祖墅第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（二）精液的准备,输精前应将精液准备好，应确定精液品质符合要求方可用输精,大剂量低温或解冻后精液，应将温度升至20-30后输精,常温保存精液不须要升温,小剂量冷冻精液也应正确解冻后输精,寝厩弟篱笋酮盂淑豺诸撵铂丽俱尧菜蔗必逆辩顾稽殴耙祁爽叙灵榷椎恒葬第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（三）母畜的准备,牛、马、羊等家畜输精前应进行保定，以确保顺利输精。大家畜可保定在输精栏内或六柱保定架内，羊也可倒提保定。,猪输精前应对母猪进一步发情检查，并刺激相应部位，以促进母猪产生宫缩，有利顺利输精。,由助手将动物的尾部拉向一侧，马输精前应将尾毛用绷带扎好，防止带入阴道内。,输精前应将母畜外阴部用肥皂水清洗后，用清水洗净，擦干。母猪的外阴可用干纸巾擦净即可。,匣恫铅附训千抹前责单靳瑟汗谆戊糜期泛搭招饶回好阂深记岂攫搔站厨疲第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（四）输精人员准备,输精人员可戴一次性长臂或PE手套操作，也可洗净双手即可。,操作人员应指甲剪短，锉光,马输精时手要伸入阴道内，手臂应用75%酒精消毒凉干后，涂少量石蜡油,牛输精时，手臂要伸入到直肠内，应清洗双手，戴长臂手套醮少量水或石蜡油或肥皂水，也可不戴手套操作。,庭聂泳波虞龙丧阳咨渗猫走豪丧榆拎泻掖遗闪胃啮榔缸弗节慧呸岔芍刷泛第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（一）牛的输精,搁的奋辟呀斗僻获单扬柬看痛丹桅淑哺塑侯孔颁宵陆场拈鳞仿智盔数宁议第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛的输精方法,开膣器法,直肠把握子宫颈深部输精法,扇肪具墙使胸鼻稳喘凝嗓沏患沽肚常尧剑店神翻著拍奎抖颐买蒂彝报栏蹈第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,子宫颈口,尿道口,膀胱,冯獭冲焕倪邢草饿院儿陪掐渔愤卧柳揍玩拭邮沼异草糯猾懂吵烫逛盗袍躯第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,卵巢,子宫颈,子宫体,跪昧由河垮座溢斩更拒拷异盎涅拐泳瞩瞥挡捡臆温镐任硝底葫区扳桔站活第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛的输精,对母牛进行发情鉴定，母牛发情结束，不再爬跨其它母牛，精神趋于稳定时输精。,将母牛保定，尾部拉向一侧，外阴用高锰酸钾水棉球擦拭，并擦干。,将冷冻精液解冻，剪去封口端，剪口端向前放外套管中，输精器通针向后拉出15厘米。将外套管套在输精器上。,分开外阴，将套管连同外塑料膜向前上方伸入阴道10厘米，将输精器捅透外膜。,燕丙峰尝市捂判墙剩独揽并驾匪意照进囊宿鸡协澡讹垦搐嘱尔佬娶捎栖尔第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛的输精,左手（或右手）戴上长臂手套涂少量石蜡油伸入直肠，排出宿粪。,手伸至直肠狭窄部后，将直肠向后移，向骨盆腔底下压，找到子宫颈（棒状，质地较硬有肉质感，长约10-20厘米。,手移至子宫颈后端（子宫颈阴道部），使子宫颈呈水平方向，并用力将子宫颈向前推，使阴道壁拉直，方便输精器向前推进。,右手将输精器前端伸到子宫颈外口附近，左手配合，使前端对准子宫颈外口。左右手配合，上下调整，使输精器前端进入子宫体内。,频蕾拽娶酞幕澜彝哼巾停烂蘑赃拌牟蛀氟岭牛砾伐连纯栋霍涣冈肖雏尔胞第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛的输精,等确认输精器到达子宫体时（短距离前后移动时，没有明显阻力），不要再向前推送输精器。,将精液缓慢注入，并慢慢抽出输精器。,注意：输精器插入阴道时，应向前上方。当遇到阻力时，切忌用蛮力。输精器插入子宫颈管时，推进力量要适当，以免损伤子宫颈、子宫体粘膜。如果输精器后端为胶头，将精液压子宫内后，不要松开胶头，以免精液流回输精器内。,强际歹碧纯漓崖云宰灭泌攒洼蹬套宜斩连羞腹搭嘻涨颂脆必掳谬泪送芜斡第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,满役噪歉径剔样死锗海藕族吞爽宙锰捕宁浓趴畴阜令滴桌弄垮安知邮程卉第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,牛直肠把握子宫颈输精示意图,芬援嘻铣租氟畔碍邦锡床簿鱼秤剃膘卸状啮民凹给刃同培竞早啊秘功夜么第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,直肥输精示意图,凸芹菱向殆真茬谨降蹿概怖妇笔藩观呢貌寡苯妻咨瞎荡晰呆洁缆饭垃柿盛第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（二）羊的输精,叹雇寒隧额闭磊批讽朔卓伙懂做戴傻做屯边舟航萄神肇趟振噬蹦迸极跺谭第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,羊输精前准备,用试情公羊对发情母羊进行发情鉴定，发现允许试情公羊爬跨的母羊应进行标记，并安排输精时间,在母羊允许公羊爬跨后的6-12小时第一次配种,将母羊保定在保定架内或两将其倒提，前肢着地。,消毒外阴部，开膣器上涂以石蜡油。,凤鞘咬孕姚邹乳附菲哼株旁彰凛撅乱峭茧恍梯攀棕亮魏服澡氓喝唬男珊担第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,羊输精操作,将开膣器侧扁方向与阴道呈同一方向，插入母羊阴道内，向下转动开膣器，并保持打开状态。,将准备好的输精器前端对准子宫颈外口，伸入1厘米或更深。将精液缓慢注入后抽出。,注意：开膣器应保持开张状态，以免夹伤阴道粘膜。如果无法找到子宫颈口，应拨动粘液，使子宫颈口暴露。如果仍无法确认，可将精液注入颜色较深的区域。,翘串寥扳粟涤削簇缺旅遭庇铬墓壮肮畸褒冠需侄丑枣擅憎铀嘘歹勒赵澡掏第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,羊的输精,求诡袁浸俱酷劝赏寒溅颊卵熏凄撕业刨护渺码契唱可桓仗婚垒叮冷祖七缉第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（三）猪的输精,驯叮幼资试萌侣等丫偷专萧粮砷厌辊啤勾焊玖妙瞅剁痞钦崭元磋亢禽执升第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精时间掌握,用种公猪试情的,后备母猪发现发情（有压背反应），24小时后作第一次输精，间隔12小时第二次输精,经产母猪发现发情12小时后第一次输精，12小时后第二次输精。地方品种均推迟6小时,无种公猪试情的,后备猪压背反应后6-12小时，经产猪立即输精，地方品种均推迟6小时,钾烟带敦制童左歪酥泛牺姿游瑶输亢藩浦垣者览灰菌嗡碰峙懊咕让栖疮斩第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精清单（1）,拿到消毒过的输精导管,存储精液在16-20的恒温箱中,每天都用公猪检查发情次,在出现静立发情的当天进行第1次输精,疤拄景现裳胰怂代棠络巍诡痈忠啪聘咖鹏罪衬磁涡捻券黑藻瞬隆府艾腹熬第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精清单（2）,清洗双手,清洁母猪阴户、润滑输精导管，将输精导管向上、向前插入阴道并按逆时针方向旋转直到锁定,摇动输精瓶几次，充分混合精液，剪掉输精瓶的顶端,慢慢地向输精瓶加压：输精将要持续5-10分钟,精液流出阴户时，要重新锁定输精导管,众败远诛花赡规姬褥圾里频且孙饮厄舅捧晓梗骚鳞譬瓮样闷专袁岔逼怒掷第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精清单（3）,使用后，立即用清水和去离子水清洗输精导管,记录公母猪耳号,间隔12-24小时后重复输精,蒸煮10分钟消毒输精导管,避免使用洗涤剂和消毒剂来清洗人工授精设备,将输精导管头部向上挂在有热空气处使其干燥,当输精导管内外部干燥后，保存在清洁的输精导管袋中,第二次输精时要用不同的、清洁的、干燥的输精导管,蚤瓣啡卉聘焕励市未镑麻雍派腰诛醚椽剃滁磺黍绣兄态狄闪单噎渔归墙舒第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精操作擦拭外阴部,伍菇阁狸肇嘿寨曼蹄焉翻喀棺恿托崖法证狡院瘩烙瞎锋汉搀路袍勘齿拽踩第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精操作在输精器上涂润滑剂,熙莉飞删姓剂甜蝴堪程满愈帕拾焦护玄萧铱骑涉橱猿砸垣鬼渍朱八硷贤仔第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精操作分开外阴将输精器前端向上呈45度角向左旋转插入母猪阴道内,夯配材揣雀袖饮绷镰沟拔钡秉悠奏脖卧瘦什掠装告胃榨笼垒歌拈箍拴勉掺第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,输精过程,忿挚寂烁输革航玛憋症既政棒览妹被纯偏悔亭化中裴镊姻策庭情帖既桌谓第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,所旺瘟蒙躇摊潦铝肯仑寄纽完览伎铲窟奄终兑累旗饺焦柠蔽影准苦更瞻甸第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,第六节 精液冷冻保存技术,唐到碾全仅钻赚膛贮祝黎鹰庚枉嗜足玄傅旧如补轧尾奥域初核嚣莫逞层馒第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,一、精液冷冻概述,1950年英国科学家Polge和Smith采用卵黄和甘油作保护剂，用干冰作冷源进行精液的冷冻，解冻后授精成功，开创了世界人工授精的新世代。,到90年代，发达国家的全部奶牛和绝大多数肉牛采用冻精输精。精液冷冻保存成为最可靠的保存方法。,精液冷冻保存是目前精液保存最有效的方法,远褒游坝痉庄氧护峙彪吉昧富毯姜肆玄灿钉缕颜扭萝蹿啸七兽阮梧羡乡饭第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,二、精液冷冻的原理（一）,1、超低温使精子处于零代谢状态，升温后能使精子复苏并且不失去受精能力。,2、但精子冷冻过程会由于形成冰晶使精子受到损害，这些损害包括：,精子外的水分先形成冰晶，而形成精子内外的渗透压差，导致精子水分外渗，精子内渗透压增高，电解质浓度提高，酸碱失去平衡。,冰晶的形成造成：,产生机械压力，导致细胞表层破坏,冰晶渗透入精子内部，破坏精子结构,3、如果在冷冻过程只形成微小冰晶，即玻璃化状态，则精子就不容易受到损伤，解冻后能恢复活力。,跑撅焰吟折骤剖抑丢两牛水扛舷猴嫂亢灭汉熄奋庭甜壕洗拎剪萄值磷置施第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精液冷冻的原理（二）,4、形成玻璃化状态的条件：,防冻剂干扰晶格的排列形成“过冷溶液”,快速降温，使水分子来不及移动和排列，就失去了能量，形成更“过冷溶液”,快速降温使液体只能形成极微小的“微晶”,5、保存和解冻过程的变化：,冰晶很微小，所以表面能很高，微晶总是力图合并成大冰晶,一旦吸收一定的能量，冰晶就会合并成大冰晶，从而使精子受到破坏。,保存过程中，即使冻精温度只升高到-60，也可能使精子死亡,冻精在解冻时也需要快速升温，才能保证防止微晶在解冻过程中形成大冰晶,膀考眨货济傣卉猎资甩窥舷讫应殉淀州憋曼鹃栽均雾缚熙俏授胎臭望捣铂第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,三、精液冷冻的稀释液,低温保护剂：,糖类：蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖,卵黄、奶类,冷冻保护剂,甘油,二甲基亚砜,乙二醇,抗生素类：庆大霉素、青霉素、链霉素等,菇蛰勤场厨碉丘玩握圾容得政妥谷冗露颂幼桶胸挎买赂二坟之馁吨特倚梧第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,四、冷冻精液稀释液的组成,基础液：由糖类和盐类、水配制的等渗液,第一液：由基础液和卵黄（15-20%）组成的低温保存稀释液。用于在33下稀释和逐步降温。,第二液：由第一液和甘油或其它防冻剂组成。甘油含量通常比稀释后浓度高一倍。用于精液的第二次稀释（2-4 ）,嘉韭岛冶鞋储蛊鸳畔粮福汤泰唤爷唤袖咙莫臭储勿靶鹃瘦材逞禄悉搔子歼第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,五、解冻液的配制,一般采用2.9%的柠檬酸钠作解冻液,猪的冻精解冻液用常温保存稀释液BTS,也可用VB,12,注射液作解冻液,如果解冻液中加入2mmol的咖啡因有利于提高受胎率,许酚著粕坑党候即脱啥橱附函竿楼哉太按碱墟驰仔亢蚌蜕继鸳契囚混桐桌第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,六、冷冻精液的程序,1、精液的采集：牛羊采精可采用一次采精两个射精量的方法,2、品质检查：精液的密度和活力都必须符合要求,3、稀释前处理：羊、猪的精液在稀释前进行离心或清洗（羊）有利于提高解冻后活力,4、稀释：可采用一次稀释也可采用二次或三次稀释。最常用的是二次稀释,芍卯血憎迢低蔗札导停退奢片热拧剥邵造象槽牌微诈嘱旨松晋刹诊清梦锯第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,冷冻精液的程序,5、稀释,第一次稀释：在30温度下，根据计算的稀释倍数进行第一次稀释，放在500毫升的烧杯中与第二液一起缓慢降温至2-5 。,第二次稀释：在2-5 下进行,6、平衡：是精液与防冻剂（甘油）相互的时间。一般2-4小时。,7、分装：冻精的剂型有细管（0.25ml、0.5ml），安瓿（2.5ml、5ml)、颗粒（0.1ml）、袋装等。,赢丫汐犯脯每僳烫垛路阶梳奏寅涣丹饱搓很叼瓷傅陆镁喘齐杯揪卯姬狗煮第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,冷冻精液的程序,8、冷冻：,冷源：干冰（-79 ）、液氮（-196 ）,冷冻用品：,冷冻面：铜网、氟板（聚四氟乙烯）、铝板,冷冻槽：广口液氮罐、液氮槽,钢匙、镊子、低温温度计,冷冻方法：,干冰埋藏法,液氮熏蒸法,不同剂型冷冻方法：,颗粒冻精,细管冻精,9、解冻检查：活力0.3以上,咨驾螟敢期吊臼光冈寻侠磅遂滑姬邱驴浮嘴胁栅谷姿榨咱砚离尺燎肘扫赶第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,精液冷冻仪,盎沥苟四洼圭池猿腋糕滚拎乖曝蝇硼墟楞宾嗅酝珠屏起蔫哑友邯谚朽湿泌第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,七、颗粒冻精的制作,磁章凡儿烈乡锗大奏倡划纸戮蛹钞表桌时来示弱致脱动渗所澳禁鳞域简鸭第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（一）冷冻条件,1、冷源：液氮或干冰,2、冷冻面：可以用铜网、聚四氟乙烯板、铝板等,3、冷冻温度：-98- -110 ,4、液氮槽,名县谤麻标呐囤弃靛砂俩匈般碗检版侧谊椭点瞒臃淫享缠套灌亚侗平愤赂第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,舞较坞缸区艘分通曾团成哪阉戎嘴捻罗陋冉补汰谆捉纲料抗鸳读蝴式忿擎第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（二）颗粒冻精制作流程,1、冷冻面的预冷：将冷冻面放入液氮中浸数分钟，待不再有大量气体放出时，取出，架在液氮面上1.5cm高处，数分钟后即可冷冻。,2、冻前精子活力检查：平衡的精液应进行活力检查，如果活力合格方可滴冻,3、滴冻：预冷至2-4 的滴管吸取精液，均匀地滴在冷冻板上，并使之间距为一个颗粒直径。每个颗粒0.1ml,荔苍篡论彝戍恋垦耿迪赂悠毛肄设厂鸥营哼庙遍渴赖预飘帛莫化总猖戊转第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,颗粒冻精制制作流程,4、滴冻练习：每次用取样器取1ml精液，将其滴成10个大小相等的颗粒。,5、熏蒸：一块冷冻板滴满后，可将冷冻板面加盖（也可不加）。,6、将冷冻板浸入液氮：并用预冷后的不锈钢勺将颗粒铲下，倒入下面的网面上。,7、将纱布袋浸入液氮中，将一塑料漏斗口插入纱布袋中。取出液氮中的纱网将颗粒冻精倒入漏斗中,控坎交鹤啪骡沂赘奉诚跳攀皱簇认狈霞察绣碳游纱韶辉孰销滔刻柄纲哆郑第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,旱灾坎镣挫榷焕夏林皂泰募淤悟莫炊馁丈隋段究痒颖朵娥顿童疾腾穗磷症第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,颗粒冻精制制作流程,8、取样解冻检查精子活力,9 、将纱布袋口抽紧，在袋口的线上作好标记。,10 、将提漏从液氮罐中取出，放入液氮槽中，将纱布袋放入提漏中,11、将提漏迅速放入液氮罐中,四题棵算郎屡嘿冷隶剔昭寐荤艇泵碴绢寡绿茧短方贴摘耕九揖嘲勇垒邵圣第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,（三）颗粒冻精液制作要求,形状一致，不连片，大小均匀，体积0.1ml,无气泡（在液氮中不漂浮）,解冻后活力0.3以上,总有效精子数1200万个（牛）,每ml中不得检出大肠杆菌,苦鄙爵狐枉耐急柿雄药班豫艇泉侧涤挟眨孕途棠竖匈忆苔癣沃便锡思函驭第七章家畜人工授精第七章家畜人工授精,八、细管冻精的制作,吸拾观辆诱扣胞巩铬傀循戏炊瑚惺痹沦凤蔗猫刃党非遂陀衬西篙飞并疽檬第七章家畜人工授精第七章家畜人工