C-反应蛋白及临床应用

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,C-,反应蛋白及临床应用,1,Protein Structure CRP,结构,2,C,反应蛋白的生理和生化,在细胞因子,IL-6,家族诱导下，,CRP,在肝中合,成迅速。,正常合成率为,l10 mgd，,急性炎症时每,天合成超过,lg/d。,在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白，其中,20是合成,CRP。,当,IL-6,刺激物缺乏时，在 24,h,内合成率降,至正常。,循环中,CRP,半衰期约19,h，,但一旦它与配体结,合，可快速的被清除。,肝外合成对血清水平影响作用很小。,3,CRP,的生物学功能,4,CRP,的生物学功能-机理,结合坏死的内源性物质,在钙离子存在的情况下，,CRP,能结合坏死的内源性物质和效应细胞, 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时，,CRP,可发生与宿主细胞的结合。,在系统性红斑狼疮的鼠模型中，注射,CRP,可改善,SLE,的状况。,人,CRP,基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险。,CRP,量的减少可能与,SLE,发病机理有关。,CRP,量的减少使结合的细胞碎片减少。,5,CRP,的生物学功能-机理,结合外源性物质,细菌、真菌、寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱。,CRP,具有保护机体抗细菌感染的能力。,CRP,保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力。,6,CRP,的生物学功能-机理,结合配体的,CRP,激活下列生物系统，导致配体的消除：,CRP,对补体系统的激活.,CRP,结合,IgGFcR,，增强自然杀伤细胞的活性。,CRP,的调理性质，调理即刺激细胞吞噬作用。,CRP,和血小板激活因子(,PAF),结合抑制,PAF,刺激的血小板聚集。,7,CRP,的生物学功能-机理,CRP,具有多效性的作用。,当抑制干扰素的合成时,，,CRP,可诱导,IL-1,受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子,IL-10,的释放,.,CRP,也可诱导炎症反应。,CRP,向上,-,调节内皮细胞粘附分子的表达，刺激许多细胞释放,IL-8,，,增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂,-1,的表达和活性、增加,IL-1, IL-6, IL-18,和肿瘤坏死因子的释放,.,CRP,诱导或抑制炎症反应依赖于环境。,8,CRP,功能,识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除。,吞噬溶解入侵微生物。,9,急性相蛋白,CRP,合成的生物调控,CRP,基因位于,1,号染色体短臂，只有一个内含子，其分离编码信号肽的区域。,肝脏,CRP,合成的调节主要发生在转录阶段。,由,IL-6,诱导，,IL-1,可增加此作用。,CRP,启动子最近区为,STAT3,和,Rel,蛋白的结合部位。,这些因子的相互作用增加,DNA,结合,C/EBP,家属成员的稳定性，从而有效地诱导了,CRP,基因的表达。,神经元细胞、动脉硬化斑块、单核细胞和淋巴细胞也可以合成,CRP,。,在这些部位的调节机制还不清楚。,10,修饰的,CRP(m-CRP),-Modified CRP,目前认为,m-CRP,是原,CRP,的单体。,与天然,CRP,不同,表现在分子大小,溶解度,抗原性,带电荷数等方面的差别.,m-CRP,具抗菌作用。,m-CRP,具有强大地诱发炎症的作用。,11,方法灵敏度参考献,试管内沉淀试验-,JExpMed1930;52561,毛细管内沉淀试验1020,mg/LAmJMed1950;8445,改良平板双扩散法1020,mg/LIntArchAllergy1962,改良琼脂柱扩散法3.0,mg/LProcSocExpBiol1955,改良单扩散法1.0,mg/L ActaPatholMicrobiolScand,琼脂糖凝胶电泳法1.0,mg/LClinChimActa1969,放射电免疫扩散法10,g/LJClinLabInvest1973,补体结合试验0.6,mg/LProcSocExpBiol1954,胶乳凝集试验1.0,mg/LNature(London)1961,高敏乳胶增强浊度,0.35,mg/ml Dade Germany2000,荧光抗体法 ,Nature(London)1961,放射免疫测定法 3,g/L JLabClinMed1976,检测方法,12,CRP,检测方法 -,免疫沉淀试验,检测,CRP,原始方法.,将兔抗,CRP,血清吸入毛细管内。,把它浸入被测血浆或血清内,因毛细管虹吸作用被吸入,与抗,CRP,血清形成接触界面。,这种方法较粗糙,取得结果时间较长,也不太正确可靠.,13,CRP,检测方法 -,免疫浊度法,可溶性,CRP,-,Ag,与可溶性抗,CRP,-,Ab,反应,形成可见的网络状沉淀性,IC,复合物点.,IC,复合物对光具有散射作用,使溶液具有肉眼尚不可见的浊度。,在被测样品中加抗血清后一定时间,测定反应系统散射光强度或浊度变化,可对被检物及其浊度加以检测。,根据仪器的光学系统,浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类。,许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可,CRP,测定项目。,14,CRP,检测方法 -,胶乳凝集试验(,LAT),将强化的兔抗,CRP,抗体固定于胶乳微粒上。,加入被测样品后与,CRP,在3分钟内形成肉眼可见的凝集物。,胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法,试剂稳定性佳。,15,检测方法 -,标记免疫测定,ELISA,和免疫发光法和化学发光法等都可用于,CRP,的测定。,化学发光法的灵敏度和定量精确度可与,RIA,媲美,而无同位素污染,试剂稳定,分析速度快。,CRP-POCT(,床边试验)法,ELISA,干片法,。,把磷脂酰胆碱(,PC),化学交联固定于载体。,被测,CRP,与载体的,PC,结合。,被酶标记的抗,CRP,单抗结合。,可灵敏、特异性检测,CRP,约5分钟可得结果.。,16,检测方法 -,胶乳增强试验（,shCRP）,：,常规,CRP,检验方法可在感染或组织损伤时检测出,CRP10mg/L。,该检测方法具有较高的灵敏度。,这个水平（0.110,mg/L）,的,C,反应蛋白又被称为超敏,C,反应蛋白（,hsCRP）。,17,CRP,检测的评估,1、半定量：胶乳凝集试验等已弃用。,2、定量：,散射免疫比浊法、透射免疫比浊法：是目前常用方法。检测限度为5150,mgL ，CV5% 。,胶乳增强试验-,shCRP,检测：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和荧光免疫分析：有潜在的灵敏度优势。,胶乳增强试验-,shCRP,检测方法很大程度提高了敏感度。,CRP,检测对标本的采集也无特殊要求。,高浓度的类风湿因子可产生,CRP,假性升高。,CRP,筛查的费用远小于其他心血管检查的费用。,18,临床应用_,参考范围,19,临床意义,器质性疾病的筛选,急性或慢性炎症如伴有细菌感染。,自身免疫或免疫复合物病。,组织坏死和恶性肿瘤。,20,临床意义,感染的诊断与鉴别,CRP,在细菌感染发生后68,h,即开始升高，2448,h,达到高峰，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。,CRP,在病毒感染时无显著升高。,革兰阴性感染：可发生最高水平的,CRP，,有时高达 500,mgL。,革兰阳性菌感染和寄生虫感染：通常引起中等程度的反应，典型的是在100,mgL,左右。,病毒感染：引起的反应最轻，通常不超过50,mgL，,极少超过 100,mgL。,在细菌感染的急性期，,CRP,显著升高，寡聚腺苷合成酶正常；,在病毒感染时,CRP,水平正常或轻微升高，寡聚腺苷合酶水平升高。,21,临床意义,C,反应蛋白是心血管疾病最强的危险指标，,C,反应蛋白水平可预测将来心肌梗塞及中风的危险性。,C,反应蛋白含量2.1,mg/L,的人与, 100 mgL,表示严重的疾病过程并常表示细菌感染的存在。,25,临床意义-,抗生素的治疗监测,系列血浆,CRP,的测定，可用来作为下列情况的治疗监测：,在许多感染时最有效使用抗生素治疗。,根据,CRP,水平的变化来决定抗炎药物的剂量。,在,CRP,下降至正常时，中 断抗菌素治疗。,在高危人群缺少微生物学诊断时，为抗生素治疗的指引。,26,临床意义-,抗生素的治疗监测,27,临床意义-,外科,患者施行手术后2472,h,血中,CRP,水平明显升,高,约在第57天恢复正常。,凡骤升后持续高水平多预示合并感染。,对中、大手术患者,在术前和术后37天各作,常规检测一次。,凡术后57天,CRP,仍持续高水平者,理应怀疑,合并感染,并配合治疗作随访监测。,28,临床意义-,内科,肺炎:,CRP,100mg/L,，,强烈提示细菌感染，如化脓性支气管炎或肺炎;典型的病毒性肺炎不会超过,50,mg/L,。,心血管病，,在痛疼开始后数小时内，,CRP,升高，,3-4,d,达高峰，在,CK-MB,回到正常后,7-10,d,也降至正常。,代谢综合征,代谢综合征分组，根据,CRP,水平可将为,低危险组，3,mg/,29,临床意义-,妇产科,盆腔炎和子宫附件炎.,CRP,值升高,盆腔肿块和子宫肌瘤通常多为阴性。,诊断胎膜早破宫内感染.,胎膜早破时，如母亲,CRP,在产前,6-19,h,超过,50,mg/L,可作为出现,AIS,的标准；,产后第一天出现的,AIS,的,CRP,将比正常分娩时高出,2-3,倍。,无并发症的,CT,和,NG,感染不会引起,CRP,升高。,但扩散到盆腔可引起急时相反应。,30,临床意义-,儿科,新生儿浓毒血症:,出生,3,天前,CRP,10mg/L,表示感染.,如果,CRP,在,24,h,内没有超过,10,mg/L,，,多无新生儿感染.,小儿发热,:,患病超过,12,h,，,CRP,显著,40,mg/L,，,ESR,显著,30,mm/h,应关注为细菌性感染。,脑膜炎,:,CRP,20mg/L,提示为细菌感染的可能；,100,mg/L,时具有细菌感染诊断价值。,结脑,CRP,在,20-60,mg/L,。,成功的治疗可使,CRP,在一周内降至正常。,31,小 结,CRP,是一,五球体结构,的高度保守的急时相蛋白。,CRP,为一模式识别分子，与特殊的分子结构结合而发挥作用。,为宿主先天性免疫应答的一部分，,在机体平衡和自身保护中起着重要贡献。,血,CRP,浓度的升高在为炎症和组织损伤的标志。,CRP,生物学的作用似乎相当复杂的，且为多效的。,CRP,与许多疾病的发病机理有关。,CRP,对机体许多疾病的早期诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后评估以及指导临床抗菌素的合理应用等有重要的意 义。,CRP,的检测，对于普通的炎症用常敏,CRP,检测即可，而对于心血管疾病、代谢综合征、自身免疫性疾病、新生儿 疾病检测等则需用超敏,CRP,检测方法方可。,32,谢谢！,33,