细胞贴片免疫组化染色步骤课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,细胞贴片免疫组化染色步骤,6、露凝无游氛，天高风景澈。,7、翩翩新来燕，双双入我庐，先巢故尚在，相将还旧居。,8、吁嗟身后名，于我若浮烟。,9、陶渊明（约365年427年），字元亮，（又一说名潜，字渊明）号五柳先生，私谥“靖节”，东晋末期南朝宋初期诗人、文学家、辞赋家、散文家。汉族，东晋浔阳柴桑人（今江西九江）。曾做过几年小官，后辞官回家，从此隐居，田园生活是陶渊明诗的主要题材，相关作品有饮酒、归园田居、桃花源记、五柳先生传、归去来兮辞等。,10、倚南窗以寄傲，审容膝之易安。,细胞贴片免疫组化染色步骤细胞贴片免疫组化染色步骤6、露凝无游氛，天高风景澈。,7、翩翩新来燕，双双入我庐，先巢故尚在，相将还旧居。,8、吁嗟身后名，于我若浮烟。,9、陶渊明（约365年427年），字元亮，（又一说名潜，字渊明）号五柳先生，私谥“靖节”，东晋末期南朝宋初期诗人、文学家、辞赋家、散文家。汉族，东晋浔阳柴桑人（今江西九江）。曾做过几年小官，后辞官回家，从此隐居，田园生活是陶渊明诗的主要题材，相关作品有饮酒、归园田居、桃花源记、五柳先生传、归去来兮辞等。,10、倚南窗以寄傲，审容膝之易安。亲和免疫组化技术,(Affinity cytochemistry histochemistry technique),亲和的概念,物质之间具有的高度结合力,包括抗原与抗体,生物素与抗生物素(又称亲和素)、葡萄球菌A蛋白,与lgG、植物凝集素与糖类、阳离子与阴离子、激素,与受体之间的结合反应等,近几年来,学校的教学对象主要以军培学员为主,而军培学员是比较特殊的群体,他们当兵出身,缺乏许多方面的知识,但偏偏自尊心强,自认为见多识广。他们中大多数文化基础比较差,因此许多人都有厌学情绪。作为教师,在教学中必须较好地了解这些特点,把教学方式从填鸭式、说教式、压制式改为引导式、信任式、疏通式,把握尊重人格、相互平等的原则,因材施教,采用灵活多样的教学方法。下面笔者就军培班工程力学的教学谈谈自己的一点体会。,一、提高学习兴趣,加强基础知识的训练,工程力学是一门实践性很强的专业基础课,学习这门课程需要一定的数学计算和物理力学知识,而许多学员这方面的基础都比较差,在学习过程中存在一定的困难,很容易产生厌学情绪。笔者在教学中结合军培学员的特点,通过自信心教学,加强基础知识的训练,并结合现场工作实际,选择贴近学生的内容进行讲授,让他们感到易于接受和掌握,从而提高了学习兴趣和自信心。例如,在讲解“静力学公理”内容时,用简单易懂的事例进行推导,并加以详细讲解,然后要求学员自己去推导分析,充分理解和掌握静力学公理,做一些简单的练习,让他们感到简单易学,增加了自信心,另外,对学习积极性高的学员,及时给予表扬和鼓励,并对他们提出更高的要求,以此带动整体水平的提高。同时根据军培学员理解能力较好的特点,多结合现场生产及生活实例,从简单的基础知识开始,逐步激发、培养他们学习工程力学的兴趣。由于加强了基础知识的训练,使学员较好地掌握了所学的基础知识,为以后的教学创造了条件。,二、讲练结合,增强能力培养,工程力学这门课程主要目的是让学员掌握物体受力分析方法、物体平衡的一般规律和物体在荷载作用下变形和破坏的规律,掌握物体的受力分析和计算方法。在学习中有大量的公式和分析计算,为了更好的巩固课堂教学效果,在授课的同时,应有意识地设置一定的练习,不仅要教会他们计算方法,而且要提高他们分析问题、解决问题的能力。力学的基本规律,是人们通过长期生产实践和大量的科学实验,经过综合、分析和归纳总结出来的,和生产实践有着密切的联系。在教学中要注意理论联系实际,培养学员的思考能力,将感性认识上升为理性认识,将理论应用到实践中去。笔者在教学过程中采取的主要措施如下:一是根据日常生活中经常看到的实体和工程构件,要求学员仔细分析其受力状况及特点,掌握力学的基本规律和物体的受力分析方法;二是运用多媒体课件、教学模型等教学手段,把一些物体的复杂受力情况演示出来,最大限度地调动学员的主观能动性,如在力偶系的平衡时,因没有可实验条件,利用多媒体演示能够更好的理解和掌握分析和计算方法,同时在课堂上进行相关的习题练习。通过反复的讲练,使学员充分理解和掌握所学知识。,三、加强作业练习,提高教学效果,作业是工程力学学习中一个重要组成部分,不做一定量的练习,很难将这门课程学得好、学得精。当然作业量的选择不是随意的,并不是越多越好,应适量并且有所侧重。做作业是对课堂知识的巩固,仅靠课堂的理解而没有大量的练习,就难以消化和掌握所学知识。所以有效的方法就是在课后及时把课堂知识回顾一番,然后做一些与课堂知识紧密相关的练习。,做工程力学作业练习时,要求学员能举一反三,逐步深入,认真思考,独立完成。做作业有利于巩固知识,但也不能过多过滥,重要的是要用心去做,尽量使学生做过一次后再遇到类似问题就能举一反三、迎刃而解。另外,对不同类型的作业量也应分别对待。在学习一些基本理论和基本概念时,如静力学的基本概念,只要做少量的基本练习题便能使学员掌握这部分知识。但在学习平面汇交力系合成和平面汇交力系平衡时,就应要求学员多做练习,这样,通过强化作业的训练,学员就能更好地掌握力系合成和平衡的分析及计算方法。,总之,笔者在教学实践中,针对军培学员的特点,围绕提高教学效果进行了初步的探索,今后在教学业务上还要坚持勤奋学习,不断提高自身素质,遵循教育规律,勇于探索、精心实践,更好地完成今后的教学任务。,初二是物理学科开始学习的起始阶段,无论是老师还是学生都要从心理上重视。在如今素质教育的改革大潮中,作为实施者教师,则更应该积极探索以适应新教材的改革和社会的需要。初中物理起始阶段的教学效果如何,不仅影响学生初中阶段的物理学习,而且还会影响到高中阶段文理分流的趋向。因此,为使初二学生能自然地、比较平稳地踏上学习物理的轨道,起始阶段的教学应在提高学生学习兴趣和消除畏惧心理上下工夫。,一、 互动式教学,启发式提问,在课堂教学中,教师要充分利用45分钟,使这45分钟高质量高效率。第一步,教师要指导学生如何预习新章节。预习是学习好物理的起点,首先通读全文找出重点,用红笔将重点画出来,并将这些重点记在预习本上。其次,寻找疑点,将这些疑点都写在疑点本上,并用红笔勾画出,作为标记,上课要注意听。再者,将预习到的知识和后面的小试验小制作联系起来,如果能做,自己做一做,锻炼自己的动手与动脑、逻辑思维、判断能力。最后,做一下预习反馈,将本、书合上,分析这一章节讲了什么,头脑中要有一个知识网络,并和相应的习题作一下对照,看一看自己是否能解答。,接着,在授课过程以教师起主导作用,学生起主体作用为主线,以教与学为重点,贯穿整个课堂。让学生变被动接受和管理为主动参与,实行导向、导航、导演、引导、指导、辅导,领着学生走向知识,而不是领着知识走向学生。教学中首先注意引入方式,启发式、实物式、对比式,或是兼而有之。讲述中善于从学生的角度出发,从学生的立场和角度考虑问题。如在讲蒸发时,首先将一块湿布在黑板一侧抹一下,然后对同学们讲,一会儿会有什么现象发生?继而引出蒸发。其次,注重和实际相结合。日常生活中的现象学生都易接受,也易理解,关键是要分析清楚。在教学过程中注意循序渐进,不能好高骛远。最后,作业要精,按层次布置作业,但又不能伤了一些学生的自尊心。基本题全批全改,重点题细批细改,学困生面批面改。讲评时,要有一个度,无论是学困生还是优秀生,都有获得指导的机会。,二、 充分发挥新教材优势,积极调动学生兴趣,初二学生一开始的那种自豪感和迫切心情毕竟是短暂的,当他们进入课程教学后,能否保持较浓厚的兴趣,是他们能否学好物理的关键。新教材图文并茂、生动活泼、编排形式新颖;内容顺序的重新安排切合学生的实际;课题的引入既有趣又通俗易懂,对学生很有吸引力,很容易激发学生的兴趣。只要教师能充分重视引导学生阅读课本,发挥学生学习的主体作用,就能比较容易达到既提高学生的学习兴趣,又提高学生阅读能力的目的。,在学生阅读课本内容时我们发现,学生对课本上那些具有现代气息、形象直观的插图看得很投入,我们就因势利导,让他们回答这幅图是什么意思,那幅图说明课文中哪方面的内容。这样学生对课本内容的印象深了,便产生了学习兴趣。有些学生在课堂上对课本中的“阅读材料”看得很认真,教师可暗示他停止,但在下课前要提示学生课后去阅读,并把“阅读材料”中的内容稍加渲染,引起学生的普遍重视和兴趣。,新教材注意联系实际,适当降低了难度。但由于农村初中学生基础较差,学习中还是会感到有困难的,他们一遇困难一般都会产生为难情绪。因此,教师要认真分析、钻研新教材,备好课,力求讲得简洁、浅显、容易理解。在教学中尽量为学生疏通教材,使他们不感到物理知识难学,同时,帮助学生掌握正确的学习方法。,三、 利用激励教学,激发学习动力,激励性教学是指用激励性语言、行动去触动心灵的心理教育。在教学中,要经常对学生采用赞许式的评价。无论在哪些方面,尽量去挖掘学生们身上的优点,鼓励他们的信心,并给以赞许式的肯定。“优点单”就是一个很好的措施,使每个学生看到了老师与身边同学的评价,便会恍然大悟,原来自己还有这么多优势没有发挥出来,我也能行。实践表明,对于学困生来说,有时即使是简单的肯定评价,也能让他们的成绩突飞猛进。,在与学生的沟通中,同样要重视激励的作用。沟通向来是师生之间共同进步的催化剂。课上是老师,课下是朋友,这是师生共同的向往。在这个过程中,老师可以了解到学生的困难,并且能尽到最大能力来帮助他;吸取他们提出的意见,并及时改正,不断地完善自己,使学生的心与自己的心更加贴近。此时,教师是学生自我发展的促进者,理想探求的指路者,心理困扰的排除者。,总而言之,激励教学是一种心理教育,是素质教育的一方面。在实施激励教学的同时,时刻铭记着以师生的心理相容、心灵的互相接纳为核心,让激励教学发挥出它的价值,使教学质量得到大幅提高。,四、 了解学生,信任学生,初中物理教学从一开始就应注重了解学生,充分信任他们,给他们必要的指导和帮助。这样不但能增强学生学习物理的信心,而且也能使教师自己看到希望。对学生的了解,一方面从课堂教学、书面作业去进行,另一方面通过接近、谈话来进行。初二学生开始学物理犹如小学生启蒙时的情景,只要老师接触他们,就特别爱说、爱问。他们问得最多的话是:“物理好学吗?”“物理怎样学?听人家说,物理难学,是吗?”那种迫切要求学好物理的愿望显而易见。在这种情况下,教师应及时给他们解释,积极给他们鼓励,并且要认真回答问题,不能敷衍他们,要让他们有信心学好物理。,开始几周的课堂教学和书面作业,学生往往因语文水平有限,口头和语言文字的表达能力不高,对说理题的回答总感到力不从心。教师对这种现象首先要理解学生初学物理时的困难,然后作出示范性的答题。开始几周不做过高要求,只要他们答题时能用“物理语言”回答清楚就行,以后慢慢引导,要求也逐步提高。这样学生回答问题时胆子就大了,脑子也开动起来了,即使学生回答得不尽人意,也要鼓励他们,肯定他们能动脑筋的一面。教师对学生有瑕疵的回答和问话,应表扬肯定他们动脑筋的一面,同时给他们予以纠正和解释,这样才能取得良好的教学效果。,(八一初中),细胞贴片免疫组化染色步骤6、露凝无游氛，天高风景澈。细胞贴片,1,亲和免疫组化技术,(Affinity cytochemistry histochemistry technique),亲和免疫组化技术,2,亲和的概念,物质之间具有的高度结合力,包括抗原与抗体,生物素与抗生物素(又称亲和素)、葡萄球菌A蛋白,与lgG、植物凝集素与糖类、阳离子与阴离子、激素,与受体之间的结合反应等,亲和的概念,3,第“节生物素一亲和素免疫细胞化学技术,基本原理,(一)生物素( Biotin)与亲和素卵白素抗生物素,( Avidin/anti-Botn)之间有很强的亲和力,二)生物素和亲和素具有与其它示踪物质如荧光素和过,氧化物酶等相结合的能力,第“节生物素一亲和素免疫细胞化学技术,4,种经典的抗生物素一生物素染色法,)ABc( Avidin Biotin- peroxidase Complex)技术,(二)LAB( Labelled Avidin- Biotin)技术,(=) LSAB(labeled streptavidin biotin method):,SP( streptavidin- peroxidase)技术,SABc( streptavidin- biotin complex)技术,(四)BRAB( Bridged Avidin- Biotin)技术,(五)cSA( Catalyzed signal amplification)法,(六) Envision技术,种经典的抗生物素一生物素染色法,5,C亲和素生物素过氧化物酶,( Avidin Biotin-peroxidase Complex,ABC)技术,1.基本原理,标生物紫多,生物素化二抗,一抗,ABC法示意圈,C亲和素生物素过氧化物酶,6,2、操作步骤,(1)石蜡切片常规脱蜡至水,冰冻切片经冷丙酮固定,用PBS洗;,(2)用3%H202甲醇液室温作用20min后,充分水洗,(3)PBS洗,加牛血清白蛋白或二抗动物种属正常血清15min,(4)加第一抗体(即用型或浓缩型)4过夜或371h;,(5)PBs洗,加生物素化第二抗体3730min;,(6)PBS洗,加ABC复合物(1:100,使用前30mn将等量的亲和素,和酶标生物素混合,稀释配制成ABC复合物),3720mn,(7)PBS洗,经DABH22显色,(8)常规脱水,透明,中性树胶封固。,2、操作步骤,7,3、ABC法的优点,(1)敏感性高:结合力强,分子量小,(2)特异性强,背景染色淡;,(3)方法简便,节约时间,(4)由于生物素与抗生物素具有与多种标记物结合的能力,可用于,双重或多重免疫染色。,3、ABC法的优点,8,标泡生物素抗生物素技术,( Labelled Avidin- Biotin Technique,LAB技术),基本原理,以生物素标,记抗体作第一抗,体,酶标记抗生,物素作为第二抗,体,同SP技术,Figure 11: In the LAB or LSAB tchnology, the enzymeLabelled,streptavidin reacts witn the biounyated secondary andbody,LAB法示意图,标泡生物素抗生物素技术,9,2、操作步骤,(1)步骤与ABC法相同;,(5)PBS洗后加生物素标记第一抗体373min,(6)PBS洗后加酶标亲和素(如 HRP-Avidin)3730min:,(7)以下步骤同ABC法。,2、操作步骤,10,三LsAB( labeled streptavidin biotin)技术:,SP( streptavidin- peroxidase)技术,SABC( streptavidin- biotin complex)技术,、基本原理,Ag Ag,P方法示意图,SABC示意图,三LsAB( labeled streptavidin bi,11,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,12,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,13,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,14,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,15,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,16,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,17,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,18,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,19,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,20,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,21,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,22,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,23,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,24,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,25,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,26,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,27,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,28,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,29,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,30,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,31,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,32,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,33,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,34,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,35,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,36,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,37,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,38,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,39,细胞贴片免疫组化染色步骤课件,40,51,、天下之事常成于困约，而败于奢靡。,陆游,52,、生命不等于是呼吸，生命是活动。,卢梭,53,、伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。,易卜生,54,、唯书籍不朽。,乔特,55,、为中华之崛起而读书。,周恩来,谢谢！,51、天下之事常成于困约，而败于奢靡。陆游52、,41,