第二章-中药分析中供试品的制备00课件

第二章第二章 中药分析中中药分析中供试品的制备供试品的制备中药分析教研室中药分析教研室1 1讲授提纲讲授提纲u第一节第一节 取样取样u第二节第二节 样品的提取样品的提取u第三节样品的净化第三节样品的净化u第四节样品提取液的浓缩第四节样品提取液的浓缩u第五节样品的衍生化第五节样品的衍生化u第六节不同类型中药样品第六节不同类型中药样品的预处理特点的预处理特点2讲讲授提授提纲纲第一第一节节 取取样样2样品品预处理理有效有效释放被放被测成分，并成分，并制成便于分制成便于分析析测定状定状态除除杂、纯化，提高化，提高重重现性和性和准确度准确度富集富集、浓缩、衍生化衍生化，提，提高灵敏度和高灵敏度和选择性性使使试样的的形式及所形式及所溶溶剂符合符合分析分析测定定要求要求3最大限度地保留被测成分，除去干扰物质，将被测定成分浓最大限度地保留被测成分，除去干扰物质，将被测定成分浓缩至高于分析方法最小检测限所需浓度缩至高于分析方法最小检测限所需浓度样样品品预处预处理有效理有效释释放被放被测测成分，并制成便于分析成分，并制成便于分析测测定状定状态态除除杂杂、纯纯化化第一节取第一节取 样样4取样取样鉴别鉴别含量测定含量测定检查检查提取提取纯化纯化样品粉碎样品粉碎科学性、科学性、真实性、真实性、代表性代表性均匀合理均匀合理第一第一节节取取 样样4取取样鉴别样鉴别含量含量测测定定检查检查提取提取纯纯化化样样品粉碎科学品粉碎科学一、抽样一、抽样5常用常用术语包装件包装件、最小包装最小包装批批、抽抽样批批抽抽样单元元、最最终样品品抽抽样单元元的确定的确定随机抽随机抽样法法：简单、分段分段偶遇抽偶遇抽样法法针对性抽性抽样抽抽样量量一般一般药材和材和饮片片：100500g/包包粉末状粉末状药材和材和饮片片：2550g/包包贵重重药材和材和饮片片：510g/包包抽抽样方法方法中药材和饮片的抽样中药材和饮片的抽样中药提取物的抽样中药提取物的抽样中药制剂的抽样中药制剂的抽样一、抽一、抽样样5常用常用术语术语包装件、最小包装批、抽包装件、最小包装批、抽样样批抽批抽样单样单元、最元、最终样终样 6二、样品的粉碎二、样品的粉碎使使所取所取样品均品均匀匀、有代表性，有代表性，提高精密度和提高精密度和准确度准确度粉碎机粉碎机匀匀浆机机研研钵能快能快而而充分地充分地提取提取样品中被品中被测组分分 6二、二、样样品的粉碎使所取品的粉碎使所取样样品均匀、有代表性，提高精密度和准确品均匀、有代表性，提高精密度和准确取取样均匀合理均匀合理气体气体固体固体，圆锥四四分法分法半液体，半液体，硅藻土硅藻土拌拌液体，液体，混合均混合均匀匀7三、取样三、取样保留一半数量作保留一半数量作留样观察留样观察,时间为时间为半年或一年半年或一年取取样样气体固体，气体固体，圆锥圆锥四分法半液体，硅藻土拌液体，混合均匀四分法半液体，硅藻土拌液体，混合均匀7三、三、操作操作简单，适于，适于热不不稳定的定的样品品费时、费溶溶剂、提取不充分，含、提取不充分，含测少用少用简便、快速、高效，通常便、快速、高效，通常30min应规定提取功率和提取定提取功率和提取频率率浸浸渍法法提取效率高，提取效率高，时间短，但短，但杂质较多多对热不不稳定或具有定或具有挥发性成分不宜使用性成分不宜使用超声提取法超声提取法回流提取法回流提取法8第二节样品提取第二节样品提取浸浸渍渍法操作法操作简单简单，适于，适于热热不不稳稳定的定的样样品品费时费时、费费溶溶剂剂、提取不充分，、提取不充分，9供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取本品粉末取本品粉末(过二号筛过二号筛)约约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇10ml，超声处理，超声处理(功率功率250W，频率，频率50kHz)20分钟，滤分钟，滤过，滤渣和滤纸再加甲醇过，滤渣和滤纸再加甲醇10ml，同法超声处理一，同法超声处理一次，滤过，加甲醇适量洗涤次，滤过，加甲醇适量洗涤2次，合并滤液和洗次，合并滤液和洗液，转移至液，转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。（荆芥项下胡薄荷酮含量测定）即得。（荆芥项下胡薄荷酮含量测定）9供供试试品溶液的制品溶液的制备备 取本品粉末取本品粉末(过过二号二号筛筛)约约0.5g，精，精提取效率高，所需溶提取效率高，所需溶剂少，提取少，提取杂质少，少，操作操作简便便受受热易分解的成分不宜使用易分解的成分不宜使用提取提取杂质少，操作少，操作简便便适用于适用于挥发性成分，可利用性成分，可利用盐析作用析作用连续回流提取法回流提取法降低有机物干降低有机物干扰，分干法和湿法，分干法和湿法适用于以元素适用于以元素为测定定对象象水蒸气水蒸气蒸蒸馏法法消化法消化法10第二节样品提取第二节样品提取连续连续回流提取法提取效率高，所需溶回流提取法提取效率高，所需溶剂剂少，提取少，提取杂质杂质少，操作少，操作简简便受便受11供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取取本本品品中中粉粉约约4g，精精密密称称定定，置置索索氏氏提提取取器器中中，加加甲甲醇醇40ml，冷冷浸浸过过夜夜，再再加加甲甲醇醇适适量量，加加热热回回流流4小小时时，提提取取液液回回收收溶溶剂剂并并浓浓 缩缩 至至 干干，残残 渣渣 加加 水水10ml（黄芪中黄芪甲苷）（黄芪中黄芪甲苷）11供供试试品溶液的制品溶液的制备备 安全，价廉，易于操作安全，价廉，易于操作，环保保较适用于中低极性成分的提取适用于中低极性成分的提取提取率高提取率高价格昂价格昂贵超超临界流体萃取法界流体萃取法（CO2）快速，省溶快速，省溶剂、多、多样品同品同时提取提取萃取溶萃取溶剂选择性高，可与性高，可与HPLC相相连加加压溶溶剂萃取法萃取法微波微波辅助萃取法助萃取法12第二节样品提取第二节样品提取超超临临界流体萃取法（界流体萃取法（CO2）安全，价廉，易于操作，）安全，价廉，易于操作，环环保保较较适用于适用于13超临界流体萃取法超临界流体萃取法（CO2）设备）设备加压溶剂萃取法设备加压溶剂萃取法设备微波辅助萃取法设备微波辅助萃取法设备13超超临临界流体萃取法加界流体萃取法加压压溶溶剂剂萃取法萃取法设备设备微波微波辅辅助萃取法助萃取法设备设备14不同分析目的样品的提取不同分析目的样品的提取实验目的实验目的方法要求方法要求常用方法常用方法供鉴别用供鉴别用针对待检成分的溶解针对待检成分的溶解性能选择适宜的提取性能选择适宜的提取溶剂，提取方法力求溶剂，提取方法力求简便、易操作简便、易操作超声，加热回流提取，超声，加热回流提取，浸渍法浸渍法供杂质检查用供杂质检查用无机杂质检查用消化无机杂质检查用消化法；有机杂质的检查法；有机杂质的检查可按常规的鉴别或含可按常规的鉴别或含量测定的方法提取量测定的方法提取定量杂质：定量方法定量杂质：定量方法定性杂质：鉴别方法定性杂质：鉴别方法供含量测定用供含量测定用特别强调待测成分要特别强调待测成分要提取完全提取完全超声处理法、加热回超声处理法、加热回流法和连续回流法流法和连续回流法14不同分析目的不同分析目的样样品的提取品的提取实验实验目的方法要求常用方法供目的方法要求常用方法供鉴别鉴别用用针针第三节样品的分离净化第三节样品的分离净化u沉淀法沉淀法 u蒸馏法蒸馏法u液液-液萃取法液萃取法u色谱法色谱法u消化法消化法15第三第三节节样样品的分离品的分离净净化沉淀法化沉淀法 15161、沉淀法沉淀法 利用某些试剂与被测成分利用某些试剂与被测成分或杂质生成沉淀，分离沉淀或或杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液以得到精制的方法保留溶液以得到精制的方法例例水苏碱水苏碱+雷氏盐雷氏盐 生物碱雷氏盐沉淀生物碱雷氏盐沉淀H+161、沉淀法、沉淀法 利用某些利用某些试剂试剂与被与被测测成分或成分或杂质杂质生生172、萃取法萃取法 利用被测成分与干扰成分溶解性能的不利用被测成分与干扰成分溶解性能的不同进行分离，使物质从一种溶剂转移到另一同进行分离，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法种溶剂中，将测定组分提取出来的方法例例生物碱盐生物碱盐氨水氨水H2O172、萃取法、萃取法 利用被利用被测测成分与干成分与干扰扰成分溶解性能的成分溶解性能的18正丁醇正丁醇 用于皂苷类用于皂苷类醋酸乙酯醋酸乙酯 用于黄酮类用于黄酮类三氯甲烷三氯甲烷 用于生物碱类用于生物碱类乙醚、石油醚乙醚、石油醚 用于挥发油用于挥发油（1）萃取溶剂的选择）萃取溶剂的选择直接萃取：直接萃取：18正丁醇正丁醇 用于皂苷用于皂苷类类醋酸乙醋酸乙酯酯 用于黄用于黄酮类酮类三三氯氯甲甲19（2）水相）水相pH的选择的选择酸性成分酸性成分 比其比其pKa低低12个个pH单位单位碱性成分碱性成分 比其比其pKa高高12个个pH单位单位19（2）水相）水相pH的的选择选择酸性成分酸性成分碱性成分碱性成分20（3）仪器和提取次数）仪器和提取次数（4）乙醇提取液）乙醇提取液先挥去乙醇先挥去乙醇（5）防止和消除乳化）防止和消除乳化分液漏斗分液漏斗鉴别鉴别1次次含量测定含量测定 3 4次次20（3）仪仪器和提取次数（器和提取次数（4）乙醇提取液）乙醇提取液先先挥挥去乙醇（去乙醇（5）21离子对萃取：离子对萃取：萃取萃取（离子对）（离子对）有机相有机相有机酸有机酸生物碱生物碱+离子对试剂离子对试剂 （离子对）（离子对）水相水相 21离子离子对对萃取：萃取（离子萃取：萃取（离子对对）有机相有机酸生物碱）有机相有机酸生物碱+离子离子对对22例，华山参片中生物碱含量测定例，华山参片中生物碱含量测定取取本本品品40片片，除除去去糖糖衣衣，精精密密称称定定，研研细细，精精密密量量取取适适量量（约约相相当当于于12片片的的重重量量），置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶内内，精精密密加加入入枸枸橼橼酸酸-磷磷酸酸氢氢二二钠钠缓缓冲冲液液（pH4.0）25mL，振振摇摇5分分钟钟，放放置置过过夜夜，用用干干燥燥滤滤纸纸滤滤过过，取取续续滤滤液液，精精密密量量取取续续滤滤液液2mL，置置分分液液漏漏斗斗中中，精精密密加加枸枸橼橼酸酸-磷磷酸酸氢氢二二钠钠缓缓冲冲液液（pH4.0）10mL，再再精精密密加加入入0.04%溴溴甲甲酚酚绿绿溶溶液液2mL，摇摇匀匀，用用10mL三三氯氯甲甲烷烷振振摇摇提提取取5分分钟钟，待待溶溶液液完完全全分分层层后后，分分取取三三氯氯甲甲烷烷液液，用用三三氯氯甲甲烷烷湿湿润润的的滤滤纸纸滤滤入入25mL量量瓶瓶中中，再再用用三三氯氯甲甲烷烷提提取取3次次，每每次次5mL，依依次次滤滤入入量量瓶瓶中中，并用三氯甲烷洗涤滤纸，滤入量瓶中，加三氯甲烷至刻度。并用三氯甲烷洗涤滤纸，滤入量瓶中，加三氯甲烷至刻度。22例，例，华华山参片中生物碱含量山参片中生物碱含量测测定定233、色谱法色谱法（1）保留测定组分在柱上，洗去杂质，）保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分再用适当溶剂洗下组分（2）保留杂质于柱上）保留杂质于柱上-简便，精制效简便，精制效果好，被普遍使用果好，被普遍使用233、色、色谱谱法（法（1）保留）保留测测定定组组分在柱上，洗去分在柱上，洗去杂质杂质，再用适当溶，再用适当溶24常用固定相常用固定相硅胶硅胶氧化铝氧化铝键合相硅胶键合相硅胶大孔吸附树脂大孔吸附树脂-皂苷类皂苷类聚酰胺聚酰胺-黄酮类黄酮类硅藻土、纤维素硅藻土、纤维素200-100目目,1-10g机理：吸附机理：吸附24常用固定相硅胶常用固定相硅胶键键合相硅胶大孔吸附合相硅胶大孔吸附树树脂脂-皂苷皂苷类类200-1025例例 烧伤灵酊中大黄素的含量测定烧伤灵酊中大黄素的含量测定【处方处方】虎杖虎杖 黄柏黄柏 冰片冰片 精精密密量量取取本本品品2mL，加加硅硅胶胶（色色谱谱用用，60160目目）1g，置置温温水水浴浴上上蒸蒸干干，加加在在硅硅胶胶柱柱（色色谱谱用用，60160目目，2g，内内径径为为1.7cm）上上，用用石石油油醚醚（6090）-甲甲酸酸乙乙酯酯-甲甲酸酸（100:100:2）混混合合液液90mL分分次次减减压压洗洗脱脱，收收集集洗洗脱脱液液，置置100mL量量瓶中，并用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。瓶中，并用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。25例例 烧伤烧伤灵酊中大黄素的含量灵酊中大黄素的含量测测定定 26例例 复脉定胶囊中黄芪含量测定复脉定胶囊中黄芪含量测定【处方处方】党参党参 黄芪黄芪 远志远志 桑椹桑椹 川芎川芎 取取本本品品20粒粒的的内内容容物物，精精密密称称定定，研研细细，混混匀匀，取取约约2g，精精密密称称定定，置置索索氏氏提提取取器器中中，加加甲甲醇醇40mL，冷冷浸浸过过夜夜，再再加加甲甲醇醇适适量量，加加热热回回流流4小小时时，提提取取液液回回收收溶溶剂剂并并浓浓缩缩至至干干，残残渣渣加加水水10mL，微微热热使使溶溶解解，用用水水饱饱和和的的正正丁丁醇醇振振摇摇提提取取4次次，每每次次40mL，合合并并正正丁丁醇醇液液，用用氨氨试试剂剂充充分分洗洗涤涤2次次，每每次次40mL，弃弃去去氨氨液液，正正丁丁醇醇液液蒸蒸干干，残残渣渣加加水水10mL使使溶溶解解，通通过过D101型型大大孔孔树树脂脂柱柱（内内径径为为1.5cm，柱柱高高为为12cm），用用水水50mL洗洗脱脱，再再用用40%乙乙醇醇30mL洗洗脱脱，弃弃去去洗洗脱脱液液，继继用用70%乙乙醇醇100mL洗洗脱脱，收收集集洗洗脱脱液液，蒸蒸干干，残残渣渣用用甲甲醇醇溶溶解解并并转转移至移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。26例例 复脉定胶囊中黄芪含量复脉定胶囊中黄芪含量测测定定274、固相萃取法固相萃取法通过吸附剂与目标化合物之间的相互作用来保留通过吸附剂与目标化合物之间的相互作用来保留/吸附吸附u疏水作用：疏水作用：C18、C8、silicau离子交换作用：离子交换作用：SAX,SCX,COOH，NH2等等u物理吸收：物理吸收：Florsil、Alumina等等274、固相萃取法通、固相萃取法通过过吸附吸附剂剂与目与目标标化合物之化合物之间间的相互作用来保留的相互作用来保留28Sep-Pak C18柱：柱：30-60um一般操作程序：一般操作程序：（1）柱的活化）柱的活化（2）上样）上样（3）清洗）清洗（4）洗脱）洗脱28Sep-Pak C18柱：柱：30-60um29例新雪颗粒中栀子的鉴别例新雪颗粒中栀子的鉴别【处方处方】磁石磁石 石膏石膏 滑石滑石 南寒水石南寒水石 硝石硝石 栀子等栀子等取取本本品品1.5g，研研细细，加加正正己己烷烷10mL，充充分分振振摇摇，放放置置30分分钟钟，滤滤过过，滤滤渣渣加加甲甲醇醇10mL，超超声声处处理理20分分钟钟，滤滤过过，滤滤液液蒸蒸干干，残残渣渣加加水水5mL使使溶溶解解，离离心心15分分钟钟（转转速速为为每每分分钟钟3000转转），上上清清液液通通过过十十八八烷烷基基硅硅烷烷键键合合硅硅胶胶固固相相萃萃取取小小柱柱（500mg），以以水水10mL洗洗脱脱，弃弃去去洗洗液液，再再用用甲甲醇醇15mL洗洗脱脱，收收集集洗洗脱脱液液，蒸蒸干干，残渣加甲醇残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。使溶解，作为供试品溶液。29例新雪例新雪颗颗粒中粒中栀栀子的子的鉴别鉴别305、固相微萃取法固相微萃取法SPME是是在在SPE基基础础上上发发展展起起来来的的，保保留留了了SPE的的优优点点，克克服服了了SPE样样品品预预处处理理技技术术的的缺缺陷陷，即即无无需需柱柱填填充充物物和和使使用用溶溶剂剂解解吸吸被被测测组组分分的的前前处处理理，它它能能直直接接从从样样品品中中采采集集挥挥发发和和非非挥挥发发性性的的化化合合物物，然然后后直直接接在在GC、GC/MS、HPLC和和HPCE上上分分析析，集集采采样样、提提取取、浓浓缩缩、进样于一体。进样于一体。u优点：费用低、操作简单、省时、环保优点：费用低、操作简单、省时、环保u缺点：离子交换作用：缺点：离子交换作用：SAX,SCX,COOH，NH2等等305、固相微萃取法、固相微萃取法SPME是在是在SPE基基础础上上发发展起来的，保展起来的，保第四节样品提取液的浓缩第四节样品提取液的浓缩方法方法适用成分适用成分适用检测适用检测备注备注水浴蒸发水浴蒸发热稳定性好的成分热稳定性好的成分薄层薄层自然挥散自然挥散小体积提取液或挥发性小体积提取液或挥发性强溶剂，乙醚强溶剂，乙醚薄层薄层减压蒸发减压蒸发对热不稳定的样品对热不稳定的样品残留分析残留分析温度低、速度快温度低、速度快气流吹蒸法气流吹蒸法少量液体，氮吹法特别少量液体，氮吹法特别适用于结构不稳定、易适用于结构不稳定、易氧化的化学成分氧化的化学成分定量定量氮气流可以防止氧化氮气流可以防止氧化冷冻干燥冷冻干燥热不稳定的生物样品热不稳定的生物样品定量定量干燥后的物料保持原干燥后的物料保持原来的化学组成和物理来的化学组成和物理性质；热量消耗比其性质；热量消耗比其他干燥方法少他干燥方法少31第四第四节节样样品提取液的品提取液的浓缩浓缩方法适用成分适用方法适用成分适用检测备检测备注水浴蒸注水浴蒸发热稳发热稳例当归流浸膏的鉴别例当归流浸膏的鉴别取本品取本品3mL，加，加1%碳酸氢钠溶液碳酸氢钠溶液50mL，充，充分振荡，用稀盐酸调节分振荡，用稀盐酸调节pH值至值至23，用乙醚振，用乙醚振摇提取摇提取2次，每次次，每次20mL，合并乙醚液，挥干，残，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。使溶解，作为供试品溶液。32例当例当归归流浸膏的流浸膏的鉴别鉴别32第四节样品的衍生化第四节样品的衍生化33种类种类衍生化目的衍生化目的衍生化方法衍生化方法提高成分的挥发性提高成分的挥发性增加成分的稳定性增加成分的稳定性生成非对映异构体生成非对映异构体硅烷化硅烷化酰化酰化烷基化烷基化不对称衍生不对称衍生气气相相例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量 甲酯化甲酯化 校正因子测定：校正因子测定：取油酸对照品适量，精密称定，加正己烷取油酸对照品适量，精密称定，加正己烷制成每制成每1mL含含3mg的溶液。精密量取的溶液。精密量取5mL，置，置10mL具塞试具塞试管中，用氮气吹干，加入管中，用氮气吹干，加入0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液氢氧化钾甲醇溶液2mL，置，置60水浴中皂化水浴中皂化25分钟，至油珠全部消失，放冷，加分钟，至油珠全部消失，放冷，加15%三氯化硼乙醚溶液三氯化硼乙醚溶液2mL，置，置60水浴中甲酯化水浴中甲酯化2分钟，分钟，第四第四节节样样品的衍生化品的衍生化33种种类类衍生化目的衍生化方法提高成分的衍生化目的衍生化方法提高成分的挥挥34续例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量续例气相色谱法测定鸦胆子中油酸的含量 放冷，精密加入正己烷放冷，精密加入正己烷2mL，振摇，加饱和氯化钠溶液，振摇，加饱和氯化钠溶液1mL，振摇，静置，取上层溶液作为对照品溶液。精密称，振摇，静置，取上层溶液作为对照品溶液。精密称取苯甲酸苯酯适量，加正己烷制成每取苯甲酸苯酯适量，加正己烷制成每1mL含含8mg的溶液，的溶液，作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各作为内标溶液。精密量取对照品溶液和内标溶液各1mL，摇匀，吸取摇匀，吸取1L，注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。，注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。34续续例气相色例气相色谱谱法法测测定定鸦鸦胆子中油酸的含量胆子中油酸的含量 35种类种类 衍生化目的衍生化目的 反应要求反应要求提高检测提高检测的灵敏度的灵敏度改善色谱改善色谱分离效果分离效果u反应要求反应要求不苛刻，且不苛刻，且迅速定量迅速定量u单一衍生单一衍生化产物，副化产物，副产物不干扰产物不干扰u衍生化试衍生化试剂易得、通剂易得、通用性好用性好高高效效液液相相衍生化方法衍生化方法u在线在线u离线离线柱前柱前柱后柱后紫外衍紫外衍生化生化荧光衍荧光衍生化生化非对映非对映衍生化衍生化35种种类类衍生化目的反衍生化目的反应应要求提高要求提高检测检测的灵敏度反的灵敏度反应应要求不苛刻，且要求不苛刻，且36例例16，HPLC法测定阿胶中氨基酸的含量法测定阿胶中氨基酸的含量对照品溶液的制备对照品溶液的制备：取：取L-羟脯氨酸对照品、甘氨酸对照羟脯氨酸对照品、甘氨酸对照品、丙氨酸对照品、品、丙氨酸对照品、L-羟脯氨酸对照品适量，精密称定，羟脯氨酸对照品适量，精密称定，加加0.1mol/L盐酸溶液制成每盐酸溶液制成每1mL分别含分别含L-羟脯氨酸羟脯氨酸80g、甘氨酸甘氨酸0.16mg、丙氨酸、丙氨酸70g、L-脯氨酸脯氨酸0.12mg的混合溶的混合溶液，即得。液，即得。供试品溶液的制备供试品溶液的制备：取本品粗粉约：取本品粗粉约0.25g，精密称定，置，精密称定，置25mL量瓶中，加量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液盐酸溶液20mL，超声处理，超声处理（功率（功率500W，频率，频率40Hz）30分钟，放冷，加分钟，放冷，加0.1mol/L盐盐酸溶液至刻度，摇匀。精密量取酸溶液至刻度，摇匀。精密量取2mL，置，置5mL安瓿中，安瓿中，加盐酸加盐酸2mL，150水解水解1小时，放冷，移至蒸发皿中，小时，放冷，移至蒸发皿中，用水用水10mL分次洗涤，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣加分次洗涤，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣加0.1mol/L盐酸溶液溶解，转移至盐酸溶液溶解，转移至25mL量瓶中，加量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，即得。盐酸溶液至刻度，摇匀，即得。36例例16，HPLC法法测测定阿胶中氨基酸的含量定阿胶中氨基酸的含量37精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5mL，分别，分别置置25mL量瓶中，各加量瓶中，各加0.1mol/L异硫氰酸苯酯异硫氰酸苯酯（PITC）的乙腈溶液）的乙腈溶液2.5mL，1mol/L三乙胺的乙腈溶三乙胺的乙腈溶液液2.5mL，摇匀，室温放置，摇匀，室温放置1小时后，加小时后，加50%乙腈至刻乙腈至刻度，摇匀。取度，摇匀。取10mL，加正己烷，加正己烷10mL，振摇，放置，振摇，放置10分钟，取下层溶液，过滤，取续滤液，即得。分钟，取下层溶液，过滤，取续滤液，即得。测定法：测定法：分别精密吸取衍生化后的对照品溶液与供试分别精密吸取衍生化后的对照品溶液与供试品溶液各品溶液各5L，注入液相色谱仪，测定，即得。，注入液相色谱仪，测定，即得。37精密量取上述精密量取上述对对照品溶液和供照品溶液和供试试品溶液各品溶液各5mL，分，分别别置置25m38第六节不同类型中药样品的第六节不同类型中药样品的预处理特点预处理特点u固体中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点u半流体中药样品的预处理特点半流体中药样品的预处理特点u液体中药样品的预处理特点液体中药样品的预处理特点38第六第六节节不同不同类类型中型中药样药样品的固体中品的固体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点396.1 6.1 固体中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点中药材中药材/饮饮片片丸丸剂样品品待待检成分存在成分存在于于细胞中，胞中，细胞壁胞壁坚硬，成硬，成分不易溶出分不易溶出蜜丸中有蜂蜜蜜丸中有蜂蜜干干扰特点特点粉碎粉碎(2-4#筛)超声超声处理或理或加加热回流回流加加定量硅藻土定量硅藻土1:0.52（g/g）稀）稀盐酸浸酸浸泡除泡除铁离离子子方法方法396.1 固体中固体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品中品中药药材材/饮饮片丸片丸剂剂特点特点40例天王补心丸中五味子的含量测定例天王补心丸中五味子的含量测定【处方处方】丹参丹参 当归当归 石菖蒲石菖蒲 党参党参 茯苓茯苓 五味子等五味子等 取取重重量量差差异异项项下下的的大大蜜蜜丸丸，剪剪碎碎，混混匀匀，取取适适量量，精精密密称称定定，精精密密加加入入两两倍倍量量的的硅硅藻藻土土，研研匀匀，取取约约4.5g，精精密密称称定定，置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中，精精密密加加入入甲甲醇醇20mL，密密塞塞，称称定定重重量量，超超声声处处理理（功功率率180W，频频率率50kHz）30分分钟钟，放放冷冷，再再称称定定重重量量，用用甲甲醇醇补补足足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。40例天王例天王补补心丸中五味子的含量心丸中五味子的含量测测定定416.1 6.1 固体中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点片剂片剂颗粒粒剂样品品赋形形剂（水水溶性溶性），），饮片片细粉粉多数多数经提取、提取、纯化，但有化，但有糖糖/糊精等糊精等辅料干料干扰特点特点粉碎粉碎过筛(去去糖衣糖衣)选择适宜的适宜的溶溶剂注意注意提取提取溶溶剂的渗透性的渗透性提取液提取液杂质多多时需精制需精制方法方法416.1 固体中固体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品片品片剂颗剂颗粒粒剂剂特点特点赋赋形形剂剂42例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别【处方处方】丹参丹参 三七三七 冰片冰片取本品取本品5片，糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚片，糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚10mL，超声处理，超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯酸乙酯2mL使溶解，作为供试品溶液。使溶解，作为供试品溶液。例双黄连颗粒中金银花、黄芩的鉴别例双黄连颗粒中金银花、黄芩的鉴别【处方处方】金银花金银花 黄芩黄芩 连翘连翘取本品取本品1g，加，加75%乙醇溶液乙醇溶液10mL，摇匀，置水，摇匀，置水浴中加热振摇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。浴中加热振摇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。42例复方丹参片中丹参、冰片的例复方丹参片中丹参、冰片的鉴别鉴别例双黄例双黄连颗连颗粒中金粒中金银银花、花、436.1 6.1 固体中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点散散剂剂栓栓剂样品品剧毒成分和毒成分和贵重重药味成分味成分成分在成分在饮片片组织中，分布不均匀中，分布不均匀注意注意取取样代表性代表性基基质干干扰的的去除去除特点特点可用可用显微微鉴别冷浸冷浸/热回流回流/连续回流回流/超声超声必要必要时需精制需精制高低温度法高低温度法硅藻土拌硅藻土拌样提提取法取法酸碱性酸碱性变化法化法方法方法436.1 固体中固体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品散品散剂剂栓栓剂剂特点特点剧剧毒成分毒成分44例例 双黄连栓中金银花、黄芩的鉴别双黄连栓中金银花、黄芩的鉴别【处方处方】金银花金银花 黄芩黄芩 连翘连翘 取取本本品品1粒粒，加加水水20mL，置置温温水水浴浴中中，用用10%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液调调节节pH值值至至7.07.5，使使熔熔化化，置置冷冷处处使使基基质质凝凝固固，滤滤过过，取取滤滤液液10mL，加加无无水水乙乙醇醇4mL，至至水水浴浴中中振振摇摇数数分分钟，放置，取上清液作为供试品溶液。钟，放置，取上清液作为供试品溶液。例例 九分散中士的宁的含量测定九分散中士的宁的含量测定【处方处方】马钱子粉马钱子粉 麻黄麻黄 乳香（制）乳香（制）没药（制）没药（制）取取本本品品约约2g，精精密密称称定定，置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中，精精密密加加三三氯氯甲甲烷烷20mL与与浓浓氨氨试试液液1mL，轻轻轻轻摇摇匀匀，称称重重，于于室室温温放放置置24小小时时，再再称称重重，补补足足三三氯氯甲甲烷烷减减失失的的重重量量，充充分分振振摇摇，滤滤过过。精精密密量量取取续续滤滤液液10mL，用用硫硫酸酸溶溶液液（3100）分分次次提提取取至至生生物物碱碱提提尽尽，合合并并硫硫酸酸液液，加加浓浓氨氨试试液液使使呈呈碱碱性性，用用三三氯氯甲甲烷烷分分次次提提取取，合合并并三三氯氯甲甲烷烷液液，蒸蒸干干，精精密密加加三三氯甲烷氯甲烷5mL使残渣溶解，作为供试品溶液。使残渣溶解，作为供试品溶液。44例例 双黄双黄连连栓中金栓中金银银花、黄芩的花、黄芩的鉴别鉴别例例 九分散中士的九分散中士的456.1 6.1 固体中药样品的预处理特点固体中药样品的预处理特点胶囊剂胶囊剂滴丸滴丸样品品硬胶囊硬胶囊剂应倾出出全部内容物全部内容物软胶囊胶囊剂应用提用提取溶取溶剂洗洗涤囊壳囊壳基基质干干扰的的去除去除特点特点可用可用显微微鉴别冷浸冷浸/热回流回流/连续回流回流/超声超声必要必要时需精制需精制高低温度法高低温度法硅藻土拌硅藻土拌样提提取法取法酸碱性酸碱性变化法化法方法方法456.1 固体中固体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品胶囊品胶囊剂剂滴丸特点硬胶囊滴丸特点硬胶囊46例复方丹参滴丸中丹参的鉴别例复方丹参滴丸中丹参的鉴别【处方处方】丹参丹参 三七三七 冰片冰片 取取本本品品15丸丸，置置离离心心管管中中，加加水水1mL和和稀稀盐盐酸酸2滴滴，振振摇摇使使溶溶解解，加加入入乙乙酸酸乙乙酯酯3mL，振振摇摇1分分钟钟后后离离心心2分分钟钟，取取上清液作为供试品溶液。上清液作为供试品溶液。例藿香正气软胶囊中苍术的鉴别例藿香正气软胶囊中苍术的鉴别【处处方方】苍苍术术 陈陈皮皮 厚厚朴朴 白白芷芷 茯茯苓苓 大大腹腹皮皮 生生半半夏夏 甘甘草草浸膏等浸膏等取取本本品品4粒粒的的内内容容物物，加加硅硅藻藻土土1g，研研匀匀，加加环环己己烷烷20mL，超超声声处处理理15分分钟钟，过过滤滤，滤滤液液低低温温蒸蒸干干，残残渣渣加加正正己烷己烷2mL使溶解，作为供试品溶液。使溶解，作为供试品溶液。46例复方丹参滴丸中丹参的例复方丹参滴丸中丹参的鉴别鉴别例藿香正气例藿香正气软软胶囊中胶囊中苍术苍术的的鉴鉴476.2 6.2 半流体中药样品的预处理特点半流体中药样品的预处理特点煎膏剂煎膏剂浸膏剂浸膏剂样品品炼蜜或糖干蜜或糖干扰的去除的去除杂质相相对较少少特点特点加适量惰性材料，加适量惰性材料，低温烘干后，按低温烘干后，按固体固体样品品处理理稀稀释后，按液体后，按液体样品品处理理法法个个别可稀可稀释后后直接直接测定定稀稀释后提取法、后提取法、回流提取法及回流提取法及柱色柱色谱分离法分离法方法方法476.2 半流体中半流体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品煎膏品煎膏剂剂浸膏浸膏剂剂特点特点炼炼48例阿胶三宝膏中黄芪的含量测定例阿胶三宝膏中黄芪的含量测定【处方处方】阿胶阿胶 大枣大枣 黄芪黄芪 取取本本品品10g，精精密密称称定定，置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中，加加入入等等量量的的硅硅藻藻土土，拌拌匀匀，在在60烘烘干干（适适时时搅搅拌拌），放放冷冷，精精密密加加入入甲甲醇醇100mL，称称定定重重量量，超超声声处处理理（功功率率250W，频频率率40kHz）1小小时时，放放冷冷，再再称称定定重重量量，用用甲甲醇醇补补足足减减失失的的重重量量，摇摇匀匀，滤滤过过，精精密密量量取取续续滤滤液液50mL，蒸蒸干干，残残渣渣加加水水25mL使使溶溶解解，用用水水饱饱和和的的正正丁丁醇醇提提取取4次次，每每次次25mL，合合并并正正丁丁醇醇液液，正正丁丁醇醇液液用用氨氨试试液液洗洗涤涤2次次，每每次次25mL，合合并并氨氨试试液液，氨氨试试液液再再用用水水饱饱和和的的正正丁丁醇醇25mL提提取取，合合并并正正丁丁醇醇提提取取液液，回回收收正正丁丁醇醇至至干干，残残渣渣加加甲甲醇醇适适量量使使溶溶解解并并转转移移至至5mL量量瓶瓶中中，加加甲甲醇醇稀稀释释至至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。48例阿胶三宝膏中黄芪的含量例阿胶三宝膏中黄芪的含量测测定定49例刺五加水浸膏浸出物测定例刺五加水浸膏浸出物测定【处方处方】刺五加刺五加取取本本品品2.5g，精精密密称称定定，置置100mL具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中，精精密密加加水水25mL使使溶溶散散（必必要要时时以以玻玻璃璃棒棒搅搅拌拌使使溶溶散散），再再精精密密加加水水25mL冲冲洗洗瓶瓶壁壁及及玻玻璃璃棒棒，密密塞塞，称称定定重重量量，超超声声处处理理30分分钟钟，放放冷冷，再再称称定定重重量量，用用水水补补足足减减失失的的重重量量，摇摇匀匀，滤滤过过，精精密密量量取取续续滤滤液液25mL，置置己己干干燥燥至至恒恒重重的的蒸蒸发发皿皿中中，在在水水浴浴上上蒸蒸干干后后，于于105干干燥燥3小小时时，置置干燥器中冷却干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。分钟，迅速精密称定重量。49例刺五加水浸膏浸出物例刺五加水浸膏浸出物测测定定506.2 6.2 半流体中药样品的预处理特点半流体中药样品的预处理特点凝胶剂凝胶剂样品品基基质干干扰的的去除去除特点特点根据根据水溶性水溶性/油溶性油溶性基基质性性质差异差异，参照栓参照栓剂预处理方法理方法方法方法506.2 半流体中半流体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品凝胶品凝胶剂剂特点基特点基质质干干扰扰516.3 6.3 液体中药样品的预处理特点液体中药样品的预处理特点合剂合剂/口服口服液液酒酒剂/酊酊剂/流浸膏流浸膏剂样品品粘度粘度大，需大，需净化化杂质相相对较少少特点特点液液-液萃取法液萃取法/柱色柱色谱法法调酸碱性酸碱性后再后再萃取萃取个个别可直接可直接测或或加加热蒸去乙蒸去乙醇，然后再用醇，然后再用适当的有机溶适当的有机溶剂抽提抽提/柱柱层析析方法方法516.3 液体中液体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品合品合剂剂/口服液酒口服液酒剂剂/酊酊52例藿香正气水中甘草的鉴别例藿香正气水中甘草的鉴别【处处方方】苍苍术术 陈陈皮皮 厚厚朴朴（姜姜制制）白白芷芷 茯茯苓苓 甘草浸膏等甘草浸膏等取取本本品品30mL，蒸蒸至至无无醇醇味味，用用乙乙醚醚振振摇摇提提取取2次次，每每次次10 mL，弃弃去去乙乙醚醚液液，用用正正丁丁醇醇振振摇摇提提取取3次次，每每次次10mL，合合并并正正丁丁醇醇提提取取液液，用用水水洗洗涤涤2次次，每每次次10mL，弃弃去去水水液液，正正丁丁醇醇液液蒸蒸干干，残残渣渣加加甲甲醇醇溶溶液液2mL使使溶溶解解，作作为供试品溶液。为供试品溶液。52例藿香正气水中甘草的例藿香正气水中甘草的鉴别鉴别536.3 6.3 液体中药样品的预处理特点液体中药样品的预处理特点注射注射剂糖糖浆剂样品品杂质相相对较少少糖糖干干扰的去的去除除特点特点HPLC可直接可直接测TLC需需液液-液萃液萃取法取法/柱色柱色谱法法净化化液液-液萃取液萃取（调pH值）蒸蒸馏柱柱层析析方法方法536.3 液体中液体中药样药样品的品的预处预处理特点理特点样样品注射品注射剂剂糖糖浆剂浆剂特点特点杂质杂质54例例 注射用双黄连（冻干）中金银花的含量测定注射用双黄连（冻干）中金银花的含量测定【处方处方】连翘连翘 金银花金银花 黄芩黄芩 取取本本品品60mg，精精密密称称定定，置置50mL棕棕色色量量瓶瓶中中，用用水水溶溶解解并稀释至刻度，摇匀，即得。并稀释至刻度，摇匀，即得。例小儿止咳糖浆中氯化铵的含量测定例小儿止咳糖浆中氯化铵的含量测定【处方处方】甘草流浸膏甘草流浸膏 桔梗流浸膏桔梗流浸膏 氯化铵氯化铵 橙皮酊橙皮酊用用内内容容量量移移液液管管精精密密量量取取本本品品10mL，置置凯凯氏氏烧烧瓶瓶中中，用用水水冲冲洗洗移移液液管管内内壁壁，洗洗液液并并入入烧烧瓶瓶中中，加加水水250mL，摇摇匀匀，加加玻玻璃璃珠珠数数粒粒，再再加加20%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液10mL，立立即即用用氮氮气气球球将将烧烧瓶瓶与与冷冷凝凝管管连连接接，冷冷凝凝管管的的尖尖端端浸浸入入4%硼硼酸酸溶溶液液50mL的的液液面面下下，加加热热蒸蒸馏馏，至至2/3的的溶溶液液馏馏出出时时，将将冷冷凝凝管管提提出出接接近近液液面面，让让蒸蒸汽汽冲冲洗洗1分分钟钟，用用水水淋淋洗洗尖尖端端后后停停止止蒸蒸馏馏，馏馏出出液液加加甲甲基基红红-溴溴甲甲酚酚绿绿混混合合指指示示液液10滴滴，用用硫硫酸酸滴滴定定液（液（0.05mol/L）滴定。）滴定。54例例 注射用双黄注射用双黄连连（冻冻干）中金干）中金银银花的含量花的含量测测定例小儿止定例小儿止556.4 6.4 外用膏剂的预处理特点外用膏剂的预处理特点软膏膏剂膏膏药样品品基基质干干扰的的去除去除易溶于三易溶于三氯甲甲烷基基质干干扰的去除的去除特点特点滤除基除基质法法提取分离法提取分离法灼灼烧法法离心法离心法三三氯甲甲烷去基去基质溶溶剂提取法提取法方法方法556.4 外用膏外用膏剂剂的的预处预处理特点理特点样样品品软软膏膏剂剂膏膏药药特点基特点基质质干干扰扰的的56例马应龙八宝眼膏中冰片的鉴别例马应龙八宝眼膏中冰片的鉴别【处处方方】煅煅炉炉甘甘石石 琥琥珀珀 人人工工麝麝香香 人人工工牛牛黄黄 珍珍珠珠 冰片等冰片等取取本本品品2g，加加乙乙醇醇5mL，置置水水浴浴上上加加热热使使其其融融化化后后取取出出，搅搅拌拌5分分钟钟，在在冰冰浴浴中中冷冷却却，滤滤过过，滤滤液作为供试品溶液。液作为供试品溶液。例拔毒膏中樟脑的鉴别例拔毒膏中樟脑的鉴别【处方处方】金银花金银花 连翘连翘 大黄大黄 桔梗桔梗 地黄地黄 樟脑等樟脑等取取本本品品2.5g，剪剪碎碎，加加乙乙醇醇10mL，超超声声处处理理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。56例例马应龙马应龙八宝眼膏中冰片的八宝眼膏中冰片的鉴别鉴别例拔毒膏中樟例拔毒膏中樟脑脑的的鉴别鉴别576.4 6.4 外用膏剂的预处理特点外用膏剂的预处理特点贴膏膏剂剂样品品基基质干干扰的的去除去除特点特点溶溶剂提取提取方法方法576.4 外用膏外用膏剂剂的的预处预处理特点理特点样样品品贴贴膏膏剂剂特点基特点基质质干干扰扰的去除的去除58例舒康贴膏的鉴别例舒康贴膏的鉴别【处方处方】山楂核精山楂核精剪剪取取本本品品7cm20cm，除除去去盖盖衬衬，平平展展贴贴于于医医用用纱纱布布上上，剪剪切切成成小小片片，置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中中，加加入入5%氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液40mL，超超声声处处理理30分分钟钟，放放冷冷，倾倾出出液液体体，边边振振摇摇边边滴滴加加盐盐酸酸，调调节节pH值值至至56，转转移移置置500mL圆圆底底烧烧瓶瓶中中，连连接接挥挥发发油油测测定定器器，自自测测定定器器上上端端加加水水充充满满刻刻度度部部分分，并并溢溢流流入入烧烧瓶瓶为为止止，再再加加乙乙酸酸乙乙酯酯1mL，微微沸沸回回流流30分分钟钟，放放冷，分取乙酸乙酯层，作为供试品溶液。冷，分取乙酸乙酯层，作为供试品溶液。58例舒康例舒康贴贴膏的膏的鉴别鉴别59气气雾剂/喷雾剂剂样品品溶液型溶液型样品品较纯净混混悬型型样品，品，取取样前前应振振摇以保以保证取取样的均匀性的均匀性特点特点超声法超声法等等方法方法6.56.5气雾剂和喷雾剂的预处理特点气雾剂和喷雾剂的预处理特点59样样品气品气雾剂雾剂/喷雾剂喷雾剂特点溶液型特点溶液型样样品品较纯净较纯净方法超声法等方法超声法等6.560例例 麝香祛痛气雾剂中樟脑、薄荷脑、冰片的含量测定麝香祛痛气雾剂中樟脑、薄荷脑、冰片的含量测定【处处方方】人人工工麝麝香香 红红花花 樟樟脑脑 独独活活 冰冰片片 龙龙血血竭竭 薄薄荷荷脑脑 地黄等地黄等 取取本本品品，除除去去盖盖帽帽，冷冷却却至至5，在在铝铝盖盖上上钻钻一一小小孔孔，插插入入连连有有干干燥燥橡橡皮皮管管的的注注射射针针头头（勿勿与与药药液液面面接接触触），橡橡皮皮管管另另一一端端放放入入水水中中，待待抛抛射射剂剂缓缓缓缓排排除除后后，除除去去铝铝盖盖，精精密密量量取取药药液液1mL，置置50mL量量瓶瓶中中，精精密密加加入入内内标标溶溶液液5mL，加加无无水水乙乙醇醇至至刻刻度度，摇摇匀匀，作作为供试品溶液。为供试品溶液。60例例 麝香祛痛气麝香祛痛气雾剂雾剂中樟中樟脑脑、薄荷、薄荷脑脑、冰片的含量、冰片的含量测测定定 第二章第二章-中中药药分析中供分析中供试试品的制品的制备备00课课件件