仿制药质量研究与标准建立课件

書式設定,書式設定,第,2,第,3,第,4,第,5,江苏弘惠医药有限公司研发中心,周自桂,仿制药质量研究与标准的建立,仿制药质量研究与标准建立,一、药品质量与质量标准的含义,二、原料药及制剂产品质量标准的建立,三、原料药及制剂产品分析方法的研发,四、原料药及制剂产品分析方法的验证,五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求,一、药品质量与质量标准,1,、药品质量（,drug quality,）：,药品能满足规定要求和需要的特征总和。,药品的质量特征,：,（,1,）有效性,(efficacy),：在规定的适应症、用法和用量的条件下，能满足预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能的要求。,（,2,）安全性（,safety,）：按规定的适应症和用法、用量使用药品后，人体产生毒副反应的程度。,（,3,）稳定性,(stability ),：在规定的条件下保持其有效性和安全性的能力。,（,4,）均一性,(uniformity),：药品的每一单位产品都符合有效性、安全性的规定要求。,（,5,）经济性,(economic property),：药品生产、流通过程形成的价格水平,一、药品质量与质量标准,2,、,药品质量标准,为保证药品质量而对各种检查项目、指标、限度、范围等所做的规定。,药品质量标准是药品的纯度、成分含量、组分、生物有效性、疗效、毒副作用、热原度、无菌度、物理化学性质以及杂质的综合表现。,药品质量标准分为法定标准和企业标准两种。法定标准又分为国家药典、行业标准和地方标准。药品生产一律以药典为准，未收入药典的药品以行业标准为准，未收入行业标准的以地方标准为准。无法定标准和达不到法定标准的药品不准生产、销售和使用。,一、药品质量与质量标准,3,、,质量研究的目的,：,通过对药物理化性质的科学分析和研究，确定药物的定量和定性分析方法，建立科学完善的质量控制体系，保证,药物的质量，确保人民用药安全。,一、药品质量与质量标准,4,、,质量研究的意义,：,对我国的医药科学技术、生产管理、经济效益和社会效益产生良好的影响与促进作用。有利于促进药品国际技术交流和推动进出口贸易的发展与新药的研制密切相关。,二、质量标准的建立,原料药的质量标准,（,1,）品名（中文名、英文名和汉语拼音）,（,2,）有机物的结构式 （,3,）分子式与分子量,（,4,）来源或有机药物的化学名称,（,5,）含量或效价规定（,6,）处方 （,7,）制法,（,8,）,性状,（,9,）,鉴别,（,10,）,检查,（,11,）,含量或效价测定,（,12,）类别,（,13,）规格（,14,）贮藏 （,15,）制剂,原料药的质量标准,原料药的质量研究应在,确证化学结构或组份,的基础上,进行。原料药的一般研究项目包括,性状、鉴别、检查和含量测定,等几个方面。,原料药用于稳定性研究的质量标准,考察项目应选择在原料药保存期间易于发生变化，并可能会影响到药品的质量、安全性与有效性的测试项目，以便客观、全面、灵敏地反映药品质量。,性状,水分,/,干燥失重,含量测定*,有关物质*,晶型（如不是稳定的晶型）,*使用具有稳定性指示能力的方法,Eg,:,原料药质量标准,项目,标准限度,分析方法,结果,性状,目视,鉴别,A IR,B HPLC-RT,C,特定离子,Chp,二部附录,IV C,Met-R003A,Chp,二部附录,III,重金属,Chp,二部附录,VIII H,第二法,干燥失重,Chp,二部附录,VII L,灼炽残渣,Chp,二部附录,VII N,残留溶剂,Met-R003R,有关物质,已知杂质,未知杂质,总杂,Met-R003I,含量测定（,Assay),Met-R003A,粒径分布,Met-R003P,晶型,Met-R003J,Eg,:,原料药稳定性质量标准,项目,标准限度,分析方法,是否测定,性状,目视,Yes,鉴别,A IR,B HPLC-RT,C,特定离子,Chp,二部附录,IV C,Met-R003A,Chp,二部附录,III,No,重金属,Chp,二部附录,VIII H,第二法,No,干燥失重,Chp,二部附录,VII L,Yes,灼炽残渣,Chp,二部附录,VII N,No,残留溶剂,Met-R003R,No,有关物质,已知杂质,未知杂质,总杂,Met-R003I,Yes,含量测定（,Assay),Met-R003A,Yes,粒径分布,Met-R003P,No,晶型,Met-R003J,Yes/ No,原料的质量标准,粒径分布：,水溶性差的原料，并对下列因素有显著影响，需订入质量标准的。,制剂工艺及含量均匀度,溶出速率,生物利用度,药物稳定性及外观,原料的质量标准,粒径分布：,符合下列条件之一，无需订入质量标准,在生产过程中原料药需溶解,制剂为溶液剂型,对药物可生产性、含量均匀度、溶出度以及稳定性不起关键作用,原料的质量标准,多晶形药物：,研究查明是否存在不同晶形？,如存在，有多少种晶形？,结晶形式,无定型形式,溶剂化物或水合物形式,你需要哪种晶型的原料药？,原料的质量标准,多晶型药物：,水溶性差的原料，并对下列药物的质量及行为有显著影响，需订入质量标准与稳定性质量标准。,制剂工艺,溶解度及溶出速率,生物利用度,/,生物等效性,药物稳定性,二、质量标准的建立,制剂产品的质量标准,（,1,）品名（中文名、英文名和汉语拼音）,（,2,）来源及含量规定（,3,）处方 （,4,）制法,（,5,）,性状,（,6,）,鉴别,（,7,）,检查,（,8,）,含量或效价测定,（,9,）类别,（,10,）规格（,14,）贮藏,制剂产品用于稳定性研究的质量标准,考察项目应选择在药品保存期间易于发生变化，并可能会影响到药品的质量、安全性与有效性的测试项目，以便客观、全面、灵敏地反映药品的稳定性。,性状,水分,/,干燥失重,含量测定*,有关物质*,溶出度,/,释放度,*使用具有稳定性指示能力的方法,制剂产品质量标准,Eg,:,制剂产品质量标准,项目,标准限度,分析方法,结果,外观,目视,鉴别,A IR,B HPLC-RT,Chp,二部附录,IV C,Met-T002A,溶出度,Met-T002D,含量均匀度,Met-T002C,水分,Chp,二部附录,VII N,有关物质,已知杂质,未知杂质,总杂,Met-T002I,含量测定（,Assay),Met-T002A,Met-T002A,残留溶剂,用到时订入，不订说明理由,包装和贮存,Eg,:,制剂产品稳定性质量标准,项目,标准限度,分析方法,是否测定,性状,目视,Yes,鉴别,A IR,B HPLC-RT,Chp,二部附录,IV C,Met-T002A,No,溶出度,Met-T002D,Yes,含量均匀度,Met-T002C,No,水分,Chp,二部附录,VII N,Yes,有关物质,已知杂质,未知杂质,总杂,Met-T002I,Yes,含量测定（,Assay),Met-T002A,Met-T002A,Yes,残留溶剂,包装和贮存,二、质量标准的建立,对于手性药物,鉴别：区分另一光学异构体,手性含量测定方法,手性杂质检测方法,含量测定：,手性含量测定方法,或用非手性含量测定方法结合手性杂质检测方法,手性杂质：,定量检测原料药中手性杂质的含量,如手性杂质也是降解产物，定量检测在制剂中的含量,二、质量标准的建立,溶出度或释放度,对于速释药物,如有药典法定标准：方法与限度同标准，并与原研对照药做溶出对比曲线,没有药典法定方法，但有公开发表的原研药溶出度方法，可按发表的限度与方法，并与原研药做溶出对比曲线,没有药典方法，也没有公开发表，按下列条件与原研药进行溶出对比曲线,不同的溶出介质（,pH16.8),，对难溶性药物添加表面活性剂,用转篮法与浆法用不同的转速,基于已有的生物等效性和其他数据来设置溶出度质量标准,二、质量标准的建立,溶出度或释放度,对于缓控释制剂,对于缓释制剂，设置多点溶出限度,对于延迟释放制剂，设置多点溶出限度,二、质量标准的建立,可接受标准,含量,原料药：,EP,：,99.0101.0%,；,USP,：,98.0102.0%,自拟：,99.0101.0%,制剂成品：,90.0110.0%,95.0105.0%,93.0107.0%,二、质量标准的建立,可接受标准,残留溶剂,原料药：,合成路线中各步反应及纯化用到的溶剂；,挥发性起始原料及试剂,最后一步原料药重结晶用到的溶剂,制剂成品：,生产过程中用到的溶剂,基于原料药,/,辅料报告进行计算，产品应符合残留溶剂限度标准,二、质量标准的建立,可接受标准,第一类溶剂：禁用,第二类溶剂：应限量，其限度见药典附录,VIII P,第,63,页,第三类溶剂：对人类潜在毒性较低，如仅有第三类溶剂，可用干燥失重法测定不得过,0.5%,。,设置第二类的限度有两种选择：,法一：按药典附录,63,页表格中的限度；,法二：药物所含的每个成分的残留溶剂相加，其每天的摄入总量应小于可允许的日摄入量（,PDE,）,二、质量标准的建立,可接受标准,例：法一或法二,乙腈：,PDE=4.1mg/,天,法一限度：,410ppm,不合格；,法二：,3.64mg/,天,4.1mg/,天，合格,组分,用量,乙腈含量,日摄入量,主药,0.3g,800ppm,0.24mg,辅料,1,0.9,400ppm,0.36mg,辅料,2,3.8,800ppm,3.04mg,成品,5.0,728ppm,3.64mg,二、质量标准的建立,可接受标准,原料药的,有关物质,从原料药合成产生的：,未反应完全的起始原料、试剂及混入的杂质,反应中间体、副产物,立体异构体、手性对映体（原料药为单一光学活性）,降解产物：,原料药生产过程中降解产生,强力降解试验：高温、光照、氧化、酸,/,碱水解,原料药贮存过程中（稳定性考察期间）产生,二、质量标准的建立,可接受标准,原料药的,有关物质,对于仿制药：,可与原研药进行杂质谱对比,对药典或文献所列的杂质进行评估,供应商提供的质量标准,ICH Q3A,（,R,）及化学药物杂质指导原则,二、质量标准的建立,可接受标准,制剂的,有关物质,/,降解产物,降解产物由原料药生产及贮存过程中产生,降解产物由制剂生产过程中产生,强力降解试验：高温、高湿、光照、氧化、酸,/,碱水解,制剂贮存过程中（稳定性考察期间）产生,*不包括原料药合成的工艺杂质（如果不是降解产物）,二、质量标准的建立,可接受标准,制剂的,有关物质,/,降解产物,对于仿制药：,可与原研药进行杂质谱对比,对药典或文献所列的杂质进行评估,ICH Q3B,（,R,）及化学药物杂质指导原则,二、质量标准的建立,可接受标准,原料药,最大日剂量,报告限度,鉴定限度,质控限度,2g,0.05%,0.10%,或,1mg,（取最小值）,0.15%,或,1.0mg,（取最小值,),2g,0.03%,0.05%,0.05%,二、质量标准的建立,可接受标准,例：,*,注：报告时，,1.0,保留,1,位小数,日剂量,限度,实测值（,%,）,报告值（,%,）,日服杂质量,(mg),鉴别限是否超,质控限是否超,0.5g,鉴别限,=?,0.0963,0.10,0.5,质控限,=?,0.044,0.2,0.12,0.12,0.6,0.1649,0.16,0.8,1.2g,鉴别限,=?,0.044,0.5,质控限,=?,0.0886,0.09,1.1,0.114,0.11,1.3,二、质量标准的建立,可接受标准,例：,*,注：报告时，,1.0,保留,1,位小数,日剂量,限度,实测值（,%,）,报告值（,%,）,日服杂质量,(mg),鉴别限是否超,质控限,是否超,0.5g,鉴别限,=0.1%,0.0963,0.10,0.5,质控限,=0.15%,0.044,0.2,0.12,0.12,0.6,+,0.1649,0.16,0.8,+,+,1.2g,鉴别限,=1.0mg,0.044,0.5,质控限,=1.0mg,0.0886,0.09,1.1,+,+,0.114,0.11,1.3,+,+,制定药典收载原料药的杂质标准,名称,ICH Q3A,（,%,）,药典限度,%,制定限度,%,依据,杂质,A,？,NMT0.15,？,杂质,B,？,？,杂质,C,？,NMT0.15,？,杂质,D,？,NMT0.15,？,杂质,E,？,？,杂质,G,？,NMT0.15,？,杂质,H,？,NMT0.15,？,最大单杂,？,0.1,？,总杂,NMT0.75,？,最大日剂量：,80mg/,天，鉴别限,=0.10%,质控限,=0.15%,制定药典收载原料药的杂质标准,名称,ICH Q3A(%),药典限度,%,制定限度,%,依据,杂质,A,0.15,NMT0.15,0.15,USP/ICHQ3A,杂质,B,0.15,0.15,ICHQ3A,杂质,C,0.15,NMT0.15,0.15,USP/ICHQ3A,杂质,D,0.15,NMT0.15,0.15,USP/ICHQ3A,杂质,E,0.15,0.15,ICHQ3A,杂质,G,0.15,NMT0.15,0.15,USP/ICHQ3A,杂质,H,0.15,NMT0.15,0.15,USP/ICHQ3A,最大单杂,0.10,0.1,0.10,ICHQ3A,总杂,NMT0.75,0.75,USP/,最大日剂量：,80mg/,天，鉴别限,=0.10%,质控限,=0.15%,二、质量标准的建立,可接受标准,制剂,二、质量标准的建立,可接受标准,例：,日剂量,限度,实测值（,%,）,报告值（,%,）,日服杂质量,(mg),鉴别限是否超,质控限是否超,1.9g,报告限,=?,0.044,0.84=1,鉴别限,=?,0.079,0.08,1.52=2,质控限,=?,0.183,0.18,3.42=3,0.192,0.19,3.61=4,二、质量标准的建立,可接受标准,例：鉴别限,=2mg(1.9*0.2%=3.8mg2mg),；,3mg),；,0.15%,日剂量,限度,实测值（,%,）,报告值（,%,）,日服杂质量,(mg),鉴别限是否超,质控限是否超,1.9g,报告限,=0.05%,0.044,0.84=1,鉴别限,=2mg,0.079,0.08,1.52=2,质控限,=3mg,0.183,0.18,3.42=3,+,0.192,0.19,3.61=4,+,+,制定药典收载制剂的杂质标准,名称,ICH Q3B,（,%,）,药典限度,%,制定限度,%,依据,杂质,A,？,NMT0.2,杂质,B,？,NMT0.25,杂质,C,？,NMT0.25,杂质,E,？,NMT0.1,最大单杂,？,NMT0.2,总杂,NMT0.8,最大日剂量：,80mg/,天，,报告限,=,？ 鉴别限,=,？ 质控限,=,？,制定药典收载制剂的杂质标准,名称,ICH Q3B,（,%,）,药典限度,%,制定限度,%,依据,杂质,A,0.25,NMT0.2,0.2,USP,杂质,B,0.25,NMT0.25,0.25,USP/ICHQ3B,杂质,C,0.25,NMT0.25,0.25,USP/ICHQ3B,杂质,E,0.25,NMT0.1,0.1,USP,最大单杂,0.2,NMT0.2,0.2,USP/ICHQ3B,总杂,NMT0.8,0.8,USP,最大日剂量：,80mg/,天，,报告限,=0.1%;,鉴别限,=0.2%;,质控限,=0.25%,二、质量标准的建立,可接受标准,原料药的残留溶剂,名称,类别,ICH,限度,测定结果,标准限度,四氢呋喃,二类,720ppm,350ppm,720ppm,甲苯,二类,890ppm,LOQ,LOQ=50ppm,500ppm,DMF,二类,880ppm,480ppm,880ppm,乙醚,二类,5000ppm,590ppm,3000ppm,三,、原料药及制剂分析方法的研发,原料药的分析方法,含量测定,有关物质,残留溶剂,粒径分布,多晶体,无机离子等,三,、原料药及制剂分析方法的研发,制剂产品分析方法,含量测定,含量均匀度,有关物质,/,降解产物,溶出度,/,释放度,三,、原料药及制剂分析方法的研发,含量测定、杂质及残留溶剂分析方法,使用药典专论方法,原料药厂家提供的试验方法,文献报导的方法,内部研制的方法,三,、原料药及制剂分析方法的研发,分析方法的基本要求,原理及应用范围,仪器设备,试剂，化学品及对照品,溶液制备,详细操作程序，包括仪器参数的设置（流速、温度、运行时间、波长等,系统适用性试验及接受标准（拖尾因子、理论板数、分离度、,RSD,及,RRT,等）,进样序列（空白,系统适用性溶液,对照,样品）,计算公式,结果报告,附典型图谱,三,、原料药及制剂分析方法的研发,高效液相色谱含量测定及杂质分析方法,仪器设备,色谱柱的选择：,C18,、,C8,、,Phenly,、,CN,、,Chiral,等,洗脱模式：等度、梯度,流动相组成及比例：乙腈,/,甲醇：水,/,缓冲液,是否用缓冲液或离子对试剂：极性太大，,5%,甲醇,-,水也很快出峰，且具有酸、碱性的化合物可考虑使用，同时视出峰情况选择不同的,C,链,缓冲剂、缓冲液,pH,、缓冲能力及离子强度的选择：,酸性化合物的,pKa,值：,pH ,pKa,，离子形式存在，,t,R,小,pH =,pKa,，分子离子共存，出,2,个峰或裂峰,缓冲能力：磷酸盐,pH3,时最强，浓度尽可能小（,0.05M/0.01M),三,、原料药及制剂分析方法的研发,高效液相色谱含量测定及杂质分析方法,检测器及检测波长的选择：,含量：辅料无干扰，选,max,有关物质：,PDA,检测器，记录所有杂质,UV,图，再确定检测波长,流速、进样体积、柱温（一般高于环境温度,5,）,样品溶剂的选择：不得破坏样品,样品溶液的制备：,三,、原料药及制剂分析方法的研发,HPLC,含量测定方法适用于常规放行及稳定性研究,原料药应完全溶解或被溶剂完全萃取：,原料药峰应与杂质（包括降解产物）峰完全分离,原料药峰应是纯峰,原料药峰的响应值应在检测器线性范围内,尽可能选择原料药的,max,为检测波长,原料药峰保留时间通常控制在,10min,内,低成本、易操作、使用便捷,*,进行强力破坏试验来表明含量测定方法可用于稳定性考察样品的测试,三,、原料药及制剂分析方法的研发,HPLC,杂质分析方法适用于常规放行及稳定性研究,原料药及所含杂质应完全溶解或被溶剂完全萃取,原料药峰保留时间通常控制在,10min,左右,所有杂质（包括降解产物）应完全从色谱柱中洗脱,任何杂质峰应与溶剂峰分离,所有杂质峰之间应有一定的分离度并与原料药主峰完全分离（无任何杂质,/,降解产物的峰与主峰重叠）,所选,波长应能检测所有已知杂质和未知杂质包括降解产物,应有足够的灵敏度能对,报告限的所有杂质检测并定量,低成本、易操作、使用便捷,*,进行强力破坏试验来表明含量测定方法可用于稳定性考察样品的测试,四,、原料药及制剂分析方法的验证,方法验证：是论证分析方法适用于拟定用途的过程,化学药物质量控制分析方法验证的技术指导原则,药典二部附录,XIX A,药品质量分析方法验证指导原则,四,、原料药及制剂分析方法的验证,方法验证：是论证分析方法适用于拟定用途的过程，包括：,已有药典专论方法的，可进行方法确认，主要包括,系统适用性、方法重现性、溶液稳定性及专属性,方法全验证,药典论坛方法或其它药典专论方法,原料供应商提供的方法,内部研制的分析方法,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,系统适用性,/,精密度,专属性,线性,方法准确性,方法精密度,中间精密度,耐用性,范围,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,系统适用性,/,精密度,系统适用性溶液,1,针，评价：拖尾因子,T,、理论板数,N,、分离度,R,对照品溶液（,5,针），评价,RSD,：一般原料,1.0%,，制剂,2.0%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,专属性,空白溶剂、辅料溶液,原料药,/,制剂中掺入杂质,强力降解试验,溶液：热、酸及碱水解、氧化、光照,固态：高温、光照、高湿,评价,（,1,）,主峰不受溶剂、辅料及任何杂质的干扰；（,2,）主峰纯度合格,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,线性,对照品溶液（,56,个浓度）：一般,主成分含量测定：以测定浓度为,100%,，,50%150%,之间选取,5,个点即可。,溶出（释放）度测定：以释放量的,10%,120%,间选取,5,个点即可,线性回归方程,接受标准：,（,1,）,相关系数：,R,2,不得低于,0.998,（,2,）报告,Y,轴截距与斜率,（,3,）附线性方程与线性图,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,方法准确性,辅料混合物与对照品混合：三个水平（,50%,、,100%,、,150%,）,9,个样品,接受标准：,（,1,）,回收率：,98.0102.0%,（,2,）,RSD,：,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,方法精密度,100%,水平,6,个样品：,接受标准：,（,1,）,RSD,：原料,1.0%,；制剂,2.0%,仪器精密度,同一溶液连续进样,6,次：,接受标准：,（,1,）,RSD,：,2.0%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,中间精密度,由第二个分析人员在不同天，用不同的仪器及不同批号的柱子重复方法精密度试验：,接受标准：,（,1,）,RSD,：原料,1.0%,；制剂,2.0%,（,2,）两人结果偏差：原料,1.0%,；制剂,2.0%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,耐用性,HPLC,系统参数的变化：,流动相比例：,10%,缓冲盐,pH,：,0.2,流速：,0.2ml/min,柱温,: 5,样品制备参数的变化：,振摇,/,超声时间：,5min,萃取溶剂的比例：,10%,样品过滤的影响：,1,、,2,、,3,、,4,、,5ml,对照品及样品溶液的稳定性,: 0,、,12,、,24,、,48h,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,含量测定方法全验证,范围,指测试方法适用的高低限浓度区间，并能达到一定的精密度、准确度和线性,根据线性、准确度、精密度的验证结果确定：,一般要求：,（,1,）,含量测定：,80120%,（,2,）含量均匀度：,70130%,（,3,）溶出度：限度的,20%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,系统适用性,/,精密度,专属性,线性,检测限（,LOD,）,定量限（,LOQ,）,方法准确性,方法精密度,中间精密度,耐用性,范围,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,系统适用性,/,精密度,系统适用性溶液,1,针：,在,100,浓度的主成分溶液中加入,1%,浓度的杂质对照品，以模拟样品中有可能存在的状态,评价：拖尾因子,T,1,.5,、理论板数,N,2,000,、分离度,R,1,.5,对照品混合溶液（,6,针），评价,RSD,：每个成分均,5.0%,质量标准中的系统适用性试验如何拟定,柱效,2500,即可，没必要更高，否则作茧自缚。,采用杂质对照品验证分离度，如该杂质仅用于定位、则无需纯度很高；该杂质的选择一者可为目标降解物，分离度要求根据研究时的具体情况拟定；二者选用与主成分峰最难分离杂质。,采用强破坏试验验证，通过对比破坏前产生的杂质峰与主成分峰的分离情况。,如：国家药品标准,WS1-(X-350)-2004Z,注射用奥美拉唑钠的质量标准中规定：取供试品溶液，加,3%,过氧化氢溶液,3ml,，放置,10,分钟后，再加流动相稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性验证用溶液。色谱图中与主成分峰相邻的氧化降解产物峰与主成分峰的分离度应符合规定,典 型 图 谱 分 析,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,专属性,空白溶剂、辅料、每个杂质,原料药,/,制剂中掺入杂质,强力降解试验,溶液：热、酸及碱水解、氧化、光照,固态：高温、光照、高湿,评价,（,1,）,所有杂质能被检测并能互相分离，而且也能与溶剂、辅料以及主峰分离；,（,2,）主峰纯度合格,（,3,）质量平衡评估（将破坏溶液进一步稀释测定含量，平衡,=,有关物质,+,含量，,95%,）,（,4,）稳定性、降解途径及色谱图,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,线性,对照品混合溶液（,56,个浓度）：一般,LOQ 150%,）,每个成分的线性回归方程,每个成分接受标准：,（,1,）,相关系数：,R,2,不得低于,0.99,（,2,）报告,Y,轴截距与斜率,（,3,）附线性方程与线性图,四,、原料药及制剂,分,析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,检测限（,LOD,）：试样中被测物能可靠的被检测出的最低浓度,在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音,接受标准：,（,1,）,信噪比：,3,：,1,或,2,：,1,注：,信噪比的三倍,纯属“纸上谈兵”，实际测定中根本用不上。,是相对值，不是绝对值。是相对于供试品溶液浓度的多少分之一而言，一般至少要在,5000,倍以上,(1),最大进样量,(2),有关物质测定,供试品溶液浓度、,(3),含量测定浓度,(4),有关物质测定,自身稀释对照溶液,浓度,(5),最低检出限,五者间的,比例关系,浓,度,进样量,绝对量,相当于供试品,溶液浓度的,倍数关系,最大进样量,0.3mg/ml,10l,有关物质供试品溶液浓度,0.1mg/ml,10l,1g,100%,10000,倍,含量测定浓度,10g/ml,10l,10%,1000,倍,有关物质自身稀释对照溶液浓度,1.0g/ml,10l,10ng,1.0%,100,倍,最低检出限,10ng/ml,10l,0.1ng,0.01%,“,基准点,”,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,定量限（,LOQ,）：试样中被测物被定量测定的最低浓度，其结果应具有一定的准确度,在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音,线性试验的最低浓度，对照品混合液,6,针,接受标准：,（,1,）,信噪比：,10,：,1,（,2,）每个成分的,RSD10%,四,、原料药及制剂发析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,方法准确性,原料药,/,制剂中掺入杂质对照品：三个水平（,LOQ,、,100%,、,150%,）,9,个样品,接受标准：,（,1,）每个杂质,回收率：,80120%,（,2,）,RSD,：,四,、原料药及制剂发析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,方法精密度,按照方法测试,6,个样品（原料,/,制剂）或,原料,/,制剂中掺入杂质对照品（,6,100%,）,接受标准：,（,1,）,总杂质的,RSD,：,10%,（,2,）或每个杂质回收率的,RSD,： ,10%,四,、原料药及制剂发析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,中间精密度,由第二个分析人员在不同天，用不同的仪器及不同批号的柱子重复方法精密度试验：,接受标准：,（,1,）总杂的,RSD,：,10%,（,2,）或每个杂质回收率的,RSD,： ,10%,（,3,）两人结果偏差及类似的杂质谱： ,15%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,耐用性,HPLC,系统参数的变化：,流动相比例：,10%,缓冲盐,pH,：,0.2,流速：,0.2ml/min,柱温,: 5,接受标准：,符合系统适用性限度,样品制备参数的变化：,振摇,/,超声时间：,5min,萃取溶剂的比例：,10%,样品过滤的影响：,1,、,2,、,3,、,4,、,5ml,对照品及样品溶液的稳定性,: 0,、,12,、,24,、,48h,接受标准：,样品溶液总杂偏差,：,15%,对照品溶液每个杂质偏差： ,10%,类似的杂质谱,四,、原料药及制剂分析方法的验证,HPLC,杂质分析方法验证,范围,指测试方法适用的高低限浓度区间，并能达到一定的精密度、准确度和线性,根据线性、准确度、精密度的验证结果确定：,一般要求：,LOQ,150%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,系统适用性,/,精密度,专属性,线性,检测限（,LOD,）,定量限（,LOQ,）,方法准确性,方法精密度,中间精密度,耐用性,范围,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,系统适用性,/,精密度,系统适用性溶液,1,针，评价：拖尾因子,T,1,.5,、理论板数,N,2,000,、分离度,R,1,.5,对照品混合溶液（,6,针），评价,RSD,：每个溶剂均,5.0%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,专属性,空白溶剂,每个残留溶剂定位,残留溶剂对照品混合溶液,原料,/,制剂溶液,原料,/,制剂中掺入残留溶剂,评价,（,1,）,所有残留溶剂能被检测到并能很好的互相分离；,（,2,）也能与溶剂及其杂质很好分离,（,3,）每个色谱图,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,线性,对照品混合溶液（,56,个浓度）：一般,LOQ 150%,）,每个溶剂的线性回归方程,每个溶剂接受标准：,（,1,）,相关系数：,R,2,不得低于,0.99,（,2,）报告,Y,轴截距与斜率,（,3,）附线性方程与线性图,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,检测限（,LOD,）：试样中被测物能可靠的被检测出的最低浓度,在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音,接受标准：,（,1,）,信噪比：,3,：,1,或,2,：,1,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,定量限（,LOQ,）：试样中被测物被定量测定的最低浓度，其结果应具有一定的准确度,在低浓度被测物的色谱图上比较其响应信号与仪器噪音,线性试验的最低浓度，对照品混合液,6,针,接受标准：,（,1,）,信噪比：,10,：,1,（,2,）每个溶剂的,RSD10%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,方法准确性,原料药,/,制剂中掺入残留溶剂：三个水平（,LOQ,、,100%,、,150%,）,9,个样品,接受标准：,（,1,）每个溶剂,回收率：,80120%,（,2,）,RSD,：,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,方法精密度,原料,/,制剂中掺入残留溶剂对照品（,6,100%,）,原料,/,制剂样品作为空白,接受标准：,（,1,）,每个溶剂回收率的,RSD,： ,10%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,中间精密度,由第二个分析人员在不同天，用不同的仪器及不同批号的柱子重复方法精密度试验：,接受标准：,（,1,）,每个溶剂回收率的,RSD,： ,10%,（,3,）两人结果偏差及类似的溶剂谱： ,15%,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,耐用性,GC,系统参数的变化：,流速：,0.5ml/min,初始温度,: 5,温度梯度速率：,5/min,接受标准：,符合系统适用性限度,样品制备参数的变化：,振摇平衡时间：,5min,平衡温度：,5,对照品及样品溶液的稳定性,: 0,、,12,、,24,、,48h,接受标准：,偏差,：,15%,类似的溶剂谱,四,、原料药及制剂分析方法的验证,GC,残留溶剂方法验证,范围,指测试方法适用的高低限浓度区间，并能达到一定的精密度、准确度和线性,根据线性、准确度、精密度的验证结果确定：,一般要求：,LOQ,150%,残留溶剂,研究思路,研究原则：,合成过程中使用到的有机溶剂均需建立测定方法、并予以研究测定。,观测样品测定结果：,申报,3,批样品测定结果说明工艺稳定性。,质量标准,拟定原则：,除第一类溶剂外、,“未检出的溶剂”,可以不拟定，仅拟定最后一步重结晶溶剂。,测定方法,：,根据研究检测结果，质量标准方法完全可以与研究时方法不同。,残留溶剂,研究思路,质量标准,拟定原则：,如仅残留有重结晶溶剂、且为低沸点（如乙醇、丙酮等），完全可采用,105,干燥失重方法予以替代。从而省略掉气相测定，且干燥失重限度可酌情放宽。,质量标准是一个不断完善的过程：,气相色谱法测定时应注意事项,将对照品溶液浓度配制为限度点。,对于二氯甲烷、三氯甲烷采用氢火焰检测器,(FID),勉为其难、应采用电子捕获检测器,(ECD),。如要强行检测，可采用的办法有：直接进样、加大流速，使峰形更尖锐、从而提高峰面积积分精密度。,供试品溶液一定要全部溶解。,对于一些高沸点和低沸点的残留溶剂，不推荐采用顶空法进样！,尽可能建立内标法、而非外标法。,色谱柱的选择一定要遵循“极性相似”原理。,直接法进样样品溶液后，进样针极易堵塞。自动进样器时设定几针溶剂，冲洗时多洗几次。试验结束后用乙醇浸泡进样针,五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求,一级标准品,如果药典标准品（或其它官方认可的来源）已有市售,使用药典标准品的现行批次作为一级标准品,提供所使用的药典标准品的批号,使用药典标准品，标定工作对照品（二级标准品）,贮存条件：,按标签上的贮存条件保存,五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求,一级标准品,如果药典标准品（或其它官方认可的来源）未市售,选择具高纯度的原料来建立一级标准品，并提供其来源、批号,进行完整的结构鉴别鉴定：包括,IR,、,UV,、,MS,、氢谱,/,碳谱及其光谱解析和元素分析等以确保其结果的准确性及含量与纯度,建立标准品的质量标准,按质量标准项目要求，进行完整的分析检验，包括性状、理化性质及纯度检测等,五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求,二级标准品（工作对照品）,使用药典标准品，标定工作对照品,选择一批原料作为工作对照品，并提供其来源、批号,建立工作对照品的质量标准,按质量标准所列项目要求，进行完整的分析检验，（鉴别及含量项目测试与药典标准品作对比）,审核、批准、放行工作对照品的分析报告单,五、标准品、工作对照品及杂质对照品的要求,杂质对照品,使用药典杂质标准品，标定内部杂质对照品,使用其它官方认可来源的化学品作为杂质对照品,通过红外、紫外、核磁共振、质谱等，鉴别杂质对照品的化学结构,来源、批号及纯度,建立杂质对照品的质量标准,杂质对照品的分析报告单,Thank You!,谢谢大家！,