海医第10章肠杆菌科ppt课件

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主讲人:主讲人:中中 华华 医医 学学 检检 验验 全全 书书 主主 编编 北华大学临床微生物学北华大学临床微生物学 教教 授授 李影林李影林 2010年年10月月海医第10章肠杆菌科1主讲人:第10章肠杆菌科海医第10章肠杆菌科1 一、种类一、种类肠杆菌科细菌目前已有44个属170多个种。临床上常见的有 埃希菌属埃希菌属(Escherichia)沙门菌属沙门菌属(Salmonella)志贺菌属志贺菌属(Shigella)耶尔森菌属(耶尔森菌属(Yersinia)枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属(Citrobacter)克雷伯菌属克雷伯菌属(Klebsiella)肠杆菌属、多源菌属、哈夫尼亚属肠杆菌属、多源菌属、哈夫尼亚属 沙雷菌属沙雷菌属(Serratia)变形杆菌属、普罗菲登菌属、摩根菌属变形杆菌属、普罗菲登菌属、摩根菌属 肠杆菌科中的其他菌属肠杆菌科中的其他菌属海医第10章肠杆菌科2概述埃希菌属(Escherichia)海医第10章肠杆菌 第一节第一节 埃希菌属埃希菌属 (Escherichia)(E.coli)(E.fergusonii)(E.hermannii)(E.vulneris)(E.blattae)不脱胺/凝聚埃希菌。(E.abecarboxylata/agglomeransE.abecarboxylata/agglomerans)代表菌:大肠埃希菌(Escherichia coli)海医第10章肠杆菌科3第一节埃希菌属(E学习大肠埃希菌有何意义学习大肠埃希菌有何意义?1.大肠埃希菌为肠道正常菌群成员。大肠埃希菌为肠道正常菌群成员。2.又为条件致病菌又为条件致病菌,引起肠道外感染。引起肠道外感染。3.一些血清型具有致病性。一些血清型具有致病性。4.环境卫生学和食品卫生学常用作粪便污染的指标。环境卫生学和食品卫生学常用作粪便污染的指标。5.用于基因工程研究。用于基因工程研究。海医第10章肠杆菌科4学习大肠埃希菌有何意义?1.大肠埃希菌为肠道正常菌群成员。海 一、生物学性状一、生物学性状(一)形态与染色(一)形态与染色1.G-两端钝圆的中等两端钝圆的中等 大小的短杆菌。大小的短杆菌。2.周鞭毛,无芽胞,电镜周鞭毛,无芽胞,电镜 观察有周身菌毛观察有周身菌毛。菌菌毛毛:普普通通菌菌毛毛、性性菌毛菌毛 3.某些菌株有包膜(某些菌株有包膜(K)。4.培培养养初初期期或或分分泌泌物物中中可可形成球形形成球形。海医第10章肠杆菌科5一、生物学性状(一)形态与染色海医第11.对营养要求不高,自身合成能力很强对营养要求不高,自身合成能力很强。2.兼兼性性厌厌O2 1545均均可可发发育育,最最适适温温度度37,最适,最适pH7.47.6。3.在在普普通通琼琼脂脂上上可可形形成成光光滑滑、湿湿润润、灰灰白白色色半半透透明明、凸凸起起、边边缘缘整整齐齐中中等等大大小小(23mm)的的菌落。菌落。4.在在血血平平板板上上生生长长更更佳佳,某某些些菌菌株株(溶溶血血性性菌菌株株)可产生可产生溶血。溶血。(二)培养特点(二)培养特点海医第10章肠杆菌科6(二)培养特点海医第10章肠杆菌科6(1)SSA指指示示剂剂为为中中性性红红,分分解解乳乳糖糖产产酸酸的的细细菌菌(大肠埃希菌)呈红色菌落(大肠埃希菌)呈红色菌落(2)中国蓝)中国蓝 大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大而浑浊的蓝色菌落,大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大而浑浊的蓝色菌落,其他不分解乳糖的肠道菌为透明淡红色菌落。其他不分解乳糖的肠道菌为透明淡红色菌落。5.在肠道选择性培养基上,因能分解乳糖产酸,在肠道选择性培养基上,因能分解乳糖产酸,使指示剂变色形成有色菌落。使指示剂变色形成有色菌落。海医第10章肠杆菌科7大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大而浑浊的蓝色菌落,5.在海医第10章肠杆菌科8海医第10章肠杆菌科8(三)生化反应(三)生化反应 1.可可分分解解多多种种糖糖(醇醇)类类 葡、乳、麦、甘葡、乳、麦、甘对对蔗蔗糖糖、卫卫矛矛醇醇、棉棉子子糖糖、鼠李糖则因菌株而异。鼠李糖则因菌株而异。2.IMVC为为+-。3.尿尿素素酶酶、苯苯丙丙氨氨酸酸、丙丙二酸盐二酸盐-。4.克氏双糖铁克氏双糖铁/海医第10章肠杆菌科9(三)生化反应1.可分解多种糖(醇)类葡、乳、麦、甘 I M V C I M V C +-+海医第10章肠杆菌科10IMVC (四四)Ag构造复杂构造复杂主要有主要有O、H、K三种三种Ag1.O-Ag 本本质质是是细细菌菌细细胞胞壁壁的的成成分分,其其化化学学组组成成是脂多糖是脂多糖组成组成其分子由其分子由3部分组成:部分组成:海医第10章肠杆菌科11(四)Ag构 2.H-Ag本质本质其化学组成为鞭毛蛋白其化学组成为鞭毛蛋白性质性质不耐热不耐热其其特特异异性性取取决决于于多多肽肽链链排排列列顺顺序序和和空间构型空间构型 海医第10章肠杆菌科122.H-Ag海医第1 3.K-Ag本质本质化学成分是多糖化学成分是多糖性质性质 细菌的种类不同,其名称也不同细菌的种类不同,其名称也不同 E.coliK-Ag S.typhi-不耐热的作用与相应故可阻断周围因其包绕.bAbAgO,AgO.a 区别点区别点 L A B破坏其本身的可凝集性破坏其本身的可凝集性 1001h 1202.5h 100 1h破坏其抑制破坏其抑制O血清的凝集血清的凝集 1001h 1202.5h 100 1h与抗体结合力的破坏与抗体结合力的破坏 1001h 1212.5h不破坏不破坏 100 2.5h不破坏不破坏抗原性破坏抗原性破坏 1001h 1202h 100 1h本质本质 菌毛抗原菌毛抗原 荚膜荚膜 荚膜抗原荚膜抗原表示法:上述表示法:上述3种抗原均用阿拉伯数字表示种抗原均用阿拉伯数字表示 其型别按其型别按O:K:H 例如:例如:O111:K58:H2 简写:简写:O111:58:2 O86:B7:H3简写:简写:O86:7:3表示法:上述表示法:上述3种抗原均用阿拉伯数字表示种抗原均用阿拉伯数字表示 其型别按其型别按O:K:H 例如:例如:O111:K58:H2 简写:简写:O111:58:2 O86:B7:H3简写:简写:O86:7:3Vi Ag海医第10章肠杆菌科133.(五)抵抗力(五)抵抗力不强不强1.10g/L石炭酸石炭酸1530min被杀死被杀死;2.加热加热6010min即死即死;3.对酸敏感对酸敏感海医第10章肠杆菌科14(五)抵抗力不强1.10g/L石炭酸1530min被杀死;二、致病性(一一)致病物质致病物质1.黏附素黏附素 使细菌紧密黏附于肠道泌尿道细胞上使细菌紧密黏附于肠道泌尿道细胞上,避免尿液避免尿液的冲刷和肠蠕动排除。的冲刷和肠蠕动排除。特点特点:具有高度的特异性具有高度的特异性 定植抗原定植抗原、(CFA/、CFA/、CFA/)集聚黏附菌毛集聚黏附菌毛和和 (AAF/、AAF/)束形成菌毛束形成菌毛(bundle forming pili,Bfp)种类种类 紧密黏附素紧密黏附素(intimin)P菌毛菌毛 侵袭质粒抗原侵袭质粒抗原(invasion plasmid antigen,Ipa)蛋白蛋白 Dr菌毛菌毛海医第10章肠杆菌科15二、致病性(一)致病物质(1)志贺毒素志贺毒素和和(Shiga toxins,Stx-,Stx-)(2)耐热肠毒素)耐热肠毒素a和和b(heat stable enterotoxin,STa,STb)(3)不耐热肠毒素不耐热肠毒素和和 (heat labile enterotoxin,LT-,LT-)(4)溶血素溶血素A2.外毒素外毒素 海医第10章肠杆菌科16(1)志贺毒素和(Shigatoxins,Stx-(1)志贺毒素志贺毒素和和 (Shiga toxins,Stx-,Stx-)产生菌株及作用产生菌株及作用 肠出血性大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)可表可表达达志贺毒素志贺毒素,引起上皮细胞微绒毛的破坏。引起上皮细胞微绒毛的破坏。性质性质 Stx-与志贺菌产生的志贺毒素基本相同。与志贺菌产生的志贺毒素基本相同。Stx-则有则有60%的同源。的同源。两型毒素均由溶原性噬菌体介导。两型毒素均由溶原性噬菌体介导。海医第10章肠杆菌科17海医第10章肠杆结构及作用结构及作用A亚单位亚单位可裂解可裂解60S核糖体亚单核糖体亚单位的位的28SrRNA阻止与氨酰阻止与氨酰tRNA的结合的结合,终止蛋白质合成。终止蛋白质合成。Stx由由1个个A亚单位和亚单位和5个个B亚单位成。亚单位成。B亚单位亚单位与宿主细胞特异性糖脂受与宿主细胞特异性糖脂受体结合体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体高浓度的糖脂受体)海医第10章肠杆菌科18结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA作用机制作用机制A.绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对增加。增加。B.溶血性贫血的尿毒综合征溶血性贫血的尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)在产生志贺毒素在产生志贺毒素(Stx-)的的 EHEC中较多中较多,因因Stx-能选择性破坏肾小球内皮细能选择性破坏肾小球内皮细胞胞,引起肾小球滤过减少和急性肾功能衰竭。引起肾小球滤过减少和急性肾功能衰竭。C.志贺毒素志贺毒素(Stx)还能刺激炎症细胞因子还能刺激炎症细胞因子(肿瘤坏死肿瘤坏死因子因子-,白细胞介素白细胞介素-6)的表达。的表达。D.还可加强糖脂受体的表达。还可加强糖脂受体的表达。海医第10章肠杆菌科19作用机制A.绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对增加产生菌株及作用产生菌株及作用肠产毒素性大肠埃希菌肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)产生产生耐热耐热肠毒素由质粒编码肠毒素由质粒编码。STb与人类疾病无关与人类疾病无关。STa 的性质的性质:A.低分子量多肽低分子量多肽;B热稳定热稳定(10020min不失活不失活)C.免疫原性差。免疫原性差。STa的作用机制的作用机制:与与LT-不同。是通过激活肠黏膜细胞的鸟苷环化酶不同。是通过激活肠黏膜细胞的鸟苷环化酶使使cGMP水平水平引起腹泻,细菌产生肠毒素的能力与引起腹泻,细菌产生肠毒素的能力与 两种两种Plasmid有关。有关。应当指出的是应当指出的是:STa阳性菌株同时产生阳性菌株同时产生LT,具有更强的致病性。具有更强的致病性。(2)耐热肠毒素)耐热肠毒素a和和b(heat stable enterotoxin,STa,STb)海医第10章肠杆菌科20产生菌株及作用(2)耐热肠毒素a和b海医第10章肠杆菌科2 (3)不耐热肠毒素不耐热肠毒素和和 (heat labile enterotoxin,LT-,LT-)产生菌株及作用产生菌株及作用肠产毒素性大肠埃希菌肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)产生产生耐热耐热肠毒素由质粒编码肠毒素由质粒编码。LT-与人类疾病无关与人类疾病无关LT-是引起人类胃肠炎的致病物质是引起人类胃肠炎的致病物质,在结构和功能上与霍乱弧菌在结构和功能上与霍乱弧菌产产 生的肠毒素密切相关生的肠毒素密切相关。特点特点:不耐热不耐热 结构结构:A亚单位亚单位(毒素的活性部位毒素的活性部位)B亚单位亚单位与肠黏膜上皮细胞与肠黏膜上皮细胞表面的表面的GM1神经节苷脂神经节苷脂结合后结合后,使使A亚单位穿过亚单位穿过细胞膜与腺苷环化酶作用细胞膜与腺苷环化酶作用海医第10章肠杆菌科21(3)不耐热肠毒素和A亚单位(毒素的 LT-小肠上皮小肠上皮C的腺苷环化的腺苷环化E 刺激前列腺素刺激前列腺素 的释放和炎症因子的释放和炎症因子 的产生的产生ATPcAMP 促进肠粘膜分泌功能促进肠粘膜分泌功能 进一步导致水进一步导致水 分的丧失分的丧失 引起腹泻引起腹泻致病作用致病作用海医第10章肠杆菌科22致病作用海医第10章肠杆菌科22 (4)溶血素溶血素A在尿路致病性大肠埃希菌所致疾病中有在尿路致病性大肠埃希菌所致疾病中有重要作用重要作用。海医第10章肠杆菌科23海医第10章肠杆菌科233.侵袭力侵袭力(1)K-Ag抗吞噬有抵抗抗体和补体抗吞噬有抵抗抗体和补体(2)菌毛)菌毛帮助细菌粘附于粘膜表面。帮助细菌粘附于粘膜表面。4.内毒素内毒素 5.型分泌系统型分泌系统是一种向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效是一种向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统。应系统。海医第10章肠杆菌科243.侵袭力海医第10章肠杆菌科24 (二)所致疾病(二)所致疾病(一一)1.肠外感染肠外感染(1)尿尿路路感感染染常常见见的的有有O1、O2、O6、O7、O11、O25、O75,这这些些大大肠肠埃埃希希菌菌具具有有K-Ag(抗抗吞吞噬噬)和和菌菌毛毛(粘粘附附泌泌尿道抗冲洗)。尿道抗冲洗)。(2)败血症)败血症如烧伤引起如烧伤引起G-败血症败血症(3)胆胆囊囊炎炎、肺肺炎炎以以及及新新生生儿儿或或婴婴幼幼儿儿脑脑膜炎。膜炎。海医第10章肠杆菌科25(二)所致疾病(一)1.肠外感染海(二)所致疾病(二)所致疾病(二二)2.胃肠炎胃肠炎(1)产毒素大肠埃希菌)产毒素大肠埃希菌(ETEC)引起婴幼儿及旅游者腹泻。引起婴幼儿及旅游者腹泻。(2)致病性大肠埃希菌)致病性大肠埃希菌(EPEC)主要引起婴儿腹泻。主要引起婴儿腹泻。(3)侵袭性大肠埃希菌)侵袭性大肠埃希菌(EIEC)引起较大儿童和成年人腹泻,引起较大儿童和成年人腹泻,有时可形成暴发性流行。有时可形成暴发性流行。(4)肠出血性大肠埃希菌)肠出血性大肠埃希菌(EHEC):由:由O157:H7引起的腹泻,引起的腹泻,有有27发展成溶血性尿毒综合征,出现溶血性贫血,血发展成溶血性尿毒综合征,出现溶血性贫血,血小板减少性紫癜和急性肾衰竭。小板减少性紫癜和急性肾衰竭。(5)肠凝聚性大肠埃希菌)肠凝聚性大肠埃希菌(EAEC):成人慢性腹泻,儿童急性:成人慢性腹泻,儿童急性腹泻。腹泻。海医第10章肠杆菌科26(二)所致疾病(二)2.胃肠炎海医第10章肠杆菌科26 三、微生物学检查法三、微生物学检查法(一)肠外感染的细菌学检验(一)肠外感染的细菌学检验主要指普通大肠埃希菌主要指普通大肠埃希菌1.标本的采集标本的采集 视疾病种类不同而异视疾病种类不同而异呼吸系呼吸系痰痰烧伤及化脓感染烧伤及化脓感染脓汁及分泌物脓汁及分泌物尿路感染尿路感染尿液尿液菌血症(败血症)菌血症(败血症)血液血液N症状症状脑脊液脑脊液胆囊炎胆囊炎胆汁胆汁卫生细菌学卫生细菌学水等水等海医第10章肠杆菌科27三、微生物学检查法(一)肠外感染的细菌学检验海2.2.检验方法检验方法(1)(1)涂片染色检查法涂片染色检查法除血液标本外除血液标本外,均作均作。(2)(2)分离培养分离培养血平板血平板、SSA、MAC海医第10章肠杆菌科282.检验方法海医第10章肠杆菌科28(3)鉴定鉴定(1)初步鉴定)初步鉴定 形态染色特点形态染色特点菌落特征(菌落特征(EMB、中国蓝、麦康凯、中国蓝、麦康凯)KIA A.A+-生化反应生化反应初步鉴定为大肠埃希菌初步鉴定为大肠埃希菌 硝酸盐还原+氧化触E+-E、IMVC+-MIU+-海医第10章肠杆菌科29(3)鉴定(1)初步鉴定硝酸盐还原+氧化(2)最后鉴定)最后鉴定触触E+氧化氧化E-葡葡或或/+乳乳/迟缓迟缓+肌醇肌醇-IMVC +-脲酶脲酶-H2S-苯丙脱氨苯丙脱氨E-硝酸盐还原硝酸盐还原+动力多动力多+海医第10章肠杆菌科30(2)最后鉴定海医第10章肠杆菌科30(二)肠道内感染的细菌学检验(二)肠道内感染的细菌学检验)EaggEC()EHEC()EIEC()EPEC()ETEC(5肠凝聚型大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌肠侵袭性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌产肠毒素型大肠埃希菌组包括海医第10章肠杆菌科31(二)肠道内感染的细菌学检验)EaggE 检验方法检验方法标本标本 接种选择培养基接种选择培养基 挑选可疑菌落挑选可疑菌落鉴定大肠埃希菌鉴定大肠埃希菌ELISA核酸杂交核酸杂交PCR其其它它其他其他分子分子生物生物学技学技术术检测不同类型胃肠炎检测不同类型胃肠炎Ecoli的肠毒的肠毒素毒力因子和血清型等特征素毒力因子和血清型等特征海医第10章肠杆菌科32检验方法标本接种选择培养基卫生细菌学检查卫生细菌学检查Ecoli随粪便排除随粪便排除污染环境、水源、饮污染环境、水源、饮料、食品等料、食品等检测样品中检测样品中Ecoli间接表明肠道致病菌间接表明肠道致病菌污染污染大肠菌群指数大肠菌群指数每每1000ml(g)样品中的样品中的大肠菌群数大肠菌群数。大肠菌群大肠菌群系指在系指在3724h内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌厌氧的肠道杆菌。包括埃希菌属、。包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属。杆菌属。我国卫生标准规定我国卫生标准规定:饮水饮水 3个个/L 汽水果汁汽水果汁5个个/L海医第10章肠杆菌科33卫生细菌学检查Ecoli随粪便排除污染环境、水源、饮料、食品防治原则防治原则1.疫苗的免疫预防正在研究中。疫苗的免疫预防正在研究中。2.抗生素治疗要在药敏试验指导下进行抗生素治疗要在药敏试验指导下进行。3.尿道插管和膀胱镜检查应无菌操作。尿道插管和膀胱镜检查应无菌操作。4.腹泻病人应进行隔离治疗腹泻病人应进行隔离治疗,及时校正水和电解质及时校正水和电解质平衡。平衡。5.采取措施减少医院感染。采取措施减少医院感染。6.保持高卫生标准保持高卫生标准,减少接触引起胃肠炎的大肠埃减少接触引起胃肠炎的大肠埃希菌菌株的危险。希菌菌株的危险。7.污染的水和食品是肠产毒素性大肠埃希菌污染的水和食品是肠产毒素性大肠埃希菌(ETEC)的重要传播媒介的重要传播媒介;肠出血性大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌(EHEC)常由常由污染的肉类和未消毒的牛奶引起。要充分烹饪。污染的肉类和未消毒的牛奶引起。要充分烹饪。海医第10章肠杆菌科34防治原则1.疫苗的免疫预防正在研究中。海医第10章肠杆菌科3 第二节第二节 志贺菌属志贺菌属(Shigella)志贺菌属志贺菌属痢疾志贺菌痢疾志贺菌(S.dysentriae)福氏志贺菌福氏志贺菌(S.flexneri)鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌(S.boydii)宋内志贺菌宋内志贺菌(S.sonnei)海医第10章肠杆菌科35第二节志贺菌属(Shigella)志贺菌属一、生物学性状一、生物学性状(一)形态与染色(一)形态与染色 从形态学上看,志贺从形态学上看,志贺菌属与一般肠杆菌科菌属与一般肠杆菌科细菌无明显的区别。细菌无明显的区别。突出点是无鞭毛不能突出点是无鞭毛不能运动。运动。1.G-短小杆菌短小杆菌2.无特殊构造无特殊构造3.有菌毛有菌毛海医第10章肠杆菌科36一、生物学性状从形态学上看,志贺菌属与一般肠杆菌科细菌无明 (二)培养特点(二)培养特点 1.营养要求不高,可在普通培养基上生长营养要求不高,可在普通培养基上生长。2.普普通通琼琼脂脂平平板板 光光滑滑、湿湿润润、圆圆形形凸凸起起,无无色半透明,边缘整齐,中等大小的菌落。色半透明,边缘整齐,中等大小的菌落。3.在肠道选择性培养基上,为不发酵乳糖菌落在肠道选择性培养基上,为不发酵乳糖菌落值值得得提提出出的的是是,宋宋内内志志贺贺菌菌培培养养48h后后可可转转为为乳糖发酵菌落。也常出现扁平粗糙型菌落乳糖发酵菌落。也常出现扁平粗糙型菌落 海医第10章肠杆菌科37(二)培养特点1.营养要求不高,可在普通培养基 SSA海医第10章肠杆菌科38SSA海医第10章肠杆菌科38(三)生化反应(三)生化反应 较为复杂较为复杂葡萄糖葡萄糖、MR 阳性阳性 尿乳蔗枸赖脱,尿乳蔗枸赖脱,V-P、H2S均阴性均阴性 SSA 无色半透明菌落无色半透明菌落 克氏双糖铁克氏双糖铁 斜面粉红斜面粉红,底层黄底层黄+海医第10章肠杆菌科39(三)生化反应较为复杂葡萄糖、MR阳性海医第10章 I M V C海医第10章肠杆菌科40IMV(四)(四)Ag构造及分类构造及分类 1.Ag构造构造 特点特点无无H-Ag(1)O-Ag是分类的依据是分类的依据型特异性型特异性Ag 群特异性群特异性Ag 海医第10章肠杆菌科41(四)Ag构造及分类1.Ag构造特点无H(2)K-Ag 海医第10章肠杆菌科42(2)K-Ag海医第10章肠杆菌科422.分类分类根据根据O-Ag不同将不同将shigella分为分为4个群个群(P122,表,表7-12)-海医第10章肠杆菌科432.分类-海医第10章肠杆菌科43我国福氏最多,宋内次之。南方鲍氏也不少。我国福氏最多,宋内次之。南方鲍氏也不少。A群群:即痢疾志贺菌即痢疾志贺菌 有有12个血清型个血清型均不发酵甘露醇均不发酵甘露醇无鸟氨酸脱羧酶无鸟氨酸脱羧酶与其他各群无血清学关系与其他各群无血清学关系我我国国常常见见的的为为2型型,又又叫叫舒舒密密志志贺贺菌菌(西西藏藏),I(靛基质)(靛基质)+,其他型,其他型-B群又叫福氏菌群群又叫福氏菌群有有6个血清型个血清型,2个变种个变种(X、Y)其特点:其特点:分解甘露醇分解甘露醇无鸟氨酸脱羧无鸟氨酸脱羧酶酶-Ag构造较复杂,各型间有交叉构造较复杂,各型间有交叉Ag海医第10章肠杆菌科44我国福氏最多,宋内次之。南方鲍氏也不少。海医第10章肠杆菌 C群又叫鲍氏菌群群又叫鲍氏菌群,有,有18个血清型个血清型其特点:其特点:分解甘露醇分解甘露醇鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶-各型间无交叉各型间无交叉Ag D群又叫宋内菌群群又叫宋内菌群,只有一个血清型,只有一个血清型其特点:其特点:分解甘露醇分解甘露醇鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶+迟缓分解乳糖迟缓分解乳糖本群菌有光滑型(本群菌有光滑型(S)和粗糙型()和粗糙型(R)两种)两种海医第10章肠杆菌科45C群又叫鲍氏菌群,有18个血清型海医第10章肠杆较其他肠杆菌科细菌弱较其他肠杆菌科细菌弱。(五)抵抗力(五)抵抗力1.不耐热不耐热6010min即可杀死即可杀死2.对一般消毒剂敏感对一般消毒剂敏感3.耐耐48种药物种药物海医第10章肠杆菌科46(五)抵抗力1.不耐热6010min即可杀死海医第10章肠 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性(一)致病物质(一)致病物质 1.侵袭力侵袭力 2.内毒素内毒素 3.3.外毒素外毒素 海医第10章肠杆菌科47二、致病性与免疫性(一)致病物质海医第10章肠派伊尔淋巴派伊尔淋巴结的结的M细胞细胞通过通过型分泌系统向上皮细型分泌系统向上皮细胞和巨噬细胞分泌胞和巨噬细胞分泌4种蛋白种蛋白志贺菌志贺菌IpaA IpaB黏附并侵入IpaC IpaD诱导细胞膜凹陷诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞导致细菌内吞志贺菌溶解吞噬小泡志贺菌溶解吞噬小泡 进入细胞质内繁殖进入细胞质内繁殖宿主细胞内肌动纤维宿主细胞内肌动纤维的重排的重排,推动细菌进入推动细菌进入毗邻细胞毗邻细胞细胞到细胞传播细胞到细胞传播细菌逃避了免疫的清除细菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保护作用而得到了自身保护通过诱导细胞程序性死亡通过诱导细胞程序性死亡从吞噬中得到了存活从吞噬中得到了存活引起白细胞介素引起白细胞介素-1的释放的释放 吸引多形核白细胞到吸引多形核白细胞到感染组织肠壁完整性破坏感染组织肠壁完整性破坏细菌到达较深层的上皮细胞细菌到达较深层的上皮细胞,加速了细菌的扩散加速了细菌的扩散1.1.侵袭力侵袭力 作用作用海医第10章肠杆菌科48派伊尔淋巴通过型分泌系统向上皮细志贺菌IpaAIp2.2.内毒素内毒素内毒素内毒素肠黏膜肠黏膜通透性通透性内毒素内毒素的吸收的吸收促进促进发发 热热神志障碍神志障碍中毒性休中毒性休克克作用作用内毒素内毒素肠黏膜肠黏膜破坏破坏炎症炎症溃疡溃疡形成形成典型的脓血典型的脓血黏液便黏液便内毒素内毒素肠壁自主肠壁自主神经系统神经系统作用于作用于肠功能肠功能紊乱紊乱肠蠕肠蠕动失动失调和调和痉挛痉挛肤痛肤痛里急里急后重后重海医第10章肠杆菌科492.内毒素内毒素肠黏膜通透性内毒素促进发热作用内3.3.外毒素外毒素其功其功 能同肠出血性大肠埃希菌能同肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC),引起上皮细胞引起上皮细胞微绒毛的破坏。微绒毛的破坏。产生菌株及功能产生菌株及功能A群志贺菌群志贺菌(痢疾志贺菌痢疾志贺菌)型和型和型可产生志贺型可产生志贺外毒素外毒素。海医第10章肠杆菌科503.外毒素其功能同肠出血性大肠埃希菌(enterohemo结构及作用结构及作用A亚单位亚单位可裂解可裂解60S核糖体亚单核糖体亚单位的位的28SrRNA阻止与氨酰阻止与氨酰tRNA的结合的结合,终止蛋白质合成。终止蛋白质合成。Stx由由1个个A亚单位和亚单位和5个个B亚单位成。亚单位成。B亚单位亚单位与宿主细胞特异性糖脂受与宿主细胞特异性糖脂受体结合体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体高浓度的糖脂受体)毒素作用毒素作用:损伤上皮细胞。个别病人志贺毒素可介导肾小球内损伤上皮细胞。个别病人志贺毒素可介导肾小球内皮细胞的损伤皮细胞的损伤,导致溶血性尿毒综合征导致溶血性尿毒综合征(HUS)海医第10章肠杆菌科51结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA急性、亚急性、慢性菌痢,急性急性、亚急性、慢性菌痢,急性最常见,中毒性痢疾。最常见,中毒性痢疾。(二)所致疾病(二)所致疾病海医第10章肠杆菌科52急性、亚急性、慢性菌痢,急性最常见,中毒性痢疾。(二)所(三三)免疫性免疫性 病后病后,在血液中可产生循环抗体在血液中可产生循环抗体,此抗体无此抗体无保护作用。保护作用。其抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的分其抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的分泌型泌型IgA(SIgA)。病后免疫期短病后免疫期短,不巩固。其原因不巩固。其原因:1.感染只停留在肠壁局部感染只停留在肠壁局部。2.型别多型别多。海医第10章肠杆菌科53(三)免疫性病后,在血液中可产生循环抗体,此抗 三、微生物学检查法三、微生物学检查法(一)标本的采集(一)标本的采集1.用用无无菌菌棉棉拭拭取取病病人人新新排排出出的的粪粪便便的的粘粘液或脓血便。液或脓血便。2.无无便便者者,用用无无菌菌棉棉拭拭从从肛肛门门或或直直肠肠直直接取。接取。3.对昏迷病人、不排便者对昏迷病人、不排便者灌肠。灌肠。4.慢性患者慢性患者用直肠镜。用直肠镜。海医第10章肠杆菌科54三、微生物学检查法(一)标本的采集海医第10章注意事项:注意事项:1.用药前采集标本用药前采集标本2.要要快快(要要立立即即送送检检)最最好好1h内内或或床床边边接种接种3.取材不要粪尿相混(本菌怕酸)取材不要粪尿相混(本菌怕酸)4.如如不不能能立立即即送送检检者者,立立即即用用3%甘甘油油盐盐水保存液,远道可放在冰壶中水保存液,远道可放在冰壶中 海医第10章肠杆菌科55注意事项:海医第10章肠杆菌科55(二)检验程序(二)检验程序 海医第10章肠杆菌科56(二)检验程序海医第10章肠杆菌科56(三)检验方法(三)检验方法 1.1.分离培养分离培养SSASSA及及MacConkeyMacConkey无色透明中等大菌落无色透明中等大菌落2.2.初步鉴定初步鉴定 (1 1)试试探探性性玻玻片片凝凝集集 先先用用志志贺贺菌菌属属多多价价诊诊断断血血清清再用单价血清再用单价血清(2 2)初步生化反应)初步生化反应 KIA KIA、MIU MIU KIA MIU 抗血清抗血清斜面斜面底层底层气体气体H2S 动力动力 吲哚吲哚脲酶脲酶 多价多价 单价单价-+-/+-+/-+海医第10章肠杆菌科57(三)检验方法1.分离培养KIA 3.最后鉴定最后鉴定(1)生化反应)生化反应,除除KIA、MIU外,甘露醇外,甘露醇(+/-)、蔗糖()、蔗糖(-/+)、)、C(-)、苯丙氨酸)、苯丙氨酸脱氨酶(脱氨酶(-)、)、ONPG(-半乳糖苷酶)(半乳糖苷酶)(-)、鸟氨酸脱羧酶()、鸟氨酸脱羧酶(-)(宋内)(宋内+)(2)血清学鉴定:生化特点符合血清学鉴定:生化特点符合,且多价、且多价、单价血清均呈阳性者,应单价血清均呈阳性者,应转入分型鉴定。转入分型鉴定。海医第10章肠杆菌科583.最后鉴定(1)生化反应,除KI测定志贺菌的侵袭力可用测定志贺菌的侵袭力可用Sereny试验试验豚鼠眼结膜试验豚鼠眼结膜试验另一只眼用大肠埃希菌作对照另一只眼用大肠埃希菌作对照 4.毒力试验毒力试验受试受试1824h培养物培养物接种接种结结囊内囊内发生结发生结膜炎膜炎Sereny试验阳试验阳性性表明受表明受试菌有试菌有侵袭力侵袭力志贺毒素志贺毒素的测定的测定HeLa细胞细胞Vero细胞细胞PCR直接检测其毒素基直接检测其毒素基因因stxA和和stxB海医第10章肠杆菌科59测定志贺菌的侵袭力可用Sereny试验另一只眼用大肠埃希菌作(1)免疫荧光菌球法)免疫荧光菌球法特异性较强特异性较强(2)免疫染色法)免疫染色法 (3)协同凝集试验协同凝集试验 (4)胶乳凝集试验胶乳凝集试验 (5)分子生物学方法分子生物学方法5.快速检验法快速检验法海医第10章肠杆菌科60(1)免疫荧光菌球法特异性较强5.快速检验法海医第10章 第三节第三节 沙门菌属沙门菌属(SalmonellaSalmonella)动物致病的沙门菌动物致病的沙门菌从对人引起疾病的角度从对人引起疾病的角度 本属的代表菌本属的代表菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌(S.typhi)。引起肠热症副伤寒沙门菌伤寒沙门菌人的致病菌Bparatyphi.S(A)typhi.S(毒污染乳肉蛋引起食物中肠炎沙门菌猪霍乱沙门菌鼠伤寒沙门菌人畜共患-)senteritidi.S()suischolera.S()mtyphimuriu.S(c海医第10章肠杆菌科61第三节沙门菌属(Salmonella)动物致病的沙门 一、生物学性状一、生物学性状(一)形态与染色(一)形态与染色 基本同基本同E.coli1.G-细长的中杆菌细长的中杆菌2.无无芽芽胞胞、无无荚荚膜膜,除除雏雏白白痢痢沙沙门门菌菌和和鸡沙门菌外均具有周身鞭毛鸡沙门菌外均具有周身鞭毛3.多数菌株有菌毛多数菌株有菌毛 海医第10章肠杆菌科62一、生物学性状(一)形态与染色 (二)培养特点(二)培养特点 3.生长现象生长现象(1 1)普通琼脂平板)普通琼脂平板 圆形,无色半透明,光滑湿润,圆形,无色半透明,光滑湿润,边缘整,粗糙型表面干燥边缘不整(呈锯齿状)。边缘整,粗糙型表面干燥边缘不整(呈锯齿状)。(2)产生产生H2S的细菌在的细菌在SSA上形成带黑心的菌落。上形成带黑心的菌落。海医第10章肠杆菌科63(二)培养特点3.生长现象(2)产生H2S的细菌海医第10章肠杆菌科64海医第10章肠杆菌科64海医第10章肠杆菌科65海医第10章肠杆菌科65 (三)生化反应(三)生化反应 1.沙门菌与大肠埃希菌的区别沙门菌与大肠埃希菌的区别 乳乳 蔗蔗 I I E.coliE.coli +Salmonella -尿素尿素 Proteus +Salmonella -葡葡 麦麦 甘甘 鼠鼠 鸟鸟 C(柠)(柠)其他沙门菌其他沙门菌 /-+/-/-+/-伤寒沙门菌伤寒沙门菌 +-/+3.伤寒沙门菌与其他沙门菌的主要区别伤寒沙门菌与其他沙门菌的主要区别 2.沙门菌与变形杆菌的区别沙门菌与变形杆菌的区别 4.4.根据生化反应,沙门菌属分为根据生化反应,沙门菌属分为6 6个亚属个亚属海医第10章肠杆菌科66(三)生化反应1.沙门菌与大肠埃希菌的区别海医第10章肠杆菌科67海医第10章肠杆菌科67 I M V C海医第10章肠杆菌科68IMV (四)(四)Ag构造及分类构造及分类 1.菌体(菌体(O)Ag(1)组成)组成 就是细胞壁的脂多糖就是细胞壁的脂多糖(2)性质较稳定)性质较稳定(3 3)成分)成分 根据根据O-AgO-Ag的组成成分不同,共有的组成成分不同,共有5858种,用阿拉伯种,用阿拉伯字母字母1 1、2 2、33表示,目前已排至表示,目前已排至6767,其中有,其中有9 9个数码被删个数码被删去,故数字不是连续的。并且将具有相同成分的沙门菌都归去,故数字不是连续的。并且将具有相同成分的沙门菌都归为一群(即每群都有它共同的为一群(即每群都有它共同的AgAg),这样使),这样使20002000种沙门菌归种沙门菌归为为A A、B B、C C、D D、E E、F F、II一直至一直至Z Z,在以,在以O O5151O O6767群表示群表示 (4)O-Ag机体机体产生产生IgM型型Ab O-Ag与与O-Ab呈颗粒状凝集呈颗粒状凝集石炭酸破坏不被酒精可达耐热、h5.2,100海医第10章肠杆菌科69(四)Ag构造及分类1.菌体(O)Ag石炭酸2.鞭毛(鞭毛(H)Ag(1)组成)组成Pr(2)性质不稳定)性质不稳定(3)具具有有鞭鞭毛毛的的细细菌菌经经甲甲醛醛固固定定后后即即制制成成H-Ag,由由于于H-Ag将将O-Ag遮遮盖盖,故故O-Ag不不能能再再与与O-Ab发生凝集发生凝集(4)H-Ag机机体体产产生生IgG型型Ab H-Ag与与H-Ab呈絮状凝集呈絮状凝集 海医第10章肠杆菌科702.鞭毛(H)Ag海医第10章肠杆菌科70(5)H-Ag分两相分两相 同时具有两相的同时具有两相的H-Ag叫双相菌叫双相菌 仅有一相的仅有一相的H-Ag,叫单相菌,叫单相菌 3.表面表面Ag 目前已证实,本属细菌中的个别血清型具目前已证实,本属细菌中的个别血清型具有有Vi-Ag、M-Ag和和5Ag三种表面三种表面Ag。-)7(4,3,1 2,,70)117117P,117(zz,z,z,z)(zd,c,b,a,65321种以上目前有表示伯字母几种沙门菌共有。用阿拉第二相又叫非特异相第二相又叫非特异相多种目前有表见表示以后则用小写直至表示用小写特异性高第一相又叫特异相第一相又叫特异相,海医第10章肠杆菌科71(5)H-Ag分两相同时具有两相的H-Ag叫双相菌3.表面(五)抵抗力(五)抵抗力 本本属属细细菌菌在在自自然然界界中中生生活活能能力力较较强强,仅仅次次于于大大肠肠埃埃希希菌菌,在在土土壤壤、水水中中可可活活几几周周几个月,在粪便中可活较长时间。几个月,在粪便中可活较长时间。1.耐冷不耐热耐冷不耐热 2.易被一般消毒剂杀死易被一般消毒剂杀死 3.胆胆盐盐、煌煌绿绿及及其其他他染染料料对对沙沙门门菌菌的的抑抑制作用较其他肠道菌为小。制作用较其他肠道菌为小。海医第10章肠杆菌科72(五)抵抗力本属细菌在自然界中生活能力较强,仅次于大肠埃希 二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性 1.侵侵袭袭力力 有有Vi-Ag的的伤伤寒寒沙沙门门菌菌比比无无Vi-Ag者要强得多者要强得多。2.内毒素内毒素3.有有些些菌菌型型尚尚能能产产生生肠肠毒毒素素(如如鼠鼠伤伤寒寒沙沙门门菌菌),其其性性质质类类似似产产毒毒素素大大肠肠埃埃希希菌。菌。(一)致病物质(一)致病物质海医第10章肠杆菌科73二、致病性和免疫性1.侵袭力有Vi派伊尔淋巴派伊尔淋巴结的结的M细胞细胞通过两个通过两个型分泌系统型分泌系统沙门菌沙门菌黏附并侵入诱导细胞膜凹陷诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞导致细菌内吞沙门菌溶解吞噬小泡沙门菌溶解吞噬小泡 进入细胞质内繁殖进入细胞质内繁殖细胞到细胞传播导致细胞到细胞传播导致宿主细胞死亡宿主细胞死亡1.1.侵袭力侵袭力 繁殖繁殖输送外源性输送外源性Ag到其到其下方的巨噬细胞下方的巨噬细胞沙门菌致病岛(SPI)沙门菌致病岛(SPI)沙门菌侵袭蛋白沙门菌侵袭蛋白向M细胞宿主细胞内肌宿主细胞内肌动纤维的重排动纤维的重排细菌扩散并进入毗细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织邻细胞淋巴组织具有耐酸应具有耐酸应答基因答基因使细菌在胃和使细菌在胃和吞噬体的酸性吞噬体的酸性环境得到保护环境得到保护氧化酶氧化酶、超超氧化物歧化氧化物歧化酶酶保护细菌不被保护细菌不被胞内杀菌因素胞内杀菌因素杀伤杀伤伤寒沙门菌伤寒沙门菌希氏沙门菌希氏沙门菌Vi抗原抗原抗吞噬抗吞噬,阻挡抗阻挡抗体体、补体补体海医第10章肠杆菌科74派伊尔淋巴通过两个型分泌系统沙门菌黏附并侵入诱导细胞膜凹陷2.2.内毒素内毒素沙门菌死亡后沙门菌死亡后释放内毒素释放内毒素引起引起宿主宿主KT ,WBC大剂量导致中毒大剂量导致中毒症状和休克症状和休克激活补体激活补体替代途径替代途径产生产生C3a、C5a等等诱发免疫细胞诱发免疫细胞、分泌分泌TNF-、IL-1、IFN-等等细细胞因子胞因子海医第10章肠杆菌科752.内毒素沙门菌死亡后释放内毒素引起宿主KT,WBC大(二)所致疾病(二)所致疾病1.伤寒、副伤寒沙门菌伤寒、副伤寒沙门菌肠热症肠热症2.食物中毒(急性胃肠炎)食物中毒(急性胃肠炎)3.败血症败血症 炎症出血性坏死炎症出血性坏死4.无症状带菌者无症状带菌者海医第10章肠杆菌科76(二)所致疾病1.伤寒、副伤寒沙门菌肠热症炎症出血性坏死 三、微生物学检查法(一)细菌学检查(一)细菌学检查 1.标本的采集标本的采集(1)肠热症:)肠热症:1 1血血2 2便便3 3检尿,要检骨髓全知道检尿,要检骨髓全知道(2)食物中毒)食物中毒:呕吐物、可疑食物、粪便:呕吐物、可疑食物、粪便(3)其他标本)其他标本:胆汁、脑脊液、胸腹水,应:胆汁、脑脊液、胸腹水,应离心后沉淀,供培养用;中耳分泌物、渗出液、离心后沉淀,供培养用;中耳分泌物、渗出液、脓液、咽喉、阴道等可用拭子采集。脓液、咽喉、阴道等可用拭子采集。注意事项:病的晚期或用药,阳性率注意事项:病的晚期或用药,阳性率 病的初期阳性率不高病的初期阳性率不高海医第10章肠杆菌科77三、微生物学检查法(一)细菌学检查海医第10采集时机采集时机用药前用药前新新鲜鲜标标本本,立立即即送送检检(如如不不能能立立即即送送检检应应保保存存在在冰冰箱箱、冰冰壶壶内内,但但不不得得超超过过2h)血血液液标标本本应应在在出出现现症症状状后后尽尽早早静静脉脉采采血血5ml。海医第10章肠杆菌科78采集时机海医第10章肠杆菌科782.检验方法检验方法(1)分离培养与增菌培养)分离培养与增菌培养增菌培养增菌培养孔雀绿氯化镁四硫磺酸盐一般沙门菌亚硒酸盐甲副伤寒增菌液不同沙门菌应选择不同、:、温度的选择温度的选择伤寒伤寒37其他沙门菌其他沙门菌4043 为好为好-麦康凯中国蓝产选择亚硫酸铋琼脂琼脂强选择种各选培养基一次一次次进行分离培养、EMB、HE.SSA)1(h48h24162海医第10章肠杆菌科792.检验方法(1)分离培养与增菌培养孔雀绿氯化镁四硫(2)初初步步鉴鉴定定-主主要要依依据据是是生生化化和和血血清清学学两两个个方面方面菌菌落落特特点点:从从选选择择性性培培养养基基上上挑挑选选菌菌落落是是一一个重要环节,稍一疏忽则易遗漏个重要环节,稍一疏忽则易遗漏a.菌菌落落以以无无色色、光光滑滑、较较透透明明、扁扁平平为为主主要要特特征,大小则往往不一。征,大小则往往不一。b.EMB-靠近大肠埃希菌者可呈深蓝色靠近大肠埃希菌者可呈深蓝色c.SSA-产生产生H2S者带黑心者带黑心d.对可疑菌落用笔圈出(便于复查)对可疑菌落用笔圈出(便于复查)生生化化鉴鉴定定 凡凡可可疑疑之之每每型型菌菌落落均均要要挑挑取取12个,分别接种于个,分别接种于KIA和和MIU。海医第10章肠杆菌科80(2)初步鉴定-主要依据是生化和血清学两个方面海医第10章肠本属内细菌鉴定本属内细菌鉴定 海医第10章肠杆菌科81本属内细菌鉴定海医第10章肠杆菌科81先用先用AF群多价群多价O诊断血清做玻片凝集试验诊断血清做玻片凝集试验 盐水盐水+无效(无效(S S R R有关)有关)盐水盐水-多价多价O O血清血清+沙门菌沙门菌 盐水盐水-多价多价O O血清血清-生化反应不典型阴性生化反应不典型阴性 生化反应典型生化反应典型Vi-AgcH若若H2S+H2S+葡葡尿素尿素-初步考虑初步考虑 (3)最后鉴定)最后鉴定 全面生化反应全面生化反应枸橼酸菌属沙门菌亚属、海医第10章肠杆菌科82先用AF群多价O诊断血清做玻片凝集试验cH若H2S+葡尿血清学鉴定血清学鉴定a.先先用用AF群群多多价价O血血清清做做玻玻片片凝凝集集T-确确定定是是否否是是在在AF群群内内(因因95%以以上上沙沙门门菌均属菌均属AF群)群)b.再再分分别别用用代代表表6个个O群群的的单单价价因因子子血血清清做玻片凝集做玻片凝集T进行分群进行分群 c.再用鞭毛再用鞭毛Ag确定菌种确定菌种 海医第10章肠杆菌科83血清学鉴定海医第10章肠杆菌科834.鉴定依据鉴定依据(1)沙门菌的鉴定主要靠)沙门菌的鉴定主要靠(2)血清型的确定)血清型的确定(3)检查过程中必须配合形态与染色检查,以排除肠球菌)检查过程中必须配合形态与染色检查,以排除肠球菌 和其他肠道内细菌和其他肠道内细菌(4)也可用噬菌体鉴定)也可用噬菌体鉴定 生化反应综合判定式相同的菌株则需借助对于型相结合综合决定其血清相和第H因子血清第血清决定定群AgO海医第10章肠杆菌科844.鉴定依据(3)检查过程中必须配合形态与染色检查,以排除(二)血清学检查(二)血清学检查肥达(肥达(Widal)反应)反应 1.原理原理 人患伤寒、副伤寒后,一般于人患伤寒、副伤寒后,一般于12周周后在血清中出现的特异性后在血清中出现的特异性Ab(凝集素),(凝集素),3、4、5周后达高峰,以后缓慢下降。根据此道理,周后达高峰,以后缓慢下降。根据此道理,用已知伤寒沙门菌用已知伤寒沙门菌TO、TH和和副伤寒副伤寒PA、PB、PC的菌液做的菌液做Ag,与病人血清做凝集反应来测,与病人血清做凝集反应来测定病人血清中有无相应特异性抗体的定量凝集定病人血清中有无相应特异性抗体的定量凝集试验。根据抗体凝集价增长情况,以做伤寒、试验。根据抗体凝集价增长情况,以做伤寒、副伤寒的辅助诊断。副伤寒的辅助诊断。2.方法方法实验课做。实验课做。海医第10章肠杆菌科85(二)血清学检查肥达(Widal)反应1.原理人患3.结果判断必须结果临床、病期及地区而定结果判断必须结果临床、病期及地区而定(1)效价的地区性)效价的地区性(2 2)注意病程)注意病程(3 3)有关)有关THTH与与TOTO变化的评价变化的评价 出现速度出现速度 交叉反应或非特异性回忆反应交叉反应或非特异性回忆反应 (4)注意区别非特异性回忆反应)注意区别非特异性回忆反应 海医第10章肠杆菌科863.结果判断必须结果临床、病期及地区而定海医第10章肠杆菌科 本菌在自然界中分布很广,主要存在于饮本菌在自然界中分布很广,主要存在于饮水、污水中。在动物中存在于家畜、家禽、水、污水中。在动物中存在于家畜、家禽、鼠、鸽、蛙、蜗牛和虾蟹排泄物中。在食品鼠、鸽、蛙、蜗牛和虾蟹排泄物中。在食品(乳、乳制品、蛋、肉、冰琪淋等)常检出。(乳、乳制品、蛋、肉、冰琪淋等)常检出。猪是带菌者。猪是带菌者。经苍蝇、蚤、蟑螂、蜚蠊带菌等媒介传播,经苍蝇、蚤、蟑螂、蜚蠊带菌等媒介传播,为人兽共患病原菌之一。为人兽共患病原菌之一。(三三)致病性致病性海医第10章肠杆菌科87本菌在自然界中分布很广,主要存在于饮水、污水中。第四节第四节 其其 他菌属他菌属一、一、克雷伯菌属克雷伯菌属(Klebsiella)肺炎克雷伯菌菌属(Kpneumonia)产酸(催娩)克雷伯菌(Koxytoca)解尿氨酸克雷伯菌(Kornithinolytica)植生克雷伯菌(Kplanticola)土生克雷伯菌(Kterrigena)臭鼻克雷伯菌(Kozaenae)鼻硬结克雷伯菌(Krhinoscleromatis)本属菌本属菌包括包括7 7个种个种海医第10章肠杆菌科88第四节其他菌属一、克雷伯本属细菌符合肠杆菌科一般特征。其属的共同特征为:本属细菌符合肠杆菌科一般特征。其属的共同特征为:1.G短杆菌,无芽胞,无鞭毛有荚膜短杆菌,无芽胞,无鞭毛有荚膜2.营养要求不高普通培养基即可生长营养要求不高普通培养基即可生长3.生化反应较活泼生化反应较活泼(1)可发酵多种糖类)可发酵多种糖类 葡葡 乳乳 麦麦 甘甘 蔗蔗 其他糖醇(阿拉伯、木、棉子、海藻、其他糖醇(阿拉伯、木、棉子、海藻、阿糖醇)阿糖醇)+(2)触酶)触酶 氧化氧化E 脂脂E H2S 明胶明胶 硝酸盐硝酸盐 尿素尿素 V-P ONPG 肌醇肌醇 +4.均为周围环境及人呼吸道常居菌群,为条件致病菌均为周围环境及人呼吸道常居菌群,为条件致病菌,目,目前引起感染日益增多。前引起感染日益增多。其代表菌为肺炎克雷伯菌。其代表菌为肺炎克雷伯菌。共同特征共同特征海医第10章肠杆菌科89本属细菌符合肠杆菌科一般特征。其属的共同特征为:(一一)生物学性状生物学性状肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌1.形态与染色形态与染色(1)G-卵圆或球杆菌,常成双排列卵圆或球杆菌,常成双排列(2)菌体外绕以宽厚的荚膜)菌体外绕以宽厚的荚膜(3)无芽胞、无鞭毛、无动力、有菌毛)无芽胞、无鞭毛、无动力、有菌毛(4)培培养养物物菌菌体体长长,常常呈呈多多形形性性,有有时时可见丝状物可见丝状物海医第10章肠杆菌科90(一)生物学性状肺炎克雷伯菌海医第10章肠杆菌科90海医第10章肠杆菌科91海医第10章肠杆菌科912.培养特点培养特点(1)需)需O2或兼性厌或兼性厌O2(2)对营养要求不高,普通培养基即可生长)对营养要求不高,普通培养基即可生长(3)在在普普通通琼琼脂脂和和血血平平板板 灰灰白白色色、圆圆形形、光光亮亮较较大大凸凸起起,粘粘液液状状,菌菌落落易易互互相相融融合合,用用接接种种环挑易拉成丝状的较大菌落。环挑易拉成丝状的较大菌落。(4)在在肠肠道道选选择择培培养养基基上上呈呈乳乳糖糖发发酵酵产产酸酸的的菌菌落落,与大肠埃希菌相似但色泽较淡,较为饱满而凸起。与大肠埃希菌相似但色泽较淡,较为饱满而凸起。(5)液体培养基)液体培养基混浊生长、农厚,有菌膜,混浊生长、农厚,有菌膜,管底有粘液性沉淀。管底有粘液性沉淀。35 24h 海医第10章肠杆菌科922.培养特点35海医第10章肠杆菌科92海医第10章肠杆菌科93海医第10章肠杆菌科93(6)生化反应)生化反应本菌本菌IMVC+,其他,如丙二酸盐,其他,如丙二酸盐+(7)Ag构造构造 O、K两种两种Ag K-Ag为分型依据为分型依据(8)抵抗力不强)抵抗力不强 对一般消毒剂敏感对一般消毒剂敏感对热敏感对热敏感56-6056-60即死即死对一般抗生素均敏感,但易产生抗药性对一般抗生素均敏感,但易产生抗药性海医第10章肠杆菌科94(6)生化反应海医第10章肠杆菌科94 (二二)临床意义临床意义 本属细菌多感染重病老人及幼儿,死亡本属细菌多感染重病老人及幼儿,死亡率很高。也是医院感染的常见菌。率很高。也是医院感染的常见菌。海医第10章肠杆菌科95(二)临床意义本属细菌多感染重病老人及幼儿,死二、变形杆菌属二、变形杆菌属(ProtensProtens)普通变形杆菌普通变形杆菌(P.vulgarisP.vulgaris)变形杆菌属变形杆菌属 奇异变形杆菌奇异变形杆菌(P.mirabiliP.mirabili 产粘变形杆菌产粘变形杆菌(P.myxofaciensP.myxofaciens)潘纳变形杆菌潘纳变形杆菌(P.penneriP.penneri)(一)生物学性状(一)生物学性状1.1.形态与染色形态与染色(1 1)G G-中小杆菌,菌端钝圆中小杆菌,菌端钝圆(2 2)无芽胞、无荚膜、周身鞭毛,运动活泼。)无芽胞、无荚膜、周身鞭毛,运动活泼。(3 3)具有明显的多形性,多呈球状或丝状,在活泼)具有明显的多形性,多呈球状或丝状,在活泼运动的培养物中多为较长而弯曲的杆菌。运动的培养物中多为较长而弯曲的杆菌。海医第10章肠杆菌科96二、变形杆菌属(Protens)普通变形杆菌(P.vulg海医第10章肠杆菌科97海医第10章肠杆菌科972.2.培养特点培养特点(1 1)需)需O O2 2,或兼性厌,或兼性厌O O2 2。(2 2)营养要求不高,在普通或综合培养基上)营
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