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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,微生物的遗传,发酵工程菌株的选育,菌种选育的方法,自然筛选,诱变育种,基因重组,自然筛选,样品的采集,葡萄酒酿酒酵母菌样品的采集,葡萄植株,葡萄园的土壤,酿酒(储酒)容器,发酵醪,自然筛选,样品的采集,增殖培养,纯种分离,初选、复选,优选菌株,性能鉴定,微生物培养,Cultivation method,Cultivation method,Cultivation method,Cultivation method,Cultivation method,Cultivation method,10,-3,10,-4,10,-5,10,-6,自然筛选,样品的采集,增殖培养,纯种分离,初选、复选,优选菌株,性能鉴定,抗生素生产菌的筛选,放线菌 霉菌 细菌,菌种选育的方法,自然筛选,诱变育种,基因重组,变异,(variation):,生物体在外因或内因的作用下,遗传物质的结构或数量发生改变。变异的特点:,a.,在群体中以极低的几率出现,(一般为,10,-6,10,-10,);,b.,形状变化的幅度大;,c.,变化后形成的新性状是稳定的,可遗传的。,饰变(,modification,):,指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。,特点是:,a.,几乎整个群体中的每一个个体都发生同样的变化;,b.,性状变化的幅度小;,c.,因遗传物质不变,故饰变是不遗传的。,引起饰变的因素消失后,表型即可恢复。,变 异,突变的特点,不对应性,:突变的性状与突变原因之间无直接的对应关系。,自发性,:突变可以在没有人为诱变因素处理下自发地产生。,稀有性,:突变率低且稳定。,独立性,:各种突变独立发生,不会互相影响。,可诱发性,:诱变剂可提高突变率。,稳定性,:变异性状稳定可遗传。,可逆性,:从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突变(,forward mutation,),,从突变株回到野生型的过程则称为回复突变或回变(,back mutation,或,reverse mutation,)。,基因突变的自发性和不对应性的证明,在各种基因突变中,抗性突变最为常见。但在过去相当长时间内对这种抗性产生的原因争论十分激烈。,一种观点认为,突变是通过适应而发生的,即各种抗性是由其环境(指其中所含的抵抗对象)诱发出来的,突变的原因和突变的性状间是相对应的,并认为这就是“定向变异”,也有人称它为“驯化”或“驯养”。,另一种看法则认为,基因突变是自发的,且与环境是不相对的。由于其中有自发突变、诱发突变、诱变剂与选择条件等多种因素错综在一起,所以难以探究问题的实质。,从,1943,年起,经过几个严密而巧妙的实验设计,主要攻克了检出在接触抗性因子前已产生的自发突变株的难题,终于解决了这场纷争。,变量试验又称波动试验或彷徨试验。,1943,年,,S. E. Luria,和,M. Delbrck,根据统计学原理,设计了左方的实验。,1.,变量试验,fluctuation test,变量试验,,1943,年由美国科学工作者鲁里亚和德尔波留克根据统计学的理论而设计的。,Salvador Luria,Max,Delbr,ck,2.,涂布试验,原理与变量试验相同,方法更为简便,且可计算突变率。,3.,平板影印培养试验,(,replica plating,),1952,年,,J. Lederberg,夫妇的论文,平板影印培养法和细菌突变株的间接选择,,更好地证明了微生物的抗药性是在未接触药物前自发地产生的,这一突变与相应药物环境毫不相干。,平板影印培养法,,是一种能达到在,一系列培养皿,的,相同位置上,出现,相同遗传型菌落,的接种培养方法:把长有许多菌落的母种培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木质圆柱印章上,使其沾上来自平板上的菌落。然后可把这一,“,印章,”,上的菌落一一接种到不同的选择性培养基平板上。待这些平板培养后,对各平板相同位置上的菌落作对比后,就可选出适当的突变型菌株。据报道,用此法可把母平板上,1020%,量的细菌转移到丝绒布上,并可利用这一“印章”接种,8,个子培养皿。因此,通过影印培养法,就可以,从,在非选择性条件下生长的细菌群体中,分离出各种类型的突变。,平板影印培养,法,在根本未接触过任何一点链霉素的情况下,就可以筛选到大量抗链霉素的突变株,充分说明了突变是自发产生的,链霉素只是起到了一种检出作用。,平板影印培养不仅在微生物遗传理论的研究中有重要应用,而且在育种时间和其它研究中均有应用,值得很好地领会。,诱变育种的基本过程,选择选择合适的出发菌株,制备待处理的菌悬液,诱变处理,筛选,保藏和扩大试验,诱变育种,诱变剂(,mutagen,):,凡能提高突变率的任何理化因子。,化学诱变剂,物理诱变剂,诱变育种,物理诱变剂:射线如紫外线、,x-,射线、,-,射线,快中子;,化学诱变剂:化学因子如碱基类似物、,5-,溴尿嘧啶、烷化剂、吖啶类染料等。,紫外诱变,营养缺陷型的筛选,诱变,淘汰野生型,检出缺陷型,确定生长谱,Thank you for your attention,
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