生化检验报告的审核课件(同名1414)

临床生化床生化检验反反应原理原理及及报告的告的审核核泸州市人民医院州市人民医院检验科科 潘庭荣潘庭荣1编辑ppt主要内容主要内容常常见的生化反的生化反应原理原理检验报告告审核普遍存在的核普遍存在的问题检验报告告审核的建核的建议总结2编辑ppt终点分析法（平衡法）点分析法（平衡法）连续监测法法比比浊测定法定法一、常一、常见的生化反的生化反应原理原理3编辑ppt 终点分析法是基于反点分析法是基于反应达到平衡达到平衡时反反应产物的物的吸收光吸收光谱特征及其特征及其对光吸收光吸收强度的大小，度的大小，对物物质进行定量的一行定量的一类分析方法。反分析方法。反应混合物混合物进行一定行一定时间反反应后，达到平衡后，达到平衡终点，即在点，即在显色反色反应处于于稳定定阶段段时，监测其其颜色色对光的吸收光的吸收强度，以此度，以此计算待算待测物物浓度。分度。分为一点、两点一点、两点终点法点法终点分析法点分析法4编辑ppt一点一点终点法点法 一点一点终点法：一点点法：一点终点法的特点是使用点法的特点是使用一种或两种一种或两种试剂。当。当样品和品和试剂混合后，待混合后，待测物与物与试剂的物理化学反的物理化学反应达到达到终点点时，测定吸光度，定吸光度，计算待算待测物物质的的浓度。度。该法要求法要求试剂本底本底颜色要深，色要深，该法具有代表性的法具有代表性的试验有：有：总蛋白、白蛋白、蛋白、白蛋白、镁测定定5编辑pptTP反反应曲曲线6编辑pptMg反反应曲曲线7编辑ppt 二点二点终点法：一般是用双点法：一般是用双试剂，是自，是自动化生化分析化生化分析仪常用的一种方法。常用的一种方法。该方法的方法的优点是可以消除点是可以消除样品、品、试剂的的颜色、色、浊度度以及一些干以及一些干扰物物质的影响。代表性的的影响。代表性的试验有葡萄糖等有葡萄糖等两点两点终点法点法8编辑pptCre反反应曲曲线9编辑ppt 测定底物的消耗或定底物的消耗或产物生成的速度的化学物生成的速度的化学方法称方法称为连续监测法（又称法（又称动态分析法、速率分析法、速率法或法或动力学法）。在反力学法）。在反应速度恒定期（零速度恒定期（零级反反应期）来期）来连续观察和察和记录一定反一定反应时间内底物内底物或或产物量的物量的变化。以化。以单位位时间酶促反促反应初速度初速度计算算酶活力的大小和代活力的大小和代谢物的物的浓度。度。连续监测法法10编辑ppt酶促反促反应进程曲程曲线11编辑ppt酶促反促反应进程曲程曲线12编辑ppt典型典型酶联法反法反应曲曲线13编辑pptAMY反反应曲曲线14编辑pptALT反反应曲曲线15编辑ppt 通通过检测物物质对光的散射或透射光的散射或透射强度度来来测定物定物质的方法称比的方法称比浊法。比法。比浊法可法可分分为化学比化学比浊法和免疫比法和免疫比浊法，免疫比法，免疫比浊法又分法又分为透射比透射比浊和散射比和散射比浊。全自。全自动生化生化仪常用透射比常用透射比浊法，常用于特种法，常用于特种蛋白蛋白测定。其工作曲定。其工作曲线为抛物抛物线。比比浊测定法定法16编辑ppt比比浊测定法定法注意事注意事项：抗原或抗体量（抗原或抗体量（测定物）大大定物）大大过剩，可出剩，可出现可可溶性复合物，造成溶性复合物，造成误差。差。应维持反持反应管中抗体蛋白（底物）始管中抗体蛋白（底物）始终过剩。剩。易受到脂血的影响。易受到脂血的影响。17编辑ppt二、二、报告告审核中的普遍核中的普遍问题责任心不任心不强，未，未对结果果进行行认真真审核核对检测仪器或器或试剂方法学不方法学不够了解了解专业知知识欠缺，工作欠缺，工作经验不足不足对仪器器检测的的结果及室内果及室内质控控结果果过于相信于相信18编辑ppt三、三、报告告审核的建核的建议结合合临床床资料料审核核结合分析合分析项目目间的内在的内在联系系审核（核（专业知知识）结合影响合影响检验结果因素果因素审核核u检验项目的方法学和目的方法学和线性性u检验标本的影响本的影响u检验仪器性能影响器性能影响结合当日合当日检验结果果总体体趋势审核核结果果19编辑ppt结合合临床床资料料 结合病人的性合病人的性别、年、年龄、临床床诊断、其他断、其他检查结果果审核核 例：某病人例：某病人检测的的TP为110g/L，该标本没有本没有脂血等影响脂血等影响检测结果的因素果的因素 临床床诊断：多断：多发性骨髓瘤性骨髓瘤 另：胰另：胰岛素与低血糖、病人素与低血糖、病人输注注药物物对结果果的影响的影响20编辑ppt检验项目目间的内在的内在联系系各各检测参数参数间存在大小、比例、存在大小、比例、逻辑关系关系例：例：HDL-C+LDL-CTC、Dbil Tbil CK-MB CK(M+B)-HBDH LDH(H+M)原原发性甲亢：性甲亢：T3、T4 、TSH等等21编辑ppt影响影响检验结果的因素果的因素 试剂线性范性范围：了解了解检验项目目试剂的的线性范性范围，对超超过或或低于范低于范围的的项目，必目，必须进行相行相应的减量稀的减量稀释或或增量后重新增量后重新测定。定。22编辑ppt线性范性范围 在在实际工作中，用工作中，用连续监测法会遇到法会遇到检验结果果为0或者或者负值的情况，此的情况，此时不能盲目相信不能盲目相信该结果低就出具低果低就出具低值报告，告，应查看其反看其反应曲曲线例：某病人的尿液例：某病人的尿液AMY检测结果果为0U/L 其反其反应曲曲线如下如下图：23编辑pptAMY反反应曲曲线24编辑pptAMY反反应曲曲线分析分析分析：由于分析：由于测定物定物质浓度度过高高处理：理：对测定物定物质进行十倍左右的稀行十倍左右的稀释再再测定，定，直到反直到反应曲曲线恢复正常恢复正常结果才可靠果才可靠25编辑ppt影响影响检验结果的因素果的因素检测项目的方法学：目的方法学：要了解要了解该项目目试剂采用的方法学：采用的方法学：例：某病人在例：某病人在测定心肌定心肌酶谱时，其，其CK:246U/L、CK-MB:286U/L，标本无溶血等因素影响本无溶血等因素影响 其其结果中果中CK-MBCK26编辑ppt检测项目的方法学目的方法学 分析：分析：CK是由是由M和和B两两类亚基基组成的二聚体，成的二聚体，其构成其构成为CK-MB(心型心型)约占占0-3%、CK-MM(肌肌型型)约占占97-100%、CK-BB（脑型）型）约占占0-1%27编辑ppt检测项目的方法学目的方法学 CK-MB采用的采用的检测方法方法为免疫抑制法免疫抑制法 原理原理:正常人体中，正常人体中，CK同工同工酶中中CK-MM CK-MB CK-BB,其中其中CK-BB含量极少，可忽含量极少，可忽略。免疫抑制法正是建立于忽略略。免疫抑制法正是建立于忽略CK-BB的基的基础上。采用抗体抑制其上。采用抗体抑制其M亚基活性，使基活性，使CK-MM失失去活性，而去活性，而CK-MB失去一半的活性。失去一半的活性。单测定定B亚基的活性，其基的活性，其结果果2即即为CK-MB活性活性28编辑ppt检测项目的方法学目的方法学 原因分析：由于在患原因分析：由于在患轻度或中度度或中度脑损伤、脑 血管意外及血管意外及脑手手术后后、新生儿、新生儿产程窒息造成程窒息造成 脑组织发生生实质性性损害害 的病人中，的病人中，CK-BB会会升高，升高，这时该方法方法测定的定的CK-MB的活性相当的活性相当于是于是CK-MB+2CK-BB的活性之和，造成的活性之和，造成 CK-MB活性假性升高活性假性升高29编辑ppt检测项目的方法学目的方法学为什么什么CK-MB 2CK不可能不可能 该测定定CK-MB活性活性=CK-MB+2CK-BB,如果如果CK-BB CK-MM,结果要乘果要乘2，即，即CK-MB+2CK-BB CK-BB+CK-MB+CK-MM,测定的定的CK-MB 活性活性 CK活性，但活性，但CK-MB 2CK不可能不可能解决方法：其他方法解决方法：其他方法测定定CK-MB的的质量量 30编辑ppt检验标本的影响本的影响 标本脂血会使反本脂血会使反应浊度增加，透光度下降，度增加，透光度下降，吸光度增加，从而造成吸光度增加，从而造成检验结果不准确。如果不准确。如TP、TG、UA显著增高，著增高，GGT显著下降或著下降或为0 标本溶血会使本溶血会使K+、ALT、AST、LDH等等检验结果果显著升高著升高抗凝抗凝剂的的错误使用使用31编辑ppt仪器性能影响器性能影响 仪器老化、故障、清洗管道堵塞、水器老化、故障、清洗管道堵塞、水质不不纯等均会等均会对检验结果造成影响果造成影响光路老化：表光路老化：表现为ALT、AST等等项目目结果重复果重复性性较差差水水质不不纯、反、反应杯清洗不干杯清洗不干净：表：表现为无机物无机物质结果不准果不准32编辑ppt检验结果的果的总体体趋势 即使即使质控在控，也要注意当日控在控，也要注意当日检验结果的果的总体的分布体的分布趋势如如K+的参考区的参考区间为3.55.5，中，中值为4.5，如果，如果当日当日结果大部分甚至全部低于果大部分甚至全部低于4.5，即使当日，即使当日质控在控，任要考控在控，任要考虑结果是否偏低，果是否偏低，应重新校重新校准、准、质控后再控后再测定定 如在如在质控中控中 TC(-1S),HDL(+1S),LDL(+1S),虽然在控，如出然在控，如出现大部分大部分HDL+LDL TC，也也应考考虑重新重新对三三项目校目校标、质控后再控后再测定定33编辑ppt四、四、总结不要盲目相信不要盲目相信仪器器检测的的结果一定准确果一定准确检验人人员要增要增强对报告告审核的核的责任心任心检验人人员应加加强对专业知知识的学的学习和掌握和掌握,了了解解仪器的性能及各器的性能及各项目的方法学和反目的方法学和反应原理原理对检验标本的状本的状态要要认真确真确认对有疑有疑问或或报警的警的结果要果要查看反看反应曲曲线加加强与与临床科室的沟通床科室的沟通34编辑ppt35编辑ppt