中药制剂中各类化学成分分析ppt课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第五章 中药制剂中各类化学成分分析,第五章 中药制剂中各类化学成分分析,掌握中药制剂中生物碱、黄酮、三萜皂苷、醌类成分的定性、定量原理与方法。,熟悉中药制剂中挥发性成分、木质素类成分的定性、定量原理与方法。,了解其他成分（有机酸类、环烯醚萜类、香豆素类、单萜及二萜类、多糖类）的分析方法。,【,目的要求,】,药物分析学科,掌握中药制剂中生物碱、黄酮、三萜皂苷、醌类成分的定性、定量原,第五章 中药制剂中各类化学成分分析,学习方法,结构 性质 分析方法,结构：母核、官能团、分子量等,物理化学性质：溶解性、酸碱性、挥发性、氧化还原性、,旋光性、光谱特性等,分析方法：,总类成分：化学分析法、分光光度法,单一成分：各种色谱法（,GC,、,HPLC,、,HPCE,、,TLCS,、,SFC,等）,药物分析学科,第五章 中药制剂中各类化学成分分析学习方法结构：母核、官能,一、概述,1,、概念：生物碱是生物界除生物体必需的含氮化合物（如,氨基酸、蛋白质和,B,族维生素等）之外的所有含氮有机化合,物，因其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有,碱性,。,2,、含生物碱成分的常用中药：,第一节 生物碱类成分分析,一、概述第一节 生物碱类成分分析,中药名称,主要生物碱成分,中药名称,主要生物碱成分,山豆根,制川乌,马钱子,延胡索,苦参碱、氧化苦参碱、,槐果碱、金雀花碱,乌头碱,、,次乌头碱、,新乌头碱,马钱子碱、番木鳖碱,（士的宁）、,伪马钱子,碱、伪番木鳖碱,延胡索乙素、延胡索甲,素、,原阿片碱、黄连碱,苦 参,麻 黄,黄 连,黄 柏,防 己,苦参碱、,槐定碱、槐果碱、,氧化苦参碱,麻黄碱、伪麻黄碱、,去甲麻,黄碱、甲基麻黄碱,小檗碱、,巴马丁、药根碱、,黄连碱,小檗碱、药根碱、,木兰花碱,粉防己碱、,防己诺林碱、轮,环藤酚碱、木兰碱,药物分析学科,中药名称主要生物碱成分 中药名称 主要生物碱成分 山豆根苦参,第一节 生物碱类成分分析,二、理化性质,1,、,溶解性,大多数生物碱难溶于水，易溶于,氯仿,、乙醚、乙醇、丙酮及苯等有机溶剂；,与酸结合成盐后水溶性增加，但酸不同，生成的盐水溶性有差异；,季铵型生物碱、有氮氧配位键的生物碱易溶于水,液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既溶于水也可溶于有机溶剂；,含有酸性官能团或酯键的生物碱还可溶于一些碱液或热苛性碱液。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析二、理化性质药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,二、理化性质,2,、沉淀反应,大多数生物碱在酸性水溶液中可以与某些试剂生成不溶于水的复盐或分子复合物。,生物碱沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子有机酸,马钱子散中生物碱成分的鉴别,取马钱子散,1g,，加浓氨试液数滴及氯仿,10ml,，浸泡数小时，,滤过，取滤液,1ml,蒸干，残渣加稀盐酸,1ml,使溶解，加碘化铋,钾试液,12,滴，即生成黄棕色沉淀。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析二、理化性质马钱子散中生物碱成分的,第一节 生物碱类成分分析,二、理化性质,3,、显色反应,生物碱在一定,pH,条件下可与一些,酸性染料,（多为磺酸肽类）生成有色络合物，可被,氯仿,等有机溶剂定量提出,结构中具有酯键的酯碱如乌头碱等可与,异羟肟酸铁试剂,反应产生,紫红色,；,这些特点可用于中药制剂中生物碱成分的分析,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析二、理化性质药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,二、理化性质,4,、紫外光谱特性,结构中具有,共轭体系,的生物碱均有紫外吸收,结构中的氮原子与发色团直接连接或参与发色团的生物碱，其吸收峰位置与测定时溶剂的,pH,有关,。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析二、理化性质药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,三、定性鉴别,1,、一般理化鉴别,沉淀反应是生物碱理化鉴别常用方法，此反应一般在,酸性水溶液,中进行,制备样品供试液时必须净化处理，防止假阳性结果,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析三、定性鉴别药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,三、定性鉴别,2,、薄层色谱法,吸附剂：,硅胶,、氧化铝；,展开剂：多以,氯仿,、苯等低极性溶剂，加入其他溶剂调整展,开剂的极性；,由于,硅胶显弱酸性，,强碱性的生物碱在硅胶色谱板上能形成,盐，,使,Rf,值很小或拖尾、形成复斑等,。,显色剂：,常用改良碘化铋钾试剂,，有时喷,碘化铋钾,试剂之后,再喷硝酸钠试剂，可使样品斑点更加清晰。,如有荧光，不用显色,亦可用碘蒸汽、硫酸铈、碘铂酸等其他的试剂显色。,讨论：如何改进？,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析三、定性鉴别讨论：如何改进？药物分,第一节 生物碱类成分分析,三、定性鉴别,3,、纸色谱法,可用于生物碱盐或游离碱的鉴别,4,、,HPLC,：,保留时间定性,5,、,GC,：,可用于小分子生物碱的鉴别,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析三、定性鉴别药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（一）总生物碱的含量测定,1,、化学分析法,主要使用,酸碱滴定法,。,强碱滴定生物碱盐时，在,70%90%,的乙醇介质中终点比在水中明显，因此常将生物碱盐溶于,90%,乙醇，再用标准碱乙醇液滴定。,若选择的溶剂及指示终点方法合适，还可用非水滴定法进行,要求：总生物碱的,纯度较高,，用于药味少成分简单制剂的测定,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（一）总生物碱的含量测定,2,、分光光度法,（,1,）直接测定法,不经过化学反应、利用生物碱物质,自身的光吸收,直接进行比色测定的方法。,一般用于,药味较少,、,干扰小,的中药制剂中总生物碱的含量测定。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（一）总生物碱的含量测定,（,2,）酸性染料比色法（例题,P,1,2,4,）,原理：,BH,+,+In,-,BH,+,In,-,（水相）,BH,+,In,-,（有机相）,关键：,酸性染料的选择,：甲基橙、,溴麝香草酚兰,（,BTB,）和溴甲酚绿等；,pH,值的选择：,与生物碱和酸性染料的性质有关。,有机溶剂的选择：,一般用,氯仿、二氯甲烷,水分的干扰及消除,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（一）总生物碱的含量测定,（,3,）雷氏盐比色法（注意事项,p126,）,原理：,BH,+,+,Cr(NH,3,),2,(SCN),4,-,BH,Cr(NH,3,),2,(SCN),4,测定方法：,（复盐沉淀）,复盐沉淀,溶于,丙酮（或甲醇）,直接比色测定,样品,定量过量的雷氏盐,过滤滤液比色测定,max,=520nm,（,4,）异羟肟酸铁比色法,用于含有酯键结构的生物碱的测定,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（二）单体生物碱成分含量测定,1,、,TLCS,生物碱不具有紫外吸收或挥发性时可用本法测定；,选用的吸附剂、展开剂及显色方法与鉴别相似；,使用改良,碘化铋钾等,作为显色剂时，必须完全挥干展开剂后（尤其在碱性环境下展开的）才可喷洒，否则背景深、反差小，影响测定。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（二）单体生物碱成分含量测定,2,、,HPLC(,例题,P,128,),以,反相高效液相,色谱应用较多；,在反相高效液相色谱中，由于硅胶表面残留硅醇基的影响，使生,物碱分析易产生保留时间延长、峰形变宽、拖尾；,可在流动相中加入,硅醇基抑制剂,、,离子对试剂等,措施以克服游离,硅醇基的影响，满足定量分析的要求；,中药制剂中生物碱成分进行高效液相色谱法测定时，使用较多的,是,紫外检测器。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,四、含量测定,（二）单体生物碱成分含量测定,3,、,GC,只适用于有挥发性的，遇热不分解的生物碱类，如麻黄碱、槟榔,碱、苦参碱和颠茄类生物碱等,制备供试品溶液时一般应采用,冷提取,，净化过程也要避免加热以,防成分的流失，最后需用氯仿等低极性有机溶剂为溶媒制备成供试,液。,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析四、含量测定药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析,五、常见生物碱成分分析,化合物名称,结构式,理化性质、结构及光谱特征,常用定量分析方法,小檗碱,（黄连素）,Berberine,(Umbellatine),（,C,20,H,18,NO,4,；,336.37,）,异喹啉类原小檗碱,型生物碱、季铵型,生物碱、有共轭体,系。,黄色结晶、碱性较,强，易溶于热水或,热乙醇，微溶或不,溶于苯、氯仿、丙,酮，其盐酸盐水中,溶解度小。,mp,：,1450,UV,：,225,，,270,，,331,。,重量法、滴定法,分光光度法,薄层扫描法,薄层荧光扫描法,高效液相色谱法,脉冲极谱法,流动色谱分析法,酶法,第一节 生物碱类成分分析五、常见生物碱成分分析化合物名称,第一节 生物碱类成分分析,五、常见生物碱成分分析,化合物名称,结构式,理化性质、结构及光谱特征,常用定量分析方法,士的宁,（番木鳖碱）,Strychnine,（,C,21,H,20,N,2,O,2,;334.40,）,单萜吲哚类生物,碱、环叔胺显碱,性、酰胺不显碱,性。,难溶于水，可溶于,乙醇，甲醇。易溶,于氯仿，微溶于乙,醚。,mp,：,268,290,。,UV,：,282,。,重量法,滴定法,分光光度法,一阶导数分光光度法,薄层扫描法,高效液相色谱法,第一节 生物碱类成分分析五、常见生物碱成分分析化合物名称结,第一节 生物碱类成分分析,五、常见生物碱成分分析,化合物名称,结构式,理化性质、结构及光谱特征,常用定量分析方法,乌头碱,Aconitine,（,C,34,H,47,N O,11,;645.76,）,二萜类酯型生物,碱。,易溶于氯仿、苯、,无水乙醇和乙醚，,难溶于水、微溶石,油醚,mp,：,204,UV:281,273,230,202,滴定法,酸性染料比色法,一阶导数紫外分光光度法,薄层扫描法,高效液相色谱法,药物分析学科,第一节 生物碱类成分分析五、常见生物碱成分分析化合物名称结,第二节 黄酮类成分分析,一、概述,黄酮类化合物（,flavonoids,）是广泛存在于自然界的一大类化合物。多具有颜色，在植物体内大部分与糖结合成苷，一部分以游离形式存在,.,黄酮类化合物多为晶性固体，少数（如黄酮苷）为无定形粉末。,1,、定义：黄酮类化合物是指基本母核为,2-,苯基色原酮（,2-phenylchromone,）类化合物，现在则是泛指两苯环通过中央三碳链,（,C,6,-C,3,-C,6,）,相互联结而成的一系列化合物。,第二节 黄酮类成分分析一、概述,中药名称,主要黄酮类成分,中药名称,主要黄酮类成分,黄芩,黄芩苷、黄芩素、,汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素,山柰,山柰酚、山柰素,槐米,芦丁、槲皮素,广藿香,商陆素、芹菜素,葛根,葛根素,、大豆苷、大豆苷元、,7-,木糖苷葛根素,白果,山奈酚、槲皮素、芦丁,枳实,橙皮苷,、川陈皮素、新橙皮苷、,5-,邻,-,去甲基川陈皮素,高良姜,高良姜素、山奈素、槲皮素,茵陈,茵陈黄酮,、芫花素、槲皮素,补骨脂,补骨脂查耳酮、异补骨脂查耳酮,山楂,槲皮素、金丝桃苷,金线草,槲皮素,、山奈酚,2,、含黄酮类成分的常见中药,:,中药名称主要黄酮类成分 中药名称 主要黄酮类成分 黄芩 黄芩,第二节 黄酮类成分分析,二、结构特征及理化性质,1,、,结构特征,第二节 黄酮类成分分析二、结构特征及理化性质,第二节 黄酮类成分分析,二、理化性质,2,、,溶解度,黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异。,游离苷元,难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中；,黄酮苷,一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等。,第二节 黄酮类成分分析二、理化性质,第二节 黄酮类成分分析,二、理化性质,3,、,酸碱性,酸性：黄酮类化合物因分子中多有酚羟基，故,显酸性,，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酸性强弱：,7,4-,二羟基,7-,或,4-,羟基,一般酚,5-,羟基,碱性,:,碱性氧原子的性质,黄酮类化合物分子中,-,吡喃酮环上的,1-,位氧原子，因有未共用的电子对，故表现出,微弱的碱性,，可与强无机酸，如浓硫酸、盐酸等生成盐，常表现出特殊的颜色，可用于鉴别。,生成的盐极不稳定，加水后即可分解。,第二节 黄酮类成分分析二、理化性质,4,、,显色反应,还原反应：与盐酸,镁粉（或锌粉）反应（显红色或紫红色）,金属盐类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中多有下列结构，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物。,第二节 黄酮类成分分析,4、显色反应第二节 黄酮类成分分析,铝盐：,常用试剂为,1%,三氯化铝或硝酸铝溶液。生成的络合物多为,黄色,（,max=415nm,）,并有荧光，可用于定性及定量分析。,铅盐：,常用,1%,醋酸铅及碱式醋酸铅水溶液，可生成,黄至红色沉淀,。据此不仅可用于鉴定，也可用于提取及分离工作。,锆盐：,多用,2%,二氯氧化锆甲醇溶液。黄酮类化合物分子中有游离的,3-,或,5-OH,存在时，均可反应生成,黄色的锆络合物,。,但两种锆络合物对酸的稳定性不同，当反应液中接着加入枸橼酸后，,5-,羟基黄酮的黄色溶液显著褪色，而,3-,羟基黄酮溶液的呈鲜黄色（锆,枸橼酸反应）。,第二节 黄酮类成分分析,铝盐：常用试剂为1%三氯化铝或硝酸铝溶液。生成的络合物多,5,、,紫外光谱特征,黄酮类由于具有,2-,苯基色原酮的基本结构，具有特定的紫外吸收峰，常有两个较强的吸收带，,I,带在,300400nm,范围内，它是由于,B,环桂皮酰基引起的，,带为,240285nm,范围内，它是由于,A,环上的苯甲酰基引起的。,黄酮类化合物当加入一些位移试剂如甲醇钠、醋酸钠、氯化铝等，可使最大吸收波长发生位移，选择性提高，还可消除杂质的干扰，有利于含量测定。,第二节 黄酮类成分分析,苯甲酰基 桂皮酰基,240280nm 300400nm,5、紫外光谱特征第二节 黄酮类成分分析苯甲酰基,第二节 黄酮类成分分析,三、定性鉴别,1,、理化鉴别,盐酸,-,镁粉（锌粉）反应,金属盐类试剂的配合反应,2,、色谱鉴别,吸附剂：硅胶、聚酰胺。,硅胶色谱分离弱极性化合物较好；,聚酰胺色谱分离含游离酚羟基的黄酮及其苷元；,纤维素薄层则适用于分离多糖苷混合物。,显色反应：采用在紫外光下观察荧光和喷显色剂相配合的方法。,第二节 黄酮类成分分析三、定性鉴别,四、含量测定,（一）总成分的含量测定,中药制剂中如含有黄酮类成分，可根据要求测定制剂中的总黄酮含量、黄酮类单体成分的含量或二者同时测定。,直接测定,:,直接于最大吸收波长处测定其吸收度,以芦丁等为对照品计算其含量,.,显色测定,:,黄酮类化合物显色以后显色物与背景最大吸收波长差别较大,可消除背景,(,即阴性空白,),的干扰,以提高本法的选择性及灵敏度,.,常用铝盐作显色试剂,.,第二节 黄酮类成分分析,四、含量测定第二节 黄酮类成分分析,四、含量测定,（二）黄酮类单体成分的含量测定,1,、薄层色谱法,样品经有机溶剂或水提取后，可用硅胶、纤维素或聚酰胺进行层析，达到分离目的。,层析后可将含有待测组分的色斑刮下，再用适当的溶剂洗脱后，用紫外,-,可见分光光度法测定。,更常用的是薄层扫描仪（单波长或双波长法）直接在薄层板上扫描测定。,第二节 黄酮类成分分析,四、含量测定第二节 黄酮类成分分析,（二）黄酮类单体成分的含量测定,2,、高效液相色谱法,由于黄酮类化合物在紫外区有较强的吸收，使用,HPLC,法检测灵敏度较高，故该法在黄酮类单体成分的定量分析中最常用。,黄酮类成分的,HPLC,条件他为正相和反相色谱两类，反相色谱应用较多。,反相色谱测定多有,C,18,键合相固定液，流动相常用甲醇,-,水,-,乙酸（或磷酸缓冲液）及乙腈,-,水。检测器主要采用紫外检测器或荧光检测器。,第二节 黄酮类成分分析,（二）黄酮类单体成分的含量测定第二节 黄酮类成分分析,应用示例,双黄连口服液中黄芩苷的含量测定,处方组成：金银花、黄芩、连翘,1,、色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇,-,水,-,冰醋酸（,50,：,50,：,1,）为流动相；检测波长,274nm,。理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于,1500.,2,、对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品,10mg,，置,100ml,量瓶中，加,50%,甲醇适量，置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每,1ml,中含黄芩苷,0.1mg,）。,应用示例双黄连口服液中黄芩苷的含量测定,3,、供试品溶液的制备：精密量取本品,1ml,，置,50ml,量瓶中，加,50%,甲醇适量，超声处理,20min,，放置至室温，加,50%,甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。,4,、测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各,5ul,，注入液相色谱仪，测定，即得。,本品每支含黄芩以黄芩苷（,C,21,H,18,O,11,）计，不得少于,80mg,。,应用示例,3、供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，,第三节 三萜皂苷类成分分析,一、概述,1,、概念,三萜是由,30,个碳原子组成的萜类化合物，大多数三萜化合物均可看作由,6,个异戊二烯单位联结而成。,第三节 三萜皂苷类成分分析一、概述,2,、含三萜皂苷类成分的常用中药,2、含三萜皂苷类成分的常用中药,第三节 三萜皂苷类成分分析,二、结构及理化性质,游离三萜类化合物通常多不溶于水，而与糖结合成苷后，则大多可溶于水，振摇后可生成胶体溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，故有三萜皂苷之称。,甘草酸,人参皂甙,(A,型,),第三节 三萜皂苷类成分分析二、结构及理化性质甘草酸人参皂甙,二、理化性质,1,、溶解度：,可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶于或难溶于乙醚、苯等极性小的有机溶剂。,在含水丁醇或戊醇中溶解度较好，且又能与水分成二相,，可利用此性质从水溶液中用正丁醇或戊醇提取皂苷，借以与亲水性的糖、蛋白质等分离。,三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有机溶剂，而不溶于水。,第三节 三萜皂苷类成分分析,二、理化性质第三节 三萜皂苷类成分分析,第三节 三萜皂苷类成分分析,二、理化性质,2,、显色反应,醋酐,-,浓硫酸反应：,皂苷溶解于醋酐中，加浓硫酸,-,醋酐试剂，能产生颜色变化，一般由黄色转为红色、紫色或绿色。,冰醋酸,-,乙酰氯反应：,皂苷溶于醋酸中，加入乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍稍加热，则呈现红色或紫红色。,氯仿,-,硫酸反应：,皂苷溶于氯仿，沿管壁滴加浓硫酸后，在氯仿层呈现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。,金属盐类反应：,+,铅、钡、铜盐沉淀,第三节 三萜皂苷类成分分析二、理化性质 2,第三节 三萜皂苷类成分分析,三、定性鉴别,1,、理化鉴别,泡沫反应：多用于检验含有皂苷的原料药；,化学显色反应：仅在组成药物较少的中药制剂中使用。,2,、,TLC-,皂苷定性鉴别中最常用的方法。,吸附剂：硅胶，氧化铝、硅藻土等。,展开剂：,氯仿,-,甲醇,-,水（,13,：,7,：,2,）（,10,以下放置，下层）氯仿,-,醋酸乙酯,-,甲醇,-,水（,15,：,40,：,22,：,10,）（下层）,显色剂：三氯醋酸、氯磺酸,-,醋酸、,50%,及,10%,硫酸乙醇液、碘蒸气等显色剂进行显色，不同浓度的,硫酸乙醇,液最常用。,第三节 三萜皂苷类成分分析三、定性鉴别1、理化鉴别,第三节 三萜皂苷类成分分析,四、定量分析,（一）总成分分析,提取分离：一般需要用适当的溶剂提取。提取溶剂可为各种浓度的甲醇（,70%-95%,）、乙醇、异丙醇、丁醇、戊醇。总皂苷成分分离可用有机溶剂，如水饱和的正丁醇萃取，也可用大孔吸附树脂处理后溶剂洗脱。,1,、重量法,该法主要用于含皂苷的原料药质量控制。,在中药制剂中，当处方中药味含皂苷类成分较多时，,常用正丁醇作溶剂，测定正丁醇浸出物,。,第三节 三萜皂苷类成分分析四、定量分析（一）总成分分析,第三节 三萜皂苷类成分分析,四、定量分析,（一）总成分分析,2,、比色法：,常用显色剂有：香草醛,-,硫酸、,香草醛,-,高氯酸,、醋酐,-,硫酸、高氯酸、浓硫酸以及亚甲蓝等。,用比色法测定中药制剂中总皂苷或总苷元的含量时，可选用单体皂苷或皂苷元作对照品，但要注意测定单体皂苷或皂苷元与总皂苷的换算系数。,第三节 三萜皂苷类成分分析四、定量分析（一）总成分分析,（二）皂苷元的含量测定,皂苷元的获得：,得到总皂苷后，加酸（如硫酸、盐酸）加热水解，得到皂苷元；,将样品先行水解，再用有机溶剂从水解后的溶液中提取皂苷元。,测定方法：主要有薄层色谱法、高效液相色谱法和比色法。,第三节 三萜皂苷类成分分析,（二）皂苷元的含量测定第三节 三萜皂苷类成分分析,三萜皂苷类单体成分含量测定：,（,1,）薄层色谱法,样品经适当的提取、纯化后，用薄层色谱法分离，可排除其他组分的干扰，常用于测定中药制剂中的皂苷元或单体皂苷，定量方法可采用薄层洗脱,比色法或薄层扫描法。,第三节 三萜皂苷类成分分析,三萜皂苷类单体成分含量测定：第三节 三萜皂苷类成分分析,三萜皂苷类单体成分含量测定：,（,2,）高效液相色谱法,大多数三萜皂苷类成分，如人参皂苷、三七皂苷等可利用其在紫外区的末端吸收来检测，但灵敏度相对要低。,若中药制剂中所含三萜皂苷类成分本身具有较强的紫外吸收，如甘草酸、远志皂苷等，可用,HPLC,分离并用紫外检测器检测。,蒸发光散射检测器（,ELSD,）用于高效液相色谱法检测三萜皂苷类成分的应用日渐广泛。,第三节 三萜皂苷类成分分析,三萜皂苷类单体成分含量测定：第三节 三萜皂苷类成分分析,第四节 醌类成分分析,一、概述,中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四种类型。,其中以,蒽醌,类化合物最为多见，包括蒽醌及其不同还原程度的产物和二聚物，如蒽酚、氧化蒽酚、蒽酮、二蒽酮、二蒽醌等。,这些化合物在中药中可游离存在，也可与糖结合成苷，称为蒽苷。,第四节 醌类成分分析一、概述,第四节 醌类成分分析,二、结构特征及理化性质,1,、结构类型及特征,苯醌类,苯醌类化合物从结构上可分为邻苯醌及对苯醌两大类。因前者不稳定，故天然存在的苯醌化合物多为对苯醌的衍生物，且在醌核上多有,-OH,、,-OCH3,、,-CH3,等基团或更长的烃类侧链。,对苯醌 邻苯醌,第四节 醌类成分分析二、结构特征及理化性质 对苯,萘醌类,萘醌化合物从结构上考虑可以有,(1,4),、,(1,2),及,amphi(2,6),三种类型。但迄今为止从自然界得到的几乎均为,-,萘醌类。,-,（,1,，,4,）萘醌,-,（,1,，,2,）萘醌,amphi-(2,6),萘醌,菲醌类,天然菲醌衍生物包括邻醌（,A,）及对醌（,B,）两种类型。,（,A,）（,B,）,第四节 醌类成分分析,萘醌类-（1，4）萘醌 -（1，2）萘,蒽醌类,蒽醌类成分包括蒽醌衍生物及其不同还原程度的产物，如氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮及蒽酮的二聚物等。,蒽醌 氧化蒽酚 蒽酮 蒽酚,第四节 醌类成分分析,蒽醌类蒽醌 氧化蒽酚 蒽酮,2,、含醌类成分的常用中药,第四节 醌类成分分析,2、含醌类成分的常用中药第四节 醌类成分分析,第四节 醌类成分分析,二、结构及理化性质,丹参醌,IIA,大黄素,第四节 醌类成分分析二、结构及理化性质丹参醌IIA大黄素,第四节 醌类成分分析,二、结构及理化性质,（,1,）溶解性,苯醌及萘醌多以游离状态存在；而蒽醌类则往往结合成苷存在于植物体中；,游离的醌类多具有升华性；小分子的苯醌及萘醌类具有挥发性，能随水蒸气蒸馏，可据此进行提取、精制工作。,游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂，微溶于或不溶于水。,结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在热水中也可溶解，几乎不溶于乙醚、苯、氯仿等非极性溶剂中。,第四节 醌类成分分析二、结构及理化性质（1）溶解性,（,2,）酸碱性,蒽醌类化合物分子中多具有酚羟基，故具有一定酸性，在碱性水溶液中易溶，但加酸酸化时又可重新沉淀析出，所谓碱提取,酸沉淀即是根据这个道理进行的。,根据以上性质，醌类化合物的提取可采用碱提取,-,酸沉淀法。,第四节 醌类成分分析,（2）酸碱性第四节 醌类成分分析,第四节 醌类成分分析,二、结构及理化性质,（,3,）显色反应,羟基蒽醌,+,碱,橙，红，紫红，蓝,+Pb,2+,/Mg,2+,配合物。,与,Pb2+,形成的络合物在一定,pH,条件下能沉淀析出，故可用于该化合物的精制。,9,、,10,位未取代的,羟基蒽酮化合物,+,对亚硝基二甲基苯胺,紫，绿，蓝，灰,第四节 醌类成分分析二、结构及理化性质,三、定性鉴别,1,、显色反应,将中药制剂用适当方法提取分离，制成供试品液，利用碱性条件下的呈色反应或醋酸镁显色反应等可对羟基蒽醌类成分进行鉴别。,2,、升华法,游离的蒽醌及其他醌类衍生物多具有升华性。中药制剂中如含有这类成分量较大，可采用升华法得到升华物，可见光下观察或加碱性试液显色定性。如大黄流浸膏的鉴别。,第四节 醌类成分分析,三、定性鉴别第四节 醌类成分分析,3,、薄层鉴别,（,1,）吸附剂：多用硅胶,（,2,）展开剂：,A,：乙酸乙酯,-,甲醇,-,水（,100,：,16.5,：,13.5,或相近的比例），适于他离蒽醌苷元和蒽醌苷。,B,：正丙醇,-,乙酸乙酯,-,水（,4,：,4,：,3,）和异丙醇,-,乙酸乙酯,-,水（,9,：,9,：,4,），适于分离番泻苷和二蒽酮苷,.,C,：不含水或甲醇的混合溶媒适合于分离蒽醌类的苷元。,（,3,）显色方法：主要有喷碱性试剂或醋酸镁甲醇液、氨气熏及在紫外灯下观察荧光，亦可在可见光下直接观察色斑。,第四节 醌类成分分析,3、薄层鉴别第四节 醌类成分分析,四、含量测定,蒽醌类成分含量测定,1,、游离蒽醌的测定,中药中含有游离蒽醌的量一般不高，且为脂溶性的，故此部分另用弱极性溶剂如乙醚、氯仿等提取后加碱比色测定。,2,、结合蒽醌的测定,通常是取游离蒽醌测定项下的药渣将苷提出，水解成苷元后再测定；,将药渣先行酸水解，然后用非极性溶剂提取苷元后测定；,取待测样品先行酸水解，然后用非极性溶剂提取苷元后测定，其结果为总蒽醌含量，从中减去游离蒽醌含量，即得结合蒽醌的含量。,第四节 醌类成分分析,四、含量测定第四节 醌类成分分析,四,、含量测定,3,、蒽醌类单体成分的测定,中药制剂中蒽醌类单体成分的测定一般要将样品水解后再进行测定，测定方法主要有薄层扫描法和高效液相色谱法。,薄层扫描法为蒽醌类成分常用定量分析方法，经层析分离后，可在可见光、紫外光及荧光下扫描测定。,蒽醌类成分在紫外及可见光下均有强吸收，利用高效液相色谱,-,紫外可见光检测器测定蒽醌类单体成分，具有灵敏、准确、简便等特点。在含蒽醌类化合物的中药制剂分析中应用日趋增多。,第四节 醌类成分分析,四、含量测定第四节 醌类成分分析,第四节 醌类成分分析,四、含量测定,例,1,、,牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定,混合碱液比色法,.,对照品溶液测定,：以,1,，,8-,二羟基蒽醌,为对照品，精密称取,10mg,于,100mL,量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度（,100g/mL,）。取,1mL,对照品液于,10mL,量瓶中，在水浴上蒸干，加,5%,氢氧化钠,-2%,氢氧化铵混合碱,溶解并稀释至刻度，,放置,1,小时,，以,5%,氢氧化钠,-2%,氢氧化铵混合碱液为空白，在,510nm,波长处测定。,样品测定：,游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片,10,片，刮去糖衣，精密称定重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入,氯仿,100mL,，称重，水浴上,回流,4,小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量，滤过，吸取滤液,50mL,于分液漏斗中，用,蒸馏水,20mL,洗涤,数次，至水层无色，弃去水液。氯仿层用,5%,氢氧化钠,-2%,氢氧化铵混合碱液振摇萃取,数次，直至混合碱液无色，合并碱液，用,20mL,氯仿洗涤,数次，至氯仿层无色，弃去氯仿层。将混合碱液在水浴上,加热数分钟至氯仿挥尽,，冷却，移入,100mL,量瓶中，并稀释至刻度，放置,1,小时，以,5%,氢氧化钠,-2%,氢氧化铵混合碱液为空白，在,510nm,处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于,1,，,8-,二羟基蒽醌含量）。,第四节 醌类成分分析四、含量测定,第四节 醌类成分分析,四、含量测定,例,1,、,牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定,混合碱液比色法,总蒽醌的测定,：精密称取游离蒽醌项下的牛黄解毒片粉一片置于,150mL,烧瓶中，加,2.5mol/L,硫酸,30mL,直火回流,4,小时,，放冷，加入,氯仿,20mL,，水浴,回流,0.5,小时,，放冷，吸出氯仿液，再加氯仿，反,复操作至氯仿无色为止。合并氯仿层液，用,蒸馏水洗涤,数次，至水,层无色，弃去水液。氯仿液用,5%,氢氧化钠,-2%,氢氧化铵,混合碱液振,摇萃取数次，至碱液无色，合并，用,20mL,氯仿洗涤数次，至氯仿层,无色，弃去氯仿液。将碱液置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入,50mL,量瓶中，用混合碱液稀释至刻度，放置,1,小时，以,5%,氢氧化,钠,-2%,氢氧化铵液为空白，在,510nm,处测定，计算游离蒽醌的含量,（相当于,1,，,8-,二羟基蒽醌含量）。,结合蒽醌的计算：,每片含结合蒽醌量,=,每片含总蒽醌量,每片含游离蒽醌量,。,第四节 醌类成分分析四、含量测定,第四节 醌类成分分析,四、含量测定,例,2,、,复方丹参片中丹参酮,A,含量测定,高效液相色谱法,色谱条件与系统适用性试验,：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇,-,水,（,73,：,27,）为流动相；检测波长为,270nm,。,对照品溶液的制备,：精密称取丹参酮,A,对照品,10mg,，置,50mL,棕色量瓶,中,用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取,5mL,，置,25mL,棕色量瓶中，加,甲醇至刻度，摇匀，即得（每,1mL,中含丹参酮,A40g,）,供试品溶液的制备,：取本品,10,片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取,1g,，精密称定，精密加入甲醇,25mL,，称定重量，超声处理,15,分钟，放冷，,再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。,测定法：,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各,10,L,，注入液相色谱,仪，测定，即得。,第四节 醌类成分分析四、含量测定,第四节 醌类成分分析,五、常见醌类成分,化合物名称,结构式,理化特征,常用定量方法,大黄酸,(Rhein),（,C,15,H,8,O,6,，,284.21,）,为黄色针状结晶（升化法），,mp321,322,，,330,分解。几乎不溶于水，溶于碱和吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。,UV,max,MeOH,nm(),：,229(36800),258(20100),435(11100),。,高效液相色谱法,薄层扫描法,第四节 醌类成分分析五、常见醌类成分化合物名称 结构式 理,第四节 醌类成分分析,五、常见醌类成分,化合物名称,结构式,理化特征,常用定量方法,大黄素,(Emodin),（,C,15,H,10,O,5,，,270.23,）,为橙色针状结晶，,mp265,267,。几乎不溶于水，溶于乙醇及氢氧化钠、碳酸钠、氨水等碱液中。,25,时溶于（,g/100mL,）,:,乙醚,0.140,、氯仿,0.071,、四氯化碳,0.010,、二硫化碳,0.009,。,UV,max,EtOH,nm(Log),：,220,（,4.55,），,252,（,4.26,），,265,（,4.34,），,289,（,4.34,），,437,（,4.10,）。,高效液相色谱法,薄层扫描法,第四节 醌类成分分析五、常见醌类成分化合物名称 结构式 理,第四节 醌类成分分析,五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析,五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析,五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析,五、常见醌类成分,第四节 醌类成分分析五、常见醌类成分,第五节 挥发性成分分析,一、概述,挥发性成分是指中药中一类具有芳香气并易挥发的成分，其化学组成复杂，主要包括挥发油类成分和其他分子量较小、易挥发的化合物。,按照化学结构分类：,萜类化合物,芳香族化合物,脂肪族化合物,第五节 挥发性成分分析一、概述,中药,名称,挥发油中主要成分,中药名称,挥发油中主要成分,厚朴,辛夷,肉桂,陈皮,川芎,薄荷,广霍香,-,桉油醇、,-,蒎烯、柠檬烯、醋酸龙脑酯,柠檬烯、丁香酚、桉油精、,-,蒎烯,桂皮醛、桂皮酸、乙酸苯丙酯,柠檬烯、柠檬醛,藁本内酯、,3-,丁叉苯酞、香桧烯,薄荷酮、薄荷脑、乙酸薄荷酯,广霍香醇、苯甲醛、丁香酚、桂皮醛,羌活,细辛,豆蔻,丁香,-,蒎烯、,-,蒎烯、柠檬烯、萜品烯醇,-4,、,甲基丁香酚、黄樟醚、细辛醚优香芹酮、,-,蒎烯、,-,蒎烯,桉油精、龙脑、樟脑、草烯松油烯、蒎烯,丁香酚、水杨酸甲酯、,-,蒎烯、,-,蒎烯、乙酰丁香酚,含挥发油成分的常用中药,中药挥发油中主要成分 中药名称 挥发油中主要成分 厚朴-桉,第五节 挥发性成分分析,二、结构及理化性质,薄荷醇,桂皮醛,柠檬烯,第五节 挥发性成分分析二、结构及理化性质薄荷醇桂皮醛柠檬烯,第五节 挥发性成分分析,二、结构及理化性质,显色反应：,含有酚类成分,+,三氯化铁,蓝色、蓝紫色、或绿色反应。,含有羰基化合物,+,苯肼或苯肼衍生物、羟胺试剂 结晶性的衍生物。,含有醛类化合物,+,硝酸银氨试液 银镜反应。,含有不饱和化合物,+,溴 红棕色褪去。,含有肟类衍生物,+,浓硫酸 蓝色或紫色反应。,第五节 挥发性成分分析二、结构及理化性质显色反应：,（一）化学反应法,利用挥发性成分的结构或功能基的化学性质进行鉴别，但专属性不强。,大多数挥发油成分能在浓硫酸（或浓盐酸）存在下与香草醛形成各种颜色的化合物。,例 冰硼散中冰片（合成龙脑）的鉴别,处方：冰片、硼砂（煅）、朱砂、玄明粉,取本品,0.5g,，加乙醚,10ml,，振摇，滤过，滤液置蒸发皿中，放置，使乙醚挥发后，加新配制的,1%,香草醛硫酸溶液,1,2,滴，显紫色。,第五节 挥发性成分分析,三、,定性鉴别,（一）化学反应法第五节 挥发性成分分析三、定性鉴别,第五节 挥发性成分分析,三、,定性鉴别,（二）,TLC,吸附剂：硅胶、氧化铝,展开剂：石油醚、正己烷,-,不含氧的烃类。,（石油醚、正己烷加少量乙酸乙酯或苯,-,含氧化合物）,显色剂：茴香醛,-,浓硫酸试剂（通用型），,若干扰较多，选用专属性强的显色剂。,第五节 挥发性成分分析三、定性鉴别（二）TLC,常用显色剂：,香草醛浓硫酸试剂：与挥发油中各成分产生多种鲜艳的颜色,2%,高锰酸钾水溶液：在粉红色背景下产生黄色斑点时表明含不饱和化合物。,荧光素溴试剂：在长波长的紫外灯下观察，如薄层显黄色荧光，表明含乙烯基化合物,2,，,4,二硝基苯肼试剂：如产生黄色斑点，表明可能含有醛或酮类化合物异羟肟酸铁试剂：如产生淡红色斑点，表明含有内酯类化合物,三氯化铁试剂：斑点显蓝色或绿色，表明含有酚性物质,0.05,溴酚蓝乙醇溶液：斑点显黄色，表明含酸类物质,硝酸铈铵试剂：在黄色背景上显棕色斑点，表明含有醇类物质,碘化钾冰醋酸淀粉试剂：斑点显蓝色表明含过氧化物,第五节 挥发性成分分析,常用显色剂：第五节 挥发性成分分析,处方：檀香、丁香、木香、冰片、薄荷脑等。,取本品,0.5g,，置具塞锥形瓶中，加石油醚（,30,60,）,10ml,，振摇数分钟，滤过，滤液低温浓缩至约,2ml,，作为供试品溶液。另取薄荷脑、冰片对照品，加石油醚（,30,60,）制成每,1ml,含,0.5mg,的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各,10l,，分别点于同一硅胶,G,薄层板上，以环已烷,-,乙酸乙酯（,17:3,）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以,5%,香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。,例,避瘟散中薄荷脑、冰片的鉴别,处方：檀香、丁香、木香、冰片、薄荷脑等。例 避瘟散中薄荷脑,四、含量测定,含量测定可分为总挥发油和单一成分的测定。,总挥发油的测定，采用挥发油测定器，用蒸馏法测定，可分别测定相对密度在,1.0,以下和,1.0,以上的挥发油含量。,单一成分测定：,GC,（首选）,HPLC,TLCS,GC-MS,GC-FTIR,第五节 挥发性成分分析,四、含量测定第五节 挥发性成分分析,挥发油测定器,挥发油测定器,第六节 木脂素成分分析,一、,概述,木脂素是一类在生物体内由二分子苯丙素衍生物聚合而成的化合物。,第六节 木脂素成分分析一、概述,中药名称,主要成分,中药名称,主要成分,五味子,牛蒡子,连翘,远志,五味子甲素 五味子乙素 五味子醇甲 五味子醇乙,牛蒡子苷 牛蒡子苷元拉帕酚,连翘脂素 连翘脂苷,中国远志脂酚,厚朴,细辛,杜仲,黑芝麻,厚朴酚,和厚朴酚,细辛脂素,芝麻脂素,（,+,）,-1-,羟基松脂素葡萄糖苷,芝麻脂素,含木脂素类成分的常用中药：,中药名称 主要成分 中药名称 主要成分 五味子五味子甲素 五,第六节 木脂素成分分析,二、,结构及理化性质,C,H,3,C,H,3,O,C,H,3,O,C,H,3,H,3,C,O,H,3,C,O,H,3,C,O,H,3,C,O,牛蒡子苷,(,元,),五味子甲素,1,、溶解性,游离,难溶于水，,易溶于苯、乙醚、氯仿、丙酮、乙醇等,.,成苷时,可溶于甲醇、乙醇等,.,第六节 木脂素成分分析二、结构及理化性质CH3CH3OCH,第六节 木脂素成分分析,二、,结构及理化性质,2,、紫外光谱特征（多数木质素具有苯环的特征吸收）,max,=,250-350nm,3,、显色反应,通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇（不同的木质素化合物可显示不同的颜色）。,Labat,反应：,+,硫酸,+,没食子酸蓝绿,Ecgrine,反应：,+,硫酸,+,变色酸蓝紫,（具有亚甲二氧基的木质素的特征反应，反应机理都是分解后产生的甲醛与两分子酚缩合显色）,第六节 木脂素成分分析二、结构及理化性质2、紫外光谱特征（,第六节 木脂素成分分析,三、,定性分析,TLC,吸附剂：硅胶,展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲醇等）,显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼酸乙醇溶液、碘熏,四、含量测定,总成分：变色酸比色法（目测比色法和光电比色法）,单体成分：,TLCS,HPLC,第六节 木脂素成分分析三、定性分析,第六节 木脂素成分分析,五、常见木脂素类成分,第六节 木脂素成分分析五、常见木脂素类成分,第七节 其他成分分析,一、香豆素类成分,香豆素是具有苯骈吡喃酮母核的内酯类衍生物广泛存在于芸香科和伞形科的植物中。,1,、主要结构及理化性质,补骨脂素,茵陈内酯,异羟肟酸铁反应：,有酚羟基取代的香豆素可与三氯化铁显色反应：,紫外光谱特性：,max,=300nm,，,母核有供电子基团取代可产生荧光,第七节 其他成分分析一、香豆素类成分补骨脂素茵陈内酯异羟肟,第七节 其他成分分析,一、香豆素类成分,2,、定性鉴别,（香豆素类大多能产生荧光）,荧光法,薄层荧光鉴别,七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别,取本品,10g,，研细，加醋酸乙酯,20ml,、盐酸,0.5ml,，超声处,理,20,分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯,0.5ml,使溶解，,作为供试品溶液。,薄层条件：硅胶,G,薄层板，展开剂正已烷,醋酸乙酯（,4:1,），,显色剂为,10%,氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯,365nm,下检视。,用显色剂或喷洒碱液以增强荧光。,第七节 其他成分分析一、香豆素类成分七宝美髯颗粒中补骨脂素,第七节 其他成分分析,一、香豆素类成分,3,、含量测定,可见,-,紫外分光光度法：,荧光光度法：专属性强,TLCS,：薄层荧光扫描,HPLC,：,C18,，甲醇,-,水，,GC,：用于某些分子量小、具有挥发性的香豆素成分。,第七节 其他成分分析一、香豆素类成分,第七节 其他成分分析,二、有机酸类成分,1,、定性鉴别,吸附色谱,分配色谱,2,、含量测定,酸碱滴定法总有机酸,分光光度法,高效液相色谱法,薄层色谱法,其他方法,第七节 其他成分分析二、有机酸类成分,第七节 其他成分分析,三、环烯醚萜类成分,特殊的单萜,物理性状（多苦味；稳定性差，易聚合，以苷的形式存在；）,溶解性：易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇,薄层定性鉴别,吸附剂：硅胶、聚酰胺,显色剂：硫酸乙醇，茴香醛试液，香草醛硫酸试液，,对二甲氨基苯，甲醛硫酸试液,龙胆苦苷,第七节 其他成分分析三、环烯醚萜类成分龙胆苦苷,第七节 其他成分分析,三、环烯醚萜类成分,含量测定,高效液相色谱法,薄层扫描法,荧光分光光度法,分光光度法,复方栀子冲剂中栀子甙的含量测定,精密称取本品,3g,，置索氏提取器内，加甲醇回流提取,6,小时，,回收甲醇至干，加水,10ml,溶解，用水饱和正丁醇提取，提取,液蒸干，以甲醇溶解，通过已处理好的活性炭,-,中性氧化铝柱，,用甲醇,100ml,洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用,2ml,甲醇溶,解，作为供试品溶液。,薄层条件：硅胶,GF,254,薄层板，展开剂氯仿,甲醇,25%,氨,水（,4:1:0.1,），检测波长,247nm,，参比波长,370nm,。,第七节 其他成分分析三、环烯醚萜类成分复方栀子冲剂中栀子甙,第七节 其他成分分析,四、单萜及二萜类成分,1,、含芍药甙中药制剂的分析,薄层色谱,高效液相色谱,2,、含穿心莲内酯中药制剂的分析,薄层色谱,回滴法,比色法,总内酯,薄层扫描或高效液相色谱法,单体成分,穿心莲内酯,第七节 其他成分分析四、单萜及二萜类成分穿心莲内酯,第七节 其他成分分析,五、多糖,1,、鉴别,TLC,：,硅胶、纤维素、硅藻土,展开剂：正丁醇、水混合体系,显色剂：苯胺,-,邻苯二甲酸的正丁醇饱和水溶液等,HPLC,：,GC-MS,：,2,、提取分离：,水提醇沉,防止水解，注意消除酶、酸、碱等的影响,第七节 其他成分分析五、多糖,第七节 其他成分分析,五、多糖,3,、含量测定,1,）总多糖的测定,（例题,P153,）,3,5-,二硝基水杨酸比色法棕红色（,550nm,）,苯酚,-,硫酸法蓝绿色（,480-490nm,）,蒽酮,-,硫酸法黄绿色（,620nm,）,2,）单体多糖的含量测定,高效凝胶液相色谱法确定分子量,高效液相色谱法确定组成,色谱柱：氨基键合相硅胶柱，或普通硅胶柱,检测器：示差折光检测器,第七节 其他成分分析五、多糖,习 题,1,、,当采用硅胶薄层色谱法鉴别生物碱成分时，为什么常有斑点,Rf,值较小或斑点明显拖尾的现象？可采用哪些方法克服？,2,、酸性染料比色法测定中药制剂中生物碱成分时，关键是什么？,3,、简述聚酰胺薄层色谱分离黄酮类化合物的原理和特点。,4,、简述,HPLC-ELSD,检测人参皂苷等成分的优点。,5,、总多糖的主要含量测定方法有哪些？,6,、设计：止喘灵注射液处方组成为麻黄、洋金花、苦杏仁、连翘，请设计用薄层色谱法鉴别其中洋金花的方法。（样品供试液制备可根据方法原理用流程表示，薄层色谱法请注明选用的吸附剂及薄层原理、展开剂特点及显色剂名称）,习 题1、当采用硅胶薄层色谱法鉴别生物碱成分时，为什么常有斑,