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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第二章 组织血型和器官血型,输血技术学,Blood Transfusion Technology,血检教研室:赵 臣,输血技术学Blood Transfusion Techno,第一章 红细胞血型系统,第一节 概述,第二节,ABO,血型系统,第三节,H,系统及,Lewis,血型系统,第四节,Rh,血型系统,第五节 其他血型系统,输血技术学,第一章 红细胞血型系统第一节 概述输血技术学,第一节 概 述,第一章 红细胞血型系统,第一节 概 述第一章 红细胞血型系统,血型的发现,1901,年卡尔,.,兰德斯坦纳发现,ABO,血型系统,1927,年发现,MNS,、,P,血型系统,1940,年发现,Rh,血型系统,1945,年发明,Coombs,试验,发现更多血型,Ag,1945-1951,年发现,Lutheran,、,Kell,、,Lewis,、,Duffy,、,Kidd,、,Diego,系统,以后又发现其他血型系统.,第一节 概 述,血型的发现1901年卡尔.兰德斯坦纳发现ABO血型系统第一节,血型系统研究的三个阶段,1.,1950,前,血型血清学方法,应用,抗原抗体反应,原理,观察红细胞凝集现象,发现血型抗原,通过群体调查、种族和家系研究,阐述抗原频率、分布和遗传特点,第一节 概 述,血型系统研究的三个阶段1.1950前血型血清学方法第一节,血型系统研究的三个阶段,2.,1960-70s,血型抗原的生物化学本质,这一时期生物化学和生理学发展迅速,血型研究集中于血型抗原的,生物化学本质和化学结构,第一节 概 述,血型系统研究的三个阶段2.1960-70s血型抗原的生物化,血型系统研究的三个阶段,3.,1980s,以后,血型分子生物学,分子生物学迅速发展,,PCR技术和分子克隆技术,广泛应用,大部分血型系统的,基因定位、结构和序列,得以阐明,通过基因序列分析和对比,大量,血型抗原的,变异体和亚型,的遗传背景、分子机制被揭示,第一节 概 述,血型系统研究的三个阶段3.1980s以后血型分子生物学第一,一、红细胞血型抗原,(,一,),抗原的一般特性,1.,免疫原性和反应原性,免疫原性:刺激机体产生,Ab,及免疫效应细胞,抗原分子量决定抗原的免疫原性,,1,万,反应原性:,与,Ab,及致敏淋巴细胞特异性结合,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(一)抗原的一般特性第一节 概 述,一、红细胞血型抗原,(,一,),抗原的一般特性,2.,抗原决定簇或表位,抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团,是免疫应答和免疫反应特异性的物质基础,其,性质,、,数量,和,空间构象,决定了抗原的特性,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(一)抗原的一般特性第一节 概 述,一、红细胞血型抗原,(,一,),抗原的一般特性,3.,完全抗原和半抗原,完全抗原:,具有免疫原性、反应原性,多为蛋白质、细菌、病毒,半抗原:,无免疫原性,、,有反应原性,大多数多糖和所有类脂质,许多小分子化合物及药物(青霉素等),半抗原,+,大分子蛋白,=,完全抗原,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(一)抗原的一般特性第一节 概 述,第一章1-1-红细胞血型系统-概述课件,(二),RBC,血型抗原分类:依据抗原的生化性质,(二)RBC血型抗原分类:依据抗原的生化性质,携带血型抗原的蛋白分别以单次跨膜、多次跨膜或链接于糖基磷脂酰肌醇(GPI)方式嵌入红细胞膜,分子量,25-100kD,;每个红细胞抗原位点数,1.5,万,-100,万,携带血型抗原的蛋白分别以单次跨膜、多次跨膜或链接于糖基磷脂酰,第一章1-1-红细胞血型系统-概述课件,一、红细胞血型抗原,(,三,),血型抗原的免疫原性,不同血型抗原的免疫原性不同,献血员必须检测,A,、,B,、,D,抗原,第一节 概 述,注:,*,指缺,乏该抗原的患者,输入,1U,含该抗原红细胞后产生相应抗体的概率的大小,一、红细胞血型抗原(三)血型抗原的免疫原性第一节 概 述注,一、红细胞血型抗原,(,四,),血型抗原的剂量效应及位置效应,1.,剂量效应,:见于共显性基因,基因为,纯合子,时,抗原为相对的“,双倍剂量,”,与对应的抗体反应强度强,抗体反应,滴度高,基因为,杂合子,时,抗原为相对的“,单倍剂量,”,与对应抗体反应强度弱,抗体反应,滴度低,见于:,Rh(,除,D),、,MNSs,、,Kidd,、,Duffy,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(四)血型抗原的剂量效应及位置效应第一节,一、红细胞血型抗原,(,四,),血型抗原的剂量效应及位置效应,2.,位置效应,指基因之间的相互影响,主要发生在,Rh,血型系统,“,顺式效应,”:发生在,同一染色体上,基因之间的位置效应,如,E,抗原量在,DcE,cE,“,反式效应,”:发生在,两条同源染色体上,基因之间的位置效应,如,D,抗原量,CDe/ce,Ce/cDe,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(四)血型抗原的剂量效应及位置效应第一节,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,1.,膜转运蛋白,2.,受体及粘附分子,3.,补体调节糖蛋白,4.,酶活性,5.,维持红细胞的完整性,6.,构成细胞外糖链基质,7.,血型抗原多态性的意义,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,1.,膜转运蛋白:分子的跨膜转运,带,3,蛋白、,Diego,系统抗原:转运阴离子,Kidd,糖,蛋白:尿素转运蛋白,Colton,糖蛋白:水通道,Rh,蛋白及,RhAG,:参与铵的跨膜转运,D,多肽:转运阳离子,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,2.,受体及粘附分子,Duffy,糖蛋白:,G,PI超家族成员,趋化因子受体,LW,、,Lutheran,、,Ok,糖蛋白:,Ig,超家族成员,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,3.,补体调节糖蛋白,Chido/Rogers,抗原:,C4,分子的一部分,Cromer,抗原:位于,CD55(DAF),Knops,抗原:,C3,受体的一部分,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,4.,酶活性,Yt,抗原:乙酰胆碱酯酶,神经传递,Kell,抗原:肽链内切酶,产生内皮素,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,5.,维持红细胞的完整性,Diego,抗原,-,带,3,蛋白,-,骨架蛋白,G,erbich,抗原,-GP,C,和,D-,骨架蛋白,编码这些蛋白的基因突变形态异常,6.,构成细胞外糖链基质,带,3,蛋白,/GPA-,细胞外糖链,构成外衣,保护,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,一、红细胞血型抗原,(,五,),红细胞血型抗原的生物功能,7.,血型抗原多态性的意义:不清,血型抗原糖蛋白、糖脂是病原微生物的受体,Duffy,抗原是间日疟原虫的受体,基因突变非洲黑人,Fy(a-b-),缺乏,Duffy,抗原或糖蛋白免受间日疟原虫感染,.(,突变选择优势,),第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(五)红细胞血型抗原的生物功能第一节 概,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原,(,六,),红细胞血型抗原基因,每个血型抗原都由一个或多个紧密连锁的基因编码,大多数血型基因位于常染色体上,等位基因的表达一般为共显性,如,K,、,k,抗原,某些基因结构复杂,表达多种抗原,如,GPB,携带有,S,或,s,、,N,、,U,抗原,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(六)红细胞血型抗原基因第一节 概 述,一、红细胞血型抗原,(,六,),红细胞血型抗原基因,一对染色体携带相同的沉默基因,则血型表现为缺失型,血型多态性大多是由一个或多个,突变,导致,或,单核苷酸缺失,、,整个基因缺失或插入,、,基因重组,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(六)红细胞血型抗原基因第一节 概 述,一、红细胞血型抗原,(,七,),红细胞血型抗原的命名,单个字母表示:如,ABO,;,MN,;,Lewis,、,Duffy,、,Kidd,;,LW,等位基因编码的对偶抗原用不同大写字母表示:,A,、,B,,,M,、,N,等位基因编码的对偶抗原用大小字母表示:,S,、,s,,,K,、,k,;,Le,a,、,Le,b,;,Fy,a,、,Fy,b,;,Jk,a,、,Jk,b,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(七)红细胞血型抗原的命名第一节 概 述,一、红细胞血型抗原,(,七,),红细胞血型抗原的命名,1961,年,Allen,及,Rosenfield,介绍数字化符号命名法:,KK1,kK2;DRh1,CRh2,ERh3,缺失的抗原在数字前加“,-”,1980,年,ISBT,命名法:,3,5,字母符号,+,数字:,KEL:-1,2,-3,4,基因用斜体字母*数字,,KEL*1,*2,*3,*4,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(七)红细胞血型抗原的命名第一节 概 述,ISBT,1900,1926,1926,1939,1945,1946,1946,1950,1951,1955,1956,1962,1962,1965,1967,1940,1967,1952,1975,1960,1965,1970,1974,ISBT1900,一、红细胞血型抗原,(,八,),红细胞血型抗原的分类,国际输血协会,(ISBT),分类:,308,个抗原,血型系统,(system),:,30,个,,270,个抗原,血型集合,(collection),:,6,个,,12,个抗原,血型系列,(series),:,901,系列(高频组):,8,个抗原,700,系列(低频组):,18,个抗原,第一节 概 述,一、红细胞血型抗原(八)红细胞血型抗原的分类第一节 概 述,国际输血协会,(ISBT),分类:,2009,年,第一节 概 述,国际输血协会(ISBT)分类:2009年第一节 概 述,二、红细胞血型抗体,(,一,),抗体,(antibody,,,Ab),是抗原刺激机体免疫系统产生的一种免疫球蛋白,并且能和抗原发生特异性结合反应,第一节 概 述,二、红细胞血型抗体(一)抗体(antibody,Ab)第一节,第一节 概 述,(一)抗体,第一节 概 述(一)抗体,“Y”型,四肽链,重链,(5种:,,,,,,,,,),轻链,(2种:,、,),可变区,(V区),超变区,(CDR,互补决定,区),恒定区,(C区),铰链区:蛋白酶敏感区,(一)抗体,第一节 概 述,“Y”型,四肽链(一)抗体第一节 概 述,(,二,),各种,Ig,在输血中的意义,第一节 概 述,(二)各种Ig在输血中的意义第一节 概 述,IgA,:,单体、二聚体、三聚体,多聚体以,J,链及分泌片相连,ABO,系统的抗,A,、抗,B,抗体中,IgA,占,30%,缺乏,IgA,的患者血液中可能存在抗,IgA,抗体,输入含,IgA,的血液可能发生,严重的过敏反应,IgA,还能增强,IgG,诱导的溶血,第一节 概 述,(,二,),各种,Ig,在输血中的意义,IgA:第一节 概 述(二)各种Ig在输血中的意义,Ig,E,:,血浆中含量非常少,参与过敏反应,过敏原与,IgE,的,Fab,段结合时,,IgE,的,Fc,段与肥大细胞和嗜碱细胞结合,促使组胺释放,引起过敏性输血反应,但不参与溶血反应,第一节 概 述,(,二,),各种,Ig,在输血中的意义,IgE:第一节 概 述(二)各种Ig在输血中的意义,(,三,),红细胞血型抗体的分类,1.,天然抗体:,没有可察觉的抗原刺激,机体内自然存在的抗体,,IgM,为主,ABO,、,Hh,、,Ii,、,MN,、,P,、,Lewis,系统,产生:遗传;细菌类、花粉、尘埃等类,A,、,B,抗原,第一节 概 述,(三)红细胞血型抗体的分类1.天然抗体:第一节 概 述,2.,免疫抗体,:,由异型抗原刺激机体产生的抗体,,IgG,为主,常见于,Rh,、,Kell,、,Duffy,、,Kidd,、,MNSs,系统,产生:异型间的输血;血型不合的妊娠,注射流感疫苗或破伤风抗毒血清,肺炎球菌感染;某些,G,-,杆菌感染,第一节 概 述,(,三,),红细胞血型抗体的分类,2.免疫抗体:第一节 概 述(三)红细胞血型抗体的分类,3.,规则抗体:符合,Landsteiner,规律的抗体,见于,ABO,系统,可进行,ABO,血型反定型,4.,不规则抗体,:,不符合,Landsteiner,规律的抗,体(意外抗体),见于ABO血型以外的其他血型系统,正常人一般没有,输血前应常规检查,第一节 概 述,(,三,),红细胞血型抗体的分类,3.规则抗体:符合Landsteiner规律的抗体第一节 概,5.,完全抗体:,在盐水介质中能与相应的红细胞抗原结合并出现可见反应,多为,IgM,6.,不完全抗体:,在盐水介质中能与相应,RBC,抗原结合,形成致敏,RBC,,但不出现可见反应,并能阻止抗原再与相应完全抗体结合,多为,IgG,第一节 概 述,(,三,),红细胞血型抗体的分类,5.完全抗体:第一节 概 述(三)红细胞血型抗体的分类,7.,同种抗体:,针对患者缺乏的抗原所产生的抗体,抗,D,抗体,8.,自身抗体:,针对自身抗原产生的抗体,引起,AIHA,,也可能破坏输入的供者红细胞,第一节 概 述,(,三,),红细胞血型抗体的分类,7.同种抗体:第一节 概 述(三)红细胞血型抗体的分类,9.,外源凝聚素,(Lectin),:抗体样物质,植物血凝素,(PHA),、动物血凝素,有血型特异性的凝集素:,双花扁豆,有抗,-A1,凝集素,葡萄蜗牛的蛋白腺体,有抗,-A,凝集素,欧洲荆豆,有抗,-H,凝集素,第一节 概 述,(,三,),红细胞血型抗体的分类,9.外源凝聚素(Lectin):抗体样物质第一节 概 述(,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,抗体引起红细胞凝聚分两步:,致敏阶段,:不出现可见的反应现象,凝集物或沉淀物的形成阶段,:,Ag-Ab,复合物交联出现肉眼可见的凝集物或沉淀物,第一节 概 述,(四)血型抗体与相应抗原的反应抗体引起红细胞凝聚分两步:第一,1.,影响因素:,(1),红细胞抗原与抗体结合,化学成分、空间结构,要匹配,外因:,摇动、离心,缩短距离,增加结合机会,最适比,:抗原抗体反应最快,沉淀物形成最多,上清液中几乎无游离抗原或抗体存在,第一节 概 述,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,1.影响因素:第一节 概 述(四)血型抗体与相应抗原的反应,2.Ag-Ab,之间的化学键:,静电引力,:带相反电荷的氨基和羧基,与距离有关,范德华力,:原子与原子、分子与分子相互接近时分子极化发生的引力,氢键,:氢原子与氢受体原子间的引力,疏水键,:两个疏水基团对水排斥而趋向聚集,第一节 概 述,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,2.Ag-Ab之间的化学键:第一节 概 述(四)血型抗体与,2.Ag-Ab,之间的化学键:,离子强度,利于,Ag-Ab,生成,冷,Ab,降低温度,利于,Ag-Ab,生成,温,Ab,在,37,利于,Ag-Ab,生成,pH,利于,Ag-Ab,分解,第一节 概 述,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,2.Ag-Ab之间的化学键:第一节 概 述(四)血型抗体与,第一节 概 述,3.,红细胞与抗体凝集反应分级:,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,第一节 概 述3.红细胞与抗体凝集反应分级:(四)血型抗体,3.,红细胞与抗体凝集反应分级:,第一节 概 述,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,3.红细胞与抗体凝集反应分级:第一节 概 述(四)血型抗体,4.,红细胞凝集反应的影响因素:,Ab,大小及数量,:,IgM-,盐水介质凝集;,IgG-,抗球蛋白凝集;,A-RBC,凝集需连接,7000,个,IgM,抗,A,RBC,间静电排斥,:酶处理破坏唾液酸,/,白蛋白,/,低离子强度介质利于凝集,RBC-Ag,性质,:,Ag,位点多,密度大,突出细胞膜表面利于凝集,反应条件,:,pH6.5-7.5,;冷,Ab 4-10,;温,Ab 37,;反应时间、离心增强凝集,第一节 概 述,(,四,),血型抗体与相应抗原的反应,4.红细胞凝集反应的影响因素:第一节 概 述(四)血型抗体,(,五,),红细胞血型抗体的临床意义,能引起RBC寿命缩短、HDN、溶血反应的抗体才有临床意义,37,不与,RBC,反应的,Ab,无临床意义,有意义,Ab,,选择相应抗原阴性、交叉配血相合的,RBC,输血前对患者进行常规意外抗体筛查阳性进一步鉴定,Ab,的特异性,第一节 概 述,(五)红细胞血型抗体的临床意义能引起RBC寿命缩短、HDN、,(,六,),红细胞血型抗体的检测,1.,意外抗体筛查:妊娠史或输血史,将待检血清与已知抗原的红细胞混合孵育,以发现,37,有反应活性的抗体,红细胞常见抗原:,D,、,C,、,E,、,c,、,e,;,M,、,N,、,S,、,s,;,P1,;,Le,a,、,Le,b,;,K,、,k,;,Fy,a,、,Fy,b,;,JK,a,、,JK,b,根据不同人群增加相应的抗原,如亚洲人群的筛查细胞应具有,M,ia,抗原,第一节 概 述,(六)红细胞血型抗体的检测1.意外抗体筛查:妊娠史或输血史第,2.,意外抗体鉴定:筛查阳性时,确定Ab特异性,(1),自身细胞检查:自身血清与自身红细胞反应,(2),抗体谱红细胞鉴定:已知抗原的,O,型红细胞,阴性反应,以排除方式推测抗体特异性,阳性反应,具有谱红细胞相应抗体,同种抗体的特异性不应针对自身红细胞抗原,第一节 概 述,(,六,),红细胞血型抗体的检测,2.意外抗体鉴定:筛查阳性时,确定Ab特异性第一节 概 述,2.,意外抗体鉴定:,(2),抗体谱红细胞鉴定:,多种抗体或自身抗体,须借助血型物质抑制试验、吸收放散试验等鉴定,可被蛋白酶破坏的抗原,:,JMH,、,Inb,、,Ge2,、,Yta,、,S,、,s,、,Fya,、,Fyb,不被蛋白酶不破坏的抗原,:,Rh,、,Kell,、,Kidd,、,Colton,、,Sciana,、,Diego,第一节 概 述,(,六,),红细胞血型抗体的检测,2.意外抗体鉴定:第一节 概 述(六)红细胞血型抗体的检测,
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