食品快速检测方法简介-课件

食品快速检测方法简介广东省食品药品检验所广东省食品药品检验所2015年年6月月食品安全与食品检测n食品安全的定义食品安全的定义n食物中有毒、有害物质对人体健康影响的公共卫生问题。食物中有毒、有害物质对人体健康影响的公共卫生问题。（WHO）食品安全与食品检测n食品安全的主要问题食品安全的主要问题n致病性微生物致病性微生物n每年非伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌和志贺氏菌食源性感染人数总计每年非伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌和志贺氏菌食源性感染人数总计2736万例万例。n食品添加剂滥用食品添加剂滥用n超量、超范围使用食品添加剂超量、超范围使用食品添加剂n添加有害的非食用物质添加有害的非食用物质n掺杂使假、假冒伪劣的隐患掺杂使假、假冒伪劣的隐患n化学污染物化学污染物n农药、兽药残留农药、兽药残留n持久性有机污染物持久性有机污染物n重金属重金属n食品本身所含及生产加工产生的有害物食品本身所含及生产加工产生的有害物n食品容器包装材料等迁移污染食品容器包装材料等迁移污染食品安全与食品检测n国务院对食品安全工作提出了国务院对食品安全工作提出了“四个最严四个最严”的要求：用最严谨的的要求：用最严谨的标准、最严格的监管、最严厉的处罚、最严肃的问责来体现食品标准、最严格的监管、最严厉的处罚、最严肃的问责来体现食品安全监管的执法力度。安全监管的执法力度。n“史上最严史上最严”的食品安全法（的食品安全法（2015年年10月月1日实施）日实施）n第一百一十二条县级以上人民政府食品药品监督管理部门在食第一百一十二条县级以上人民政府食品药品监督管理部门在食品安全监督管理工作中可以采用国家规定的快速检测方法对食品品安全监督管理工作中可以采用国家规定的快速检测方法对食品进行抽查检测。进行抽查检测。n第八十八条采用国家规定的快速检测方法对食用农产品进行抽第八十八条采用国家规定的快速检测方法对食用农产品进行抽查检测，被抽查人对检测结果有异议的，可以自收到检测结果时查检测，被抽查人对检测结果有异议的，可以自收到检测结果时起四小时内申请复检。复检不得采用快速检测方法。起四小时内申请复检。复检不得采用快速检测方法。食品安全与食品检测n食品检验方法与展望食品检验方法与展望n标准检验方法标准检验方法n色谱法（色谱法（GC、HPLC、TLC）n质谱法（质谱法（GC-MS、GC-MS/MS、HPLC-MS/MS、ICP-MS）n光谱法（光谱法（AAS、AFS、UV）n酶联免疫法酶联免疫法nn实验室检验方法，检验周期长，一般不能在现场进行。实验室检验方法，检验周期长，一般不能在现场进行。食品安全与食品检测n食品检验方法与展望食品检验方法与展望n食品快检技术食品快检技术n理化鉴别技术：显色反应，沉淀反应等理化鉴别技术：显色反应，沉淀反应等n免疫分析技术：胶体金免疫分析、酶联免疫分析、生物芯片免疫分析技术：胶体金免疫分析、酶联免疫分析、生物芯片等等n便携式设备便携式设备nn具有快速、简便、灵敏、可移动等特点，非常适合在监督现具有快速、简便、灵敏、可移动等特点，非常适合在监督现场对可疑样品进行快速筛查。场对可疑样品进行快速筛查。n满足食品安全检验的时效性。满足食品安全检验的时效性。n已成为国家标准的快检方法很少（如已成为国家标准的快检方法很少（如GB/T 5009.199）食品安全与食品检测n抽检、监测常见不合格项目抽检、监测常见不合格项目n微生物：致病菌（金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等）微生物：致病菌（金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等）n食品添加剂（苯甲酸、山梨酸、亚硝酸盐、糖精钠、甜蜜素、食品添加剂（苯甲酸、山梨酸、亚硝酸盐、糖精钠、甜蜜素、硫酸铝钾硫酸铝钾(铵铵)、人工合成着色剂等）、人工合成着色剂等）n非食用物质（罂粟壳、甲醛、吊白块、非食用色素等）非食用物质（罂粟壳、甲醛、吊白块、非食用色素等）n真菌毒素（黄曲霉毒素真菌毒素（黄曲霉毒素B1等）等）n污染物（镉、铅）污染物（镉、铅）n品质指标（食用油：酸价、过氧化值、脂肪酸组成等）品质指标（食用油：酸价、过氧化值、脂肪酸组成等）食品安全与食品检测n食品快检技术食品快检技术n理化鉴别技术：显色反应，沉淀反应等理化鉴别技术：显色反应，沉淀反应等n免疫分析技术：胶体金免疫分析、酶联免疫分析、生物芯片免疫分析技术：胶体金免疫分析、酶联免疫分析、生物芯片等等n便携式设备便携式设备n色谱技术：高效液相色谱，毛细管电泳，气相色谱法，离子色谱技术：高效液相色谱，毛细管电泳，气相色谱法，离子迁移色谱等迁移色谱等n波谱技术：紫外光谱、荧光分析、红外光谱、近红外光谱、波谱技术：紫外光谱、荧光分析、红外光谱、近红外光谱、拉曼光谱、质谱、核磁共振波谱、拉曼光谱、质谱、核磁共振波谱、X射线荧光等射线荧光等n电化学技术：化学发光，化学传感器，氧化值等电化学技术：化学发光，化学传感器，氧化值等n分子印迹技术（人工抗体、塑料抗体）分子印迹技术（人工抗体、塑料抗体）n感官鉴别技术：又称为外观鉴别感官鉴别技术：又称为外观鉴别大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点培训内容培训内容n铝残留快速检测方法n亚硝酸盐快速检测方法n甲醛快速检测方法n吊白块快速检测方法n酸价快速检测方法n过氧化值快速检测方法n黄曲霉毒素B1快速检测方法n三聚氰胺快速检测方法n孔雀石绿快速检测方法n瘦肉精残留快速检测方法n罂粟壳快速检测方法n农药残留快速检测方法一、铝残留量快速检测方法简介一、铝残留量快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n食品中的铝主要来源于含铝食品添加剂，如膨松剂硫酸铝钾、食品中的铝主要来源于含铝食品添加剂，如膨松剂硫酸铝钾、硫酸铝铵，曾广泛常用于小麦粉及其制品、膨化食品中，以硫酸铝铵，曾广泛常用于小麦粉及其制品、膨化食品中，以改善食品的口感和质地。改善食品的口感和质地。n长期过多摄入铝，会损伤骨骼、大脑及神经系统。可能引起长期过多摄入铝，会损伤骨骼、大脑及神经系统。可能引起儿童发育迟缓、老年人痴呆等疾病。儿童发育迟缓、老年人痴呆等疾病。n由于我国食品中超量、超范围使用含铝膨松剂的情况较为严由于我国食品中超量、超范围使用含铝膨松剂的情况较为严重，含铝食品添加剂的使用范围作出重要调整。重，含铝食品添加剂的使用范围作出重要调整。nGB 2762-2005、GB 2760-2011，小麦粉及其制品中铝残留量为，小麦粉及其制品中铝残留量为100mg/kg。n自自2014年年7月月1日起，膨化食品生产中不得使用含铝食品添加日起，膨化食品生产中不得使用含铝食品添加剂，小麦粉及其制品（除油炸面制品、面糊（如用于鱼和禽剂，小麦粉及其制品（除油炸面制品、面糊（如用于鱼和禽肉的拖面糊）、裹粉、煎炸粉外）生产中不得使用硫酸铝钾肉的拖面糊）、裹粉、煎炸粉外）生产中不得使用硫酸铝钾和硫酸铝铵。和硫酸铝铵。nGB 2760-2014n不得使用：膨化食品、非油炸小麦粉及其制品不得使用：膨化食品、非油炸小麦粉及其制品（一）概述n相关检测标准相关检测标准（一）概述n受传统制作工艺影响，我国面制食品中铝残留量超标的情况受传统制作工艺影响，我国面制食品中铝残留量超标的情况仍较常见。仍较常见。n外观蓬松或口感酥脆的面制品为重点抽检对象。外观蓬松或口感酥脆的面制品为重点抽检对象。（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于面粉、蒸制面制品（如馒头、包子、适用范围：适用于面粉、蒸制面制品（如馒头、包子、花卷等）、蒸制类中式糕点（如马拉糕、发糕等）。花卷等）、蒸制类中式糕点（如马拉糕、发糕等）。n原理：在弱酸性缓冲介质中，三价铝离子与铬天青原理：在弱酸性缓冲介质中，三价铝离子与铬天青S及及十六烷基三甲基溴化铵反应生成蓝色的络合物，根据其十六烷基三甲基溴化铵反应生成蓝色的络合物，根据其颜色的深浅反应铝的含量。颜色的深浅反应铝的含量。（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【样品前处理样品前处理】n 取取剪剪碎碎或或粉粉碎碎后后的的样样品品1g于于具具塞塞玻玻璃璃瓶瓶或或者者离离心心管管中中，加加入入10mL蒸馏水，蒸馏水，2滴铝提取剂，搅拌均匀，超声滴铝提取剂，搅拌均匀，超声20 min；n吸吸取取超超声声处处理理后后的的上上清清液液1 mL于于1.5 mL离离心心管管中中，加加入入2滴滴铝调节剂，摇匀，铝调节剂，摇匀，12000 rpm离心离心10 min。（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法【样品检测样品检测】另取另取1个个1.5mL离心管，用吸管滴加离心管，用吸管滴加3滴滴样品离心后上清液。样品离心后上清液。滴加滴加1滴铝检测滴铝检测A试剂，试剂，1滴铝检测滴铝检测B试试剂，混匀。剂，混匀。滴加滴加2滴铝检测滴铝检测C试剂，试剂，5滴铝检测滴铝检测D试试剂，混匀。剂，混匀。静置反应静置反应2min。CD（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法n筛查结果判定筛查结果判定n观察显色结果，并与提供的色阶卡比较。观察显色结果，并与提供的色阶卡比较。n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n若不加铝调节剂，则不能正常显色。若不加铝调节剂，则不能正常显色。n应应在在规规定定时时间间范范围围内内观观察察反反应应结结果果，否否则则，结结果果的的判判断可能不准确。断可能不准确。（三）铝快筛试剂盒使用方法二、亚硝酸盐快速检测方法简介二、亚硝酸盐快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n亚硝酸盐外观及滋味都与食盐相似，常用作肉制品护色剂、亚硝酸盐外观及滋味都与食盐相似，常用作肉制品护色剂、防腐剂。防腐剂。n亚硝酸盐是剧毒物质，成人摄入亚硝酸盐是剧毒物质，成人摄入0.2-0.5g即可引起中毒，即可引起中毒，3g即可致死。即可致死。n由于亚硝酸盐毒性大，性状与食盐相似，在餐饮服务单位中由于亚硝酸盐毒性大，性状与食盐相似，在餐饮服务单位中容易被误用，容易被误用，2012年起，我国已禁止餐饮服务单位使用亚硝年起，我国已禁止餐饮服务单位使用亚硝酸盐作为食品添加剂。酸盐作为食品添加剂。n根据根据GB 2760和和GB 2762，各类食品中亚硝酸盐的残留量均，各类食品中亚硝酸盐的残留量均有明确规定。有明确规定。（一）概述n常见食品中亚硝酸盐的最大使用量和残留限量常见食品中亚硝酸盐的最大使用量和残留限量n相关检测标准相关检测标准（一）概述n重点抽检对象：肉制品、腌制蔬菜。重点抽检对象：肉制品、腌制蔬菜。（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于肉制品（如腊肉、腊肠、卤肉、熏肉、适用范围：适用于肉制品（如腊肉、腊肠、卤肉、熏肉、腌肉、肴肉、红肠、肉肠、香肠、火腿、香肚），酱腌菜腌肉、肴肉、红肠、肉肠、香肠、火腿、香肚），酱腌菜等食品中亚硝酸盐的快速筛查。等食品中亚硝酸盐的快速筛查。n原理：在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化原理：在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，根据染料颜后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，根据染料颜色的深浅反应亚硝酸盐的含量。色的深浅反应亚硝酸盐的含量。（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【样品前处理样品前处理】n固固体体或或半半固固体体样样品品：称称取取20 g待待测测样样品品，切切碎碎或或研研碎碎混混合合后后取取2 g 于于“样样品品杯杯”中中，加加入入20 mL 蒸蒸馏馏水水，浸浸泡泡1015 min，其其间间振振荡荡数数次次，过过滤滤取取清清液液1 mL加加9 mL蒸馏水稀释混匀待测。（稀释倍数为蒸馏水稀释混匀待测。（稀释倍数为100倍）倍）n液体样品：无色或颜色较浅的液体样品可直接取样。液体样品：无色或颜色较浅的液体样品可直接取样。（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法【样品测试样品测试】对照测试对照测试取一支取一支2 mL空离心管，加入空离心管，加入1800 L蒸馏水，加入蒸馏水，加入100 L试剂试剂A，反应，反应5 min 后，加入后，加入100 L试剂试剂B，混匀反应，混匀反应10 min后，上机进行对照测试。后，上机进行对照测试。（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法 样品测试样品测试另取一支另取一支2ml空离心管，加入空离心管，加入1800 L样品处理液，加入样品处理液，加入100 L试剂试剂A，反应，反应5min 后，加入后，加入100 L试剂试剂B，混匀反，混匀反应应10 min后，上机进行样品测试。后，上机进行样品测试。（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法n测试结果测试结果n1、液液体体样样品品结结果果：CsC0，仪仪器器所所测测浓浓度度值值即即为为样样品品中中所所含含亚亚硝硝酸酸盐盐的的含含量量。如如稀稀释释10倍倍，CsC010（稀稀释释倍倍数数），即为样品中所含亚硝酸盐的含量即为样品中所含亚硝酸盐的含量(mg/kg)。n2、固固体体样样品品结结果果：CsC0100（稀稀释释倍倍数数）,记记录录仪仪器器所所测测浓浓度度值值C0，再再乘乘以以样样品品的的稀稀释释倍倍数数100，即即为为样样品品中中所所含含亚亚硝酸盐的含量硝酸盐的含量(mg/kg)。n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n生活饮用水中常存在亚硝酸盐，不能作为测定用稀释液。生活饮用水中常存在亚硝酸盐，不能作为测定用稀释液。n若若显显色色后后颜颜色色很很深深且且有有沉沉淀淀产产生生或或很很快快退退色色变变成成浅浅黄黄色色，说说明明样样品品中中亚亚硝硝酸酸盐盐含含量量很很高高，须须加加大大稀稀释释倍倍数数重重新新测测定。定。（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法三、甲醛快速检测方法简介三、甲醛快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n甲醛防腐能力强，一些不法经营者在生产和储藏过程中将甲醛防腐能力强，一些不法经营者在生产和储藏过程中将水产品浸泡在甲醛溶液中，以达到延长保质期、改善外水产品浸泡在甲醛溶液中，以达到延长保质期、改善外观和口感的目的。观和口感的目的。n甲醛为强烈致癌物。食用含有甲醛的食品后会损害人的肝甲醛为强烈致癌物。食用含有甲醛的食品后会损害人的肝肾功能，甚至导致肾衰竭。肾功能，甚至导致肾衰竭。n甲醛曾用作食品加工助剂在食品工业中使用。甲醛曾用作食品加工助剂在食品工业中使用。n GB 2760-2011，甲醛从食品加工助剂中删除，意味着甲，甲醛从食品加工助剂中删除，意味着甲醛在食品中彻底禁用。醛在食品中彻底禁用。（一）概述n相关检测标准相关检测标准n水发产品本底含有少量甲醛，农业部水发产品本底含有少量甲醛，农业部无公害食品无公害食品 水发水产水发水产品品中规定甲醛含量不得大于中规定甲醛含量不得大于10mg/kg。（二）监督检查重点品种n甲醛主要非法添加在水发食品（及其发泡水）、水产及水产甲醛主要非法添加在水发食品（及其发泡水）、水产及水产制品中。制品中。（三）甲醛快筛试剂盒使用方法n适用范围：适用于水发食品（及其发泡水）、水产及适用范围：适用于水发食品（及其发泡水）、水产及水产制品中甲醛的快速筛查。水产制品中甲醛的快速筛查。n原理：在碱性条件下，甲醛与乙酰丙酮发生反应，生原理：在碱性条件下，甲醛与乙酰丙酮发生反应，生成黄色物质，根据其颜色的深浅反应甲醛的含量。成黄色物质，根据其颜色的深浅反应甲醛的含量。n （三）甲醛快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【试剂配制试剂配制】n检测试剂在第一次使用前需进行试剂配制检测试剂在第一次使用前需进行试剂配制n取取400 L显色剂加入到缓冲液瓶中。显色剂加入到缓冲液瓶中。n混混匀匀，放放置置4小小时时后后使使用用。试试剂剂配配制制后后应应在在30天内使用，过期无效。天内使用，过期无效。（三）甲醛快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【样品前处理样品前处理】n固固体体样样品品：称称取取20 g 待待测测样样品品，切切碎碎或或研研碎碎混混合合后后取取1.5 g 于于“三三角角瓶瓶”中中。取取出出后后趁趁热热加加入入1 mL甲甲醛醛提提取取液液A和和1 mL甲甲醛醛提提取取液液B，摇摇匀匀。冷冷却却后后过过滤滤，过过滤滤后后的的清清液液为为样样品品待待测测液液，待待测测。（稀释倍数为（稀释倍数为20倍）倍）n液体样品：直接取样品的浸泡液或渗出液待用。液体样品：直接取样品的浸泡液或渗出液待用。（三）甲醛快筛试剂盒使用方法（三）甲醛快筛试剂盒使用方法【样品测试样品测试】对照测试对照测试取一支取一支15 mL离心管，加入离心管，加入5 mL蒸馏水；蒸馏水；加入加入1 mL经处理后的缓冲液；经处理后的缓冲液；盖好离心管的盖子，放入到盖好离心管的盖子，放入到100 的沸水中加热的沸水中加热3分钟；分钟；冷却后上机进行对照测试。冷却后上机进行对照测试。（三）甲醛快筛试剂盒使用方法（三）甲醛快筛试剂盒使用方法 样品测试样品测试取一支取一支15 mL离心管，加入离心管，加入5 mL样品待测液，混匀；样品待测液，混匀；加入加入1 mL经处理后的缓冲液；经处理后的缓冲液；盖好离心管的盖子，放入到盖好离心管的盖子，放入到100 的沸水中加热的沸水中加热3分钟；分钟；冷却后上机进行对照测试。冷却后上机进行对照测试。（三）甲醛快筛试剂盒使用方法（三）甲醛快筛试剂盒使用方法n测试结果测试结果n1、液液体体样样品品结结果果：CsC0，仪仪器器所所测测浓浓度度值值即即为为样样品品中中所所含含甲甲醛醛的的含含量量。如如稀稀释释10倍倍，CsC010（稀稀释释倍倍数数），即即为样品中所含甲醛的含量为样品中所含甲醛的含量(mg/kg)。n2、固固体体样样品品结结果果：CsC020（稀稀释释倍倍数数）,记记录录仪仪器器所所测测浓浓度度值值C0，再再乘乘以以样样品品的的稀稀释释倍倍数数20，即即为为样样品品中中所所含含甲甲醛醛的的含量含量(mg/kg)。n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n样品提取时应充分震摇。样品提取时应充分震摇。n应应在在规规定定时时间间范范围围内内反反应应结结果果，否否则则，结结果果的的判判断断可可能不准确。能不准确。（三）甲醛快筛试剂盒使用方法（三）甲醛快筛试剂盒使用方法四、吊白块快速检测方法简介四、吊白块快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n吊白块（甲醛次硫酸氢钠）具有极强的还原性，具有漂白、吊白块（甲醛次硫酸氢钠）具有极强的还原性，具有漂白、防腐、增强韧性的功效。防腐、增强韧性的功效。n吊白块是一种强致癌物质，进入人体后，可能作用于某些吊白块是一种强致癌物质，进入人体后，可能作用于某些酶系统，并可能引起机体细胞变异，从而损害肺、肝、肾，酶系统，并可能引起机体细胞变异，从而损害肺、肝、肾，以致引发癌症。人经口服甲醛次硫酸氢钠的致死量为以致引发癌症。人经口服甲醛次硫酸氢钠的致死量为10g。n吊白块作为非食用物质，吊白块作为非食用物质，2008年被列入我国第一批年被列入我国第一批“食食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单种名单”。n相关检测标准相关检测标准（一）概述n重点抽检对象：白糖、米制品、面制品、豆制品。重点抽检对象：白糖、米制品、面制品、豆制品。（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于腐竹、馒头、米、面、豆制品、白糖和适用范围：适用于腐竹、馒头、米、面、豆制品、白糖和榨菜等食品的快速检测。榨菜等食品的快速检测。n原理：吊白块本身不稳定，在食品中以甲醛和次硫酸根形原理：吊白块本身不稳定，在食品中以甲醛和次硫酸根形式存在。本方法对样品中的甲醛进行检测，在碱性条件下，式存在。本方法对样品中的甲醛进行检测，在碱性条件下，甲醛与乙酰丙酮发生反应，生成黄色物质，根据其颜色的甲醛与乙酰丙酮发生反应，生成黄色物质，根据其颜色的深浅反应甲醛的含量。深浅反应甲醛的含量。（三）吊白块快筛试剂盒使用方法（三）吊白块快筛试剂盒使用方法（三）吊白块快筛试剂盒使用方法（三）吊白块快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【样品前处理样品前处理】n液液体体样样品品：无无色色或或颜颜色色较较浅浅的的液液体体样样品品可可直直接取样待测。接取样待测。n固固体体样样品品：取取2g剪剪碎碎样样品品于于样样品品杯杯中中，加加纯纯净净水水或或蒸蒸馏馏水水至至20mL，浸浸泡泡10min，期期间间搅搅拌数次，待测。拌数次，待测。n （三）吊白块快筛试剂盒使用方法（三）吊白块快筛试剂盒使用方法【样品检测样品检测】取待测液取待测液1mL于离心管中，依次加入于离心管中，依次加入3滴检测液滴检测液A、3滴检测液滴检测液B，盖上盖子后摇匀，反应，盖上盖子后摇匀，反应5min后加后加入入1滴检测液滴检测液C，盖上盖子后摇匀，反应，盖上盖子后摇匀，反应5min。C（三）吊白块快筛试剂盒使用方法（三）吊白块快筛试剂盒使用方法n筛查结果判定筛查结果判定n观察显色结果，对照标准比色板进行半定量判定。观察显色结果，对照标准比色板进行半定量判定。n本试剂盒仅对甲醛进行检测。结果判定会存在一定的偏差。本试剂盒仅对甲醛进行检测。结果判定会存在一定的偏差。n当测试结果甲醛当测试结果甲醛10ppm时，判定此样品中不含吊白块。时，判定此样品中不含吊白块。n当当测测试试结结果果甲甲醛醛10ppm时时，应应用用所所配配的的二二氧氧化化硫硫检检测测管管对对样样品品进进行行复复检检，得得出出其其二二氧氧化化硫硫含含量量。若若二二氧氧化化硫硫未未检检出出或或10ppm时时，判判定定样样品品中中不不含含吊吊白白块块，但但可可能能含含有有甲甲醛醛。若若二二氧氧化化硫硫10ppm时时，且且甲甲醛醛与与二二氧氧化化硫硫比比例例大大约约为为1：2时时，判判定定样样品品中中含含有有吊吊白白块块，且且吊吊白白块块含量约甲醛含量含量约甲醛含量5.12。（三）吊白块快筛试剂盒使用方法（三）吊白块快筛试剂盒使用方法n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n样品提取时应充分震摇。样品提取时应充分震摇。n应应在在规规定定时时间间范范围围内内观观察察反反应应结结果果，否否则则，结结果果的的判判断可能不准确。断可能不准确。五、酸价快速检测方法简介五、酸价快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试纸条使用方法（一）概述n酸价（或称中和值、酸值、酸度）表示中和酸价（或称中和值、酸值、酸度）表示中和1g化学物质所需化学物质所需的氢氧化钾（的氢氧化钾（KOH）的毫克数，是对化合物（例如脂肪酸）的毫克数，是对化合物（例如脂肪酸）或混合物中游离羧酸基团数量的一个计量标准。或混合物中游离羧酸基团数量的一个计量标准。n油脂酸价的大小与制取油脂的原料、油脂制取与加工的工艺、油脂酸价的大小与制取油脂的原料、油脂制取与加工的工艺、油脂的贮运方法与贮运条件等有关。油脂的贮运方法与贮运条件等有关。n酸价可作为油脂变质程度的指标。酸价可作为油脂变质程度的指标。（一）概述n常见食用油中酸价的限量值常见食用油中酸价的限量值n相关检测标准相关检测标准（一）概述n重点抽检对象重点抽检对象n散装食用植物油散装食用植物油n煎炸过程中的食用植物油煎炸过程中的食用植物油n生产、运输、储存不当的食用植物油生产、运输、储存不当的食用植物油（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于常温下为液态的食用油中酸价进行快适用范围：适用于常温下为液态的食用油中酸价进行快速检测。速检测。n原理：利用食用植物油酸败所产生的游离脂肪酸与试纸原理：利用食用植物油酸败所产生的游离脂肪酸与试纸中的药剂发生显色反应，以此反应出油脂酸败的程度。中的药剂发生显色反应，以此反应出油脂酸败的程度。（三）酸价快筛试纸条使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n【样品前处理样品前处理】n用用清清洁洁、干干燥燥容容器器量量取取少少量量的的食食用用油油样样品品，将将使使用用有有样样品品的的温温度度调调整整到到255，待测。，待测。（三）酸价快筛试纸条使用方法【样品检测样品检测】从试纸筒中取出试纸条。从试纸筒中取出试纸条。将试纸浸入油样中约将试纸浸入油样中约5s，取出后静置，取出后静置5min，用吸水纸，用吸水纸吸去多余的油样。吸去多余的油样。筛查结果判定筛查结果判定将反应膜所显示的颜色与比色卡进行对比，得出油样将反应膜所显示的颜色与比色卡进行对比，得出油样中的酸价值（以中的酸价值（以KOH计）。计）。（三）酸价快筛试纸条使用方法n试纸条操作关键点试纸条操作关键点n开开封封前前若若发发现现铝铝箔箔袋袋已已经经破破损损、密密封封不不好好或或反反应应膜膜已已经变色，则不能使用。经变色，则不能使用。n开封后必须立即使用。开封后必须立即使用。n应应在在规规定定时时间间范范围围内内观观察察反反应应结结果果，否否则则，结结果果的的判判断可能不准确。断可能不准确。（三）酸价快筛试纸条使用方法六、过氧化值快速检测六、过氧化值快速检测方法简介方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试纸条使用方法（一）概述n过氧化值是指过氧化值是指1kg样品中的活性氧含量，以过氧化物的毫摩样品中的活性氧含量，以过氧化物的毫摩尔数表示，是油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标，用于尔数表示，是油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标，用于说明样品是否因已被氧化而变质，判断其质量和变质程度。说明样品是否因已被氧化而变质，判断其质量和变质程度。n过氧化物可以破坏细胞膜结构，引发胃癌、肝癌、动脉硬化、过氧化物可以破坏细胞膜结构，引发胃癌、肝癌、动脉硬化、心肌梗塞和脱发。长期食用过氧化值过高的食物对心血管病、心肌梗塞和脱发。长期食用过氧化值过高的食物对心血管病、肿瘤等慢性病有促进作用。肿瘤等慢性病有促进作用。n油脂氧化后生成过氧化物、醛、酮等氧化能力较强的物质，油脂氧化后生成过氧化物、醛、酮等氧化能力较强的物质，能将碘化钾氧化成游离碘。可用硫代硫酸钠来滴定。能将碘化钾氧化成游离碘。可用硫代硫酸钠来滴定。（一）概述n常见食用油中过氧化值的限量值常见食用油中过氧化值的限量值n相关检测标准相关检测标准（一）概述n重点抽检对象重点抽检对象n散装食用植物油散装食用植物油n煎炸过程中的食用植物油煎炸过程中的食用植物油n生产、运输、储存不当的食用植物油生产、运输、储存不当的食用植物油（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于常温下为液态的食用油中过氧化值进适用范围：适用于常温下为液态的食用油中过氧化值进行快速检测。行快速检测。n原理：利用食用植物油氧化所产生的过氧化物与试纸中原理：利用食用植物油氧化所产生的过氧化物与试纸中的药剂发生显色反应，以此反应出油脂被氧化的程度。的药剂发生显色反应，以此反应出油脂被氧化的程度。（三）过氧化值快筛试纸条使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n【样品前处理样品前处理】n用用清清洁洁、干干燥燥容容器器量量取取少少量量的的食食用用油油样样品品，将将使使用用有有样样品品的的温温度度调调整整到到255，待测。，待测。（三）过氧化值快筛试纸条使用方法【样品检测样品检测】从试纸筒中取出试纸条。从试纸筒中取出试纸条。将试纸浸入油样中约将试纸浸入油样中约5s，取出后静置，取出后静置10min，用吸水，用吸水纸吸去多余的油样。纸吸去多余的油样。筛查结果判定筛查结果判定将反应膜所显示的颜色与比色卡进行对比，得出油样将反应膜所显示的颜色与比色卡进行对比，得出油样中的过氧化值。中的过氧化值。（三）过氧化值快筛试纸条使用方法n试纸条操作关键点试纸条操作关键点n开开封封前前若若发发现现铝铝箔箔袋袋已已经经破破损损、密密封封不不好好或或反反应应膜膜已已经变色，则不能使用。经变色，则不能使用。n开封后必须立即使用。开封后必须立即使用。n应应在在规规定定时时间间范范围围内内观观察察反反应应结结果果，否否则则，结结果果的的判判断可能不准确。断可能不准确。（三）过氧化值快筛试纸条使用方法七、黄曲霉毒素七、黄曲霉毒素B1快速检测快速检测方法简介方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n黄曲霉毒素是由生长在食物及饲料中的黄曲霉菌、曲霉菌黄曲霉毒素是由生长在食物及饲料中的黄曲霉菌、曲霉菌等代谢产生的一组化学结构类似的真菌毒素。目前已分离等代谢产生的一组化学结构类似的真菌毒素。目前已分离鉴定出鉴定出17种，主要是黄曲霉毒素种，主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，以及，以及由由B1和和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1和和M2等。等。n在天然污染的食品中以黄曲霉毒素在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1 最多见，毒性最强，最多见，毒性最强，已被已被WHO划定为一类致癌物。划定为一类致癌物。n黄曲霉的分布很广，特别容易污染花生、玉米、稻米、大黄曲霉的分布很广，特别容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，对世界范围内的绝大多数食品原料豆、小麦等粮油产品，对世界范围内的绝大多数食品原料和制成品均有不同程度的危害。在湿热地区食品和饲料中和制成品均有不同程度的危害。在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。出现黄曲霉毒素的机率最高。（一）概述nGB 2761-2011n常用检测标准常用检测标准（一）概述n重点抽检对象重点抽检对象n霉变的花生、核桃、大米、玉米、小麦等粮食作物霉变的花生、核桃、大米、玉米、小麦等粮食作物n散装食用植物油散装食用植物油（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于粮食作物（玉米、大米、豆类、花生等）及适用范围：适用于粮食作物（玉米、大米、豆类、花生等）及其制品（酱油、食醋、食用油、米酒等）产品中黄曲霉毒素其制品（酱油、食醋、食用油、米酒等）产品中黄曲霉毒素B1 的定性筛查检测。的定性筛查检测。n检出限：检出限：5.0g/kgn原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的黄曲霉毒素原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的黄曲霉毒素B1在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（了抗体和包被膜检测线（T线）上的黄曲霉毒素线）上的黄曲霉毒素B1偶联物，从偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有黄曲霉毒素而导致检测线颜色的变化。当样本中没有黄曲霉毒素B1或者低或者低于其检测限时，于其检测限时，T线有明显的显色；当样本中的黄曲霉毒素线有明显的显色；当样本中的黄曲霉毒素B1残留高于检测线时，残留高于检测线时，T线不会显色；无论样本中是否含有黄曲霉线不会显色；无论样本中是否含有黄曲霉毒素毒素B1，C线均会显色。线均会显色。（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法（三）黄曲霉毒素（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法快筛试剂盒使用方法n胶体金技术简介胶体金技术简介n胶体金免疫技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的胶体金免疫技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。通常有双抗体夹心法和竞争法两种。一种新型的免疫标记技术。通常有双抗体夹心法和竞争法两种。对于小分子物质，一般只能用竞争法检测。对于小分子物质，一般只能用竞争法检测。n样品液滴加到样品垫后，受毛细作用向金标垫层析，随后胶体样品液滴加到样品垫后，受毛细作用向金标垫层析，随后胶体金标记物复溶于溶液中并随溶液一起向金标记物复溶于溶液中并随溶液一起向T线移动。线移动。n若样品中没有被分析物，则胶体金标记物与若样品中没有被分析物，则胶体金标记物与T线上蛋白特异性结线上蛋白特异性结合形成线条，即阴性。合形成线条，即阴性。n若样品中有被分析物，在抗体金标型中，小分子物质与若样品中有被分析物，在抗体金标型中，小分子物质与T线上的线上的抗原竞争胶体金上的抗体；在抗原金标中，小分子物质与胶体抗原竞争胶体金上的抗体；在抗原金标中，小分子物质与胶体金上的抗原竞争结合金上的抗原竞争结合T线上的抗体，两种情况都使得金标记物线上的抗体，两种情况都使得金标记物不能和不能和T线上物质结合，从而不能产生线条，即阳性。线上物质结合，从而不能产生线条，即阳性。（三）黄曲霉毒素（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法快筛试剂盒使用方法n胶体金试纸条组成结构胶体金试纸条组成结构n 【样品前处理样品前处理】谷物和饲料谷物和饲料取取5g以以上上有有代代表表性性的的样样品品粉粉碎碎，称称取取2.0g均均匀匀粉粉碎碎样样加加入入到到15 mL离心管中。离心管中。向向离离心心管管中中准准确确加加入入2mL纯纯净净水水和和8mL乙乙酸酸乙乙酯酯，将将瓶瓶塞塞盖盖紧紧密密封封，充充分分震震荡荡5min，然然后后静静置置1min（注注意意：如如上上清清不不足足3mL，以，以4000rpm离心离心1min）。）。取取3mL上上清清液液到到小小玻玻璃璃杯杯中中，用用电电吹吹风风（不不要要过过高高温温度度）或或60氮氮(空空)气吹干。气吹干。溶溶剂剂吹吹干干后后，滴滴加加4滴滴（约约200L）样样品品稀稀释释液液溶溶解解残残留留物物，震荡使其混匀，待检。震荡使其混匀，待检。（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法【样品前处理样品前处理】食用油食用油准确称取准确称取2.0g油样于油样于15mL离心管中。离心管中。准准确确加加入入8mL的的正正己己烷烷及及4mL纯纯净净水水，盖盖紧紧离离心心管管盖盖，充充分分震震荡荡3min，小心吸去上层液体。，小心吸去上层液体。再再加加入入4mL乙乙酸酸乙乙酯酯，盖盖紧紧离离心心管管盖盖，充充分分震震荡荡5min，静静置置或或4000 rpm离心离心1min。转转移移3mL上上清清液液到到一一个个干干净净的的小小玻玻璃璃杯杯或或其其它它小小容容器器中中，用用电电吹吹风（不要过高温度）吹干或风（不要过高温度）吹干或60氮氮(空空)气吹干。气吹干。溶溶剂剂吹吹干干后后，滴滴加加4滴滴（约约200L）样样品品稀稀释释液液溶溶解解残残留留物物，震震荡荡使其混匀，待检。使其混匀，待检。（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法【样品前处理样品前处理】酱油、醋酱油、醋准确量取准确量取2mL样品于样品于15mL离心管中。离心管中。准准确确加加入入4mL乙乙酸酸乙乙酯酯，盖盖紧紧离离心心管管盖盖，充充分分震震荡荡5min，静静置置12min，让待测液分层。，让待测液分层。将上清液用吸管全部转移到另一个将上清液用吸管全部转移到另一个15mL离心管中。离心管中。加加入入2mL 50mM Na2CO3溶溶液液（若若是是米米醋醋，用用NaOH溶溶液液调调节节pH值到值到6.0-8.0之间），充分震荡之间），充分震荡3min。转转移移3mL上上清清液液到到一一个个干干净净小小玻玻璃璃杯杯或或小小容容器器中中，用用电电吹吹风风（不要过高温度）吹干或（不要过高温度）吹干或60氮氮(空空)气吹干。气吹干。溶溶剂剂吹吹干干后后，滴滴加加4滴滴（约约200L）样样品品稀稀释释液液溶溶解解残残留留物物，震震荡使其混匀，待检。荡使其混匀，待检。（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法【样品前处理样品前处理】发酵酒发酵酒准确量取准确量取2mL样品于样品于15mL离心管中。离心管中。准准确确加加入入4mL乙乙酸酸乙乙酯酯，盖盖紧紧离离心心管管盖盖，充充分分震震荡荡5min，静静置置12min，让待测液分层。，让待测液分层。转转移移3mL上上清清液液到到一一个个干干净净的的小小玻玻璃璃杯杯或或其其它它小小容容器器中中，用用电吹风（不要过高温度）吹干或电吹风（不要过高温度）吹干或60氮氮(空空)气吹干。气吹干。溶溶剂剂吹吹干干后后，滴滴加加4滴滴（约约200L）样样品品稀稀释释液液溶溶解解残残留留物物，震荡使其混匀，待检。震荡使其混匀，待检。（三）黄曲霉毒素（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法快筛试剂盒使用方法（三）黄曲霉毒素（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法快筛试剂盒使用方法【样品检测样品检测】使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放。从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放。用移液枪移取用移液枪移取100L待测液于微孔中，反复吹打待测液于微孔中，反复吹打35 次，次，混合均匀，静置混合均匀，静置5min，用一次性吸管转移液体至加样孔，用一次性吸管转移液体至加样孔中。中。加样后开始计时，加样后开始计时，58min即可观察结果，即可观察结果，10min后判读无后判读无效。效。（三）黄曲霉毒素（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法快筛试剂盒使用方法n筛查结果判定筛查结果判定n阴阴性性（）：若若质质控控线线（C线线）和和检检测测线线（T线线）均均显显色色，表表示示待待测测样样品品中中不不含含黄黄曲霉毒素曲霉毒素B1 或者低于检测下限。或者低于检测下限。n阳阳性性（）：若若仅仅质质控控线线（C线线）显显色色，检检测测线线（T线线）不不显显色色，表表示示待待测测样样品品中中可能含黄曲霉毒素可能含黄曲霉毒素B1。n无无效效：若若质质控控线线（C 线线）不不显显色色，表表示示存存在不正确的操作过程或检测卡已变质失效。在不正确的操作过程或检测卡已变质失效。n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n检检测测卡卡从从铝铝膜膜袋袋中中取取出出后后，应应于于1h内内进进行行实实验验，置置于于空空气中时间过长，检测卡会受潮失效。气中时间过长，检测卡会受潮失效。n实实验验环环境境应应保保持持一一定定湿湿度度、避避风风，避避免免在在过过高高温温度度下下进进行实验。行实验。（三）黄曲霉毒素（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法快筛试剂盒使用方法八、三聚氰胺快速检测方法简介八、三聚氰胺快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。由于其含氮三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。由于其含氮量高达量高达66%，部分违法分子为了掩盖产品蛋白质不足的缺，部分违法分子为了掩盖产品蛋白质不足的缺陷，非法添加三聚氰胺，虚高产品蛋白质含量，造成蛋白陷，非法添加三聚氰胺，虚高产品蛋白质含量，造成蛋白质含量的质含量的“假达标假达标”。n长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。n三聚氰胺作为非食用物质，三聚氰胺作为非食用物质，2008年被列入我国第一批年被列入我国第一批“食食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单种名单”。（一）概述n食品中三聚氰胺的最大残留限量食品中三聚氰胺的最大残留限量n关于三聚氰胺在食品中的限量值的公告关于三聚氰胺在食品中的限量值的公告(2011年第年第10号号)n相关检测标准相关检测标准（一）概述n重点抽检对象重点抽检对象n乳制品及含乳制品乳制品及含乳制品n植物蛋白饮料植物蛋白饮料n乳饮料乳饮料n其他具有蛋白质限量要求的食品其他具有蛋白质限量要求的食品（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于液态奶、奶粉中三聚氰胺残留的快速适用范围：适用于液态奶、奶粉中三聚氰胺残留的快速筛查。筛查。n原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的三聚氰原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的三聚氰胺在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结胺在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的三聚氰胺线）上的三聚氰胺偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有三偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有三聚氰胺或者低于三聚氰胺检测限时，聚氰胺或者低于三聚氰胺检测限时，T线有明显的显色；线有明显的显色；当样本中的三聚氰胺残留高于检测线时，当样本中的三聚氰胺残留高于检测线时，T线不会显色；线不会显色；无论样本中是否含有三聚氰胺，无论样本中是否含有三聚氰胺，C线均会显色。线均会显色。（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【试剂配制试剂配制】n将将样样品品稀稀释释液液（10）用用去去离离子子水水或或蒸蒸馏馏水水按按（1:9）体积进行稀释。）体积进行稀释。n 【样品前处理样品前处理】n液液体体奶奶：吸吸取取1mL牛牛乳乳至至样样品品杯杯中中，加加入入1mL 样样品稀释液，混匀即为待测液。品稀释液，混匀即为待测液。n奶奶粉粉：称称取取1g奶奶粉粉至至样样品品杯杯中中，加加入入9mL 样样品品稀稀释液，混匀即为待测液。释液，混匀即为待测液。（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法【样品检测样品检测】使用前将检测条和待检样本溶液恢复至室温（使用前将检测条和待检样本溶液恢复至室温（1037）。）。从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放，用滴管滴加从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放，用滴管滴加3 滴待测样品溶液于加样孔中。滴待测样品溶液于加样孔中。加样后开始计时，加样后开始计时，58 min即可观察结果，即可观察结果，10min 后判后判读无效。读无效。（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法n筛查结果判定筛查结果判定n阴阴性性（）：二二条条红红色色反反应应线线：检检测测区区（T）及及对对照照区区（C）各各出出现现一一条条红红色色反反应应线线，表表示示样样品品中中不不含含三三聚聚氰氰胺胺或或者者低低于于检检测下限。测下限。n阳阳性性（）：一一条条红红色色反反应应线线：仅仅在在对对照照区区（C）出出现现一一条条红红色色反反应应线线。表表示示样样品品中可能含有三聚氰胺。中可能含有三聚氰胺。n无无效效：对对照照区区（C）无无红红色色反反应应线线出出现现，表表示示测测试试错错误误或或无无效效。在在此此情情况况下下，应应再再次次仔仔细细阅阅读读说说明明书书，并并用用新新的的检检测测卡卡重重新新测试。测试。n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n检检测测条条从从铝铝膜膜袋袋中中取取出出后后，应应于于1h内内进进行行实实验验，置置于空气中时间过长，检测卡会受潮失效。于空气中时间过长，检测卡会受潮失效。n实实验验环环境境应应保保持持一一定定湿湿度度、避避风风，避避免免在在过过高高温温度度下下进行实验。进行实验。n检检测测卡卡在在常常温温下下保保存存，谨谨防防受受潮潮，低低温温下下保保存存的的检检测测卡应平衡至室温方可使用。卡应平衡至室温方可使用。（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法九、孔雀石绿快速检测方法简介九、孔雀石绿快速检测方法简介主要内容主要内容n 概述n 监督检查重点品种n 快筛试剂盒使用方法（一）概述n孔雀石绿是杀菌和杀寄生虫的化学制剂，可用作治理鱼类孔雀石绿是杀菌和杀寄生虫的化学制剂，可用作治理鱼类或鱼卵的寄生虫、真菌或细菌感染，对鱼体水霉病和鱼卵或鱼卵的寄生虫、真菌或细菌感染，对鱼体水霉病和鱼卵的水霉病有特效，对其他一些细菌性疾病都有很好的效果。的水霉病有特效，对其他一些细菌性疾病都有很好的效果。n孔雀石绿进入水生动物体内后，会快速代谢成脂溶性的无孔雀石绿进入水生动物体内后，会快速代谢成脂溶性的无色孔雀石绿。孔雀石绿具有潜在的致癌、致畸、致突变的色孔雀石绿。孔雀石绿具有潜在的致癌、致畸、致突变的作用。作用。n我国农业部已将孔雀石绿列为水产上的禁药，但由于没有我国农业部已将孔雀石绿列为水产上的禁药，但由于没有低廉有效的替代品，孔雀石绿在水产养殖中的使用屡禁不低廉有效的替代品，孔雀石绿在水产养殖中的使用屡禁不止。止。n相关检测标准相关检测标准（一）概述n重点抽检对象重点抽检对象n表面发绿，严重的呈现青草绿色，鱼鳍条显现白色，通表面发绿，严重的呈现青草绿色，鱼鳍条显现白色，通体色泽发亮的水产品体色泽发亮的水产品n养殖过程、运输过程、暂养存放过程中的养殖水养殖过程、运输过程、暂养存放过程中的养殖水（二）监督检查重点品种n适用范围：适用于水产中孔雀石绿的定性快速现场检测。适用范围：适用于水产中孔雀石绿的定性快速现场检测。n原理：应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀原理：应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀石绿在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体石绿在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（结合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的孔雀石线）上的孔雀石绿偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有绿偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有孔雀石绿或者低于孔雀石绿检测限时，孔雀石绿或者低于孔雀石绿检测限时，T线显色明显强线显色明显强于于C线或与线或与C线显色一致；当样本中的孔雀石绿残留高线显色一致；当样本中的孔雀石绿残留高于检测线时，于检测线时，T线不会显色或明显弱于线不会显色或明显弱于C线；无论样本线；无论样本中是否含有孔雀石绿，中是否含有孔雀石绿，C线均会显色。线均会显色。（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法n筛查操作步骤筛查操作步骤n 【样品前处理样品前处理】n用均质器均质组织样本。用均质器均质组织样本。n称称取取1.0g均均质质样样品品至至10mL新新聚聚苯苯乙乙烯烯离离心心管管中中，加加入入1mL去去离离子子水水，涡涡旋旋2min，加加入入100L孔孔雀雀石石绿绿提提取取剂剂1，再再加加入入1瓶瓶孔孔雀雀石石绿绿提提取取剂剂2，涡涡旋旋2min，室室温温（20-25）离心）离心5min。n取取上上清清液液1mL上上清清液液至至10mL新新聚聚苯苯乙乙烯烯离离心心管管中中，加加入入50L孔孔雀雀石石绿绿氧氧化化剂剂，涡涡旋旋15s，于于5060水水浴浴氮氮气气或或空气流下吹干。空气流下吹干。n加入加入0.3mL样品复溶液涡动溶解样品复溶液涡动溶解3min，取，取100L用于分析。用于分析。（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法【样品检测样品检测】从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂和试纸卡，并做好标记。请在和试纸卡，并做好标记。请在60min内尽快使用。所需内尽快使用。所需微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖，防止受潮。微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖，防止受潮。用微量移液器吸取用微量移液器吸取100L待检样本溶液于微孔中，缓慢抽待检样本溶液于微孔中，缓慢抽吸且充分与微孔中试剂混匀。吸且充分与微孔中试剂混匀。室温（室温（2025）孵育）孵育3min 后，吸取混匀液约后，吸取混匀液约100L垂直垂直滴于加样孔（滴于加样孔（S 孔）中。孔）中。液体流动时开始计时，反应液体流动时开始计时，反应5min，根据示意图判定结果，根据示意图判定结果，其他时间判定无效。其他时间判定无效。（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法n筛查结果判定筛查结果判定n阴阴性性（）：T线线显显色色强强于于C线线显显色色或或与与C线线显显色色无无明明显显差差异异，表表示示水水产产样样本本中中不不含含有孔雀石绿或其浓度低于检测限。有孔雀石绿或其浓度低于检测限。n阳阳性性（）：T 线线显显色色明明显显弱弱于于C 线线显显色色或或T 线线不不显显色色，表表示示水水产产样样本本中中孔孔雀雀石石绿绿浓度等于或高于检测限。浓度等于或高于检测限。n无无效效：未未出出现现C线线，表表明明不不正正确确的的操操作作过过程程或或试试纸纸卡卡已已失失效效。在在此此情情况况下下，应应再再次次仔仔细细阅阅读读说说明明书书，并并用用新新的的试试纸纸卡卡重重新新测测试。试。n试剂盒操作关键点试剂盒操作关键点n实实验验过过程程中中，用用红红色色标标记记笔笔进进行行标标记记，黑黑色色标标记记笔笔含含有结晶紫，会对该实验造成污染。有结晶紫，会对该实验造成污染。n操作时勿触摸试纸卡显色区。操作时勿触摸试纸卡显色区。n微微孔孔试试剂剂取取出出后后，请请立立即即盖盖好好试试剂剂桶桶盖盖子子。如