PCR实验室基本设置要求课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,PCR,实验室基本设置要求,张 琼,PCR实验室基本设置要求张 琼,1,主要内容,一、,实验室生物安全,二、PCR实验室布局设置,主要内容一、实验室生物安全,2,严重生物安全事故案例,2003,年,9,月新加坡实验室人员感染,SARS,病毒,2003,年,9,月台湾实验室人员感染,SARS,病毒,2004,年,4,月我国国家,CDC,的,SARS,实验室研究生感染,SARS,病毒并传染给别人,严重生物安全事故案例2003年9月新加坡实验室人员感染SAR,3,实验室生物安全法规,2003,年,12,月,实验室生物安全通用要求,通过了专家审定，并很快申报国家标准,2003,年,SARS,期间，有关部门制订了,传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法,2004,年,11,月,12,日我国发布了,病原微生物实验室生物安全管理条例,实验室生物安全法规2003年12月实验室生物安全通用要求,4,一、,实验室生物安全,生物危险度的分级,生物安全实验室分级,生物安全柜分级,一、实验室生物安全生物危险度的分级,5,1.,生物危险（,risk,）的分级,I,级：个体和群体低危险,II,级：中等个体危险，有限群体危险,III级：高个体危险，低群体危险,IV,级：高度的个体和群体危险,1.生物危险（risk）的分级I 级：个体和群体低危险,6,第一级,：不引起健康成年人疾病,第二级,：可通过,破损皮肤、消化道及粘膜暴露,等方式引起人类疾病,第三级,：本土或外来的微生物，通过,吸入途径,暴露时可以造成严重或潜在致死性疾病,第四级,：可以引起,严重且威胁生命,的人类疾病，可通过,气溶胶,传播，或相关的传播危险性不明的微生物,生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为,四,个生物安全防护级别,美国,CDC,对,微生物,指导性,分级,第一级：不引起健康成年人疾病美国CDC对微生物指导性分级,7,我国对,病原微生物,的分类,第一类,：,能够引起人类或者动物,非常严重疾病,的微生物，以及我国,尚未发现,或者,已经宣布消灭,的微生物,第二类,：,能够引起人类或者动物,严重疾病,，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物,第三类,：,能够引起人类或者动物,疾病,；不构成严重危害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施,第四类,：,通常情况下,不会引起人类或者动物疾病,的微生物,第一类和第二类病原微生物统称为,高致病性病原微生物,我国对病原微生物的分类第一类：能够引起人类或者动物非常严重疾,8,2.,生物安全,实验室分级,生物安全,是,防范处理,微生物,及其,毒素,对人体危害的综合性措施,危害的来源：,对医学,实验室,主要是标本,2.生物安全实验室分级生物安全是防范处理微生物及其毒素对人体,9,实验室生物安全防护,实验室工作人员所处理的实验对象含有,致病的微生物,及其,毒素,时，通过在,实验室设计建造,、使用,个体防护,装置、严格遵从标准化的工作及,操作程序和规程,等方面采取,综合措施,，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染,实验室生物安全防护实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微,10,实验室生物安全防护分级,一级生物安全防护实验室，,简称BSL1或P1,二级生物安全防护实验室，,简称BSL2或P2,三级生物安全防护实验室，,简称BSL3或P3,四级生物安全防护实验室，,简称BSL4或P4,一级最低，四级最高,实验室生物安全防护分级一级生物安全防护实验室，简称BSL1或,11,典型的一级生物安全水平实验室,（图片由,CUH2A,，,Princeton,，,NJ,，,USA,提供）,典型的一级生物安全水平实验室,12,典型的二级生物安全水平实验室（图片由,CUH2A,，,Princeton,，,NJ,，,USA,提供）。,在生物安全柜中进行可能发生气溶胶的操作程序。门保持关闭并贴上适当的危险标志。潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。,典型的二级生物安全水平实验室（图片由CUH2A ，Princ,13,BIOHAZARD,生物危害标识,BIOHAZARD,14,PCR实验室基本设置要求课件,15,典型的三级生物安全水平实验室（图片由,CUH2A,，,Princeton,，,NJ,，,USA,提供）。,实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的基础实验室）或气锁室进入。处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭菌以清除污染。应有非手控的水槽。形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在生物安全柜中进行。,典型的三级生物安全水平实验室（图片由CUH2A ，Princ,16,四级生物安全水平实验室,在加拿大仅有一个,4,级实验室,(,Canadian Centre for Human and Animal Health,in Winnipeg, Man.),设计要求非常苛刻，要把工作人员完全与感染物质隔离开,四级生物安全水平实验室在加拿大仅有一个4级实验室(Cana,17,3.生物安全柜,3.生物安全柜,18,生物安全柜,（,biosafety cabinet,）,是处理危险性微生物时所用的箱型空气净化安全装置,3.,生物安全柜,分级,生物安全柜（biosafety cabinet）是处理危险性,19,PCR实验室基本设置要求课件,20,I,级生物安全柜,（,class I biosafety cabinet,）,至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，外部空气由操作窗,吸进,，而不可能由操作窗口,逸出；,100%由密接排气导管排到室外 （,类似于通风厨,）,工作状态时保证,工作人员,不受侵害，但不保证,实验对象,不受污染,。,现已很少使用,I级生物安全柜（class I biosafety cab,21,I,II,III,IIIIII,22,至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸进，而不可能由操作窗口逸出,工作状态下遵守操作规程时既保证,工作人员,不受侵害，又保证,实验对象,及,环境,不受污染,级生物安全柜,（,class biosafety cabinet,）,至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高,23,I,II,III,IIIIII,24,II,级生物安全柜根据结构以及气流分配不同主要是外排气流不同分为：,A1,型,:,（,0.38m/s,，,30%,排在室内 ）,A2,型,:,（,0.5m/s,，,30%,外排，原,B3,型,）,B1,型,:,（,0.5m/s,，,70%,接管道外排）,B2,型,:,（,0.5m/s,，,100%,接管道外排）,PCR实验室基本设置要求课件,25,级生物安全柜,（,class biosafety cabinet,）,至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。正面上部为观察窗，下部,手套箱式操作口,箱内对外界保持负压,可确保人体与柜内物品完全隔绝,级生物安全柜（class biosafety cab,26,I,II,III,IIIIII,27,隔离器,隔离器,28,美国国立卫生研究所,美国疾病控制中心,病 源,操 作,一级屏障,二级屏障,P1,BSL,-,1,不会经常引发健康成人疾病,标准的微生物操作,不要求,开放实验台、洗手池,P2,BSL,-,2,人类病源菌，因皮肤伤口、吸入、黏膜曝露而发生危险,BSL1,操作外加：,1,、限制进入,2,、有生物危险警告标志,3,、“锐器”安全措施,4,、生物安全手册，其中规定废物消毒和医疗观察,1,级、,2,级生物安全柜实验服、手套、若需要则采取面部保护措施,BSL-1,外加：高压灭菌锅,P3,BSL,-,3,内源性和外源性病源，可通过气溶胶传播，能导致严重后果或生命危险,BSL-3 BSL-2,操作外加：,1,、控制进入,2,、所有废物消毒,3,、洗涤前，实验服消毒,4,、有基础血清,1,级、,2,级生物安全柜保护性实验服、手套、若需要则采取呼吸保护措施,BSL-2,外加：,1,、和进入走廊隔开,2,、双门进入，门自动关闭,3,、排出的空气不循环,4,、实验室内负压,P4,BSL,-,4,对生命有高度危险的危险性病源或外源性病源：致命、通过气溶胶而致实验室感染：或未知传播风险的有关病源,BSL3,操作外加：,1,、进入前换衣服,2,、出实验室前淋浴,3,、带出设施的所有材料消毒,3,级生物安全柜或,1,级、,2,级生物安全柜加全身的、供应空气的正压防护服,BSL3,外加：,1,、单独建筑或隔离区域,2,、有供气系统、排气系统、真空系统、消毒系统,3,、其他有关要,美国国立卫生研究所美国疾病控制中心病 源操 作一级屏障二级屏,29,二、PCR实验室布局设置,生物安全二级实验室,生物安全二级实验室,30,目的,保护操作人员,保护环境,保护样品,目的保护操作人员保护环境保护样品,31,PCR实验室,平面设计,在入口处设,缓冲间缓冲间比专用走廊更有意义。,PCR实验室平面设计在入口处设缓冲间缓冲间比专用走廊更有,32,PCR实验室基本设置要求课件,33,有问题！,有问题！,34,临床,PCR,实验室工作流程,试剂储存和准备,标本制备区,扩增区,产物分析区,临床PCR实验室工作流程试剂储存和准备标本制备区扩增区,35,PCR实验室基本设置要求课件,36,PCR实验室基本设置要求课件,37,PCR实验室基本设置要求课件,38,PCR实验室基本设置要求课件,39,PCR实验室基本设置要求课件,40,PCR实验室基本设置要求课件,41,PCR,实验室各区的设备配置表,分区,器材选配,PCR,试剂区,PCR,制备区,PCR,扩增区,PCR,分析区,PCR仪器,生物安全柜,加热模块、离心机,产物分析仪,冰箱、混匀器,移液器,可移动紫外车,办公用品、耗材,PCR实验室各区的设备配置表,42,PCR实验室基本设置要求课件,43,建筑结构,阴角,均采用,圆弧线条密封,建筑结构阴角 均采用圆弧线条密封,44,洗手池,洗手池,45,谢谢！,谢谢！,46,