钙磷镁测定课件

第十二章第十二章 钙磷镁和微量元素检验钙磷镁和微量元素检验目标：目标：1.钙、磷、镁代谢情况及功能钙、磷、镁代谢情况及功能2.微量元素的功能微量元素的功能3.它们的测定方法它们的测定方法钙磷占第五、六位钙磷占第五、六位镁占第十一位镁占第十一位微量元素有重要的生物作用和临床意义微量元素有重要的生物作用和临床意义第一节第一节 概述概述一、钙、磷代谢和调节一、钙、磷代谢和调节二、镁代谢和生理功能二、镁代谢和生理功能三、微量元素与疾病三、微量元素与疾病一、钙、磷代谢和调节一、钙、磷代谢和调节（一）钙代谢：（一）钙代谢：1.钙的含量、分布和血钙钙的含量、分布和血钙骨：骨：99%体液、组织：体液、组织：1%可扩散钙：影响代谢、功能可扩散钙：影响代谢、功能非扩散钙：与血浆蛋白结合非扩散钙：与血浆蛋白结合血钙受血钙受H+影响：影响：pH升高升高-结合钙增加结合钙增加-Ca2+减少减少 H+Ca2+=K-HCO3-2.钙的吸收和排泄钙的吸收和排泄影响吸收的因素：影响吸收的因素：VD3年龄年龄溶解状态：乳糖、乳酸、氨基酸提高溶解状态：乳糖、乳酸、氨基酸提高 草酸、植酸抑制草酸、植酸抑制Ca:P=2:1时，吸收最好时，吸收最好排泄：排泄：肠道：食物中未吸收及肠道分泌钙肠道：食物中未吸收及肠道分泌钙肾脏：点总排钙量的肾脏：点总排钙量的20%（三）磷代谢：（三）磷代谢：分布：分布：骨：骨：86%各组织体液：各组织体液：14%吸收：易吸收，较少缺磷吸收：易吸收，较少缺磷排泄：肾脏。排泄量可血中磷酸盐成正比排泄：肾脏。排泄量可血中磷酸盐成正比（三）钙、磷代谢的调节（三）钙、磷代谢的调节甲状旁腺素：甲状旁腺素：促进肾脏对促进肾脏对Ca、P重吸收重吸收促进破骨细胞生成，促进骨盐溶解促进破骨细胞生成，促进骨盐溶解促进钙、磷重吸收促进钙、磷重吸收Ca2+上升上升降钙素：降钙素：抑制肾脏对钙、磷的重吸收抑制肾脏对钙、磷的重吸收促进骨盐沉积促进骨盐沉积抑制抑制Ca、P吸收吸收降低降低Ca2+VD3促进肾脏对钙、磷的重吸收促进肾脏对钙、磷的重吸收促进溶骨作用促进溶骨作用促进肠道促进肠道Ca、P吸收吸收升高升高Ca2+（四）钙、磷的生理功能（四）钙、磷的生理功能1.钙的作用：钙的作用：（1）凝血因子之一）凝血因子之一（2）增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性）增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性（3）降低毛细血管通透性，减少渗出）降低毛细血管通透性，减少渗出（4）做为酶的激活剂、抑制剂）做为酶的激活剂、抑制剂（5）激素的）激素的“第二信使第二信使”，参与代谢调节，参与代谢调节2.磷的作用磷的作用(1)参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成(2)参与高能磷酸化合物生成参与高能磷酸化合物生成(3)共价修饰调节共价修饰调节(4)HPO42/H2PO4是缓冲体系是缓冲体系二、镁代谢和生理功能二、镁代谢和生理功能（一）镁的代谢（一）镁的代谢骨：骨：60%骨骼肌：骨骼肌：20-30%其它组织：其它组织：10%血浆中：血浆中：重碳酸、柠檬酸、磷酸盐重碳酸、柠檬酸、磷酸盐Mg2+Mg-血浆蛋白复合物血浆蛋白复合物（二）镁的生理功能（二）镁的生理功能1.酶的辅助因子：约酶的辅助因子：约300种酶需种酶需Mg2+2.对神经肌肉兴奋性有降低作用对神经肌肉兴奋性有降低作用三、微量元素与疾病三、微量元素与疾病（一）微量元素对各种生命活动的影响（一）微量元素对各种生命活动的影响1.促进机体生长发育促进机体生长发育2.对神经系统结构和功能的影响对神经系统结构和功能的影响3.内分泌的影响、内分泌的影响、4.免疫系统的影响免疫系统的影响5.对心血管疾病的影响对心血管疾病的影响6.对肿瘤发生、发展和治疗对肿瘤发生、发展和治疗7.对胚胎及胎儿发育的影响对胚胎及胎儿发育的影响测复合物的活性测复合物的活性免疫化学法免疫化学法（三）微量元素的生物学作用及代谢（三）微量元素的生物学作用及代谢1.铁：铁：吸收：吸收：贮量少时贮量少时-吸收多吸收多酸性酸性-吸收多吸收多Fe2+比比Fe3+-吸收多吸收多代谢：代谢：Fe2+-Fe3+-运铁蛋白运铁蛋白-合成合成血红素血红素功能：合成血红素功能：合成血红素-血红蛋白、肌红蛋白、血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶细胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶2.锌锌分布：分布：肌肉：肌肉：62.2%骨：骨：28.5%功能：功能：1.与酶的合成与活性有关与酶的合成与活性有关 2.与免疫功能有关与免疫功能有关3.铜铜吸收：肠粘膜吸收：肠粘膜-合成铜蓝蛋白合成铜蓝蛋白排出：胆道排出：胆道-肠道肠道功能：功能：1.参与许多酶的组成参与许多酶的组成 2.促进促进Fe3+-Fe2+，促进铁吸，促进铁吸收收4.硒：硒：肠道吸收肠道吸收-尿汗排出尿汗排出多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶抗氧化作用抗氧化作用5.铬铬葡萄糖耐量因子葡萄糖耐量因子-使胰岛素与受使胰岛素与受体形成体形成-S-S-键键6.锰锰 参与多种酶的组成（精氨酸酶、丙酮酸参与多种酶的组成（精氨酸酶、丙酮酸羟化酶、过氧化物岐化酶等）羟化酶、过氧化物岐化酶等）8.钼钼骨牙中。对骨牙形成有重要作用骨牙中。对骨牙形成有重要作用黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧化酶化酶9.氟氟10.碘碘 甲状腺素甲状腺素T3、T4合成合成（一）钙测定（一）钙测定第二节第二节 钙、磷、镁和微量元素测定钙、磷、镁和微量元素测定 一、血清钙、磷、镁的测定一、血清钙、磷、镁的测定1.离子钙的测定：离子钙的测定：离子选择电极法离子选择电极法（二）总钙测定（二）总钙测定 1.邻甲酚酞络合酮比色法：邻甲酚酞络合酮比色法：2.甲基麝香草酚蓝法甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与钙螯合碱性溶液中与钙螯合-淡绿变淡绿变蓝蓝3.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 高温高温-Ca2+-气态钙离子气态钙离子-吸收吸收422.7nm光谱光谱4.EDTA络合滴定法络合滴定法碱性下碱性下-Ca2+与钙红结合与钙红结合-淡红淡红色色EDTA滴入滴入-夺取夺取Ca2+-钙红重新游钙红重新游离离-变蓝色变蓝色（二）血清磷的测定（二）血清磷的测定1.磷钼酸还原法磷钼酸还原法2.磷酸盐与钼酸磷酸盐与钼酸-无色磷钼酸无色磷钼酸-3.加还原剂加还原剂-蓝色复合杂聚物钼蓝蓝色复合杂聚物钼蓝2.磷钼酸非还原法磷钼酸非还原法 酸性溶液中磷酸酸性溶液中磷酸+钼酸铵钼酸铵-磷钼酸铵杂聚化合物磷钼酸铵杂聚化合物3.酶法酶法（三）血清镁的测定（三）血清镁的测定1.原子吸收分光光度法：原子吸收分光光度法：2.镁灯镁灯-激发激发-285.2nm光谱光谱-标本中基态镁原子蒸汽吸收标本中基态镁原子蒸汽吸收-吸收量与镁浓度成正比吸收量与镁浓度成正比2.甲基麝香草酚蓝法甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与镁螯合碱性溶液中与镁螯合-蓝紫色化合蓝紫色化合物物3.Calmagite比色法比色法碱性下，镁与碱性下，镁与Calmagite染料生成紫红色化合物染料生成紫红色化合物4.达旦黄比色法达旦黄比色法碱性下碱性下-Mg2+-Mg(OH)2胶体胶体-与达旦黄生成橘红色复合物与达旦黄生成橘红色复合物二、尿液中钙镁磷的测定二、尿液中钙镁磷的测定 先将尿液酸化，溶解尿中盐先将尿液酸化，溶解尿中盐三、铁、铜、锌测定三、铁、铜、锌测定（一）铁测定（一）铁测定1.血清铁血清铁酸性酸性-Fe3+与运铁蛋白分离与运铁蛋白分离-还原剂还原剂-Fe2+-络合显色剂络合显色剂-比色测定比色测定2.总铁结合力总铁结合力加过量加过量Fe-使运铁蛋白饱和使运铁蛋白饱和-除去多余除去多余Fe2+-上清上清-测测Fe+-HOH甘氨酰甘氨酸甘氨酰甘氨酸肽键(二）铜测定二）铜测定1.原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法2.血清铜比色法血清铜比色法稀酸稀酸Cu2+与蛋白分离与蛋白分离-除蛋白除蛋白-上清与二乙基二醇代氨基甲酸钠上清与二乙基二醇代氨基甲酸钠-金金黄色化合物黄色化合物（三）锌测定（三）锌测定酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的磷钨酸、磷钼酸磷钨酸、磷钼酸-蓝色化合物蓝色化合物加上加上Cu2+,结合双缩脲法，提高灵敏度结合双缩脲法，提高灵敏度适于测单一蛋白，且适用于蛋白含量较适于测单一蛋白，且适用于蛋白含量较少的样品少的样品4 比浊法比浊法酸性试剂酸性试剂+蛋白质蛋白质-沉淀沉淀5 染料结合法染料结合法酸性条件下，蛋白质酸性条件下，蛋白质-NH3+酪，酪，与染料中阴离子产生颜色反应。与染料中阴离子产生颜色反应。氨基黑、考马斯亮兰氨基黑、考马斯亮兰6 紫外分光光度法紫外分光光度法色氨酸、酪氨酸色氨酸、酪氨酸 在在280nm有吸收峰有吸收峰保持蛋白活性保持蛋白活性7 折光测定法折光测定法溶于溶液中的固体可增加它的光折射溶于溶液中的固体可增加它的光折射率率固定波长、固定温度下，光折射率与蛋固定波长、固定温度下，光折射率与蛋白浓度成正比白浓度成正比血清总蛋白血清总蛋白-临床意义：临床意义：升高：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症升高：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。等。降低：白蛋白合成减少，或蛋白丢失降低：白蛋白合成减少，或蛋白丢失二、血清白蛋白测定二、血清白蛋白测定1.染料结合法染料结合法白蛋白与染料结合，球蛋白很少与染料白蛋白与染料结合，球蛋白很少与染料结合结合溴甲酚绿，溴甲酚紫溴甲酚绿，溴甲酚紫白蛋白（白蛋白（pH4.2,+)+BCG-蓝绿色化蓝绿色化合物合物-OD与白蛋白浓度成正比与白蛋白浓度成正比2.盐析法盐析法球蛋白先沉淀球蛋白先沉淀3.电泳法电泳法4.2免疫化学法免疫化学法抗原抗体反应；抗体过量抗原抗体反应；抗体过量临床意义临床意义合成减少合成减少吸收减少吸收减少丢失过多丢失过多七、脑脊液蛋白质测定七、脑脊液蛋白质测定脉络膜的毛细血管壁超滤形成，及少脉络膜的毛细血管壁超滤形成，及少量中枢神经系统合成量中枢神经系统合成浊度法浊度法染料结合法：考马斯亮兰，邻苯三酚红染料结合法：考马斯亮兰，邻苯三酚红钼络合显色法。钼络合显色法。临床意义：临床意义：神经系统疾病神经系统疾病血脑屏障通透性增加；血管性脑水肿，血脑屏障通透性增加；血管性脑水肿，细胞含量过多，神经细胞坏死等细胞含量过多，神经细胞坏死等三、血清球蛋白测定三、血清球蛋白测定球蛋白中色氨酸占球蛋白中色氨酸占2%，而白蛋中仅，而白蛋中仅0.2%乙酰色氨酸乙酰色氨酸+乙醛酸反应乙醛酸反应-紫色紫色四、血清纤维蛋白原测定四、血清纤维蛋白原测定1.凝块测定法：加凝血酶凝块测定法：加凝血酶血块血块-挑出挑出双缩脲双缩脲-比色比色2.比浊法：比浊法：13.3%硫酸铵硫酸铵3.盐析盐析4.免疫化学法：免疫化学法：p经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量pStudyConstantly,AndYouWillKnowEverything.TheMoreYouKnow,TheMorePowerfulYouWillBe写在最后Thank You在别人的演说中思考，在自己的故事里成长Thinking In Other PeopleS Speeches，Growing Up In Your Own Story讲师：XXXXXX XX年XX月XX日