生物制品基础知识培训教学课件

生物制品基础知识培训11、战争满足了，或曾经满足过人的好斗的本能，但它同时还满足了人对掠夺，破坏以及残酷的纪律和专制力的欲望。查埃利奥特12、不应把纪律仅仅看成教育的手段。纪律是教育过程的结果，首先是学生集体表现在一切生活领域生产、日常生活、学校、文化等领域中努力的结果。马卡连柯(名言网)13、遵守纪律的风气的培养，只有领导者本身在这方面以身作则才能收到成效。马卡连柯14、劳动者的组织性、纪律性、坚毅精神以及同全世界劳动者的团结一致，是取得最后胜利的保证。列宁 摘自名言网15、机会是不守纪律的。雨果2 2、抗毒素及免疫血清、抗毒素及免疫血清 由特定抗原免疫动物所得由血浆或血清制成；由特定抗原免疫动物所得由血浆或血清制成；称抗毒素或免疫血清。称抗毒素或免疫血清。如破伤风抗毒素、抗狂犬病血清等，用于治如破伤风抗毒素、抗狂犬病血清等，用于治疗或被动免疫预防。疗或被动免疫预防。3 3、血液制品、血液制品由健康人的血浆或特异免疫人血浆分离、提由健康人的血浆或特异免疫人血浆分离、提纯或由重组技术制成的血浆蛋白组分纯或由重组技术制成的血浆蛋白组分或血细胞组分制品或血细胞组分制品,如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子子(天然或重组的天然或重组的)、红细胞浓缩物等、红细胞浓缩物等,用于用于诊断、治疗或被动免疫预防。诊断、治疗或被动免疫预防。4 4、细胞因子及重组产品、细胞因子及重组产品 由健康人血细胞增殖、分离、提纯或重组由健康人血细胞增殖、分离、提纯或重组技术制成的多肽类或蛋白质类制剂技术制成的多肽类或蛋白质类制剂,如干扰素、白细胞介素、集落刺激因子、如干扰素、白细胞介素、集落刺激因子、红细胞生成素等红细胞生成素等,用于治疗。用于治疗。5 5、诊断制品、诊断制品 （1 1）体外诊断制品）体外诊断制品:由特定抗原、抗体由特定抗原、抗体或有关生物物质制成的免疫诊断试剂或诊或有关生物物质制成的免疫诊断试剂或诊断试剂盒断试剂盒,如伤寒、副伤寒、变形杆菌诊断如伤寒、副伤寒、变形杆菌诊断菌液菌液,沙门氏菌属诊断血清沙门氏菌属诊断血清,等等,用于体外免用于体外免疫诊断疫诊断;（2 2）体内诊断制品）体内诊断制品:由变态反应由变态反应(超敏反应超敏反应)原或原或有关抗原材料制成的免疫诊断试剂有关抗原材料制成的免疫诊断试剂,用于皮内接种等。用于皮内接种等。6 6、其它制品、其它制品 由有关生物材料或特定方法制成由有关生物材料或特定方法制成,不属于上述不属于上述5 5类的类的其他生物制剂其他生物制剂,用于治疗或预防疾病。如治疗用型用于治疗或预防疾病。如治疗用型肉毒素制剂、微生态制剂和卡介菌多糖、核酸制剂肉毒素制剂、微生态制剂和卡介菌多糖、核酸制剂等。等。三、疫苗的定义和分类1.疫苗定义2.疫苗分类1、疫苗定义由特定细菌、病毒、立克次体、衣原体等微生物及寄生虫制成的，接种动物后能产生自动免疫和预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗，制剂的主要成分为微生物或寄生虫。2、分类按微生物分类1.细菌类疫苗2.病毒类疫苗3.寄生虫类疫苗按疫苗抗原的性质和制备工艺分类活疫苗p弱毒活疫苗p基因缺失疫苗：用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除构建的活疫苗 p基因工程活载体疫苗p病毒抗体复合疫苗：特异性高免血清与适当比例的相应病毒组成，其特点是可以延缓病毒释放，提高疫苗的安全性和免疫效果。活疫苗特点p可在体内繁殖p系统免疫反应和局部免疫反应p免疫力持久，产量高，成本低p有毒力增强和反祖危险p抗原干扰现象p保存条件苛刻死疫苗p灭活疫苗：由完整的病毒或细菌经灭活剂灭活后制成，即要使病原体充分死亡，丧失感染性或毒性，又要保留其免疫原性。p亚单位疫苗：是指将病原体经物理或化学方法处理，除去无效物质，提取其有效抗原部分制备的一类疫苗，经提取、纯化，通过化学合成，制成不同的亚单位疫苗。p基因工程重组亚单位疫苗：利用DNA重组技术，将编码病原微生物保护性的基因 导入原核或真核细胞，使其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原肽链，提取肽链加入佐剂制成。该类疫苗安全性好，副反应小（有害的反应原少），稳定性好，便于保存和运输，但研发、生产成本高，免疫原性较差，需多次免疫才能得到有效保护。死疫苗特点p不能在体内繁殖p有利于制备多价或多联疫苗p比较安全，不发生全身性副反应，无毒力反祖现象p受外界影响小，有利于保存运输p免疫剂量大，需多次免疫，成本高p只能诱导机体产生体液免疫p通常需要用佐剂或携带系统来增强其免疫效果举例说明活疫苗和灭活苗的区别猪瘟基因疫苗：包括DNA疫苗和RNA疫苗，是将编码某种抗原蛋白的基因置于真核表达元件的控制下，构成重组表达质粒DNA或RNA，将其直接注入动物体内，通过宿主细胞的转录翻译系统合成抗原蛋白，从而诱导宿主产生抗原蛋白的免疫应答。单价疫苗：利用同一种微生物（菌）毒株或同一种微生物中的单个血清型（菌）毒株的增殖培养物制备的疫苗。多价疫苗：利用同一种微生物（菌）毒株或同一种微生物中的多个血清型（菌）毒株的增殖培养物制备的疫苗多联疫苗：利用不同的微生物增殖培养物，按免疫学原理和方法组合而成的疫苗。接种动物后能获得相应疾病的免疫保护，一针多防，可减少劳动力和动物应激。按疫苗病原菌（毒）株来源分类同源疫苗：采用同种、同型或同源微生物制备，应用于同类动物免疫接种的疫苗。异源疫苗：采用不同种微生物的（菌）毒株制备的疫苗，接种动物后能使其获得对疫苗中未含有的病原体产生抵抗力，如犬在接种麻疹疫苗后，能产生对犬瘟热的抵抗力。或采用同一种中一种型微生物的（菌）毒株制备的疫苗，接种动物后能使其获得对异型病原体的抵抗力。四、疫苗生产工艺流程 菌（毒）种 培养物（培养基、动 物、禽胚或细胞等）收获抗原（培养液、含毒组织、胚液或细胞液等）配苗 分装 冻干成活疫苗或灭活后制成灭 活疫苗。细菌疫苗的制造工艺流程蛋白胨、肉浸液等原料配制、灭菌菌种生产用种子生产用种子培养菌液菌液菌苗原液配苗分装冻干冻干、扎盖帖签活疫苗原料佐剂佐剂灭活菌液配苗乳化乳化分装、扎盖、帖签灭活疫苗灭活灭活检验配制、灭菌保护剂保护剂原料配制、灭菌培养基培养基病毒性细胞疫苗的制造工艺流程健康动物（或胚胎）组织原料细胞悬液细胞悬液生长细胞病毒液病毒液配苗分装冻干冻干、扎盖帖签活疫苗基础种毒生产用种毒生产用种毒原料保护剂保护剂配制灭菌细胞培养液传代细胞传代细胞灭活病毒液配苗（混匀、乳化乳化）分扎盖帖签装灭活疫苗检验原料佐剂佐剂配制灭菌灭活灭活检验配制培养收获病毒性组织疫苗的制造工艺流程感染动物或胚胎分装、扎盖、贴签健康动物或SPF鸡胚等健康动物或健康动物或SPFSPF鸡胚等鸡胚等动物或SPF鸡胚等基础种毒生产用种毒生产用种毒收获感染组织或胚液收获感染组织或胚液纯化配制成含毒悬液配苗分装冻干冻干活疫苗保护剂保护剂原料配制检验灭活病毒液配苗、乳化乳化灭活疫苗原料佐剂配制灭活灭活检验病毒类疫苗的制造方法病毒类疫苗的制造方法1毒种的选择与减毒毒种的选择与减毒毒株须具备的条件：（1）持有特定的抗原性；（2）有典型的形态和感染特定组织的特性，并能保持其生物学特性；（3）易在特定组织中大量繁殖；（4）不产生神经毒素或能引起机体损害的其它毒素；（5）如制备活疫苗，繁殖过程中无恢复原致病性的现象；（6）未被其它病毒污染。2病毒的繁殖病毒的繁殖（1）活体动物培养（2）鸡胚培养（3）组织培养（4）细胞培养3疫苗的灭活疫苗的灭活用甲醛或酚溶液灭活。动物组织对灭活效果有影响；灭活时间要合适。5冻干冻干的疫苗充氮或真空密封保存。4疫苗纯化疫苗纯化主要方法：层析技术与沉淀、离心等。层析系统都由两个相组成：一是固定相，另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组分的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量比）不同，且随流动相向前移动，各组分不断地在两相中进行再分配。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组分，从而达到将各组分分离的目的。病毒性病毒性细胞培养细胞培养疫苗的制备疫苗的制备流程：流程：种毒与毒种 营养液配制与细胞制备 接毒与收获配苗工序工序1 1 种毒与毒种种毒与毒种种毒由国家指定的菌、毒种保藏部门鉴定分发，多为冻干品。按规定在细胞中继代培养后用作毒种。继代培养控制在一定代数以内。工序工序2 2 营养液配制与细胞制备营养液配制与细胞制备营养液通常分为细胞培养用的生长液和病毒增殖用的维持液，两者不同的是生长液血清含量为520，维持液血清含量仅有05。不同细胞需要不同的营养成分，根据需要选择合适的营养液。常用的营养液有乳汉液、MEM、DMEM等，只需溶解后经除菌过滤即可使用。工序工序3 3 接毒与收获接毒与收获病毒接种可与细胞同步（分装同时或分装不久后接种病毒）或异步（细胞形成单层后接种病毒）。待出现70%80%以上细胞病变时即可收获。收获时可将培养瓶反复冻融后收取；也可加EDTA-胰酶液消化分散收获。收获的细胞毒液经无菌检验、毒价测定合格后，供配苗用。工序工序4 4 配苗配苗灭活疫苗和冻干苗的配制方法见禽胚培养疫苗。疫苗制造及检验规程任何一种疫苗都有其制造及检验规程，它是国家法定标准。疫苗的生产必须严格按规程规定的方法进行生产和检验，若要改变方法，则要提供研究材料证明是可行的，并报农业部评审批准，形成新规程才能进行生产。规程来源p中华人民共和国生物制品规程（常规疫苗）p转让单位五、疫苗质量控制及检定的要求五、疫苗质量控制及检定的要求（一）生产过程中质量监控标准的建立及要求在生产工艺的各个环节和步骤中的产品均应建立相应的监控标准，以便后续工艺的进行,保证产品的质量、工艺的稳定性。（二）疫苗产品的质量检定与要求 1外观检查：根据样品的特征建立外观的质量标准。2pH值检测：可根据一般生物制品的要求建立标准，一般为7.20.5。3纯度：主要用于评价纯化制品中含有有效成分的量和杂质的最低限量，制定相应标准，通常可测定有效抗原在疫苗中的绝对值或测定主要杂质的量推算有效抗原在疫苗中的相对值。4宿主细胞 DNA和蛋白残留量检测：采用传代细胞生产疫苗，应限制疫苗中的宿主细胞DNA和蛋白残留量，进行方法研究时应建立相应的标准品，并对检测试剂的敏感性和特异性进行验证。疫苗中残余宿主细胞DNA及蛋白残留量可参考现行版中国药典的相关要求。5.无菌检查：应符合现行版中国药典的相关要求。6热原或细菌内毒素检查：可参照现行版中国药典的相关要求进行；也可以用其它方法检测疫苗中的热原物质。7抗生素检测：预防用疫苗在生产过程中不得添加青霉素或其他内酰氨类抗生素；如在生产过程中添加除上述以外的其他抗生素，应建立相应的检测方法并规定抗生素残留量的要求。8灭活效果的验证：由于制备疫苗的病原体一般均对人类致病，因此应建立有效的灭活方法对该制品中的病原体进行灭活，并应对灭活效果进行验证；在成品检定中应建立灭活剂残留量检测的方法和限度标准。9异常毒性检查：应符合现行版中国药典的相关要求。10稳定性试验：是指疫苗在常规保存温度下的稳定性试验。由于稳定性试验的结果直接与制品的效期有关，且试验观察时间较长，因此应在生产工艺确定后尽早留样进行，定期取样测定制品效力和其他相关的质量指标；11效力试验（生物效价）：由于用于预防的疫苗是通过机体的免疫应答反应发生作用的，因此应评价其体液免疫和细胞免疫的生物效价。在评价体液免疫效价时，应选择实验动物的品系，建立检测动物血清抗体的诊断试剂，并对该类试剂进行验证，可以计算小鼠ED50以及抗体产生的滴度12佐剂的质量评价：如最终制品含有佐剂，则应建立佐剂含量以及与之结合率的检测方法，并制定相应质量标准。13疫苗标准品或参考品的研究：对于一种新疫苗而言，建立检测疫苗的效力、免疫原性或毒性用标准品或参考品对判断验室研究阶段与批量投产后的疫苗质量是否一致以及临床试验的评价是非常重要的。一些基本概念外毒素指某些细胞生长繁殖过程中分泌到菌体外的一种代谢产物。类毒素是细菌的外毒素经甲醛处理后，失去毒性而仍保留其免疫原性，能刺激机体产生保护性免疫的制剂。内毒素是革兰氏阴性菌的菌体中存在的毒性物质的总称。（三）我们公司疫苗要检验哪些项目？1、病毒类疫苗a 毒种：病毒含量、安全性、纯净、毒种保存、毒种继代；b 成品：性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、鉴别检验、安全检验、效力检验、剩余水份测定、真空度测定。2.细菌类疫苗a 菌种：形态和生化特性、培养特性、血清学特性、特异性、安全性、免疫原性、毒种继代、纯粹检验、菌种保存；b 成品：性状、纯粹检验、活菌计数、安全检验、剩余水份测定、真空度测定、贮藏与有效期、规格。3.灭活苗除了上述外，再加个灭活剂含量测定。六、厂房、设施和仪器设备GMP证书是疫苗生产的准入证，疫苗生产必需拥有与生产工艺相符合的生产线 GMP 生产车间设计要求p功能区：抗原制备区、成品生产区、洗涤区、办公区。各区域和功能间以洁净走廊相连，严格按人流物流分开原则进行设计。p洁净度：按各功能间洁净度、压力、压差要求设计施工。有10万级区、万级区和局部百级区。p六大系统：供电、供水、供汽、污水处理、净化、监控。检验设施p质检室p检验动物舍（应配备有符合各类实验动物级别饲养设施）仓储设施p原辅材料库p半成品库p成品库灭菌设备：高压蒸气灭菌柜、干热箱等；净化设备：净化机组、无菌室、超净工作台等；微生物培养设施设备：温室、孵化器、细胞培养转瓶机、各种罐体、生化培养箱等；乳化设备：各种罐体、高压匀浆机等；冻干设备：冻干机；灌装设备：洗烘连动线、自动灌装加塞联动机；包装设备：扎盖机、帖标机；冷藏冷冻设施设备：冷库、冷柜、液氮罐等；污水废弃物处理设施设备：灭菌柜、消毒罐、污水处理站；检验仪器设施设备：分光光度计,显微镜，分析天平等。谢谢大家谢谢你的阅读v知识就是财富v丰富你的人生71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。康德72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。西塞罗73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。伏尔泰74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。屈原75、内外相应，言行相称。韩非