无精子症患者的精子获取技术

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,无精子症患者的精子获取技术,北京大学第三医院生殖医学中心,白 泉,手术取精的适应症,梗阻性无精子症（,OA,）,：,无法手术,再通，如输精管道的先天性畸形和后天原因导致的不可逆性损伤；,梗阻性无精子症：手术再通失败；,非梗阻性无精子症（,NOA,）,：睾丸组织内尚存在一定的生精功能。,精道,梗阻的常见原因,先天性畸形,：如附睾头、体、尾段缺如，输精管一段或完全缺如，精囊缺如，附睾、输精管或精囊发育不全等,泌尿生殖系统感染,：如附睾炎、前列腺炎、精囊炎，附睾输精管结核等,损伤,：如疝修补术、精索静脉曲张手术等可伤及输精管；前列腺手术可引起射精管口闭塞；或虽无直接损伤，但术后感染粘连疤痕形成等导致射精管受压、梗阻。,肿瘤,：如附睾肿瘤、精囊肿瘤、前列腺肿瘤、射精管囊肿等，均可造成输精管道的阻塞。,精道,梗阻的常见原因,根据取精部位分类,输精管取精,附睾取精,睾丸取精,根据手术方式分类,穿刺取精,开放性取精：包括显微取精,根据手术目的分类,诊断性取精：睾丸活检,治疗性取精：用于辅助生殖技术,手术取精的分类,适应症,：,远端输精管梗阻,且,无法解除的,OA,患,者,手术方法,：,阴囊切口，借助手术显微镜用细针刺入输精管，吸出足量精子（,通常为,10,10,6,以上）置于培养液中，用于辅助生殖技术,。,特点,：,由于输精管内精子已,经完成在,附睾内的成熟过程，因此较其他手术方式获取的精子更为成熟。,输精管取精,适应症,：,输精管和附睾尾部缺如或瘢痕化,特点,：（,1,）由于附睾头部的精子活力和形态均较好，,通常从附睾头部取精,；（,2,）,附睾头部精子并未,完成,整个的成熟过程，因此只能用于,ICSI,；（,3,）附睾取精时只有活动精子才能用于,ICSI,。,取精方式,：,经皮附睾精子抽吸术（,PESA,）和显微附睾管精子抽吸术（,MESA,）,附睾取精,经皮附睾精子抽吸术（,PESA,）,手术方法：,采用,5ml,注射器或连接蝶形针，,吸取约,0.5ml,精子培养液，沿附睾头纵轴经皮穿刺入附睾头，施以负压，直到有乳白色的液体吸出，并立即镜检。,显微附睾管精子抽吸术（,MESA,）,手术方法：,在,20,倍放大镜下切开附睾被膜，分离并切开单条附睾管，插入细针，略施负压吸取附睾管内液，延长抽吸时间获取更多，显微缝合关闭附睾管。,不同附睾取精术式比较,经皮附睾精子抽吸术（,PESA,）,优点：操作简便，经济,缺点：盲穿，对附睾管损伤大，并发症较多，二次手术的精子获取率低,显微附睾管精子抽吸术（,MESA,）,优点：对附睾管损伤小，术后并发症少，二次手术的精子获取率高,缺点：操作复杂，需要显微外科手术设备,适应症,：附睾内无法得到精子的梗阻性无精子症、非梗阻性无精子症（,NOA,）,特点,：（,1,）睾丸内精子没有经过附睾内的成熟过程，通常不具备活动能力，但仍可用于,ICSI,；（,2,）,NOA,睾丸内生精功能不均衡，甚至局灶生精，常需要多点穿刺或显微取精。,手术方式,：,睾丸切开取精（,TESE,）、睾丸,穿刺,取精（,TESA,）和显微取精术（,MD-TESE,）,睾丸取精,睾丸切开获取精子（,TESE,）,手术方法,：,精索阻滞麻醉，,睾丸的附睾对侧缘的中间,做,切口，切开白膜，轻轻挤压睾丸后用剪刀切下少许睾丸组织,，,部分,组织置于,无菌培养,液,中进行镜检，部分置于,Bouin,氏液中固定,，,送病理检查。,睾丸抽吸获取精子（,TESA,）,手术方法,：,采用睾丸穿刺枪或简易穿刺针在睾丸的附睾对侧缘的中间位置进针，穿刺深度约,0.5cm,，抽动针栓施以负压，快速拔出穿刺针，可以获得一条或多条曲细精管。同样的方法进行镜检和病理检查。,不同睾丸取精术式的比较,开放性取材（,TESE,）,优点：取材量大，易获得较多的精子,缺点：损伤较大，术后并发症较多,经皮穿刺抽吸（,TESA,）,优点：操作简捷、损伤小，术后并发症少,缺点：取材量小，取材成功率低,睾丸局灶性生精与多点穿刺取精,睾丸显微取精（,MD-TESE,）,减少睾丸损伤：通过,20,的光学放大设备，选择睾丸血管分布相对较少或无血管的区域进行活检。,提高精子获取率：根据曲细精管的管径大小、饱满程度及透明度，寻找睾丸中含有正常曲细精管的精子发生活跃区域进行取材。,睾丸显微取精（,MD-TESE,）,适应症,：,睾丸生精功能极度低下，局灶性,生精,的患者,手术,方法,：,全麻或硬膜外阻滞，在睾丸赤道面打开白膜，于,25,倍显微镜下寻找色白、不透明、较粗而饱满的曲细精管，获取后切碎置于倒置显微镜下查找精子。,特点,：（,1,）,精子,获取,率高,（,2,）,对睾丸组织的创伤较小,MD-TESE,的精子获取率,影响,MD-TESE,精子获取率（,SRR,）的因素：,睾丸组织病理学类型：,MD-TESE,可以明显提高唯支持细胞综合征患者的,SRR,，而对精子成熟阻滞和生精功能低下的患者的,SRR,提高不明显。,睾丸体积,手术操作时间和操作熟练程度,手术取精的并发症,血肿：,睾丸或附睾内血肿、鞘膜内血肿,感染：,睾丸炎、切口感染,纤维化：,睾丸或附睾,睾丸萎缩：,雄激素缺乏和性腺功能减退,精子细胞注射,适应症：,睾丸内无成熟精子，但可见长形或圆形精子细胞的无精子症,存在的问题：,准确地鉴定圆形精子细胞的技术,缺少对卵母细胞的激活,对胚胎的中心体有潜在性的不良作用,后代的健康、生育能力和遗传缺陷,目前仅限于于临床试验,Thank You!,