血栓与止血检验的基本方法---课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,ppt课件,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,第十三章,血栓与止血检验基本方法,P367,1,ppt课件,第十三章 P3671ppt课件,教学要求,1.,掌握,PT,时间、,APTT,、,3P,试验、,FDPs,、血浆,D-,二聚,体等试验的检测的原理及临床意义、正常吸附血,浆、正常血清所含的凝血因子、过敏性紫癜、,ITP,、,DIC,、,Even,综合征的概念及临床表现，过敏性紫,癜的主要过敏原、,ITP,的诊断标准，血友病诊断和,分型。,2.,熟悉各型血友病及血管性血友病因子检测的意义、,血栓与止血筛选试验的应用，过敏性紫癜、,ITP,、,血友病、,DIC,、,Even,综合征的实验室检查。,3.,了解血小板检测、抗凝血酶检测、血浆纤溶活性,检测和血栓前状态检测的意义、其他凝血障碍性,疾病的检验。,血液检验,2,ppt课件,教学要求 血,血液检验,第一节 血栓与止血的筛选试验,一、一期止血缺陷的筛选试验,临床上常作的试验：主要有,出血时间,（,bleeding time,，,BT,）、,血小板计数,（,platelet count,，,PLT,）和,血块收缩试验,（,clot retraction test,，,CRT,）。,3,ppt课件,血液检验第一节 血栓与止血的筛选试验3ppt课件,血液检验,二、二期止血缺陷的筛选试验,主要涉及凝血因子和抗凝血物质的异常，用于凝血与抗凝血功能筛查的试验较多，常用的有：,凝血酶原时间,（,prothrombin time,，,PT,）、,活化部分凝血活酶时间,（,activated partial thromboplastin time,，,APTT,）、,试管法凝血时间,（,clotting time,，,CT,）。,4,ppt课件,血液检验二、二期止血缺陷的筛选试验4ppt课件,(,一,),血浆凝血酶原时间测定（,PT,）,1.,原理,在受检血浆中加入足量组织凝血活酶（即,TF,）浸出液和和适量,Ca,2+,离子后，血浆凝固所需的时间称为血浆,PT,。,血液检验,5,ppt课件,(一)血浆凝血酶原时间测定（PT）血液检验5ppt课件,2.,参考值,(1),平均为,12s1s,男性：,11s,13.7s,；,女性：,11s,14.3s,，超过对照,3s,以下为异,常。,(2)PT,时间比值（,PTR,）,=,被检血浆,PT,（,s,）,/,正,常参比血浆,PT,（,s,），宜用多份正常血浆,PT,的几何均数参考值为,1.000.15,(3),国际标准化比值,(INR)=PTR,S,参考值因国际敏感度指数,S,而异。,血液检验,6,ppt课件,2.参考值血液检验6ppt课件,INR,：,需先求得所用组织凝血活酶的国际敏感度指数,S,，是所用组织凝血活酶与已知参比品相比较的一个参数。是用多份凝血因子水平不同的血浆（包括正常人和口服抗凝剂患者的血浆），用参比品测得它们的,logPT,，再用待标定的组织凝血活酶测得它们的,logPT,，以前者为纵坐标，后者为横坐标作图，经回归求得直线斜率。即待标定的组织凝血活酶的,S =,已知,S ,斜率。,S,值越低，试剂对有关凝血因子降低的敏感度越高。再按下式求得,INR,：,INR=PTR,S,血液检验,7,ppt课件,INR：需先求得所用组织凝血活酶的国际敏感度指数,3.,临床意义：是外源性凝血途径的筛选试验。,(1)PT,延长,Vitk,缺乏：,、,、,、,统称为依赖,Vitk,凝,血因子。,Vitk,、因子,PT,。,抗凝治疗，香豆素类抗凝药物与,Vitk,化学结,构相似，竞争性拮抗，使,PT,。,肝病：肝脏是合成除组织因子（,）、钙（,）,及,因子外其他因子的主要场所，肝受损凝,血因子合成,PT,。,先天性凝血因子缺乏症：,、,、,、,、,。,抗凝物质增多。,(2)PT,缩短,：,常见于血栓前状态和血栓性疾病。,血液检验,8,ppt课件,3.临床意义：是外源性凝血途径的筛选试验。血液检验8ppt课,(,二,),活化部分凝血活酶时间测定,1.,原理：,37,条件下，以白陶土激活因子,和,，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板,3,因子，在,Ca,2+,参与下，观察贫血小板血浆凝固,所需的时间，即为活化部分凝血活酶时间,（,APTT,）。,血液检验,9,ppt课件,(二)活化部分凝血活酶时间测定 血液检验9ppt课件,2.,参考值,男：,37s3.3s,女：,37.5s2.8s,超过正常对照,10s,以上为异常,。,血液检验,10,ppt课件,2.参考值血液检验10ppt课件,3.,临床意义：是内源性凝血系统敏感而简便的筛,选试验。,(1)APTT,时间延长：,内源性凝血途径因子缺乏：,、,、,、,。,外源性凝血途径因子缺乏：,、,、,、,。,血中抗凝物质增多。,(2)APTT,时间缩短：,可见于高凝状态及血栓形成,性疾病。,血液检验,11,ppt课件,3. 临床意义：是内源性凝血系统敏感而简便的筛血液检验11p,三、纤溶活性的筛查试验,血浆纤溶活性增强的筛查，一般选用能直接或间接检测出血浆纤溶酶降解纤维蛋白（原）降解产物（,FDPs,）的试验，临床常用的有：凝血酶时间（,thrombin time,，,TT,）、血浆鱼精蛋白副凝固试验（,plasma protamine pracoagulation test,，,3P test,）。,血液检验,12,ppt课件,三、纤溶活性的筛查试验血液检验12ppt课件,(,一,),凝血酶时间测定,1.,原理：受检血浆中加入“标准化”的凝血酶溶液后、血浆凝固所需要的时间，即为凝血酶时间,。,2.,参考值：,16s,18s,。超过对照,3s,以上为异常。,血液检验,13,ppt课件,(一)凝血酶时间测定血液检验13ppt课件,3.临床意义,(1)TT延长：,肝素及肝素类抗凝物增多。,FgDP(FbDP)DIC(消耗Fb 或Fg)。,先天性纤维蛋白(原)异常或缺乏症。,(2)TT缩短:极罕见,主要见于某些异常蛋,白血症如巨球蛋白血症。,血液检验,14,ppt课件,3.临床意义血液检验14ppt课件,(,二,),可溶性纤维蛋白单体试验：,3P,试验,1,原理：血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（,plasma protamine paracoagulation test,3P test,），是在待测血浆中加入硫酸鱼精蛋白,可使可溶性纤维蛋白单体,(FM),与,FDP(,主要是,X,片段,),形成可溶性复合物解离,游离的,FM,之间自行聚合呈肉眼可见的纤维絮状或胶冻状沉淀。,血液检验,15,ppt课件,(二)可溶性纤维蛋白单体试验：3P试验血液检验15ppt课件,2.,参考值：阴性,3.,临床意义,(1),原发性纤溶时：阴性。,(2),继发性纤溶时早期：阳性。,(3)DIC,的晚期因,FgDP,或,FbDP,（,X,、,Y,）被降解为低分子量小碎片（,D,、,E,）：阴性。,血液检验,16,ppt课件,2.参考值：阴性血液检验16ppt课件,(,三,),血浆,D-,二聚体检测,乳胶颗粒浊度分析法,1.,原理：受检血浆中加入标有,D-,二聚体单抗的胶乳,颗粒悬液，如果血浆中,D-,二聚体含高于,0.5mg/L,时即可与胶乳颗粒上的抗体结合，发生胶乳颗,粒凝集。,血液检验,17,ppt课件,(三)血浆D-二聚体检测血液检验17ppt课件,2,血浆,D-,二聚体,是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发纤溶特有的代谢物。,血液检验,18,ppt课件,2血浆D-二聚体血液检验18ppt课件,纤维蛋白（原）降解过程及产物,凝血酶,XIIIa,纤维蛋白（原）,可溶性纤维蛋白,交联纤维蛋白,FPA,、,FPB,（,A,1-6,）,(B,1-14,),B1-42,B15-42,A,极附属物多聚体,A,极附属物,A,极附属物,D-,二聚体,（,A,、,B,、,C,、,H,）,（,A,、,B,、,C,、,H,）,DD/E,复合物,X,、,Y,、,D,、,E,X,、,Y,、,D,、,E,X,、,Y,、,D,、,E,纤溶酶,纤溶酶,纤溶酶,19,ppt课件,纤维蛋白（原）降解过程及产物纤溶酶纤溶酶纤溶酶19p,3,意义,参考值阴性，在继发纤溶时（,DIC,）阳性；原发纤溶时阴性。常作为鉴别原发性纤溶与继发性纤溶的可靠指标，也是溶栓治疗的有效观察指标。,D-,二聚体阳性或增高是诊断,DIC,的重要依据之一。,20,ppt课件,3意义20ppt课件,第二节 血管壁,(,内皮,),的检验,一、血管性血友病因子检测,1.,原理：血浆中的血管性血友病因子,(vWF),是一种多聚体大分子蛋白,血浆浓度为,7,10,g/L,。,vWF,具有与胶原、肝素、,F,轻链、,GPb/b-a,、瑞斯托霉素等结合的多个功能区。因此,vWF,的分析包括含量、活性、功能、多聚体等多功项检测。,血液检验,21,ppt课件,第二节 血管壁(内皮)的检验血液检验21ppt课件,2,参考值：检测的方法同其值也不同，一般大于,50%,。,3.,临床意义：,vWF,：,Ag,检测是临床常用的较为敏感和实用的试验之一，是研究和诊断,vWD,的重要指标。,(1),减低：,见于血管性血友病（,von,illebrand disease .vWD,），是,vWD,的诊断及分型的重要指标。,(2),增高：,vWF,是一种急性反应蛋白，在很多情况下都可增高，常见于血栓性疾病，如心肌梗死、心绞痛、脑血管病变、肾小球疾病、糖尿病、妊娠高血压综合征、大手术后等。,血液检验,22,ppt课件,2参考值：检测的方法同其值也不同，一般大于血液检验22pp,第三节 凝血因子的检测,一、血浆纤维蛋白原,1.,原理,:Clauss,法以凝血酶作用受检血浆中,纤维蛋白原,(Fg),，使其形成纤维蛋白而使,血浆凝固,测定凝固时间。纤维蛋白的量,与凝固时间成负相关，检测结果与参比血,浆制成的标准曲线对比，可得出纤维蛋白,原的含量。,2.,正常参考值：,2,4g/L,。,血液检验,23,ppt课件,第三节 凝血因子的检测血液检验23ppt课件,3.,临床意义,(1),增高,机体感染；毒血症、肝炎、轻型肝炎、胆囊炎及,长期局部炎症,无菌性炎症：糖尿病、肾病综合症、尿毒症、风,湿热、恶性肿瘤、风湿性关节炎等。,糖尿病酸中毒。,心血管疾病：动脉硬化症、脑血栓、血栓静脉炎、心肌梗塞、放射治疗。,妇女经期、妊趁晚期、妊高症及剧烈运动后。,放疗后，灼伤，休克，外科大手术后，恶性肿瘤,等。,血液检验,24,ppt课件,3.临床意义血液检验24ppt课件,(2),减低,肝脏疾病：慢性肝炎、肝硬化、急性肝萎缩。,砷、氯仿、四氯化碳中毒均可使纤维蛋白原减,少。,DIC,：因纤维蛋白原消耗及继发性纤溶活性亢进,纤维蛋白原呈进行性下降。原发性纤维蛋白原缺乏症。原发性纤溶活性亢进。恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术。天门冬酰胺酶治疗白血病。监控：溶栓治疗的监控范围：,1.2g/L,1.5g/L,，,低于,1.2g/L,时引起病人出血。,血液检验,25,ppt课件,(2)减低血液检验25ppt课件,二、,F,、,F,、,F,、,F,凝血活性测定,1.,原理：将病人血浆与缺乏因子,：,C,；,：,C,；,：,C,；,：,C,基质血浆混合，,作,APTT,，计算病人血浆中所含因子含量占,正常人的百分率。,2.,优点：方法简便，可分型。,3.,缺点：缺乏因子,：,C,等基质血浆，来源,困难。,血液检验,26,ppt课件,二、F、F、F、F凝血活性测定血液检验2,三、,Biggs,凝血活酶生成试验,1.,原理：在试管中，血浆凝血因子、,PF3,、钙可形,成凝血活酶,(,凝血酶原酶,),，使正常血浆凝固，,将病人与正常人标本进行不同组合，测定凝固,时间，可检出病人缺乏何种凝血因子。,血液检验,27,ppt课件,三、 Biggs凝血活酶生成试验血液检验27ppt课件,2.,要求,(1),吸附血浆：含,、,、,、,、,。（注意：,有,、无,）,(2),血清：含,、,、,、,。（注意：有,、,无,）,3.,临床意义,(1)PT,正常，可确定是否有：,、,、,、,、,PF3,缺乏或抗凝物质存在。,(2)/,缺乏的结果：,PT,延长，推测可能有,缺乏。,(3)/,缺乏的结果：,PT,延长，推测可能有,缺乏。,血液检验,28,ppt课件,2.要求血液检验28ppt课件,例：推测凝血因子缺乏的检测试验,首先：如,PT,正常，可除外共同凝血途径异常，而内,源性凝血途径中可能出现了,、,、,、,缺乏。,管号,吸附血浆,血清,时间 结果推测,1, 正,+,正 正常 正常,2, 病,+,病 延长 异常,正常：病人有,、可能无,3, 正,+,病,异常：病人无,正常：病人有,、可能无,4, 病,+,正,异常：病人无,血液检验,29,ppt课件,例：推测凝血因子缺乏的检测试验血液检验29ppt课件,临床常用,PT,、,APTT,、,TT,组合，作止,血与血栓性疾病的筛选试验：,1,PT,延长，,APTT,、,TT,正常：外源途径异常，,进一步作,PT,延长纠正试验鉴别。,2,APTT,延长，,PT,、,TT,正常：内源途径异常，,进一步作凝血活酶生成试验。,3,PT,、,APTT,延长，,TT,正常：共同途径异常，,肝病、,vitk,。,4,PT,、,APTT,、,TT,延长：抗凝物质增多或纤,维蛋白（原）缺乏。,血液检验,30,ppt课件,临床常用PT、APTT、TT组合，作止血液检,第十四章 血栓与止血检验的临床应用,第一节 出血性疾病中的应用,一、血栓与止血筛选检验的应用,血液检验,31,ppt课件,血液检验31ppt课件,（一）一期止血缺陷筛检试验,一期止血缺陷：是指血管壁和血小板异,常所引起的止血功能缺陷。如临床出现不同,程度的出血时，筛检试验可分为以下四种情,况：,血液检验,32,ppt课件,（一）一期止血缺陷筛检试验血液检验32ppt课件,出血时间延长合并血小板计数,减少,正常,增多,血小板增多,血小板减少,某些凝血因子缺乏,血小板功能缺陷,血管性血友病,低,(,无,),纤维蛋白原血症,原发性,/,继发性,血小板减少症,遗传性,/,获得性,血小板功能缺陷,遗传性,/,获得性,vWF,缺陷,遗传性,/,获得性,低,(,无,),纤维蛋白原血症,原发性,/,继发性,血小板增多,血液检验,33,ppt课件,出血时间延长合并血小,（二）二期止血缺陷筛检试验,二期止血缺陷：是指血液凝固和纤溶,异常所引起的止血功能缺陷。若临床出现不同程度的出血时，筛检试验分为以下四种情况：,血液检验,34,ppt课件,（二）二期止血缺陷筛检试验血液检验34ppt课件,APTT(N) APTT(N) APTT(A) APTT(A),PT(A) PT(N) PT(N) PT(A),外源途径,因子,定性,内源凝血途径缺陷,共同途径缺陷,缺陷,试验阳性,有出血,无出血,因子,缺陷症,(,遗传性,/,获得性,),因子,缺陷症,(,遗传性,/,获得性,),因子,、,PK,HMWK,、,缺陷症,(,遗传,性,/,获得性,),因子,、,缺陷症,(,遗传性,/,获得性,),因子,、,、,Fg,缺陷症,或存在血液凝,固调节异常,同时检测,APTT,和,PT,对二期止血缺陷的应用,血液检验,35,ppt课件,因子因子同时检,二、 过敏性紫癜,(P315),（一）概念：本病是一种变态反应性疾病，主要是由于机体对某些致敏物质（过敏原）发生变态反应而引起全身性毛细血管壁的通透性和（或）脆性增加，导致以皮肤和粘膜出血为主要表现的临床综合征。好发于儿童和青年人，并且在,20,岁以前发 病率约占,80%,以上。,血液检验,36,ppt课件,二、 过敏性紫癜 (P315)血液检验36,（二）主要过敏原：,1.,感染：细菌、病毒、和寄生虫等；,2.,食物：鱼、虾、蟹、蛋、奶等；,3.,药物：某些抗生素、镇痛解热药和抗结核,药等；,4.,其他：花粉、昆虫叮咬、预防接种和寒冷,气候等。,血液检验,37,ppt课件,（二）主要过敏原：血液检验37ppt课件,（三）发病机机制：是过敏原通过以下两种变态,反应引起血管病变。,1.,速发型变态反应：由肥大细胞所释放的组织,胺等生物活性物质使毛细血管扩张或通透性,增加。,2.,抗原抗体复合物：主要是,IgA,的复合物沉积在,毛细血管壁上从而激活补体引起血管炎症性,反应。,血液检验,38,ppt课件,（三）发病机机制：是过敏原通过以下两种变态血液检验38p,（四）临床表现：本病发病前常有上呼吸道感染的,前驱症状或有相关的过敏原接触史。其典型表,现分为以下五型。,1.,单纯紫癜型：好发于下肢、关节周围和臀部，紫,癜常呈对称分布，大小不等、呈暗红色。,2.,关节型：多见于膝、肘、踝、碗等大关节，呈游,走性红、肿、热、痛。,3.,腹型：呈阵发性腹绞痛或持续性钝痛，有压痛但,无肌紧张，可伴恶心、呕吐、腹泻、血便等。,4.,肾型：呈不同程度蛋白尿、血尿、管型尿等。,5.,混合型：有上述两型或两型以上表现者。,血液检验,39,ppt课件,（四）临床表现：本病发病前常有上呼吸道感染的,（五）实验室检查：,1.,血象：白细胞数、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,可增高，血小板计数正常。,2.,骨髓象：大致正常，部分病例可有嗜酸性粒细,胞比值增高。,3.,凝血功能检测：血小板功能试验、凝血和纤溶,试验均正常。,4.,尿液检测：部分病人（约占,25%,50%,）肾功能,异常。,5.,其他：,ESR,增快、血清,IgA,增高。,血液检验,40,ppt课件,（五）实验室检查：血液检验40ppt课件,三、 特发性血小板减少性紫癜,（一）概念,特发性血小板减少性紫癜（,idiophathic thrombocytopenic purpura,，,ITP,）是一种免疫性血小板破坏过多所致的血小板减少性疾病。,儿童、急性；成人、慢性；女,男。,血液检验,41,ppt课件,三、 特发性血小板减少性紫癜血液检验41ppt课件,（二）病因及发病机理,1,免疫因素：病人血清中抗血小板抗体，与血小板,GPb/a,结合单核,-,巨噬系统清除。,2,脾脏：（,1,）血小板抗体产生部位；（,2,）结合抗,体 的血小板破坏部位。,3,血小板无效生成：巨核、血小板共同抗原性，抗,体巨核成熟障碍，原位破坏。,血液检验,42,ppt课件,（二）病因及发病机理血液检验42ppt课件,（三）临床表现，发病前有病毒感染史，起病急，,皮肤大片紫癜、瘀斑，鼻腔、口腔粘膜出,血。也可内脏出血，自限性。,1,急性型：,3,7,岁婴幼儿，紫癜出现前,1,3,周常,有上呼吸道感染史，起病急骤，常伴发热、皮,肤紫癜、粘膜和内脏出血。,2,慢性型：青壮年，女,男，反复发作皮肤紫癜、,口腔刷牙出血，月经量过多，内脏出血少。反,复发作可轻度脾大，贫血。,血液检验,43,ppt课件,（三）临床表现，发病前有病毒感染史，起病急，血液检验43pp,（四）实验室检查,1,血象：血小板减少（急性,2%,，正常,2%,。,血液检验,60,ppt课件,（四）实验室检查血液检验60ppt课件,（五）第一届,止血与血栓,学术会议标准,1,存在引起,DIC,的基础疾病。,2,有下列二项以上临床表现。,多发性出血倾向。,不易用原发病解释的微循环衰竭或休克。,多发性微血栓栓塞症状及体征。,抗凝治疗有效。,血液检验,61,ppt课件,（五）第一届止血与血栓学术会议标准血液检验61ppt课件,3,实验室检查有下列三项以上异常,PLT10010,9,/L,或进行性。,Fg2%,。,血液检验,62,ppt课件,3实验室检查有下列三项以上异常血液检验62ppt课件,（,六）,1994,年全国血栓与止血学术会议对早期,DIC,诊,断的实验室指标修改意见，,1998,年全国血栓与,止血学术会议正式提出,DIC,的实验诊断指标,1.,主要诊断指标：同时有以下,3,项以上异常。,(1)PLT10010,9,/L,，或进行性（肝病、白血病低,于,5010,9,/L,），,或有,2,项以上血浆血小板活化产,物：如,-TG,、,PF4,、,TXB,2,和,GMP-140,（血小,板,颗粒膜糖蛋白,-140,）或,P-,选择素。,(2),血浆,Fg4.0g/L,（白血,病、恶性肿瘤,1.8g/L,，肝病,20g/L,（肝病,60g/L,），或,D-,二聚体阳性,/,。,(4)PT,时间缩短或较正常延长,3,秒以上，,或呈动态变化（肝病超过,5,秒以上）。,(5)PLG,含量和活性。,(6)AT-,含量和活性（肝病不适用）。,(7),：,C20g/L（肝病血液检验64,2.,疑难病例应有以下一项以上异常。,(1),因子,：,C,，,vWF,：,Ag,，,：,C/vWF,：,Ag,比,值（低于,1,：,1,）。,(2)F1,2,。,(3)PAP,（纤溶酶,-,抗纤溶酶复合物）。,(4),血或尿,FPA,。,血液检验,65,ppt课件,2.疑难病例应有以下一项以上异常。血液检验65ppt课件,(,七,),目前微血栓形成、,DIC,疑难病例的实验诊断标,准有下列一项以上异常，结合临床已作为诊,断标准之一。,1,因子,：,C,、,vWF,、,：,C/vWF,。,2,血浆,F1,2,或凝血酶,-,抗凝血酶复合物。,3,血浆纤溶酶激活物（,PA,）及,PA,与其抑制物,（,PAI,）复合物。,4,血（尿）,FPA,。,血液检验,66,ppt课件,(七)目前微血栓形成、DIC疑难病例的实验诊断标血液检验66,谢谢！,67,ppt课件,谢谢！67ppt课件,