T淋巴细胞结果的解读

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,T,细胞亚群结果的解读,淋巴细胞分化图,按,T,细胞所处的活化阶段,初始,T,细胞（,naive T cell,）,效应,T,细胞（,effector T cell,）,记忆性,T,细胞（,memory T cell,）,按,T,细胞表面受体（,TCR,）分类,+,T,细胞,+,T,细胞,按,T,细胞,CD4,和,CD8,分子表型,CD4+T,细胞,CD8+T,细胞,按,T,细胞的功能分类,Th,（辅助,T,细胞）,T,S,（抑制,T,细胞）,Tr,（调节,T,细胞）,T,淋巴细胞的分类方法,外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例,60-80%,27-51%,15-44%,T,淋巴细胞,CD4T,淋巴细胞,CD8T,淋巴细胞,淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合,血液分析常规检测,依据白细胞、淋巴细胞比例及计数绑定机体免疫状况，无法精确判断。,T,淋巴细胞亚群比例检测,临床常用，但较片面,T,淋巴细胞亚群数量,观察免疫细胞数值变化，评估免疫状况，通常采用流式细胞仪法，特别针对,CD4,的检测，已成为,“,金标准,”,。,功能、数量、比例结合,更精确评估机体免疫状态,1,2,3,4,目前临床主要可以做以下项目的检测,淋巴细胞亚群,(T+B+NK),的比例和计数,T,细胞亚群,(CD4+,细胞、,CD8+,细胞、,CD4+/CD8+,比值）,MHLA-DR,（单核细胞,HLA-DR),CD4CD25Treg,（调节细胞）及,Th17,细胞（我们工作）,目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目,项 目,百分含量（,%,淋巴细胞）,Total B lymphocyte(CD19+),5-18%,NK cell(CD3-/CD16+56+),7-40%,Total T lymphocyte(CD3+),50-84%,T helper/inducer cell(CD3+/CD4+),27-51%,T supressor/cytotoxic cell(CD3+/CD8+),15-44%,CD4/CD8,0.71-2.78,(BD),健康中国人参考范围,项 目,百分含量（,%T,淋巴细胞）,绝对含量（,cells/,L,）,Total T lymphocyte(CD3+),770-2041,Thelper/inducer cell(CD3+/CD4+/CD8-),34-70%,414-1123,Tsupressor/cytotoxic cell(CD3+/CD4-/CD8+,25-54%,238-874,CD3+CD4+CD8+cell,0.5-4.0%,6-56,CD4+,、,CD8+T,淋巴细胞的计数方法一（,FCM),取,100l,全血，加三种不同荧光素标记的鼠抗人,CD3,、,CD4,、,CD8McAb,，阴性对照。,加红细胞裂解液，溶血，离心，弃上清。,用,PBS,洗,1,次，,PBS,重悬细胞，上机检测。,FCM,分析 电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数。,简单、快速、相对精确,CD3+T,细胞正常范围为：,50-84%,CD4+T,细胞正常范围为：,27-51%,CD8+T,细胞正常范围为：,15-44%,CD19+B,细胞正常范围为：,5-18%,与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。,CD4T,淋巴细胞的计数方法二（推算）,不精确、繁琐,省钱,举例如下,患者血常规中淋巴细胞计数为,0.63,109/L,淋巴细胞比例测定结果,CD3,为,64.9%,CD4,为,32.5%,CD8,为,31.1%,CD3,细胞计数为,0.63,10,9,/L,64.9%0.41,10,9,/L,CD4,细胞计数为,0.63,109/L,32.5%0.20,10,9,/L,CD8,细胞计数为,0.63,109/L,31.1%0.19,10,9,/L,推,算,单核细胞人类白细胞抗原,DR,（,CD14/HLA-DR,）,CD14,为,LPS,复合物受体,主要分布在单核细胞，,HLA-DR,为活化标志。,CD14/HLA-DR,可反映人体细胞免疫功能，,30%,提示免疫麻痹。也有人认为,HLA-DR,浓度如果连续两天,低于,8000AB/C,可认为存在,免疫麻痹,。,广泛应用于临床。,T,淋巴细胞亚群研究,研究逐年增多,淋巴细胞亚群变化的常见临床意义,CD4,淋巴细胞减少：,见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者,CD8,淋巴细胞增多：,见于自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（,SLE,）、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等,CD4,CD8,比值异常：,比值降低：,一般被称为,“,免疫抑制,”,状态，常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等,比值增高：,表明细胞免疫功能处于,“,过度活跃,”,状态，容易出现自体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后,CD4/CD8,较移植前明显增加，则可能发生排异反应,15,The shift from a pro-in-flammatory to an anti-inflammatory immune response predominant at the systemic level likely occurs before 24 h after diagnosis of shock.,脓毒症休克期存在免疫麻痹,存在免疫麻痹的,Septic,患者死亡率大大增加,100,名,septic,患者,28,天死亡,无免疫麻痹,免疫麻痹,脓毒症休克患者,T,淋巴细胞凋亡、存在免疫紊乱,存活与死亡,Septic,中,T,淋巴细胞亚群的变化,一项对院内感染的老年脓毒症患者的前瞻性对照研究,Injury,Int.J.Care Injured(2007)38,13461357,严重多发伤患者免疫细胞的变化特点,CD4/CD8,降低,MHLA-DR,降低,T,细胞及单核细胞凋亡增加,烧伤患者早期外周血淋巴细胞亚群的变化特点,烧伤患者白细胞低于正常组,早期,CD3,、,CD4,、,CD8,细胞计数 均明显下降。,HLA-DR,表达降低。,CD4/CD8,比值下降。,CD4T,细胞亚群新分类：,Th1,、,Th2,、,Treg,、,Th17,我们的研究,抗炎细胞,Treg,及其分泌的抗炎介质,IL-10,；促炎细胞,Th17,及分泌的促炎介质,IL-17,、,IL-6,在人体的炎性免疫稳态中发挥重要作用。,23,中国呼吸与危重监护杂志,2010,09(04):416-418,.,结论一：脓毒症患者中,Treg,明显升高，,表明抗炎反应的增强,24,结论二：,在脓毒症患者中,Th17,表达明显升高,吴铁军,亢翠翠,中华急诊医学杂志,2012,21(04):378-380.,脓毒症组,对照组,脓毒症患者中,Th17,表达明显升高，,提示促炎反应的增强。,25,重症脓毒症患者淋巴细胞增殖能力低下、凋亡,淋巴细胞,Ag-NoR,在健康组中的表达,淋巴细胞,Ag-NoR,在,Sepsis,组中的表达,吴铁军，张丽娜 中国呼吸与危重监护杂志,2010,09(04):416-418,.,脓毒症组,对照组,重症脓毒症患者存在免疫麻痹,中国急救医学杂志,2011,31(9):836-838.,CD14+,单核细胞人类白细胞抗原,-DR(HLA-DR),表达情况,对照组,脓毒症组,27,T,淋巴细胞亚群的研究越来越多,某种,T,细胞亚群过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，主要用于了解恶性肿瘤、免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者机体的免疫功能是处于什么状态。,T,细胞亚群的表达受多种因素影响 常,“,变幻莫测,”,，因此,T,细胞亚群的解读应细胞比例结合计数和功能状态，连续动态监测更有意义。,严重脓毒症存在免疫紊乱，,T,淋巴细胞的凋亡，与预后有一定关系。创伤等应激状态同样导致免疫紊乱。,总结,谢 谢！,