生物化学--氨基酸--课件

第第二章二章 氨基酸氨基酸Chapter2Chapter2 Amino acidAmino acid1PPT课件教学目标教学目标：掌握氨基酸的结构特点与理化性质掌握氨基酸的结构特点与理化性质。1.1.1.1.从氨基酸的结构特点上理解氨基酸的分从氨基酸的结构特点上理解氨基酸的分从氨基酸的结构特点上理解氨基酸的分从氨基酸的结构特点上理解氨基酸的分类和生物学特性。类和生物学特性。类和生物学特性。类和生物学特性。2.2.2.2.掌握氨基酸的理化性质，重点掌握两性掌握氨基酸的理化性质，重点掌握两性掌握氨基酸的理化性质，重点掌握两性掌握氨基酸的理化性质，重点掌握两性解离与等电点的含义、氨基酸参加的化解离与等电点的含义、氨基酸参加的化解离与等电点的含义、氨基酸参加的化解离与等电点的含义、氨基酸参加的化学反应，特别是侧链的反应。了解氨基学反应，特别是侧链的反应。了解氨基学反应，特别是侧链的反应。了解氨基学反应，特别是侧链的反应。了解氨基酸的光谱学特征。酸的光谱学特征。酸的光谱学特征。酸的光谱学特征。2PPT课件第第一一节节 氨基酸氨基酸 （Amino acid,AAAmino acid,AA)蛋白质的构件分子蛋白质的构件分子 Protein ArchitectureProtein Architecture P123P123 3PPT课件一一 蛋白质的水解蛋白质的水解 酸水解酸水解酸水解酸水解:6mol/L 6mol/L 6mol/L 6mol/L HCL HCL HCL HCL，4mol/L4mol/L4mol/L4mol/L H H H H2 2 2 2SO4SO4SO4SO4 回流煮沸回流煮沸回流煮沸回流煮沸20h20h20h20h。缺点：缺点：缺点：缺点：TrpTrpTrpTrp破坏，破坏，破坏，破坏，AsnAsnAsnAsn、GlnGlnGlnGln脱酰胺基，脱酰胺基，脱酰胺基，脱酰胺基，羟基氨基酸羟基氨基酸羟基氨基酸羟基氨基酸(Ser Thr(Ser Thr(Ser Thr(Ser Thr)部分破坏。部分破坏。部分破坏。部分破坏。优点：不消旋优点：不消旋优点：不消旋优点：不消旋碱水解碱水解碱水解碱水解：5mol/LNaOH5mol/LNaOH5mol/LNaOH5mol/LNaOH共煮共煮共煮共煮10-2010-2010-2010-20小时小时小时小时 缺点缺点:消旋消旋消旋消旋 优点：色氨酸稳定优点：色氨酸稳定优点：色氨酸稳定优点：色氨酸稳定酶水解酶水解酶水解酶水解：水解位点特异，：水解位点特异，：水解位点特异，：水解位点特异，得到多肽片段和得到多肽片段和得到多肽片段和得到多肽片段和AAAAAAAA的的的的 混合物混合物混合物混合物，用于一级结构用于一级结构用于一级结构用于一级结构分析。分析。分析。分析。4PPT课件 二二.氨基酸的结构氨基酸的结构 (Structure of Pr-Structure of Pr-Structure of Pr-Structure of Pr-AA)AA)AA)AA)1 1.20.20种氨基酸的结构通式种氨基酸的结构通式:不变部分不变部分不变部分不变部分可变部分可变部分可变部分可变部分5PPT课件非解离形式非解离形式解离形式解离形式6PPT课件2.2.结构特点结构特点(1)(1)(1)(1)除除除除脯氨酸脯氨酸脯氨酸脯氨酸（亚氨基酸）（亚氨基酸）（亚氨基酸）（亚氨基酸）外外外外，这些天然这些天然这些天然这些天然氨基酸在结构上氨基酸在结构上氨基酸在结构上氨基酸在结构上 的共同特点为：的共同特点为：的共同特点为：的共同特点为：与与与与羧基相邻的羧基相邻的羧基相邻的羧基相邻的-碳原子上都有一个氨基碳原子上都有一个氨基碳原子上都有一个氨基碳原子上都有一个氨基，因而称为因而称为因而称为因而称为-氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸.-C-C-C-C-C-C-C C-COOH-COOH -C-C-C-C(NH-C-C-C-C(NH2 2)-COOH -)-COOH -氨基酸氨基酸 -C-C-C(NH-C-C-C(NH2 2)-C-COOH -)-C-COOH -氨基酸氨基酸 -C-C(NH-C-C(NH2 2)-C-C-COOH -)-C-C-COOH -氨基酸氨基酸什么是什么是什么是什么是-氨基酸？氨基酸？氨基酸？氨基酸？7PPT课件(2)(2)(2)(2)除除除除甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸外外外外,其它所有氨基酸分子中的其它所有氨基酸分子中的其它所有氨基酸分子中的其它所有氨基酸分子中的-碳原子都为碳原子都为碳原子都为碳原子都为不对称碳原子不对称碳原子不对称碳原子不对称碳原子,所以：所以：所以：所以：A.A.A.A.除甘氨酸外都具有旋光性除甘氨酸外都具有旋光性除甘氨酸外都具有旋光性除甘氨酸外都具有旋光性.除甘氨酸除甘氨酸除甘氨酸除甘氨酸 外，都具有外，都具有外，都具有外，都具有D-D-D-D-型型型型 和和和和L-L-L-L-型两种立体异型两种立体异型两种立体异型两种立体异 构体。构体。构体。构体。B.B.B.B.除胱氨酸和酪氨酸外，其余除胱氨酸和酪氨酸外，其余除胱氨酸和酪氨酸外，其余除胱氨酸和酪氨酸外，其余AAAAAAAA都能都能都能都能 溶于水。溶于水。溶于水。溶于水。8PPT课件9PPT课件三三.氨基酸的分类氨基酸的分类 AA and classificationAA and classification 基本氨基酸基本氨基酸基本氨基酸基本氨基酸:编码的蛋白质氨基酸编码的蛋白质氨基酸编码的蛋白质氨基酸编码的蛋白质氨基酸 20202020种种种种 修饰（稀有）氨基酸修饰（稀有）氨基酸修饰（稀有）氨基酸修饰（稀有）氨基酸：多肽合成后由基：多肽合成后由基：多肽合成后由基：多肽合成后由基 本本本本aaaaaaaa经酶促修饰而来。经酶促修饰而来。经酶促修饰而来。经酶促修饰而来。存在于生物体内但不存在于生物体内但不存在于生物体内但不存在于生物体内但不 组成蛋白质组成蛋白质组成蛋白质组成蛋白质 (约约约约150150150150种种种种)。蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质AAAAAAAA Pr-AAPr-AAPr-AAPr-AA非蛋白质非蛋白质非蛋白质非蛋白质AAAAAAAANon-Pr AANon-Pr AANon-Pr AANon-Pr AA10PPT课件（一）（一）（一）（一）.基本基本基本基本20202020种氨基酸按照种氨基酸按照种氨基酸按照种氨基酸按照 R R R R基的化学结构分类基的化学结构分类基的化学结构分类基的化学结构分类11PPT课件 1.1.脂肪脂肪族氨基酸族氨基酸 （1 1 1 1）.中性氨基酸：含一氨基一羧基中性氨基酸：含一氨基一羧基中性氨基酸：含一氨基一羧基中性氨基酸：含一氨基一羧基 Gly Ala Val LeuGly Ala Val LeuGly Ala Val LeuGly Ala Val Leu Ile Ile Ile Ile SerSerSerSer、Thr CysThr CysThr CysThr Cys、MetMetMetMet12PPT课件13PPT课件 含有羟基和硫的氨基酸含有羟基和硫的氨基酸 含羟基：含羟基：含羟基：含羟基：SerSer、ThrThr 含硫：含硫：含硫：含硫：CysCys、MetMet14PPT课件含羟基的氨基酸：含羟基的氨基酸：含羟基的氨基酸：含羟基的氨基酸：SerSerSerSer、ThrThrThrThr15PPT课件16PPT课件 SerSerSerSer的的的的-OH-OH-OH-OH（PKaPKaPKaPKa=15),=15),=15),=15),在生理条件下不解离在生理条件下不解离在生理条件下不解离在生理条件下不解离,但它是一个极性基团，能与其它基团形成但它是一个极性基团，能与其它基团形成但它是一个极性基团，能与其它基团形成但它是一个极性基团，能与其它基团形成 氢键氢键氢键氢键，具有重要的生理意义，常出现在，具有重要的生理意义，常出现在，具有重要的生理意义，常出现在，具有重要的生理意义，常出现在 大多数酶的活性中心。大多数酶的活性中心。大多数酶的活性中心。大多数酶的活性中心。ThrThrThrThr 中的中的中的中的-OH-OH-OH-OH是仲醇，具有是仲醇，具有是仲醇，具有是仲醇，具有亲水性亲水性亲水性亲水性。SerSerSerSer和和和和ThrThrThrThr的的的的-OH-OH-OH-OH往往与糖链相连，通过往往与糖链相连，通过往往与糖链相连，通过往往与糖链相连，通过O-O-O-O-糖苷键形成糖蛋白。糖苷键形成糖蛋白。糖苷键形成糖蛋白。糖苷键形成糖蛋白。17PPT课件CysCysCysCys的的的的R R R R中含中含中含中含巯基巯基巯基巯基-SH-SH-SH-SH,具有两个重要性质：具有两个重要性质：具有两个重要性质：具有两个重要性质：（1 1 1 1）在较高）在较高）在较高）在较高pHpHpHpH值条件，巯基离解。值条件，巯基离解。值条件，巯基离解。值条件，巯基离解。（2 2 2 2）两个）两个）两个）两个CysCysCysCys的巯基氧化生成二硫键，生的巯基氧化生成二硫键，生的巯基氧化生成二硫键，生的巯基氧化生成二硫键，生 成胱氨酸。成胱氨酸。成胱氨酸。成胱氨酸。CysCysCysCyss s s ss s s sCysCysCysCys 胱氨酸胱氨酸胱氨酸胱氨酸共价键共价键共价键共价键18PPT课件二硫键在蛋白质的结构中具有重要意义。二硫键在蛋白质的结构中具有重要意义。二硫键在蛋白质的结构中具有重要意义。二硫键在蛋白质的结构中具有重要意义。CysCysCysCys还常出现在酶的活性中心。还常出现在酶的活性中心。还常出现在酶的活性中心。还常出现在酶的活性中心。MetMetMetMet的的的的R R R R基中含有基中含有基中含有基中含有甲硫基甲硫基甲硫基甲硫基（-S-CH3-S-CH3-S-CH3-S-CH3），硫原），硫原），硫原），硫原 子有子有子有子有亲核性亲核性亲核性亲核性，易发生极化，因此，易发生极化，因此，易发生极化，因此，易发生极化，因此,在生物在生物在生物在生物合合合合成中是一种重要的甲基成中是一种重要的甲基成中是一种重要的甲基成中是一种重要的甲基供体供体供体供体。19PPT课件 （2 2 2 2）酸性氨基酸及其酰胺）酸性氨基酸及其酰胺）酸性氨基酸及其酰胺）酸性氨基酸及其酰胺:Asp Asp Asp Asp、GluGluGluGlu、GlnGlnGlnGln、AsnAsnAsnAsn20PPT课件 酸性氨基酸及其酰胺酸性氨基酸及其酰胺:Asp Asp、GluGlu、GlnGln、AsnAsn21PPT课件（3 3）.含碱性基团含碱性基团:His:His、Lys Lys、ArgArg22PPT课件 LysLysLysLys侧链氨基的侧链氨基的侧链氨基的侧链氨基的pKapKapKapKa为为为为10.5310.5310.5310.53，生理条件下，生理条件下，生理条件下，生理条件下，LysLysLysLys 侧链带有一个正电荷（侧链带有一个正电荷（侧链带有一个正电荷（侧链带有一个正电荷（NH3+NH3+NH3+NH3+）.ArgArgArgArg是碱性最强的氨基酸，侧链上的胍基是已是碱性最强的氨基酸，侧链上的胍基是已是碱性最强的氨基酸，侧链上的胍基是已是碱性最强的氨基酸，侧链上的胍基是已 知碱性最强的有机碱，知碱性最强的有机碱，知碱性最强的有机碱，知碱性最强的有机碱，pKapKapKapKa值为值为值为值为12.4812.4812.4812.48，生，生，生，生 理条件下完全质子化。理条件下完全质子化。理条件下完全质子化。理条件下完全质子化。HisHisHisHis含咪唑环，含咪唑环，含咪唑环，含咪唑环，它是它是它是它是20202020种氨基酸中侧链种氨基酸中侧链种氨基酸中侧链种氨基酸中侧链pKpKpKpK值最值最值最值最 接近生理接近生理接近生理接近生理pHpHpHpH值的一种，在接近中性值的一种，在接近中性值的一种，在接近中性值的一种，在接近中性pHpHpHpH时，时，时，时，可离解平衡。它是在生理可离解平衡。它是在生理可离解平衡。它是在生理可离解平衡。它是在生理pHpHpHpH条件下唯一具条件下唯一具条件下唯一具条件下唯一具 有缓冲能力的氨基酸。有缓冲能力的氨基酸。有缓冲能力的氨基酸。有缓冲能力的氨基酸。23PPT课件 (2 2).).芳香族氨基酸芳香族氨基酸：PhePhe、Tyr Tyr、TrpTrp苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸酪氨酸酪氨酸酪氨酸酪氨酸色氨酸色氨酸色氨酸色氨酸24PPT课件 这三种氨基酸在紫外区这三种氨基酸在紫外区这三种氨基酸在紫外区这三种氨基酸在紫外区280nm280nm280nm280nm处有特殊吸处有特殊吸处有特殊吸处有特殊吸收峰收峰收峰收峰,蛋白质的紫外吸收主要来自这三种蛋白质的紫外吸收主要来自这三种蛋白质的紫外吸收主要来自这三种蛋白质的紫外吸收主要来自这三种氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸,在在在在280nm280nm280nm280nm处处处处,三种氨基酸的紫外吸三种氨基酸的紫外吸三种氨基酸的紫外吸三种氨基酸的紫外吸收值收值收值收值 TrpTrpTrpTrpTyrTyrTyrTyrPhePhePhePhe Phe Phe Phe Phe疏水性最强。疏水性最强。疏水性最强。疏水性最强。TyrTyrTyrTyr的的的的-OH-OH-OH-OH磷酸化是一个十分普遍的调控磷酸化是一个十分普遍的调控磷酸化是一个十分普遍的调控磷酸化是一个十分普遍的调控机制，机制，机制，机制，TyrTyrTyrTyr在较高在较高在较高在较高pHpHpHpH值时，值时，值时，值时，酚羟基离解酚羟基离解酚羟基离解酚羟基离解。25PPT课件 (3(3).).杂环族氨基酸：杂环族氨基酸：ProPro（His)His)26PPT课件 ProProProPro的的的的-亚氨基是环的一部分，亚氨基是环的一部分，亚氨基是环的一部分，亚氨基是环的一部分，因此具有特殊的因此具有特殊的因此具有特殊的因此具有特殊的刚性结构刚性结构刚性结构刚性结构，一般，一般，一般，一般出现在两段出现在两段出现在两段出现在两段-螺旋之间的转角处，螺旋之间的转角处，螺旋之间的转角处，螺旋之间的转角处，ProProProPro残基所在的位置必然发生骨架残基所在的位置必然发生骨架残基所在的位置必然发生骨架残基所在的位置必然发生骨架方向的变化方向的变化方向的变化方向的变化.27PPT课件（二）二）二）二）按照按照按照按照R R R R基的极性性质基的极性性质基的极性性质基的极性性质(疏水性程度疏水性程度疏水性程度疏水性程度)分为：分为：分为：分为：28PPT课件1 1.非极性氨基酸非极性氨基酸 在维持蛋白质的三维结构中起着重要在维持蛋白质的三维结构中起着重要在维持蛋白质的三维结构中起着重要在维持蛋白质的三维结构中起着重要作用（蛋白质的疏水核心作用（蛋白质的疏水核心作用（蛋白质的疏水核心作用（蛋白质的疏水核心）29PPT课件非极性氨基酸非极性氨基酸30PPT课件 2 2.极性氨基酸极性氨基酸:这类氨基酸的侧链都能这类氨基酸的侧链都能这类氨基酸的侧链都能这类氨基酸的侧链都能与水形与水形与水形与水形 成氢键成氢键成氢键成氢键，因此很容易溶于水，因此很容易溶于水，因此很容易溶于水，因此很容易溶于水。31PPT课件（1 1 1 1）不带电荷的极性氨基酸不带电荷的极性氨基酸不带电荷的极性氨基酸不带电荷的极性氨基酸32PPT课件 （2 2）.带负电荷的带负电荷的AA(AA(酸性酸性AA)AA)33PPT课件 （3 3）.带正电何的带正电何的AA(AA(碱性碱性AA)AA)34PPT课件*胶原蛋白中的胶原蛋白中的胶原蛋白中的胶原蛋白中的LysLysLysLys侧链氧化时能形成侧链氧化时能形成侧链氧化时能形成侧链氧化时能形成很强的分子间很强的分子间很强的分子间很强的分子间(内内内内)交联。交联。交联。交联。*ArgArgArgArg的的的的胍基碱性很强胍基碱性很强胍基碱性很强胍基碱性很强，与，与，与，与NaOHNaOHNaOHNaOH相当。相当。相当。相当。*HisHisHisHis是一个弱碱，是天然的缓冲剂，是一个弱碱，是天然的缓冲剂，是一个弱碱，是天然的缓冲剂，是一个弱碱，是天然的缓冲剂，它往往存在于许多酶的活性中心。它往往存在于许多酶的活性中心。它往往存在于许多酶的活性中心。它往往存在于许多酶的活性中心。*非极性非极性非极性非极性AAAAAAAA一般形成蛋白质的疏水核心，一般形成蛋白质的疏水核心，一般形成蛋白质的疏水核心，一般形成蛋白质的疏水核心，带电荷的带电荷的带电荷的带电荷的AAAAAAAA和极性和极性和极性和极性AAAAAAAA位于表面。位于表面。位于表面。位于表面。酶的活性中心：酶的活性中心：酶的活性中心：酶的活性中心：HisHisHisHis、SerSerSerSer、CysCysCysCys35PPT课件（三）（三）.根据人体能否自身合成根据人体能否自身合成必需氨基酸必需氨基酸（定义）：（定义）：（定义）：（定义）：成年人：成年人：成年人：成年人：ThrThrThrThr、ValValValVal、LeuLeuLeuLeu、IleIleIleIle、PhePhePhePhe 、TrpTrpTrpTrp、LysLysLysLys、MetMetMetMet半必须氨基酸半必须氨基酸：婴儿期婴儿期婴儿期婴儿期ArgArgArgArg和和和和HisHisHisHis非必需氨基酸非必需氨基酸：其余其余其余其余36PPT课件（二）非编码的蛋白质氨基酸（二）非编码的蛋白质氨基酸:_修饰氨基酸修饰氨基酸 蛋白质合成后，由基本氨基酸修饰而来。蛋白质合成后，由基本氨基酸修饰而来。蛋白质合成后，由基本氨基酸修饰而来。蛋白质合成后，由基本氨基酸修饰而来。（1 1 1 1）4-4-4-4-羟脯氨酸羟脯氨酸羟脯氨酸羟脯氨酸 （2 2 2 2）5-5-5-5-羟赖氨酸羟赖氨酸羟赖氨酸羟赖氨酸 （3 3 3 3）6-N-6-N-6-N-6-N-甲基赖氨酸甲基赖氨酸甲基赖氨酸甲基赖氨酸 （4 4 4 4）-羧基谷氨酸羧基谷氨酸羧基谷氨酸羧基谷氨酸 （5 5 5 5）TyrTyrTyrTyr的衍生物的衍生物的衍生物的衍生物 37PPT课件38PPT课件（四四）非蛋白质氨基酸非蛋白质氨基酸:150 150 150 150多种多种多种多种，不组成蛋白质不组成蛋白质不组成蛋白质不组成蛋白质,但有生理功能但有生理功能但有生理功能但有生理功能.（1 1 1 1）L-L-L-L-型型型型 氨基酸的衍生物氨基酸的衍生物氨基酸的衍生物氨基酸的衍生物 （2 2 2 2）D-D-D-D-型氨基酸型氨基酸型氨基酸型氨基酸 （3 3 3 3）-、-、-氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸39PPT课件40PPT课件第二节第二节.氨基酸的重要理化性质氨基酸的重要理化性质 一一.一般物理性质一般物理性质 溶解性溶解性溶解性溶解性：在水中的溶解度差别很：在水中的溶解度差别很：在水中的溶解度差别很：在水中的溶解度差别很 大，溶解于稀酸或稀碱，大，溶解于稀酸或稀碱，大，溶解于稀酸或稀碱，大，溶解于稀酸或稀碱，不溶解于有机溶剂。不溶解于有机溶剂。不溶解于有机溶剂。不溶解于有机溶剂。熔点熔点熔点熔点：一般在一般在一般在一般在200200200200以上。以上。以上。以上。味感味感味感味感：其味随不同氨基酸有所其味随不同氨基酸有所其味随不同氨基酸有所其味随不同氨基酸有所 不同。不同。不同。不同。41PPT课件（一）（一）AA AA的光学活性和立体化学的光学活性和立体化学1 1 1 1、氨基酸的构型氨基酸的构型氨基酸的构型氨基酸的构型构型构型构型构型(configuration)：具有相同的分子：具有相同的分子：具有相同的分子：具有相同的分子式和结构式，但原子在空间的分布排式和结构式，但原子在空间的分布排式和结构式，但原子在空间的分布排式和结构式，但原子在空间的分布排列不同。列不同。列不同。列不同。构象构象构象构象(conformation)(conformation)(conformation)(conformation)：在化学结构：在化学结构：在化学结构：在化学结构和构型同的分子中，其原子由于单键和构型同的分子中，其原子由于单键和构型同的分子中，其原子由于单键和构型同的分子中，其原子由于单键的内旋转而在空间形成的不同的构象的内旋转而在空间形成的不同的构象的内旋转而在空间形成的不同的构象的内旋转而在空间形成的不同的构象体可以相互转化。体可以相互转化。体可以相互转化。体可以相互转化。42PPT课件43PPT课件44PPT课件 ThrThr和和和和IleIle有四种光学异构体有四种光学异构体有四种光学异构体有四种光学异构体分别是分别是分别是分别是D-D-D-D-、L-L-L-L-、D-D-D-D-别别别别-、L-L-L-L-别别别别-氨基酸。氨基酸。氨基酸。氨基酸。L-苏氨酸苏氨酸(L-threonine)D-苏氨酸苏氨酸(D-threonine)L-别别-苏氨酸苏氨酸(L-allo-threonine)D-D-别别-苏氨酸苏氨酸 (D-allo-threonine(D-allo-threonine45PPT课件2 2、氨基酸的旋光性氨基酸的旋光性 P143P143旋旋旋旋光光光光性性性性：除除除除甘甘甘甘氨氨氨氨酸酸酸酸外外外外，-氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸都都都都具具具具有有有有旋旋旋旋光光光光性性性性，能能能能使使使使偏偏偏偏振振振振光光光光平平平平面面面面向向向向左左左左或或或或向向向向右右右右旋旋旋旋转转转转，左左左左旋旋旋旋者者者者通通通通常常常常用用用用（-）表表表表示示示示，右旋者用（右旋者用（右旋者用（右旋者用（+）表示。）表示。）表示。）表示。光光光光学学学学异异异异构构构构体体体体：-氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸中中中中-碳碳碳碳原原原原子子子子是是是是一一一一个个个个不不不不对对对对称称称称碳碳碳碳原原原原子子子子，在在在在空空空空间间间间的的的的排排排排列列列列方式有两种方式：方式有两种方式：方式有两种方式：方式有两种方式：D D D D型和型和型和型和L L L L型。型。型。型。46PPT课件光学异构体光学异构体光学异构体光学异构体的的的的化学性质和物理性质化学性质和物理性质化学性质和物理性质化学性质和物理性质都是一样都是一样都是一样都是一样。并且，构型与旋光方向并且，构型与旋光方向并且，构型与旋光方向并且，构型与旋光方向没有直接对应关系。没有直接对应关系。没有直接对应关系。没有直接对应关系。氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸的的的的旋旋旋旋光光光光性性性性（符符符符号号号号和和和和大大大大小小小小）取取取取决决决决于于于于它它它它的的的的R R R R基基基基的的的的性性性性质质质质，并并并并与与与与溶溶溶溶液液液液的的的的PHPHPHPH值有关值有关值有关值有关。P144P144P144P144 图图图图3-163-163-163-1647PPT课件 比比旋旋光光度度 ：单单单单位位位位浓浓浓浓度度度度和和和和单单单单位位位位长长长长度度度度下下下下的旋光度。是旋光物质的特征物理常数。的旋光度。是旋光物质的特征物理常数。的旋光度。是旋光物质的特征物理常数。的旋光度。是旋光物质的特征物理常数。P P P P3 3 3 3表表表表3-43-43-43-4蛋白质中蛋白质中蛋白质中蛋白质中L L L L型氨基酸的比旋光度型氨基酸的比旋光度型氨基酸的比旋光度型氨基酸的比旋光度 消消旋旋作作用用 ：旋旋旋旋光光光光性性性性物物物物质质质质在在在在化化化化学学学学反反反反应应应应中中中中，只只只只要要要要其其其其不不不不对对对对称称称称碳碳碳碳原原原原子子子子经经经经过过过过对对对对称称称称状状状状态态态态的的的的中中中中间间间间阶阶阶阶段段段段，即即即即发发发发生生生生消消消消旋旋旋旋作作作作用用用用，并并并并转转转转变变变变为为为为D-D-D-D-型和型和型和型和L-L-L-L-型的等当量混合物，称型的等当量混合物，称型的等当量混合物，称型的等当量混合物，称消旋物消旋物消旋物消旋物。48PPT课件外消旋物外消旋物外消旋物外消旋物：D-D-D-D-型和型和型和型和L-L-L-L-型的等摩尔混合型的等摩尔混合型的等摩尔混合型的等摩尔混合物物物物内消旋物内消旋物内消旋物内消旋物：分子内消旋：分子内消旋：分子内消旋：分子内消旋 胱氨酸有三种立体异构体：胱氨酸有三种立体异构体：胱氨酸有三种立体异构体：胱氨酸有三种立体异构体：L-L-L-L-胱氨酸胱氨酸胱氨酸胱氨酸 D-D-D-D-胱氨酸胱氨酸胱氨酸胱氨酸 内消旋胱氨酸内消旋胱氨酸内消旋胱氨酸内消旋胱氨酸 49PPT课件50PPT课件（二）氨基酸的光谱性质（二）氨基酸的光谱性质可见光区：无吸收可见光区：无吸收可见光区：无吸收可见光区：无吸收远紫外和红外区：都吸收远紫外和红外区：都吸收远紫外和红外区：都吸收远紫外和红外区：都吸收近紫外区（近紫外区（近紫外区（近紫外区（200200200200400nm400nm400nm400nm）：）：）：）：Tyr/Trp/PheTyr/Trp/PheTyr/Trp/PheTyr/Trp/Phe 原因：原因：原因：原因：-C=C-C=C-C=C-C-C=C-C=C-C=C-C-C=C-C=C-C=C-C-C=C-C=C-C=C-C=C-=C-=C-=C-1 1、紫外吸收光谱、紫外吸收光谱51PPT课件52PPT课件酪氨酸的酪氨酸的酪氨酸的酪氨酸的 maxmaxmaxmax275nm275nm275nm275nm，275=1.4275=1.4275=1.4275=1.4101010103 3 3 3 苯丙氨酸的苯丙氨酸的苯丙氨酸的苯丙氨酸的 maxmaxmaxmax257nm257nm257nm257nm，257=2.0257=2.0257=2.0257=2.0101010102 2 2 2 色氨酸的色氨酸的色氨酸的色氨酸的 maxmaxmaxmax280nm280nm280nm280nm，280=5.6280=5.6280=5.6280=5.6101010103 3 3 3蛋白质含量测定蛋白质含量测定280nm53PPT课件54PPT课件、核磁共振波谱、核磁共振波谱55PPT课件二二.氨基酸的酸碱性质氨基酸的酸碱性质（P130P130P130P130）1.1.氨基酸氨基酸的兼性离子形式的兼性离子形式 1 1 1 1三种现象：三种现象：三种现象：三种现象：（1 1 1 1）晶体晶体晶体晶体熔熔熔熔点高点高点高点高 （2 2 2 2）不溶于非极性溶剂）不溶于非极性溶剂）不溶于非极性溶剂）不溶于非极性溶剂 （3 3 3 3）介电常数高）介电常数高）介电常数高）介电常数高56PPT课件22原因：原因：（1 1 1 1）-羧基羧基羧基羧基的的的的 pKpKpKpK1 1 1 1=2.0=2.0=2.0=2.0，当当当当pH3.5pH3.5pH3.5pH3.5，-COO-COO-COO-COO-存在。存在。存在。存在。-氨基氨基氨基氨基的的的的 pKpKpKpK2 2 2 2=9.4=9.4=9.4=9.4，当当当当pH8.0pH8.0pH8.0pH8.0时时时时，-NH-NH-NH-NH+3 3 3 3存存存存在在在在。3.5pH8.03.5pH8.03.5pH8.03.5pH pH pH pH pKa pKa pKa pKa 时，时，时，时，碱碱碱碱酸酸酸酸 平衡右移平衡右移平衡右移平衡右移 pH =pH =pH =pH =pKapKapKapKa 时，时，时，时，碱碱碱碱=酸酸酸酸 平衡平衡平衡平衡 pH pH pH pH 碱碱碱碱 平衡左移平衡左移平衡左移平衡左移（2 2 2 2）pKapKapKapKa 就是就是就是就是HA50%HA50%HA50%HA50%解离解离解离解离 碱碱碱碱=酸酸酸酸 时溶液的时溶液的时溶液的时溶液的 pHpHpHpH值，值，值，值，Ka Ka Ka Ka 就是此时溶液的就是此时溶液的就是此时溶液的就是此时溶液的H+H+H+H+。（3 3 3 3）当）当）当）当 碱碱碱碱=酸酸酸酸 时溶液的时溶液的时溶液的时溶液的pHpHpHpH值等于值等于值等于值等于pKapKapKapKa59PPT课件氨基酸在水溶液中既能起氨基酸在水溶液中既能起氨基酸在水溶液中既能起氨基酸在水溶液中既能起质子供体质子供体质子供体质子供体的作用的作用的作用的作用 又能起又能起又能起又能起质子受体质子受体质子受体质子受体的作用，因此是的作用，因此是的作用，因此是的作用，因此是两性电解质两性电解质两性电解质两性电解质。+H+H+H+H+60PPT课件61PPT课件GlyGly的两性解离和酸碱滴定曲线的两性解离和酸碱滴定曲线62PPT课件63PPT课件 终点：终点：终点：终点：100%100%100%100%Gly Gly Gly Gly+,+,+,+,净电荷：净电荷：净电荷：净电荷：+1+1+1+1 第一拐点：第一拐点：第一拐点：第一拐点：50%Gly+,50%Gly50%Gly+,50%Gly50%Gly+,50%Gly50%Gly+,50%Gly 平均净电荷平均净电荷平均净电荷平均净电荷 +0.5+0.5+0.5+0.5 pH=pK1+lgGly pH=pK1+lgGly pH=pK1+lgGly pH=pK1+lgGly/Gly+=pK1=2.34/Gly+=pK1=2.34/Gly+=pK1=2.34/Gly+=pK1=2.34 第二拐点：第二拐点：第二拐点：第二拐点：100%100%100%100%GlyGlyGlyGly 净电荷为净电荷为净电荷为净电荷为0,0,0,0,第三拐点：第三拐点：第三拐点：第三拐点：50%Gly50%Gly50%Gly50%Gly，50%Gly-50%Gly-50%Gly-50%Gly-净电荷：净电荷：净电荷：净电荷：-0.5-0.5-0.5-0.5 pH=pK2+lgGly/Gly pH=pK2+lgGly/Gly pH=pK2+lgGly/Gly pH=pK2+lgGly/Gly=pK2=9.6=pK2=9.6=pK2=9.6=pK2=9.6 终点：终点：终点：终点：100%Gly100%Gly100%Gly100%Gly-,-,-,-,净电荷：净电荷：净电荷：净电荷：-1-1-1-1 在在在在pH2.34pH2.34pH2.34pH2.34和和和和pH9.60pH9.60pH9.60pH9.60处，处，处，处，GlyGlyGlyGly具有缓冲能力。具有缓冲能力。具有缓冲能力。具有缓冲能力。64PPT课件 3.3.氨基酸的等电点氨基酸的等电点 (1)(1)氨基酸的等电点氨基酸的等电点氨基酸的等电点氨基酸的等电点:当溶液浓度为某一当溶液浓度为某一当溶液浓度为某一当溶液浓度为某一pHpHpHpH值时，氨基酸分值时，氨基酸分值时，氨基酸分值时，氨基酸分子中所含的子中所含的子中所含的子中所含的-NH3-NH3-NH3-NH3+和和和和-COO-COO-COO-COO-数目正好相等，数目正好相等，数目正好相等，数目正好相等，即净电荷为即净电荷为即净电荷为即净电荷为0 0 0 0。在电场中的氨基酸既不向。在电场中的氨基酸既不向。在电场中的氨基酸既不向。在电场中的氨基酸既不向正极也不向负极移动，此时溶液的正极也不向负极移动，此时溶液的正极也不向负极移动，此时溶液的正极也不向负极移动，此时溶液的pHpHpHpH值值值值即为氨基酸的等电点，简称即为氨基酸的等电点，简称即为氨基酸的等电点，简称即为氨基酸的等电点，简称pIpI。等电点时，氨基酸处于两性离子状态。等电点时，氨基酸处于两性离子状态。等电点时，氨基酸处于两性离子状态。等电点时，氨基酸处于两性离子状态。在某一试验条件下，等电点是氨基酸的在某一试验条件下，等电点是氨基酸的在某一试验条件下，等电点是氨基酸的在某一试验条件下，等电点是氨基酸的特征常数特征常数特征常数特征常数。65PPT课件（2 2）等电点的计算）等电点的计算 中性氨基酸：以中性氨基酸：以中性氨基酸：以中性氨基酸：以GlyGlyGlyGly为例为例为例为例 K1=GlyH+Gly+K2=Gly-H+GlypIpI时，时，Gly+=Gly-GlyH+K1=GlyK2H+H+2=K1K2pH=（pK1+pK2）/2pI=（pK1+pK2）/2pI=（2.34+9.60）/2=5.97Gly66PPT课件对多氨基和多羧基氨基酸的解离对多氨基和多羧基氨基酸的解离 解离原则：解离原则：先解离先解离先解离先解离a-COOH,a-COOH,a-COOH,a-COOH,随后其他随后其他随后其他随后其他-COOH;-COOH;-COOH;-COOH;然后解离然后解离然后解离然后解离a-NHa-NHa-NHa-NH3 3 3 3+，随后其他，随后其他，随后其他，随后其他a-NH3+a-NH3+a-NH3+a-NH3+pIpIpIpI等于两性离子两侧的等于两性离子两侧的等于两性离子两侧的等于两性离子两侧的pKpKpKpK值得算术平均值得算术平均值得算术平均值得算术平均值。值。值。值。67PPT课件酸性氨基酸，以酸性氨基酸，以AspAsp为例：为例：68PPT课件碱性氨基酸，以碱性氨基酸，以碱性氨基酸，以碱性氨基酸，以LysLysLysLys为例：为例：为例：为例：69PPT课件ApK1pK2pIpIpK3pK3pK2pK1加入的加入的OH-mL数数加入的加入的OH-mL数数pHpH一氨基二羧基一氨基二羧基AAAA的等电的等电点计算：点计算：pI=2pK1+pK2二氨基一羧基二氨基一羧基AAAA的等电的等电点计算：点计算：pI=2pK2+pK3谷氨酸（谷氨酸（A A）和赖氨酸（）和赖氨酸（B B）滴定曲线和等电点计算）滴定曲线和等电点计算70PPT课件71PPT课件72PPT课件中中中中性性性性氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸：pKpKpKpK1 1 1 1，为为为为羧羧羧羧基基基基的的的的解解解解离离离离常常常常数数数数，pKpKpKpK2 2 2 2，为为为为氨基的解离常数。氨基的解离常数。氨基的解离常数。氨基的解离常数。pIpI=(pK=(pK1 1，+pK+pK2 2，)/2)/2酸酸酸酸性性性性氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸：pKpKpKpK1 1 1 1，为为为为羧羧羧羧基基基基的的的的解解解解离离离离常常常常数数数数，pKpKpKpK2 2 2 2，为侧链羧基的解离常数。为侧链羧基的解离常数。为侧链羧基的解离常数。为侧链羧基的解离常数。pIpI=(pK=(pK1 1，+pK+pK2 2，)/2)/2碱碱碱碱性性性性氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸：pKpKpKpK2 2 2 2，为为为为氨氨氨氨基基基基的的的的解解解解离离离离常常常常数数数数，pKpKpKpK3 3 3 3，为侧链氨基的解离常数。为侧链氨基的解离常数。为侧链氨基的解离常数。为侧链氨基的解离常数。pIpI=(pK=(pK2 2，+pK+pK3 3，)/2)/2等电点与该离子浓度无关，只决定于两性离子等电点与该离子浓度无关，只决定于两性离子等电点与该离子浓度无关，只决定于两性离子等电点与该离子浓度无关，只决定于两性离子两侧的两侧的两侧的两侧的PkaPkaPkaPka值。值。值。值。73PPT课件氨基酸的两性解离性质及等电点（氨基酸的两性解离性质及等电点（氨基酸的两性解离性质及等电点（氨基酸的两性解离性质及等电点（pIpIpIpI）(pK1)pH=pI 净电荷净电荷净电荷净电荷=0=0=0=0 pH pI净电荷为负净电荷为负净电荷为负净电荷为负CHRCOOHNH3+CHRCOONH2CHRCOONH3+H+OH-+H+OH-(pK2)74PPT课件1.1.1.1.某氨基酸的等电点即为该氨基酸某氨基酸的等电点即为该氨基酸某氨基酸的等电点即为该氨基酸某氨基酸的等电点即为该氨基酸两性离子两性离子两性离子两性离子两边的两边的两边的两边的pKpKpKpK值和的一半。值和的一半。值和的一半。值和的一半。2.2.2.2.在氨基酸等电点以上任何在氨基酸等电点以上任何在氨基酸等电点以上任何在氨基酸等电点以上任何pHpHpHpH，AAAAAAAA带净的负带净的负带净的负带净的负电荷，在电场中向阳极移动；在氨基酸等电荷，在电场中向阳极移动；在氨基酸等电荷，在电场中向阳极移动；在氨基酸等电荷，在电场中向阳极移动；在氨基酸等电点以下任何电点以下任何电点以下任何电点以下任何pHpHpHpH，AAAAAAAA带净的正电荷，在电带净的正电荷，在电带净的正电荷，在电带净的正电荷，在电场中向阴极移动。场中向阴极移动。场中向阴极移动。场中向阴极移动。3.3.3.3.在一定在一定在一定在一定pHpHpHpH范围中，溶液的范围中，溶液的范围中，溶液的范围中，溶液的pHpHpHpH离离离离AAAAAAAA等电点愈等电点愈等电点愈等电点愈远，远，远，远，AAAAAAAA带净电荷愈多。带净电荷愈多。带净电荷愈多。带净电荷愈多。75PPT课件 实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离子形式，还有极少量的中性分子。氨基酸在等电点子形式，还有极少量的中性分子。氨基酸在等电点子形式，还有极少量的中性分子。氨基酸在等电点子形式，还有极少量的中性分子。氨基酸在等电点状态下，溶解度最小。状态下，溶解度最小。状态下，溶解度最小。状态下，溶解度最小。76PPT课件77PPT课件P133 P133 P133 P133 表表表表3-33-33-33-3，氨基酸的解离常数和等电点，氨基酸的解离常数和等电点，氨基酸的解离常数和等电点，氨基酸的解离常数和等电点氨基酸的氨基酸的氨基酸的氨基酸的-羧基羧基羧基羧基pKapKapKapKa在在在在1.8-2.71.8-2.71.8-2.71.8-2.7间，比典间，比典间，比典间，比典型羧基的型羧基的型羧基的型羧基的pKapKapKapKa（如乙酸（如乙酸（如乙酸（如乙酸pKapKapKapKa为为为为4.764.764.764.76）要小很）要小很）要小很）要小很多，并且，羧基的电离大于氨基。所以，多，并且，羧基的电离大于氨基。所以，多，并且，羧基的电离大于氨基。所以，多，并且，羧基的电离大于氨基。所以，一氨基一羧基的氨基酸的等电点都在一氨基一羧基的氨基酸的等电点都在一氨基一羧基的氨基酸的等电点都在一氨基一羧基的氨基酸的等电点都在pH6.0pH6.0pH6.0pH6.0左右。左右。左右。左右。表中只有表中只有表中只有表中只有HisHisHisHis的咪唑基侧链在生理条件下的咪唑基侧链在生理条件下的咪唑基侧链在生理条件下的咪唑基侧链在生理条件下不带电荷，在生理条件下，只有不带电荷，在生理条件下，只有不带电荷，在生理条件下，只有不带电荷，在生理条件下，只有HisHisHisHis有缓有缓有缓有缓冲能力。冲能力。冲能力。冲能力。pH=pKapH=pKapH=pKapH=pKa时，缓冲能力最大，等电点时时，缓冲能力最大，等电点时时，缓冲能力最大，等电点时时，缓冲能力最大，等电点时缓冲能力最小。缓冲能力最小。缓冲能力最小。缓冲能力最小。78PPT课件 三三.氨基酸的化学性质氨基酸的化学性质 P135P13579PPT课件（一）（一）-氨基参加的反应氨基参加的反应1.1.与亚硝酸反应与亚硝酸反应2.2.与酰化试剂反应与酰化试剂反应3.3.烃基化反应烃基化反应4.4.形成形成SchiffSchiffs s碱反碱反应应5.5.脱氨基反应脱氨基反应80PPT课件 NH2 OH R CH COOH+HNO2 R CH COOH+H2O+N2l Van Slyke 法测氨基氮（体积）的基础，法测氨基氮（体积）的基础，N2中的中的1/21/2为氨基氮。为氨基氮。l 含亚氨基的脯氨酸则不能与亚硝酸反应。含亚氨基的脯氨酸则不能与亚硝酸反应。氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定。氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定。1 1、与亚硝酸反应、与亚硝酸反应 81PPT课件 2 2 酰化反应酰化反应 氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸的的的的氨氨氨氨基基基基与与与与酰酰酰酰氯氯氯氯或或或或酸酸酸酸酐酐酐酐在在在在弱弱弱弱碱碱碱碱溶溶溶溶液液液液中中中中发发发发生生生生作作作作用用用用，氨氨氨氨基基基基被被被被酰酰酰酰基基基基化化化化。氨氨氨氨基中的氢被酰基所取代基中的氢被酰基所取代基中的氢被酰基所取代基中的氢被酰基所取代。例例例例如如如如与与与与酰酰酰酰化化化化试试试试剂剂剂剂丹丹丹丹磺磺磺磺酰酰酰酰氯氯氯氯（DNS-ClDNS-ClDNS-ClDNS-Cl，5 5 5 5二甲基氨基萘二甲基氨基萘二甲基氨基萘二甲基氨基萘-1-1-1-1-磺酰氯）磺酰氯）磺酰氯）磺酰氯）的反应的反应的反应的反应 82PPT课件83PPT课件丹丹丹丹磺磺磺磺酰酰酰酰氯氯氯氯常常常常用用用用于于于于多多多多肽肽肽肽链链链链N N N N末末末末端端端端氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸的的的的标标标标记记记记和微量氨基酸的定量测定。和微量氨基酸的定量测定。和微量氨基酸的定量测定。和微量氨基酸的定量测定。N N N N Gly Gly Gly GlyAlaAlaAlaAlaSerSerSerSerLeuLeuLeuLeuPhe Phe Phe Phe C C C C DNS DNS DNS DNSGlyGlyGlyGlyAlaAlaAlaAlaSerSerSerSerLeuLeuLeuLeuPhe Phe Phe Phe C C C C 水解水解水解水解 DNSDNSDNSDNSGlyGlyGlyGly、AlaAlaAlaAla、SerSerSerSer、LeuLeuLeuLeu、PhePhePhePhe DNS-AADNS-AADNS-AADNS-AA在紫外光激发后发黄色荧光在紫外光激发后发黄色荧光在紫外光激发后发黄色荧光在紫外光激发后发黄色荧光.此外，蛋白质和此外，蛋白质和此外，蛋白质和此外，蛋白质和多肽多肽多肽多肽的人工合成中用作的人工合成中用作的人工合成中用作的人工合成中用作N N N N末端末端末端末端-NH-NH-NH-NH2 2 2 2的保护剂。的保护剂。的保护剂。的保护剂。84PPT课件 苄氧甲酰氯苄氧甲酰氯苄氧甲酰氯苄氧甲酰氯 、叔丁氧甲酰氯、叔丁氧甲酰氯、叔丁氧甲酰氯、叔丁氧甲酰氯、对对对对-甲苯磺酰氯、邻苯二甲酸酐甲苯磺酰氯、邻苯二甲酸酐甲苯磺酰氯、邻苯二甲酸酐甲苯磺酰氯、邻苯二甲酸酐85PPT课件 3.3.烷基化反应烷基化反应 SangerSangerSangerSanger反应反应反应反应:与与与与2.42.42.42.4一二硝基氟苯（一二硝基氟苯（一二硝基氟苯（一二硝基氟苯（DNFBDNFBDNFBDNFB）的反应。）的反应。）的反应。）的反应。（R烃基）烃基）86PPT课件反应特点：反应特点：A.A.A.A.为为为为-NH2-NH2-NH2-NH2的反应。的反应。的反应。的反应。B.B.B.B.氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸-NH-NH-NH-NH2 2 2 2的一个的一个的一个的一个H H H H原子可被烃基取代原子可被烃基取代原子可被烃基取代原子可被烃基取代(卤代烃卤代烃卤代烃卤代烃)C.C.C.C.在在在在弱碱弱碱弱碱弱碱性条件下，与性条件下，与性条件下，与性条件下，与DNFBDNFBDNFBDNFB发生芳环取代，发生芳环取代，发生芳环取代，发生芳环取代，生成二硝基苯氨基酸（生成二硝基苯氨基酸（生成二硝基苯氨基酸（生成二硝基苯氨基酸（DNP-DNP-DNP-DNP-氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸）。）。）。）。应用：应用：应用：应用：分离得到的分离得到的分离得到的分离得到的DNP-DNP-DNP-DNP-氨基酸（氨基酸（氨基酸（氨基酸（黄色黄色黄色黄色），），），），层析法层析法层析法层析法鉴定。鉴定。鉴定。鉴定。87PPT课件 EdmanEdmanEdmanEdman反应反应反应反应：88PPT课件N=C=S +NCHCOOHHHRPITCNCNCHCOOHHHRSPTC-PTC-PTC-PTC-氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸NCHRSNCCOPTH-PTH-PTH-PTH-氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸pH8.3无水无水HF苯异硫氰酸酯苯异硫氰酸酯PITCPITC苯氨基硫甲酰衍生物苯氨基硫甲酰衍生物苯氨基硫甲酰衍生物苯氨基硫甲酰衍生物苯乙内硫脲衍生物苯乙内硫脲衍生物苯乙内硫脲衍生物苯乙内硫脲衍生物EdmanEdmanEdmanEdman降解法基础降解法基础降解法基础降解法基础89PPT课件+PITC弱碱中弱碱中弱碱中弱碱中(400 C)苯硫乙内酰脲苯硫乙内酰脲苯硫乙内酰脲苯硫乙内酰脲(PTH-AA)(PTH-AA)(PTH-AA)(PTH-AA)(无水氢氟酸中无水氢氟酸中)H+苯氨基硫甲酰氨基酸苯氨基硫甲酰氨基酸（PTC-PTC-氨基酸）氨基酸）（EdmanEdman反应）反应）90PPT课件反应特点：反应特点：A.A.A.A.氨基酸与氨基酸与氨基酸与氨基酸与苯异硫氰酸酯苯异硫氰酸酯苯异硫氰酸酯苯异硫氰酸酯(PITC)PITC)PITC)PITC)偶联，生成偶联，生成偶联，生成偶联，生成苯氨苯氨苯氨苯氨 基硫甲酰衍生物（基硫甲酰衍生物（基硫甲酰衍生物（基硫甲酰衍生物（PTC-AAPTC-AAPTC-AAPTC-AA），同时），同时），同时），同时PTC-PTC-PTC-PTC-氨基酸环氨基酸环氨基酸环氨基酸环化生成化生成化生成化生成苯乙内酰硫脲衍生物苯乙内酰硫脲衍生物苯乙内酰硫脲衍生物苯乙内酰硫脲衍生物（PTH-PTH-PTH-PTH-氨基酸）。氨基酸）。氨基酸）。氨基酸）。B.PTH-B.PTH-B.PTH-B.PTH-氨基酸（氨基酸（氨基酸（氨基酸（无色无色无色无色）可以用层析法分离鉴定可以用层析法分离鉴定可以用层析法分离鉴定可以用层析法分离鉴定。应用：应用：应用：应用：多肽、蛋白质序列分析多肽、蛋白质序列分析多肽、蛋白质序列分析多肽、蛋白质序列分析 多肽顺序自动分析仪，多肽顺序自动分析仪，多肽顺序自动分析仪，多肽顺序自动分析仪，灵敏度提高，能连续测定。灵敏度提高，能连续测定。灵敏度提高，能连续测定。灵敏度提高，能连续测定。一次可连续自动测定一次可连续自动测定一次可连续自动测定一次可连续自动测定60606060个个个个以上的氨基酸。以上的氨基酸。以上的氨基酸。以上的氨基酸。91PPT课件4 4、与甲醛反应、与甲醛反应92PPT课件93PPT课件94PPT课件 反应特点：反应特点：反应特点：反应特点：A.A.A.A.为为为为-NH2-NH2-NH2-NH2的反应的反应的反应的反应 B.B.B.B.在常温，中性条件，甲醛与在常温，中性条件，甲醛与在常温，中性条件，甲醛与在常温，中性条件，甲醛与-NH-NH-NH-NH2 2 2 2反应，反应，反应，反应，生成羟甲基衍生物，释放氢离子。生成羟甲基衍生物，释放氢离子。生成羟甲基衍生物，释放氢离子。生成羟甲基衍生物，释放氢离子。应用：应用：应用：应用：氨基酸定量分析氨基酸定量分析氨基酸定量分析氨基酸定量分析-甲醛滴定法甲醛滴定法甲醛滴定法甲醛滴定法（间接滴定）（间接滴定）（间接滴定）（间接滴定）为什么用为什么用为什么用为什么用甲醛滴定而不用酸碱直接滴定？甲醛滴定而不用酸碱直接滴定？甲醛滴定而不用酸碱直接滴定？甲醛滴定而不用酸碱直接滴定？95PPT课件 R R COOH R COOH R COO COO C=O+H C=O+H2 2N CH C=N CH N CH C=N CH H R H R H R H R醛醛 氨基酸氨基酸 SchiffSchiffs s碱碱-H20+H205 5.生成西