糖尿病的生物化学检测：(一)测定血液中的葡萄糖含量测定课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,四.糖尿病的生物化学检测：,（一）测定血液中的葡萄糖含量,测定血糖的方法很多，按其测定原理可分为三类：,四.糖尿病的生物化学检测：（一）测定血液中的葡萄糖含量,1,1.无机化学法： 所用试剂均为无机化学试剂,氧化亚铜法（又称Folin-Wu法）,原理,葡萄糖 + 还原碱性铜盐（Cu） CuO + 磷钼酸,钼蓝,1.无机化学法： 所用试剂均为无机化学试剂氧化亚铜法,2,铁氰化钾法,操作简便试剂易得，费用低 特异性差 谷胱甘肽 葡萄糖醛酸 尿酸 VitC 已淘汰。,偏高,铁氰化钾法 操作简便试剂易得，费用低 特异性差,3,2.有机化学方法：,利用糖的羰基与有机试剂反应测糖。,Hultmen使用邻甲苯胺试剂（Otoluidine，O-T）测定血糖。,原理,血清 + 冰醋酸 + 邻甲苯胺 （葡糖糖） 5羟甲基2呋喃甲醛 + 邻甲苯胺 蓝色的醛亚胺（Schiff碱）,2.有机化学方法： 利用糖的羰基与有机试剂反应测糖。 H,4,3.生物化学法： 主要是酶法,葡萄糖氧化酶法（Glucose Oxidase，GOD）,原理,葡萄糖氧化酶,葡萄糖 葡萄糖酸 + 过氧化氢H,2,O,2,+ 4-氨基安替比林+ 酚 O,2,+有色化合物 其颜色深浅同血糖浓度呈正比。,过氧化物酶,3.生物化学法： 主要是酶法葡萄糖氧化酶法（Glucos,5,葡萄糖氧化酶法特点： 操作简便，特异性较高 推荐方法 溶血（胆色素0.34mol/L） VitC 5mg/L以上 左旋多巴（0.5mol/L） 谷胱苷肽 100mg/L本法,第一步是特异反应,，,第二步特异性差,，误差往往发生在反应的第二步。,负偏差,葡萄糖氧化酶法特点： 操作简便，特异性较高 推荐方法,6,葡萄糖 + ATP G6P + ADP G6P + NADP 6-磷酸葡萄糖酸+ NADPH NADPH的生成速率与葡萄糖浓度成正比，在波长340nm监测吸光度升高速率，计算血清中葡萄糖浓度。,己糖激酶,G6PD,己糖激酶法,原理,葡萄糖 + ATP G6P + ADP,7,己糖激酶法的特点,参考方法 试剂盒贵 轻度溶血 脂血、黄疸、 VitC NaF、肝素、EDTA、草酸盐 但从红细胞中释放出来的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP，有干扰。,葡萄糖脱氢酶法,无干扰,己糖激酶法的特点 参考方法 试剂盒,8,（二） 测定尿中葡萄糖,临床初判断作为过筛,正常人24小时尿糖 0.5g,尿糖试验 （）,1.班氏试剂：CuSO,4,Glu,Cu,砖红色,2.尿10A：干酶试剂、折光仪比色,（二） 测定尿中葡萄糖 临床初判断作为过筛 正常人24小,9,（三）口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test , OGTT）,一种葡萄糖负荷试验，了解机体对葡萄糖的调节作用。,空腹血糖浓度67mmol/L，+OGTT,OGTT 试验前准备：,a 试验前三天，每日食物中糖,150g,b 影响试验药物停用3d,c 试验前病人1016h未进食,d 坐位取血5min后饮250ml含75g无水葡 萄糖水，以后每隔30min取血一次，共 四次，历时2h。,（三）口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose t,10,30 60 90 120 150 （min）,5,10,mmol/L,正常人,糖耐量受损,糖尿病,肾糖阈,30 60 90 120,11,1.正常糖耐量,（1）空腹静脉血浆葡萄糖6mmol/L（2）口服葡萄糖后3060min达高峰，峰 值不超过10mmol/L（3）2小时回复到空腹水平。,1.正常糖耐量（1）空腹静脉血浆葡萄糖7.8mmol/L,峰值超过10mmol/L并出现糖尿,延迟（2小时后）回复到空腹水平,判断指标是服葡萄糖后2小时的血浆葡萄糖值增高。,2.糖尿病性糖耐量 糖尿病患者由于胰岛素相对和绝对缺乏，,14,糖尿病的生物化学检测：(一)测定血液中的葡萄糖含量测定课件,15,3.糖耐量受损,轻度耐量能力下降（1）空腹血浆葡萄糖7.8mmol/L（2）口服葡萄糖后30、60、90min的血浆 葡萄糖,11mmol/L（3）2h值在811mmol/L 称为亚临床或无症状的糖尿病,1/3恢复正常,1/3仍为糖耐量受损,1/3明确糖尿病,3.糖耐量受损 轻度耐量能力下降（1）空腹血浆葡萄糖,16,4、影响糖耐量试验的因素,年龄 饮食 劳动 应激 药物 胃肠道功能 标本采集 葡萄糖测定的方法但糖耐量试验可反映近期体内糖代谢的情况。,4、影响糖耐量试验的因素 年龄 饮食,17,