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单击此处编辑母版标题样式,编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/2/27,#,第,18,章,支,原体,mycoplasma,第18章 支原体,第一节,概述,第二节,主要致病性支原体,第一节 概述第二节 主要致病性支原体,重点难点,熟悉,了解,掌握,掌握,支原体的概念和主要生物学特性及与细菌,L,型的区别,主要致病性支,原体,-,肺炎支原体、解脲脲原体、人型支原体、生殖支原体与人类疾病的,关系,1,、支原体的种类;,2,、主要致病性支原体感染的微生物学检查方法及防治原则,重点难点熟悉了解掌握 掌握支原体的概念和主要生物学特性及与细,概 述,summary,第,一,节,概 述第一节,支,原体(,Mycoplasma,),是一类,缺乏细胞壁,、呈高度多形性、,能通过滤菌器,、在无生命培养基中能生长繁殖的,最小原核细胞型微生物。,于,1898,年由,Noccard,首次,分离出来,,1967,年将其正式命名为支原体。,医学微生物(第,9,版),支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性,医学微生物(第,9,版),对人致病的主要支原体及分类,柔膜体纲,支原体目,支原体科,支原体属,脲原体属,肺炎支原体、人型支原体、,生殖支原体、嗜精子支原体、,穿透支原体、发酵支原体、,梨支原体,解脲脲,原体,微小脲原体,医学微生物(第9版)对人致病的主要支原体及分类柔膜体纲支原体,医学微生物(第,9,版),一,、生物学特性,形态与结构,形态,0.3-0.5,m,高度,多形性:球、杆、丝状和分枝状,Giemsa,染色呈淡紫色,肺炎支原体的形态(扫描电镜,10 000,),医学微生物(第9版)一、生物学特性形态与结构肺炎支原体的形态,基本结构,医学微生物(第,9,版),细胞膜,细胞质,核质,:,基因组小,合成代谢有限,外层:蛋白质及糖类,中层:脂质(磷脂为主,胆固醇占,36%,),凡,作用于胆固醇的物质,如皂素、毛地黄苷、,两性霉素,B,等均能破坏细胞膜致其死亡,内层:蛋白质及糖类,生物被膜,:,抗吞噬作用,特殊的顶端结构,:黏附与宿主上皮细胞表面,与致病有关,特殊,结构,结构,基本结构医学微生物(第9版)细胞膜外层:蛋白质及糖类中层:脂,2.,培养特性,医学微生物(第,9,版),营养要求较高:,10%,20,%,人或动物血清以提供胆固醇与其他长链脂肪酸,,多数,还需要添加酵母浸液、组织浸液,等,pH,适宜,7.6-8.0,,但解脲脲原体最适,pH,为,5.5-6.5,兼性,厌氧,微氧环境(含,5% CO,2,和,90% N,2,)中生长,最佳,繁殖方式,多样,,生长缓慢,2. 培养特性 医学微生物(第9版) 营养要求较高:,医学微生物(第,9,版),在,固体培养基中的生长,现象:,27,天长出直径约,10600,m,的“,油煎蛋样,”菌落,支原体菌落(,100,倍),Diense,染色,医学微生物(第9版)在固体培养基中的生长现象:27天长出直,医学微生物(第,9,版),在,液,体培养基,中的生长,现象:,清亮,,用颜色变化单位(,CCU,)表示。,肺炎支原体培养结果,1.,培养基对照;,2,5,为培养第,2,5,天结果,医学微生物(第9版)在液体培养基中的生长现象:清亮,用颜色变,医学微生物(第,9,版),相同点:,缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤菌器。,固体培养菌落呈荷包蛋样或颗粒状。,临床表现相似,间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等。,支原体与细菌,L,型的异同点,医学微生物(第9版)相同点: 缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤,医学微生物(第,9,版),支原体与细菌,L,型的异同点,鉴别点 支原体 细菌,L,型,细胞壁缺失原因,与,遗传特性有关,与原菌相关,可以回复,细胞膜,含高浓度固醇,细胞膜不含固醇,培养特性,需要胆固醇,大多需要高渗培养,菌落大小,生长慢,菌落小 菌落稍大,(0.6-1.0),液体培养,液体培养混浊度极低 有一定混浊度,可附壁,不同点:,医学微生物(第9版)支原体与细菌L型的异同点 鉴别点,3,.,生化反应,医学微生物(第,9,版),支原体,葡萄糖,精氨酸,尿素,pH,吸附细胞,肺炎支原体,7.5,红细胞,生殖支原体,7.5,红细胞,人型支原体,7.3,发酵支原体,7.5,嗜精子支原体,7.0,穿透支原体,7.5,红细胞,,CD4,T,细胞,梨支原体,7.5,?,脲原体,6.0,红细胞,a,人类主要支原体的生化反应,3. 生化反应 医学微生物(第9版)支原体葡萄糖精氨酸尿素p,4,.,抗原结构,医学微生物(第,9,版),补体结合试验可检测糖脂类抗原,ELISA,试验可检测蛋白质类抗原,血清抗体鉴定:,生长抑制试验(,growth inhibition test, GIT,),代谢抑制试验(,metabolic inhibition test, MIT,),抗原特异,少交叉,,有鉴定意,义,;,抗原抗体,可相互检测,4. 抗原结构 医学微生物(第9版) 补体结合试验可检测糖脂,5.,抵抗力,医学微生物(第,9,版),对理化因素的抵抗力比细菌,弱,。,对,化学消毒剂敏感,但对结晶紫、醋酸铊和亚碲酸钾等有,抵抗力,。,对影响细胞壁合成的抗生素如青霉素类,天然耐受,。,对,干扰蛋白质合成,的抗生素如多西环素和交沙霉素等敏感,对作用于,DNA,旋转酶而,阻碍,DNA,复制,的喹诺酮类药物如左旋氧氟沙星和司帕沙星等敏感。,5. 抵抗力医学微生物(第9版)对理化因素的抵抗力比细菌弱。,医学微生物(第,9,版),二,、,致病性和免疫性,1.,致病机制,黏附素,黏附,于呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞的,黏蛋白受体,上,导致宿主细胞,损伤,。,生物被膜,具有,抗,吞噬作用并,形成多重,耐药性,。,毒性代谢产物,如神经毒素,、磷脂酶,C,、核酸酶、过氧化氢和超氧离子,等均能引起,宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理,损伤,。,脂蛋白,经,机体,TLR2,识别后激活固有免疫系统,通过一系列信号转导途径诱导单核、巨噬细胞以及自然杀伤细胞等产生一系列促炎,细胞因子和,介质的表达而参与,免疫应答,。,穿透,支原体能黏附并侵入,CD4,T,淋巴细胞,导致,免疫损伤,。,医学微生物(第9版)二、致病性和免疫性1. 致病机制黏附素,医学微生物(第,9,版),二,、,致病性和免疫性,2.,所致疾病,支原体,感染部位,所致疾病,肺炎支原体,呼吸道,上呼吸道感染、非典型肺炎、支气管炎、肺外症状(皮疹、心血管和神经系统症状),生殖支原体,生殖道,尿道炎、宫颈炎、子宫内膜炎、盆腔炎、不育,人型支原体,呼吸道、生殖道,附睾炎、盆腔炎、产褥热、慢性羊膜炎,新生儿肺炎、脑炎、脑脓肿,发酵支原体,呼吸道、生殖道,流感样疾病、肺炎、关节炎,嗜精子支原体,生殖道,不孕、不育,穿透支原体,生殖道,协同,HIV,致病,梨支原体,生殖道?,协同,HIV,致病,脲原体,生殖道,尿道炎、宫颈炎、盆腔炎?,人类致病支原体的感染部位与所致疾病,医学微生物(第9版)二、致病性和免疫性2. 所致疾病支原体感,医学微生物(第,9,版),二,、,致病性和免疫性,3.,免疫性,体液免疫,膜,蛋白抗体包括,IgM,、,IgG,和,sIgA,,在抗支原体感染,中发挥主要,作用,,特别是,sIgA,,在局部黏膜阻止支原体感染中起重要,作用,。,细胞免疫,特异性,CD4,Th1,细胞分泌细胞因子,IL-2,、,TNF-,、,IFN-,和,GM-,CSF,,活化巨噬细胞而清除支原体感染。免疫细胞在清除支,原体,的,同时,释放大量炎症细胞因子,也能引起自身组织损伤。,医学微生物(第9版)二、致病性和免疫性3. 免疫性体液免疫,主要致病性,支,原体,main,pathogenic,Mycoplasma,第,二,节,主要致病性支原体第二节,一、肺炎支原体(,Mycoplasma pneumoniae,),13-05,医学微生物(第,9,版),(一),生物学性状,菌体大小为,0.20.3m,,呈高度,多形性,菌落,呈,“油煎蛋”,状,能发酵葡萄糖,不能利用精氨酸与尿素,能产生过氧化氢,对豚鼠红细胞,呈,现,溶血环,对亚甲蓝、醋酸铊和青霉素不敏感,一、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae),(二)致病性与免疫性,医学微生物(第,9,版),致病物质:,黏附因子:,P1,表面蛋白(,170 kDa,)和,P30,(,32 kDa,)为主要黏附因子,使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮细胞表面,定植后侵入,细胞。,有毒代谢产物:产生,H,2,O,2,,,使宿主细胞的触酶失去活力,纤毛运动减弱、停止乃至脱落消失,,RNA,及蛋白合成减少,,使宿主细胞,功能,受损。,脂蛋白:能,刺激炎症细胞在感染部位释放大量,TNF-,、,IL-1,、,IL-6,等促炎细胞因子引起组织损伤,。,外毒素:社区,获得性呼吸窘迫综合征毒素(,community-acquired respiratory distress syndrome toxin,,,CARDS,)可,激活炎症小体,分泌,IL-1,引起,炎症反应,。,(二)致病性与免疫性医学微生物(第9版),(二)致病性与免疫性,医学微生物(第,9,版),主要经,飞沫,传播,多发于夏末秋初,,5,15,岁,青少年发病率,最高,所致,疾病:,肺炎支原体感染后可,产生,sIgA,、,血清,特异性,IgM,、,IgG,和致敏的淋巴细胞,但抗体的保护作用,不完全,。,原发性非典型性肺炎,或,支原体肺炎,。,临床症状较轻,以咳嗽、发热、头痛、咽喉痛和肌肉痛,为主,,可伴有,呼吸道外并发症,如皮疹、心血管和神经系统症状。,(二)致病性与免疫性医学微生物(第9版)主要经飞沫传播,多发,13-10,(三),微生物学检查法,医学微生物(第,9,版),1,、病原体检测,液体和固体培养基接种,特异抗血清做,GIT,和,MIT,进一步鉴定,2,、血清学检查,冷凝集试验,:,用,(,Mp,感染)病人血清与人,O,型血红细胞或自身红细胞,混合,,4,过夜时可发生凝集,而在,37,时这种凝集又分散解离,开,ELISA,:检测支原体膜蛋白的抗体,13-10(三) 微生物学检查法医学微生物(第9版)1、病原,13-10,医学微生物(第,9,版),3,、快速,诊断,应用,P1,蛋白和,P30,蛋白的,单克隆抗体,通过,ELISA,从患者痰、鼻洗液或支气管灌洗液中检测,肺炎支原体,抗原,用,PCR,技术从患者痰液标本中检测肺炎支原体的,16S rRNA,基因,或,P1,蛋白基因,13-10医学微生物(第9版) 3、快速诊断应用P1蛋白,13-10,(,四,),防治原则,医学微生物(第,9,版),无有效疫苗,对,青霉素天然耐受,,可用大环内酯类,、四环素类、喹,诺酮类药物治疗,13-10(四)防治原则医学微生物(第9版) 无有效疫苗,二、,脲,原体,(,Ureaplasma,),13-05,13-06,医学微生物(第,9,版),(一),生物学性状,菌体,直径,为,0.050.3m,,多为单个或成双,排列,,菌落,呈,“油煎蛋”,状,能,分解尿素,,不分解糖类和精氨酸,磷脂酶阴性,四唑氮盐还原,阴性,对,1,2000,的醋酸铊不,敏感,根据细胞膜多带抗原(,MB-Ag,)不同,将解脲脲原体分为,14,个血清型,,2,个,生,物,型;根据,16S rRNA,基因和,1623S rRNA,间区将,14,个血清型分为,2,个种,,即,解脲,脲,原体,和,微小脲原体,二、脲原体(Ureaplasma)13-0513-06医学微,(二)致病性与免疫性,医学微生物(第,9,版),为条件致病菌,主要通过性接触传播,患者与携带者为主要,传染源,所,致,疾病:,尿道炎,、宫颈炎、盆腔炎及尿路结石,等,脲原体感染,后,,可,检测到,IgM,、,IgG,和黏膜局部,sIgA,;,LAMPs,可,趋化吞噬细胞,到炎症,部位,,,清除脲原体;,另外,,LAMPs,可诱生大量的,促,炎症性细胞因子,引起免疫病理损伤,(二)致病性与免疫性医学微生物(第9版)为条件致病菌,主要通,13-10,(三),微生物学检查法,医学微生物(第,9,版),1,、病原体检测,液体和固体培养基接种,特异抗血清做,GIT,和,MIT,进一步鉴定,2,、核酸检测,PCR,检测脲酶,基因、多带抗原(,MB-Ag,)基因和,16S rRNA,基因,13-10(三) 微生物学检查法医学微生物(第9版)1、病原,13-10,(,四,),防治原则,医学微生物(第,9,版),加强性道德和性卫生教育,提倡洁身自爱,坚决取缔卖淫,嫖娼,对高危人群及其性伴侣进行及时检查与,治疗,四环素类、喹诺酮类以及大环内酯类抗生素是,治疗的,首选药物,13-10(四)防治原则医学微生物(第9版)加强性道德和性卫,支原体是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物,。对,人类致病的支,原体,归属,于支原体属和脲原体属。,G+C,mol%,低,仅,25%,40%,。细胞膜胆固醇含量高,。兼性厌氧,生长缓慢,在,固体培养基上生长出典型的“油煎蛋”,样微小菌落。不同支,原体对葡萄糖、精氨酸和尿素的分解能力不同。支原体通过多种机制能引起机体不同疾病,如非典型性肺炎、泌尿生殖道感染等。实验室诊断包括分离培养、血清学试验与核酸检测。预防措施是注意个人卫生,避免接触感染。治疗首选喹诺酮类和大环内酯类药物。,支原体是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌,
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