第九章-生物碱课件1

第九章生物碱课件1 目的要求目的要求-掌握掌握 n1.1.生生物物碱碱的的含含义义、颜颜色色、溶溶解解性性、旋旋光光性性、酸酸碱碱性性、碱碱性性强强弱弱与与生生物物碱碱分分子子结结构构的的关关系系及及其其在在提提取分离中的应用。取分离中的应用。n2.2.生生物物碱碱的的显显色色反反应应、常常用用生生物物碱碱沉沉淀淀试试剂剂的的名名称、沉淀反应条件和阳性反应的判定。称、沉淀反应条件和阳性反应的判定。n3.3.吡吡啶啶类类、莨莨菪菪烷烷类类、异异喹喹啉啉类类、吲吲哚哚类类生生物物碱碱的结构特征。的结构特征。n4.4.总生物碱的提取和生物碱单体分离的一般方法总生物碱的提取和生物碱单体分离的一般方法和原则。和原则。n5.5.生物碱的主要提取分离方法。生物碱的主要提取分离方法。n6.6.所举例的生物碱的性质及提取分离方法。所举例的生物碱的性质及提取分离方法。生物碱的生物活性生物碱的生物活性n 生物碱多具有显著而特殊的生物活性。如生物碱多具有显著而特殊的生物活性。如吗啡、延胡索乙素吗啡、延胡索乙素具有镇痛作用；阿托品具有具有镇痛作用；阿托品具有解痉作用；解痉作用；小檗碱、苦参生物碱小檗碱、苦参生物碱、蝙蝠葛碱有、蝙蝠葛碱有抗菌消炎作用；抗菌消炎作用；利血平利血平有降血压作用；有降血压作用；麻黄碱麻黄碱有止咳平喘作用；奎宁有抗疟作用；有止咳平喘作用；奎宁有抗疟作用；苦参碱、苦参碱、氧化苦参碱氧化苦参碱等有抗心律失常作用；等有抗心律失常作用；喜树碱、秋喜树碱、秋水仙碱、长春新碱水仙碱、长春新碱、三尖杉碱、紫杉醇等有不、三尖杉碱、紫杉醇等有不同程度的抗癌作用等。同程度的抗癌作用等。生物碱的生物碱的定义之一定义之一：含：含负氧化态氮原子负氧化态氮原子的的存在于生物有机体中的存在于生物有机体中的环状化合物环状化合物。n负氧化态氮包括胺（负氧化态氮包括胺（-3-3），氮氧化物（），氮氧化物（-1-1）和酰胺（和酰胺（-3-3），季胺（），季胺（-3-3）。）。n硝基（硝基（+3+3），亚硝基（），亚硝基（+1+1）属于正氧化态，）属于正氧化态，不在此列。不在此列。n生物界除去生物体内必需的含氮化合物，如：生物界除去生物体内必需的含氮化合物，如：氨基酸，多肽，蛋白质和氨基酸，多肽，蛋白质和B B族维生素等外，族维生素等外，其它所有含氮有机物都可视为生物碱。其它所有含氮有机物都可视为生物碱。麻黄碱麻黄碱秋水仙碱秋水仙碱个别是非环状的生物碱个别是非环状的生物碱：如麻黄碱、秋水仙碱等：如麻黄碱、秋水仙碱等生物碱的生物碱的定义之二定义之二：含含负氧化态氮原子负氧化态氮原子的存的存在于生物有机体中的在于生物有机体中的非初级代谢产物的非初级代谢产物的一类一类化合物。化合物。生物碱的特点：生物碱的特点：|结构中至少含有一个氮原子；结构中至少含有一个氮原子；|一般不包含分子量大于一般不包含分子量大于15001500的肽类化合物；的肽类化合物；|具有碱性、中性；具有碱性、中性；|氮原子源于氨基酸或嘌呤母核或载体与萜类氮原子源于氨基酸或嘌呤母核或载体与萜类的氨基化；的氨基化；|排除上述单一定义中所有例外的化合物排除上述单一定义中所有例外的化合物生物碱的分布：生物碱的分布：多见于高等植物的多见于高等植物的双子叶植物双子叶植物中，已知存在于中，已知存在于5050多个科的多个科的120120多个属中。多个属中。毛茛科：毛茛科：黄连、乌头、附子，黄连、乌头、附子，罂粟科：罂粟科：罂粟、延胡索，罂粟、延胡索，茄茄 科：科：洋金花、颠茄、莨菪，洋金花、颠茄、莨菪，防己科：防己科：汉防己、北豆根，汉防己、北豆根，小檗科：小檗科：三棵针，三棵针，豆豆 科：科：苦参、苦豆子等。苦参、苦豆子等。生物碱的分布：生物碱的分布：有的见于有的见于单子叶植物单子叶植物石蒜科石蒜科：（川贝母、浙贝母），百合科、兰科等：（川贝母、浙贝母），百合科、兰科等，少数见于少数见于裸子植物裸子植物麻黄科、红豆杉科、三尖杉科麻黄科、红豆杉科、三尖杉科生物碱在植物体内的分布：生物碱在植物体内的分布：多数集中在某一器官，也可能分布于全株。多数集中在某一器官，也可能分布于全株。金鸡纳生物碱主要分布在金鸡纳树皮中，金鸡纳生物碱主要分布在金鸡纳树皮中，麻黄生物碱在麻黄髓部含量高。麻黄生物碱在麻黄髓部含量高。1 1在植物的各部位都有分布，但多集中在某一器在植物的各部位都有分布，但多集中在某一器官。官。2 2植物体内生物碱的含量差别很大，但一般都较植物体内生物碱的含量差别很大，但一般都较低（低（1%1%以下），通常把含量在以下），通常把含量在0.01%0.01%的植物称为的植物称为生物碱植物生物碱植物。黄连根茎中含生物碱。黄连根茎中含生物碱7%7%以上，卵叶以上，卵叶美登木中含美登素（抗癌成分）美登木中含美登素（抗癌成分）2/2/千万。千万。3 3同一植物体内往往是多种生物碱共存，而且母同一植物体内往往是多种生物碱共存，而且母核结构相似。核结构相似。同科同属的植物往往有同一母核或同科同属的植物往往有同一母核或结构相同的化合物。结构相同的化合物。生物碱的分布特点：生物碱的分布特点：三、存在形式；三、存在形式；1 1、游离游离：少数碱性极弱的生物碱，少数碱性极弱的生物碱，如酰胺类生物碱如酰胺类生物碱；2 2、成盐成盐：多数与草酸，柠檬酸，硫多数与草酸，柠檬酸，硫 酸，盐酸，硝酸等有机酸或无机酸成盐酸，盐酸，硝酸等有机酸或无机酸成盐 3 3、酰胺酰胺：秋水仙碱、喜树碱秋水仙碱、喜树碱 4 4、N-N-氧化物氧化物：苦参碱苦参碱 5 5、氮杂缩醛氮杂缩醛：阿替生阿替生 6 6、其他其他：亚胺，烯胺，苷，季胺碱，酯亚胺，烯胺，苷，季胺碱，酯第二节第二节 生物碱的分类及生源关系生物碱的分类及生源关系 分类：分类：1 1、按植物来源分：鸦片碱，白屈菜碱、按植物来源分：鸦片碱，白屈菜碱 2 2、按化学分类：喹啉类生物碱、按化学分类：喹啉类生物碱 3 3、按生源结合化学分类：、按生源结合化学分类：来源于鸟氨酸的吡咯生物碱来源于鸟氨酸的吡咯生物碱一、有机胺类生物碱一、有机胺类生物碱n氮原子不在环内：麻黄碱等氮原子不在环内：麻黄碱等二、吡咯类生物碱吡咯类生物碱 n鸟氨酸途径鸟氨酸途径吡咯吡咯 四氢吡咯四氢吡咯 吡咯里西啶吡咯里西啶 1、简单吡咯类生物碱、简单吡咯类生物碱 党参碱党参碱2、吡咯里西啶类生物碱、吡咯里西啶类生物碱：强毒性，肝毒性：强毒性，肝毒性抗癌和降血压作用抗癌和降血压作用三、哌啶类生物碱三、哌啶类生物碱n来源于赖氨酸来源于赖氨酸吡啶吡啶 哌啶哌啶 吲哚里西啶吲哚里西啶 喹诺里西啶喹诺里西啶 1、吡啶类生物碱、吡啶类生物碱烟碱烟碱 毒藜碱毒藜碱2、哌啶类生物碱、哌啶类生物碱毒芹碱毒芹碱3、吲哚里西啶类生物碱、吲哚里西啶类生物碱一叶萩碱一叶萩碱4、喹诺里西啶类生物碱、喹诺里西啶类生物碱苦参碱苦参碱 氧化苦参碱氧化苦参碱抗胆碱药抗胆碱药四、托品类生物碱四、托品类生物碱n来源于鸟氨酸来源于鸟氨酸托品烷基本骨架托品烷基本骨架五、喹啉类生物碱五、喹啉类生物碱n来源于邻氨基苯甲酸途径来源于邻氨基苯甲酸途径喹啉喹啉 喜树碱喜树碱R=H 10-羟基喜树碱羟基喜树碱R=OH六、吖啶酮类生物碱六、吖啶酮类生物碱n来源于邻氨基苯甲酸途径来源于邻氨基苯甲酸途径吖啶酮吖啶酮 吴茱萸宁吴茱萸宁n来源于苯丙氨酸和酪氨酸来源于苯丙氨酸和酪氨酸1、简单异喹啉类、简单异喹啉类七、异喹啉类生物碱七、异喹啉类生物碱异喹啉异喹啉 四氢异喹啉四氢异喹啉 萨苏林萨苏林2、苄基四氢异喹啉类、苄基四氢异喹啉类（1）苄基四氢异喹啉类）苄基四氢异喹啉类（2）双苄基四氢异喹啉类）双苄基四氢异喹啉类（3）阿朴菲类和异阿朴菲类）阿朴菲类和异阿朴菲类阿朴菲类阿朴菲类 异阿朴菲类异阿朴菲类（4）吗啡烷类）吗啡烷类吗啡烷吗啡烷 吗啡碱吗啡碱 帝巴因帝巴因 可待因可待因（5）原小檗碱和小檗碱类）原小檗碱和小檗碱类原小檗碱原小檗碱 小檗碱小檗碱 延胡索乙素延胡索乙素（6）普罗托品类）普罗托品类普罗托品普罗托品（7）苯菲啶类）苯菲啶类苯骈菲啶苯骈菲啶 白屈菜红碱白屈菜红碱3、苯乙基四氢异喹啉类、苯乙基四氢异喹啉类三尖杉碱三尖杉碱4、吐根碱类、吐根碱类八、吲哚类生物碱八、吲哚类生物碱n来源于色氨酸途径来源于色氨酸途径1、简单吲哚类、简单吲哚类2、-卡波林类卡波林类-carboline plakortaminees B3、半萜吲哚类、半萜吲哚类4、单萜吲哚类、单萜吲哚类5 5、双吲哚类、双吲哚类R=CH3 长春碱长春碱R=CHO 长春新碱长春新碱咪唑咪唑 毛果芸香碱毛果芸香碱九、咪唑类生物碱九、咪唑类生物碱喹唑酮喹唑酮 常山碱常山碱十、喹唑酮类生物碱十、喹唑酮类生物碱嘌呤嘌呤 香菇嘌呤香菇嘌呤十一、嘌呤及黄嘌呤类生物碱十一、嘌呤及黄嘌呤类生物碱十二、萜类生物碱十二、萜类生物碱n来源于异戊烯途径来源于异戊烯途径1、单萜类生物碱、单萜类生物碱2、倍半萜类生物碱、倍半萜类生物碱3、二萜类生物碱、二萜类生物碱4、三萜类生物碱、三萜类生物碱 交让木碱交让木碱十三、甾体的生物碱十三、甾体的生物碱1、孕甾烷（、孕甾烷（C21）类生物碱）类生物碱康斯生康斯生2、环孕甾烷（、环孕甾烷（C24）类生物碱）类生物碱 环氧黄杨木己碱环氧黄杨木己碱 3、胆甾烷（、胆甾烷（C27）生物碱）生物碱维藜芦胺维藜芦胺 藜芦胺藜芦胺 十四、胍盐类生物碱十四、胍盐类生物碱河豚毒素河豚毒素一、性状一、性状 1.1.组成：组成：一般由一般由C C、H H、O O、N N四种元素组成，四种元素组成，少数含有少数含有ClCl、S S等；等；2.2.状态：状态：一般为固体，少数为液体。一般为固体，少数为液体。（1 1）液体生物碱一般不含氧元素；）液体生物碱一般不含氧元素；（2 2）液体生物碱有挥发性，可随水蒸气蒸馏；）液体生物碱有挥发性，可随水蒸气蒸馏；个个别别小小分分子子固固体体生生物物碱碱有有挥挥发发性性麻麻黄黄碱碱 。个别有升华性个别有升华性咖啡因咖啡因 、川嗪、川嗪 （3 3）固体一般为结晶形，有些为无定形粉未；）固体一般为结晶形，有些为无定形粉未；3.3.味道：味道：多具苦味，有些极苦；个别有甜味多具苦味，有些极苦；个别有甜味 （甜菜碱）。（甜菜碱）。第三节第三节 生物碱的理化性质生物碱的理化性质4.颜色：颜色：多数呈无色，少数有颜色；小檗碱呈黄多数呈无色，少数有颜色；小檗碱呈黄色、色、具黄绿色荧光具黄绿色荧光；血根碱呈红色（共轭体系）。；血根碱呈红色（共轭体系）。二.旋光性旋光性多为左旋光性。条件改变有的产生变旋现象。如：烟碱 中性溶液左旋光性 酸性溶液右旋光性n通常左旋体比右旋体的生物活性强。如左旋茛通常左旋体比右旋体的生物活性强。如左旋茛菪碱比右旋茛菪碱的扩瞳作用强菪碱比右旋茛菪碱的扩瞳作用强100100倍。倍。三、溶解度：三、溶解度：（一）亲脂性生物碱：（一）亲脂性生物碱：仲胺、叔胺等游离生物碱仲胺、叔胺等游离生物碱（二）亲水性生物碱（二）亲水性生物碱：季胺碱，：季胺碱，N-N-氧化物，生物氧化物，生物碱盐等碱盐等(1)生物碱盐：溶于水、亲水性溶剂，难溶于亲脂性溶剂。溶解度与酸有关：无机酸盐有机酸盐 无机酸：含氧酸卤代酸 有机酸：小分子或多羟基大分子不符合上述规律的生物碱盐如下：如奎宁、罂粟碱等盐酸盐溶于氯仿；麻黄碱草酸盐、小檗碱盐酸盐不溶于水等。(2)游离生物碱 亲脂性生物碱：溶于有机溶剂和酸水，特别易溶于氯仿；难溶于水和碱水。如叔胺碱、仲胺碱。亲水性生物碱：溶于水、亲水性溶剂，难溶于亲脂性溶剂。如季铵碱、生物碱的氮氧化物。例外：吗啡难溶于氯仿、乙醚，可溶于碱水；吗啡难溶于氯仿、乙醚，可溶于碱水；喜树碱不溶于一般有机溶剂，而溶于酸性氯仿。喜树碱不溶于一般有机溶剂，而溶于酸性氯仿。(2)游离生物碱 不符合上述规律的特殊生物碱如下：1）小分子的叔胺碱和液体生物碱：都溶。2）两性生物碱：含酚-OH的（如青藤碱）青藤碱）同亲脂性生物碱，且可溶碱液（隐性酚-OH除外，如汉防己乙素汉防己乙素）。含-COOH的形成分子内盐，同亲水性生物碱。3）含内酯结构的生物碱，溶于碱水。四、生物碱的碱性四、生物碱的碱性1.碱性的来源及强度表示碱性的来源及强度表示 原理：原理：N N原子上孤对电子可以接受质子原子上孤对电子可以接受质子 pKa=14-pKbpKa12 强碱即即pKapKa越大，碱性越强越大，碱性越强碱性基团碱性基团pKa值大小顺序：值大小顺序：胍胍季胺碱季胺碱脂肪胺基脂肪胺基芳杂环（吡啶）芳杂环（吡啶）酰胺基酰胺基n碱性越强，其Kb越大，pKb越小，其共轭酸pka越大；即pka越大，碱性越强；（1）氮原子的杂化方式和碱性的关系）氮原子的杂化方式和碱性的关系 氮原子的价电子在形成有机胺分子氮原子的价电子在形成有机胺分子时的杂化轨道和碳原子一样，有三种形时的杂化轨道和碳原子一样，有三种形式，即式，即sp、sp2、sp3，但它是不等性杂，但它是不等性杂化。在这三种杂化方式中，随化。在这三种杂化方式中，随P电子成分电子成分的增加。其活动性增大，易提供电子的增加。其活动性增大，易提供电子（易吸引质子），则碱性强。（易吸引质子），则碱性强。2、影响碱性强弱的因素、影响碱性强弱的因素不同杂化轨道碱性强弱顺序是：不同杂化轨道碱性强弱顺序是：sp3sp2sp 季铵碱季铵碱中的氮原子以离子状态存在，中的氮原子以离子状态存在，同时含有以负离子形式存在的羟基，故同时含有以负离子形式存在的羟基，故显强碱性。显强碱性。杂化方式杂化方式pKa 5.2 11.2 吡啶吡啶异喹啉异喹啉2-甲基甲基-甲基吡咯甲基吡咯四氢异喹啉四氢异喹啉（2）诱导效应：氮原子上的电子云密度受其附近）诱导效应：氮原子上的电子云密度受其附近取代基性质的影响。取代基性质的影响。供电子基供电子基 使电子云密度增加，使电子云密度增加，取代基的影响取代基的影响 （如烷基）（如烷基）碱性增强碱性增强 吸电子基吸电子基 使电子云密度减少使电子云密度减少 碱性降低碱性降低 芳环、芳环、含氧基（酰基、酯基、含氧基（酰基、酯基、醚基、羟基）醚基、羟基）、双键、双键 诱导效应连接供电基团则使碱性增强连接供电基团则使碱性增强。麻黄碱（麻黄碱（pKa9.58pKa9.58）（甲基供电诱导效应甲基供电诱导效应）去甲基麻黄碱（去甲基麻黄碱（pKa9.00pKa9.00）（羟基的吸电诱导效应羟基的吸电诱导效应）苯异丙胺（苯异丙胺（pKa9.80pKa9.80）（无羟基的吸电作用无羟基的吸电作用）氮原子附近有吸电性基团（如-OH、苯基、羰基、酯基、双键等），碱性减弱n特例：特例：n具有具有氮杂缩醛氮杂缩醛结构的生物碱，常易于质子化结构的生物碱，常易于质子化形成季胺碱而显强碱性。形成季胺碱而显强碱性。n小檗碱小檗碱是由醇胺型小檗碱异构化而来，醇胺型是由醇胺型小檗碱异构化而来，醇胺型也属于氮杂缩醛范畴，氮原子上的孤电子对与也属于氮杂缩醛范畴，氮原子上的孤电子对与羟基的羟基的C-O单键的电子发生转位，形成稳定的单键的电子发生转位，形成稳定的季铵型，而呈强碱性。季铵型，而呈强碱性。三、理化性质（二）碱性三、理化性质（二）碱性 若氮杂缩醛体系中的氮原子处在若氮杂缩醛体系中的氮原子处在“桥头桥头”时时不能发生上述质子化，相反，却因羟基吸电子不能发生上述质子化，相反，却因羟基吸电子诱导效应使碱性降低。如诱导效应使碱性降低。如伪士的宁伪士的宁的碱性小于的碱性小于士的宁士的宁既是由于此。既是由于此。H（3）诱导场效应：）诱导场效应：当生物碱分子中不止一个氮原子时，各个氮当生物碱分子中不止一个氮原子时，各个氮原子的碱度是不相同的。原子的碱度是不相同的。当分子中一个氮原子质子化，就形成了一当分子中一个氮原子质子化，就形成了一个个强吸电基团强吸电基团，它对另一个氮原子产生二种降，它对另一个氮原子产生二种降低碱度的效应，即诱导效应和静电场效应。低碱度的效应，即诱导效应和静电场效应。诱导诱导场效应：碱性降低。场效应：碱性降低。n诱导效应：通过碳链传递，随碳链增长而影响诱导效应：通过碳链传递，随碳链增长而影响降低。降低。n静电场效应：通过空间直接传递，故又称直接静电场效应：通过空间直接传递，故又称直接效应。效应。n当吸电子基团在空间位置上与第二个氮原子相当吸电子基团在空间位置上与第二个氮原子相近时，直接效应表现的更为显著。以上即为诱近时，直接效应表现的更为显著。以上即为诱导导-场效应。场效应。（4）共轭效应共轭效应 氮原子的孤电子对与具有氮原子的孤电子对与具有电子的基团相连电子的基团相连接时，由于形成接时，由于形成p-共轭，使该氮原子的碱性共轭，使该氮原子的碱性降低降低。在生物碱分子结构中常见的。在生物碱分子结构中常见的p-共轭体共轭体系有系有苯胺型苯胺型、酰胺型酰胺型和和烯胺型烯胺型。（三种情况中，三种情况中，酰基吸电子最强，所以，酰胺型碱性最弱，有酰基吸电子最强，所以，酰胺型碱性最弱，有时甚至显一定酸性。时甚至显一定酸性。）（1）、苯胺型：苯胺氮原子上孤电子对与苯）、苯胺型：苯胺氮原子上孤电子对与苯环环电子成电子成 p-共轭共轭（2）酰胺型）酰胺型氮原子孤电子对处于氮原子孤电子对处于p 共轭体系时，共轭体系时，碱性减碱性减弱。弱。（3）烯胺型）烯胺型 在一些生物碱分子中存在的烯胺结构，有在一些生物碱分子中存在的烯胺结构，有时是使生物碱碱性增加，这是因为这类烯胺时是使生物碱碱性增加，这是因为这类烯胺结构通常含有下列平衡：结构通常含有下列平衡：A B Cn当当A中中R1和和R2为烷基时是叔烯胺，为烷基时是叔烯胺，R1或或R2中中有一个为有一个为H时，为仲烯胺，时，为仲烯胺，B为为A的共轭酸。仲的共轭酸。仲烯胺的共轭酸不稳定，而叔烯胺的共轭酸稳定，烯胺的共轭酸不稳定，而叔烯胺的共轭酸稳定，平衡向共轭酸方向进行，形成季铵，碱性强。平衡向共轭酸方向进行，形成季铵，碱性强。n有些具有稠环的叔胺生物碱结构中也有叔烯胺结构，有些具有稠环的叔胺生物碱结构中也有叔烯胺结构，在立体条件许可下，氮原子的孤电子对与双键的在立体条件许可下，氮原子的孤电子对与双键的电电子能发生转位时，则生成季铵型的共轭酸，而显强碱子能发生转位时，则生成季铵型的共轭酸，而显强碱性，如性，如蛇根碱蛇根碱分子中分子中N4的的、位有双键，位有双键，N4形成形成季铵型，季铵型，N1为为N4的电子接受体，因而碱性强。的电子接受体，因而碱性强。pKa10.8但具有此种结构的生物碱如氮原子处于桥头，但具有此种结构的生物碱如氮原子处于桥头，双键不能发生转位，则氮原子受双键吸电子诱双键不能发生转位，则氮原子受双键吸电子诱导效应而碱性降低，如导效应而碱性降低，如新士的宁碱新士的宁碱新士的宁新士的宁pKa3.8士的宁士的宁pKa8.2n如氮上孤电子对与供电子基共轭时，则使碱性如氮上孤电子对与供电子基共轭时，则使碱性增强。含胍基的生物碱，由于胍基接受质子形增强。含胍基的生物碱，由于胍基接受质子形成季铵离子，并具有高度成季铵离子，并具有高度共振稳定性共振稳定性，故显强，故显强碱性。碱性。胍胍 n并非所有并非所有p-共轭均使碱性减低。胍基共轭均使碱性减低。胍基n在共轭效应中，氮原子的孤电子对的轴必须与在共轭效应中，氮原子的孤电子对的轴必须与共轭双键系统的共轭双键系统的电子轴处在同一平面，否则电子轴处在同一平面，否则共轭效应减弱。如共轭效应减弱。如邻甲基邻甲基N，N-二甲基苯胺二甲基苯胺由由于邻位甲基与氨基的相互排斥，使氮原子的孤于邻位甲基与氨基的相互排斥，使氮原子的孤电子对与共轭系统的平面扭曲，使共轭效应减电子对与共轭系统的平面扭曲，使共轭效应减弱。弱。吡啶吡啶（5）空间效应：）空间效应：（1 1）破坏共轭，碱性增强，）破坏共轭，碱性增强，（2 2）掩盖作用，影响质子化，碱性降低。）掩盖作用，影响质子化，碱性降低。麻麻黄黄碱碱 大大于于 甲甲基基麻黄碱麻黄碱去甲麻黄碱去甲麻黄碱 pKa9.0麻黄碱麻黄碱pKa9.58甲基麻黄碱甲基麻黄碱pKa9.30NNMeNC4H9NMeMeMeMeMe MeMeMeMeMe1234pKa=4.30pKa=5.15 pKa=2.93 pKa=4.81茛菪碱茛菪碱9.65 东茛菪碱东茛菪碱7.50（6）分子内氢键）分子内氢键 若能形成稳定的分子内氢键，可使碱性增强。若能形成稳定的分子内氢键，可使碱性增强。（指成盐时接受的质子能形成稳定的分子内氢（指成盐时接受的质子能形成稳定的分子内氢键）键）碱性强弱：几种效应共存：几种效应共存：空间效应空间效应诱导效应诱导效应 共轭效应共轭效应诱导效应诱导效应通常情况下：通常情况下：杂化效应杂化效应共轭效应共轭效应空间效应空间效应诱导效应诱导效应 比较碱性强弱：五、生物碱的检识五、生物碱的检识1、沉淀试剂、沉淀试剂金属盐类金属盐类碘碘-碘化钾（碘化钾（Wagner）KI-I2 棕褐色沉淀棕褐色沉淀碘化铋钾碘化铋钾（Dragendoff）BiI3 KI 红棕色沉淀红棕色沉淀碘化汞钾碘化汞钾（Mayer试剂）试剂）HgI2 2KI 类白色沉淀类白色沉淀 若加过量试剂，沉淀又被溶解若加过量试剂，沉淀又被溶解硅钨酸硅钨酸(Bertrand试剂试剂)SiO2 12WO3 乳白乳白苦味酸试剂苦味酸试剂 晶形沉淀（必须在中性溶液中反应）晶形沉淀（必须在中性溶液中反应）雷氏铵盐雷氏铵盐(Ammoniumreineckate)硫氰酸铬铵硫氰酸铬铵 试剂试剂 生成难溶性复盐生成难溶性复盐 紫红色紫红色2.反应原理：生成复盐和络盐薄层色谱中常用显色剂：改良的碘化铋钾试剂薄层色谱中常用显色剂：改良的碘化铋钾试剂 3.沉淀反应条件沉淀反应条件（1）通常在）通常在酸性酸性水溶液中生物碱成盐状态下进行；水溶液中生物碱成盐状态下进行；（若在碱性条件下则试剂本身将产生沉淀）（若在碱性条件下则试剂本身将产生沉淀）（2）在稀醇或脂溶性溶液中时，含水量）在稀醇或脂溶性溶液中时，含水量50%；（当醇含量（当醇含量50%时可使沉淀溶解）时可使沉淀溶解）（3）沉淀试剂不宜加入多量。）沉淀试剂不宜加入多量。（如：过量的碘化汞钾可使产生的沉淀溶解）（如：过量的碘化汞钾可使产生的沉淀溶解）4.结果的判断结果的判断（1）鉴别时每种）鉴别时每种Alk需采用三种以上沉淀试剂；需采用三种以上沉淀试剂；（沉淀试剂对各种（沉淀试剂对各种Alk的灵敏度不同）的灵敏度不同）（2）直接对中药酸提液进行沉淀反应，则）直接对中药酸提液进行沉淀反应，则 阳性结果阳性结果不能判定不能判定Alk的存在的存在 阴性结果可判断无阴性结果可判断无Alk存在存在氨基酸、蛋白质、多糖、鞣质等氨基酸、蛋白质、多糖、鞣质等+沉淀试剂沉淀试剂沉淀沉淀常规提纯方法（排除水溶性成分的干扰）常规提纯方法（排除水溶性成分的干扰）中草药水提液CHCl3H2OH+/H2OOH-/CHCl3萃取萃取H2OCHCl3氨基酸、蛋白质氨基酸、蛋白质多糖、鞣质等多糖、鞣质等第四节、第四节、生物碱的提取与分离生物碱的提取与分离一一 、总生物碱的提取、总生物碱的提取 方法：方法：n 溶剂法溶剂法n 离子交换树脂法离子交换树脂法n 沉淀法沉淀法（一）水或酸水提取法（一）水或酸水提取法 提取效果与溶剂用量，原料粉碎粒度，提取效果与溶剂用量，原料粉碎粒度，操作条件等因素有关。操作条件等因素有关。溶剂用量；一般为原料的溶剂用量；一般为原料的715715倍。倍。原料粉碎粒度；一般采用原料粉碎粒度；一般采用6060目目 含油较高的原料，提取前应先进行脱含油较高的原料，提取前应先进行脱脂处理脂处理水或酸水提取法水或酸水提取法 主要用于主要用于生物碱盐类生物碱盐类的提取的提取 原原理理：生生物物碱碱盐盐类类易易溶溶于于水水，难难溶溶于于有有机机溶溶剂剂，而而游游离离生生物物碱碱与与其其相相反反，易溶于有机溶剂，难溶于水。易溶于有机溶剂，难溶于水。酸性水酸性水0.1%2%H2SO4、HCl、HOAc等等生药H+/H2O药渣Alk OH-/H2OH+/H2OOH-弱碱及杂质弱碱及杂质亲水性亲水性Alk（二）醇类溶剂提取法（二）醇类溶剂提取法 提取生物碱及其盐提取生物碱及其盐 将乙醇提取物，用适量的酸水提出，将乙醇提取物，用适量的酸水提出，除去不溶物，酸液用碱碱化（一般多除去不溶物，酸液用碱碱化（一般多用氨水，石灰乳），再用有机溶剂萃用氨水，石灰乳），再用有机溶剂萃取，浓缩得亲脂性总生物碱。取，浓缩得亲脂性总生物碱。2.醇类溶剂提取法醇类溶剂提取法 生 药H+/H2O药 渣醇 液OH-/H2O醇或酸性醇醇或酸性醇挥醇；加酸水挥醇；加酸水碱性较弱的碱碱性较弱的碱亲水性亲水性AlkCHCl3沉 淀AlkOH-/H2O CHCl3（三）亲脂性有机溶剂提取法（三）亲脂性有机溶剂提取法 适合游离生物碱的提取适合游离生物碱的提取原料原料 提取液提取液 亲脂性生物碱亲脂性生物碱碱水（石灰乳或碱水（石灰乳或NaNa2 2COCO3 3）有机溶剂提取有机溶剂提取浓缩浓缩生生 药药残残 渣渣CHCl3CHCl3H+/H2O碱化（如碱化（如NH4OH）（使）（使Alk游离）游离）渗滤（或浸渍）（如渗滤（或浸渍）（如CHCl3等）等）H+/H2OOH-/H2OAlk沉淀沉淀亲水性亲水性Alk碱性较弱的碱性较弱的Alk（四）（四）水溶性生物碱的提取水溶性生物碱的提取I 沉淀法沉淀法I 溶剂法溶剂法I 大孔吸附树脂法大孔吸附树脂法 酸提碱沉法酸提碱沉法药 材沉 淀H2OH+/H2O提取；加碱碱化提取；加碱碱化水溶性水溶性Alk、杂质、杂质不溶或难溶性不溶或难溶性Alk（1）沉淀法）沉淀法（1）沉淀法）沉淀法 盐析法：盐析法：适用中等弱碱。适用中等弱碱。黄藤1%H2SO4水溶液H2O沉淀碱化至碱化至pH=9；加；加NaCl达饱和达饱和掌叶防已碱掌叶防已碱（1）沉淀法）沉淀法 雷氏铵盐沉淀法雷氏铵盐沉淀法B为季碳生物碱阳离子为季碳生物碱阳离子常用的沉淀试剂有：常用的沉淀试剂有：雷氏铵盐雷氏铵盐;苦味酸（三硝基苯酚）苦味酸（三硝基苯酚）;碘化钾碘化钾季铵碱的水溶液季铵碱的水溶液水溶液水溶液沉淀沉淀(雷氏复盐雷氏复盐)雷氏铵盐沉淀雷氏铵盐沉淀沉沉 淀淀滤滤 液液滤液滤液 (B2SO4)硫酸钡沉淀硫酸钡沉淀季铵碱的盐酸盐季铵碱的盐酸盐加酸水调至弱酸性加酸水调至弱酸性加新配制的雷氏铵盐饱和加新配制的雷氏铵盐饱和/H2O溶丙酮（乙醇）中溶丙酮（乙醇）中加加Ag2SO4饱和水溶液饱和水溶液加入氯化钡（加入氯化钡（BaCl2）（2）溶剂法n正丁醇提取法正丁醇提取法 例：例：P407 图图9-5（3）大孔吸附树脂法生生 药药残残 渣渣水层水层水溶性杂质水溶性杂质含水醇洗脱含水醇洗脱甲醇或乙醇提取浓缩甲醇或乙醇提取浓缩加水溶解加水溶解通过大孔吸附树脂通过大孔吸附树脂水洗水洗总生物碱总生物碱亲脂性亲脂性杂质杂质碱性较弱的碱性较弱的Alk 离子交换树脂法离子交换树脂法阳离子交换树脂阳离子交换树脂生物碱的分离系统分离特定分离多用于基础研究侧重于生产实用总 碱单体Alk的分离类别指酸碱性强弱部位指极性不同依据依据Alk的理化性质的理化性质二、生物碱的分离二、生物碱的分离 总生物碱总生物碱 酸水（酸水（2%H2%H2 2SOSO4 4，2%2%酒石酸等）溶解，酒石酸等）溶解，过滤过滤 酸水溶液酸水溶液 有机溶剂萃取（有机溶剂萃取（CHClCHCl3,3,苯等）苯等）有机层有机层 酸水层酸水层（弱碱性生物碱）（弱碱性生物碱）(中强、强碱性生物碱）中强、强碱性生物碱）NaOH NaOH萃取萃取 碱层碱层 有机溶剂层有机溶剂层 NH NH4 4ClCl处理处理 （非酚性弱碱性生物碱）（非酚性弱碱性生物碱）有机溶剂萃取有机溶剂萃取酚性弱碱性生物碱酚性弱碱性生物碱（一）不同类别生物碱的分离（一）不同类别生物碱的分离 酸水层（中强，强碱性及水溶性生物碱）酸水层（中强，强碱性及水溶性生物碱）氨水调氨水调pH9-10pH9-10 有机溶剂萃取有机溶剂萃取 有机溶剂层有机溶剂层 碱水层碱水层 1 12%NaOH2%NaOH萃取萃取 （1 1）或（）或（2 2）（1 1）PH12 PH12 （2 2）酸化，加沉淀试剂）酸化，加沉淀试剂碱水层碱水层 有机溶剂层有机溶剂层 正丁醇萃取正丁醇萃取 NH NH4 4Cl/CHClCl/CHCl3 3（非酚性生物碱）（非酚性生物碱）正丁醇层正丁醇层 沉淀沉淀 CHClCHCl3 3层层 分解分解（酚性叔胺生物碱）（酚性叔胺生物碱）水溶性生物碱水溶性生物碱 水溶性生物碱水溶性生物碱 （二）利用生物碱的酸碱性差异分离（二）利用生物碱的酸碱性差异分离（1 1）pHpH梯度萃取法：梯度萃取法：用用pHpH由高到低的酸性缓冲溶液依由高到低的酸性缓冲溶液依次提取，将碱性由强到弱的生物碱次提取，将碱性由强到弱的生物碱依次萃取出来依次萃取出来 Alk碱性不同碱性不同pH梯度萃取法梯度萃取法 （1）确定）确定pH值的方法值的方法 缓冲纸色谱缓冲纸色谱四、提取分离（二）分离四、提取分离（二）分离 四、提取分离（二）分离 C+四、提取分离（二）分离（1 1）利用生物碱的碱性差异分离（依操作方式的不）利用生物碱的碱性差异分离（依操作方式的不同，分离方法有二种同，分离方法有二种）混合总生物碱混合总生物碱 酸水溶解酸水溶解 酸水液酸水液(盐盐)加碱进行梯度碱化加碱进行梯度碱化同时用同时用CHClCHCl3 3萃取，萃取，分别回收分别回收CHClCHCl3 3 生物碱由弱到强生物碱由弱到强依次被分离依次被分离 CHClCHCl3 3溶解溶解 CHClCHCl3 3溶液溶液(游离游离)用不同酸度用不同酸度(酸度由弱到强酸度由弱到强,pH ,pH 由大到小由大到小)的酸水进行梯度萃取的酸水进行梯度萃取,酸水液分别碱化酸水液分别碱化,同时同时CHClCHCl3 3萃取萃取,回收回收CHClCHCl3 3 生物碱由强到弱依次被分离生物碱由强到弱依次被分离(三三)利用生物碱或生物碱盐的利用生物碱或生物碱盐的溶解溶解度度差异分离差异分离 生物碱可以与盐酸，硫酸，苦味酸，生物碱可以与盐酸，硫酸，苦味酸，氢溴酸等形成盐，生物碱的这些盐类在氢溴酸等形成盐，生物碱的这些盐类在不同溶剂中溶解度不同，借此可达到分不同溶剂中溶解度不同，借此可达到分离目的。离目的。一般采用两相溶剂萃取法、沉淀法等一般采用两相溶剂萃取法、沉淀法等方法进行分离。方法进行分离。（1 1）利用生物碱的利用生物碱的极性极性（溶解性）差异分离（溶解性）差异分离 分子结构的不同、极性的差异、对特殊溶剂的溶解性能不同而分子结构的不同、极性的差异、对特殊溶剂的溶解性能不同而分离分离苦参碱和氧化苦参碱混合物苦参碱和氧化苦参碱混合物少量少量CHClCHCl3 3溶解溶解 CHClCHCl3 3 液液加入加入1010倍量的乙醚倍量的乙醚 沉淀沉淀（氧化苦参碱）（氧化苦参碱）母液母液（苦参碱）（苦参碱）流程说明：汉防己乙素的酚羟基，使其极性流程说明：汉防己乙素的酚羟基，使其极性较大，而在冷苯中的溶解度较小。较大，而在冷苯中的溶解度较小。汉防己甲素汉防己甲素 R=CH R=CH3 3 汉防己乙素汉防己乙素 R=H R=H汉防己甲素和汉防己乙素混合物汉防己甲素和汉防己乙素混合物 冷苯溶解冷苯溶解 不溶物不溶物（汉防己乙素）（汉防己乙素）冷苯液冷苯液 回收回收 汉防己甲素汉防己甲素（2 2）利用生物碱盐的溶解度不同分离利用生物碱盐的溶解度不同分离麻黄碱和伪麻黄碱混合物麻黄碱和伪麻黄碱混合物 甲苯溶解甲苯溶解 甲苯溶液甲苯溶液 流经流经12%草酸溶液草酸溶液 草酸溶液草酸溶液 减压浓缩，冷置，过滤减压浓缩，冷置，过滤 结晶（草酸麻黄碱）结晶（草酸麻黄碱）母液（草酸伪麻黄碱）母液（草酸伪麻黄碱）CaClCaCl2 2转化转化 CaClCaCl2 2转化转化 盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱 盐酸伪麻黄碱盐酸伪麻黄碱 流程说明流程说明:利用麻黄利用麻黄碱草酸盐的水溶度小碱草酸盐的水溶度小于伪麻黄碱草酸盐的于伪麻黄碱草酸盐的水溶度进行分离。水溶度进行分离。金鸡纳树皮粉末金鸡纳树皮粉末以以CaCa（OHOH）2 2湿润，苯提取湿润，苯提取苯提液苯提液稀硫酸稀硫酸酸水液酸水液用用NaOHNaOH调至调至pH6.5pH6.5温热放置析晶，过滤温热放置析晶，过滤硫酸奎宁晶体硫酸奎宁晶体母液母液稀硫酸中稀硫酸中氨水碱化氨水碱化奎宁奎宁碱化，过滤碱化，过滤沉淀沉淀滤液滤液乙醚乙醚不溶物不溶物乙醚液乙醚液（金鸡宁）（金鸡宁）稀稀HClHCl乙醚液乙醚液酸水液酸水液酒石酸钾钠酒石酸钾钠酒石酸金鸡宁丁酒石酸金鸡宁丁碱化碱化金鸡宁丁金鸡宁丁母液母液KIKI母液母液氢碘酸奎尼丁氢碘酸奎尼丁碱化碱化奎尼丁奎尼丁(四四)利用生物碱的特殊功能基进行利用生物碱的特殊功能基进行分离分离1 1）利用酚羟基进行分离：）利用酚羟基进行分离：将混合物溶于氯仿中，用将混合物溶于氯仿中，用5%5%氢氧氢氧化钠萃取化钠萃取,酚性碱即转入碱水溶液中。酚性碱即转入碱水溶液中。将碱水萃取液调至偏酸性，使酚羟基将碱水萃取液调至偏酸性，使酚羟基游离，用氨水等弱碱碱化，再用氯仿游离，用氨水等弱碱碱化，再用氯仿萃取出酚性生物碱。萃取出酚性生物碱。吗啡和可待因混合物吗啡和可待因混合物 CHClCHCl3 3溶解溶解 氯仿溶液氯仿溶液 1 12%NaOH2%NaOH溶液萃取溶液萃取 碱水液碱水液 CHClCHCl3 3液液 弱酸酸化弱酸酸化CHClCHCl3 3萃取萃取 回收回收 可待因可待因 CHClCHCl3 3液液 吗啡吗啡回收回收 吗啡吗啡 R=H R=H 可待因可待因 R=CH R=CH3 3 2 2）利用内酯或内酰胺结构）利用内酯或内酰胺结构（喜树碱喜树碱）（5 5）利用色谱法进行分离）利用色谱法进行分离n生物碱（游离）为生物碱（游离）为脂溶性成分脂溶性成分，适合于采用，适合于采用吸附吸附原理进行原理进行分离，分离，吸附剂吸附剂多用硅胶、氧化铝，多用硅胶、氧化铝，流动相流动相为中性的苯，氯为中性的苯，氯仿，乙醚等有机溶剂或混合有机溶剂。仿，乙醚等有机溶剂或混合有机溶剂。n对一些极性很近似或对一些极性很近似或极性较大极性较大的生物碱的分离，可以利用的生物碱的分离，可以利用分配分配原理原理进行分离，效果可能更佳（三尖杉酯碱和高三尖进行分离，效果可能更佳（三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱）的分离。杉酯碱）的分离。n 高效液相色谱高效液相色谱（三尖杉混合酯碱的分离），三尖杉混合酯碱的分离），气相色谱气相色谱（挥（挥发性生物碱），发性生物碱），制备性薄层色谱制备性薄层色谱等也经常用于生物碱的分等也经常用于生物碱的分离。离。三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱混合物三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱混合物 支持剂：硅胶支持剂：硅胶固定相：固定相：pH5.0pH5.0缓冲液缓冲液洗脱剂：洗脱剂：pH5.0pH5.0缓冲液饱和的氯仿液缓冲液饱和的氯仿液 高三尖杉酯碱高三尖杉酯碱 二者混合物二者混合物 三尖杉酯碱三尖杉酯碱 流程说明：利用高三尖杉酯碱较三尖杉酯碱流程说明：利用高三尖杉酯碱较三尖杉酯碱结构中多一个结构中多一个 CH CH2 2，极性较小（流动相中易，极性较小（流动相中易于分配）而先被洗脱下来，三尖杉酯碱则后被于分配）而先被洗脱下来，三尖杉酯碱则后被洗脱下来，中间为二者的混合物。洗脱下来，中间为二者的混合物。三尖杉酯碱三尖杉酯碱R=R=高三尖杉酯碱高三尖杉酯碱R=R=提取分离实例长春碱与长春新碱三、生物碱提取与分离实例三、生物碱提取与分离实例提取分离长春花全草长春花全草(干粉80目)苯渗漉液苯渗漉液药药 渣渣苯苯 液液H+/H2O苯渗漉pH=46%酒石酸水溶液萃取过滤，氨水碱化至pH=67 CHCl3提除水杂除水杂除脂杂除脂杂除碱性较强的成分除碱性较强的成分提取分离H2OCHCl3弱碱Alk硫酸盐硫酸盐回收氯仿，蒸干溶于无水乙醇H2SO4调pH=3.84.1Alk沉淀溶于H2O，氨水碱化至pH=89 CHCl3萃取除脂杂除水杂精精制制提取分离H2OCHCl3游离游离Alk长春碱长春碱醛基长春碱醛基长春碱回收氯仿溶于苯:氯仿(1:2)液中通过Al2O3吸附柱用苯:氯仿(1:2)洗脱色谱分离第六节第六节 生物碱的结构鉴定与测定生物碱的结构鉴定与测定一、色谱法一、色谱法 1 1、TLCTLC si-gel:si-gel:展开剂中一般加少量二乙胺等碱展开剂中一般加少量二乙胺等碱性试剂性试剂 Al Al2 2O O3:3:2 2、PCPC 3 3、HPLCHPLC（二）波谱法（二）波谱法 1 1、紫外光谱（、紫外光谱（UVUV）紫外光谱主要用于判断分子中紫外光谱主要用于判断分子中共轭双键及芳环等存在与否，是共轭双键及芳环等存在与否，是测定结构的手段之一。测定结构的手段之一。（1 1）生物碱的结构类型与紫外光谱）生物碱的结构类型与紫外光谱的关系的关系生色团在分子的生色团在分子的非主体部分非主体部分，这类生物碱主体，这类生物碱主体结构不具有生色团，结构不具有生色团，无无紫外吸收。紫外吸收。生色团在分子的生色团在分子的整体结构部分整体结构部分；生色团部分即；生色团部分即分子的分子的基本骨架基本骨架。生色团在分子的生色团在分子的主体结构部分主体结构部分，不能判断骨架，不能判断骨架类型，只能起类型，只能起辅助辅助作用作用（2 2）生物碱的）生物碱的UVUV光谱与光谱与pHpH的关系的关系A:A:碱性碱性N N与生色团直接连接：在酸性及中性液与生色团直接连接：在酸性及中性液中测定的中测定的UVUV不同不同。B:B:非碱性非碱性N N与生色团直接连接：在酸性及中性与生色团直接连接：在酸性及中性液中测定的液中测定的UVUV相同相同。C:NC:N不不与生色团连接：与生色团连接：不不影响影响UVUVD:D:生色团中生色团中有有OHOH:碱性条件有影响，吸收峰碱性条件有影响，吸收峰红移红移。2 2、红外光谱（、红外光谱（IRIR）（1 1）氨氨基基吸吸收收：N-H在在3750375030003000呈呈现现较较弱弱、尖尖锐锐的峰带的峰带（2 2）C=OC=O：跨跨环环效效应应时时，C=OC=O 166016601690cm1690cm-1-1,比比正常正常C=OC=O移向低波数。移向低波数。（3 3）BolhmannBolhmann吸吸收收带带：指指在在反反式式喹喹喏喏里里西西丁丁环环中中，凡凡氮氮原原子子邻邻碳碳上上的的氢氢上上有有两两个个与与氮氮原原子子孤孤 对对 电电 子子 处处 于于 反反 式式 直直 立立 关关 系系 者者，则则 在在280028002700cm2700cm-1-1区区域域有有两两个个以以上上吸吸收收带带（C-HC-H），而顺式异构体则在这些区域中无吸收峰或极弱。而顺式异构体则在这些区域中无吸收峰或极弱。注意点注意点(1)(1)在氯仿溶液中测定时，多为二个峰；用在氯仿溶液中测定时，多为二个峰；用KBrKBr压片时，多为一簇峰；压片时，多为一簇峰；(2)(2)含有喹诺里西丁环的生物碱结构类型：含有喹诺里西丁环的生物碱结构类型：喹诺里西丁类、吐根碱类、吲哚碱类中喹诺里西丁类、吐根碱类、吲哚碱类中的柯南因的柯南因-阿马利新类和育亨宾类、异甾阿马利新类和育亨宾类、异甾碱中原介藜芦碱类和西藜芦碱类碱中原介藜芦碱类和西藜芦碱类；用于推断生物碱的结构式、构象和取代基构型。用于推断生物碱的结构式、构象和取代基构型。（1 1）不同类型氮原子上氢与甲基的化学位移）不同类型氮原子上氢与甲基的化学位移（2 2）氮原子电负性对邻近碳上氢原子化学位移的影）氮原子电负性对邻近碳上氢原子化学位移的影响：向低场位移响：向低场位移（3 3）季胺氮对甲基中氢化学位移的影响：低场）季胺氮对甲基中氢化学位移的影响：低场（4 4）位于苯环正屏蔽区域氢的化学位移向高场移动）位于苯环正屏蔽区域氢的化学位移向高场移动3、1H-HNR谱谱4、13C-NMR谱谱 推定生物碱结构式及立体结构推定生物碱结构式及立体结构采用与标采用与标准物或近似物的碳谱对比法进行推测取代基准物或近似物的碳谱对比法进行推测取代基根据各基团的化学位移值。根据各基团的化学位移值。（1 1）氮原子对邻近碳原子化学位移的影响：低场）氮原子对邻近碳原子化学位移的影响：低场（2 2）氮原子成盐后对邻近碳原子化学位移的影响）氮原子成盐后对邻近碳原子化学位移的影响（3 3）超导核磁共振技术的应用：）超导核磁共振技术的应用：DEPTDEPT谱，二维谱，二维1313C-C-1 1H COSYH COSY谱谱 5、MS1 1）.难于裂解或由取代基或侧链的裂解产生特征离子难于裂解或由取代基或侧链的裂解产生特征离子 特点：特点：M+或或M+-1多为基峰或强峰多为基峰或强峰。一般观察不到由骨架裂解产生的特征离子。一般观察不到由骨架裂解产生的特征离子。主要包括两大类：主要包括两大类：芳香体系组成分子的整体或主体结构；芳香体系组成分子的整体或主体结构；如喹啉类、吖啶酮类等如喹啉类、吖啶酮类等 具有环系多、分子结构紧密的生物碱具有环系多、分子结构紧密的生物碱；如苦参碱类、秋水仙碱类等如苦参碱类、秋水仙碱类等2 2）.主要裂解受氮原子支配主要裂解受氮原子支配 主要裂解方式是以氮原子为中心的主要裂解方式是以氮原子为中心的-裂解，且多涉及骨架的裂解。裂解，且多涉及骨架的裂解。特征：基峰或强峰多是含氮的基团特征：基峰或强峰多是含氮的基团或部分。或部分。主要类型生物碱：金鸡宁类、甾主要类型生物碱：金鸡宁类、甾体生物碱类等。体生物碱类等。N金鸡宁金鸡宁3 3）.主要由苄基裂解产生特征离子主要由苄基裂解产生特征离子4 4）.主要由主要由RDARDA裂解产生特征离子裂解产生特征离子一、选择判断题用用pH梯梯度度萃萃取取法法从从氯氯仿仿中中分分离离生生物物碱碱时时，可可顺顺次次用用（）缓冲液萃取。）缓冲液萃取。A.pH=83 B.pH=68 C.pH=814 D.pH=38某生物碱碱性很弱，几乎呈中性，氮原子的存某生物碱碱性很弱，几乎呈中性，氮原子的存在状态可能为在状态可能为()。A.伯胺伯胺 B.仲胺仲胺 C.酰胺酰胺 D.叔胺叔胺一、选择判断题季铵型生物碱分离常用季铵型生物碱分离常用()。A.水蒸汽蒸馏法水蒸汽蒸馏法 B.雷氏铵盐法雷氏铵盐法 C.升华法升华法 D.聚酰胺色谱法聚酰胺色谱法生物碱沉淀反应是利用大多数生物碱在生物碱沉淀反应是利用大多数生物碱在()条件条件下，与某些沉淀试剂反应生成不溶性复盐或络合物下，与某些沉淀试剂反应生成不溶性复盐或络合物沉淀。沉淀。A.酸性水溶液酸性水溶液 B.碱性水溶液碱性水溶液 C.中性水溶液中性水溶液 D.亲脂性有机溶剂亲脂性有机溶剂一、选择判断题小檗碱的结构类型是小檗碱的结构类型是 A喹啉类喹啉类 B异喹啉类异喹啉类 C哌啶类哌啶类 D有机胺类有机胺类 E吲哚类吲哚类将混合生物碱溶于有机溶剂中，以酸液将混合生物碱溶于有机溶剂中，以酸液pH由大由大小顺次萃取，可依次萃取出小顺次萃取，可依次萃取出()。A.碱性由强碱性由强弱的生物碱弱的生物碱 B.碱性由弱碱性由弱强的生物碱强的生物碱 C.极性由弱极性由弱强的生物碱强的生物碱 D.极性由强极性由强弱的生物碱弱的生物碱一、选择判断题生物碱进行薄层色谱时，一般使用的显色剂是生物碱进行薄层色谱时，一般使用的显色剂是 A碘化汞钾试剂碘化汞钾试剂 B苦味酸试剂苦味酸试剂 C硅钨酸试剂硅钨酸试剂 D雷氏铵盐试剂雷氏铵盐试剂 E改良碘化铋钾试剂改良碘化铋钾试剂生物碱的碱性强弱可与下列生物碱的碱性强弱可与下列()情况有关。情况有关。A.生物碱中生物碱中N原子具有各种杂化状态原子具有各种杂化状态 B.生物碱中生物碱中N原子处于不同的化学环境原子处于不同的化学环境 C.以上两者均有关以上两者均有关 D.以上两者均无关以上两者均无关一、选择判断题pH梯梯度度萃萃取取法法分分离离生生物物碱碱时时，生生物物碱碱在在酸酸水水层层，应应顺顺次调次调pH（）用氯仿萃取。）用氯仿萃取。A.pH=38 B.pH=813 C.pH=17 D.pH=71对生物碱进行分离常用的吸附剂为对生物碱进行分离常用的吸附剂为()。A.活性炭活性炭 B.硅胶硅胶 C.葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶 D.碱性氧化铝碱性氧化铝u不能用碱溶酸沉法提取的成分是（）不能用碱溶酸沉法提取的成分是（）A.羟基蒽醌羟基蒽醌 B.香豆素类香豆素类 C.黄酮类黄酮类 D.生物碱类生物碱类二、是非判断题所有生物碱都有不同程度的碱性。所有生物碱都有不同程度的碱性。阴离子交换树脂适用于分离生物碱类物质。阴离子交换树脂适用于分离生物碱类物质。生物碱一般是以游离碱的状态存在于植物体内。生物碱一般是以游离碱的状态存在于植物体内。某某一一中中药药的的粗粗浸浸液液，用用生生物物碱碱沉沉淀淀试试剂剂检检查查结结果果为为阳阳性，可说明该中药中肯定含有生物碱。性，可说明该中药中肯定含有生物碱。生物碱都能被生物碱沉淀试剂所沉淀。生物碱都能被生物碱沉淀试剂所沉淀。三、化学方法鉴别下列各组化合物三、化学方法鉴别下列各组化合物三、化学方法鉴别下列各组化合物四、比较下列各组化合物的碱性四、比较下列各组化合物的碱性四、比较下列各组化合物的碱性四、比较下列各组化合物的碱性四、比较下列各组化合物的碱性四、比较下列各组化合物的碱性五、提取分离某中药材中主要含有生物碱类成分，且已知在其总碱中含有如下成分：季铵碱、酚性叔胺碱、非酚性叔胺碱、水溶性杂质、脂溶性杂质现有下列分离流程，试将每种成分可能出现的部位填入括号中。