果蔬有机酸含量测定(精)

果蔬有机酸含量的测定植物材料中含有丰富的有机酸，如苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、草酸 等。利用酸碱滴定法测定果蔬中的可滴定酸含量，可以从风味及营养的角度衡量其品质。重点：碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；邻苯 二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；有效数字的取舍及确定。难点：滴定终点的判断及掌握。一、实验目的1. 学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择。2. 掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择。二、实验原理1大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka10-7，用标准 碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐。滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示 剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点。2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓 度。邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4 ），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量 较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下：反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂。邻苯二甲 酸氢钾通常在105-110C下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。3. 在一定温度下，用蒸馏水或乙醇将植物材料中的有机酸浸提出来，用碱溶液 滴定浸出液，即可计算出样品的可滴定酸含量。果实中的有机酸含量如柑橘类可换算成柠檬 酸、葡萄可换算成酒石酸，苹果类可换算成苹果酸表示。二、仪器设备1.天平2. 250 m三角瓶3.匀浆机（或研钵）4.恒温水浴锅5.低速离心机（或漏斗）6. 50mL离心管（或定性滤纸）7.碱式滴定管& 100 m容量瓶9. 25ml移液管三、试剂1. 0.05 mOl NaOH标准溶液：在天平上取约0.5g固体NaOH （可用干燥小烧 杯称取），另用大量筒量取250mL去离子水（无CO2 ），倒少量水入装有NaOH固体的小烧 杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀。以邻苯二甲酸氢钾（分析纯）标定其浓度：用万分之一的天平称取干燥过的邻苯二甲酸 氢钾0.1250 g 0.1500份3分别置250 mL三角瓶中，用80 mL无CO2水溶解，加酚酞指示 剂23滴，用所配NaOH标准溶液滴定至微红色（大约15mL左右）。依下式计算NaOH的准 确浓度，求3份样品的平均值，结果保留至小数点后4位。M =式中M NaOH标准溶液的浓度（mol -）;W 邻苯二甲酸氢钾的重量（g）；V 滴定时所消耗NaOH溶液的体积（mL ）;0.2043每毫摩尔邻苯二甲酸氢钾的重量（g）。2. 1%酚酞指示剂：称取1 g酚酞，溶解于100 m L 70%90%乙醇中。四、实验内容1. 将新鲜组织用匀浆机匀浆，称取匀浆5g于50mL离心管中，将35mL左右蒸 馏水加入50mL离心管，于80匕恒温水浴中浸提30 min，其间不断摇匀。或称取新鲜组织5g，至于研钵中迅速研成糊状，用50mL蒸馏水洗入250mL三角瓶中， 加适量蒸馏水，于80匕恒温水浴中浸提 30 min ,其间不断搅拌。2冷却后6000 emin 1离心1015 min,上清液用蒸馏水定容到100 mL （如材料为 匀浆处理，且溶液色泽不影响滴定终点判断，亦可不离心冷却后直接定容到100 mL）。或过滤，残渣用1015 mL蒸馏水冲洗23次，合并滤液，定容至100mL。3取试液3份，每份25 mL，分别置250 mL三角瓶中，各滴入酚酞指示剂23 滴。用NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色，即为终点。记录NaOH的 用量。4.结果计算总酸度 = *100%式中V1样品提取液总体积（mL ）;V2滴定时所取滤液体积（mL ）;V 滴定时所消耗NaOH标准溶液的体积（mL ）;N NaOH标准溶液的浓度（molL -）;K将总酸换算为特定有机酸的系数：苹果酸0.067、柠檬酸0.06生酒石酸0.075、乳酸0.090、草酸0.045a样品滴定刖的稀释倍数;W 样品鲜重（g）五、数据记录表格实验内容消耗NaOH标准溶液体积（mL）结果计算平均值三NaOH标准溶液标 定样品总酸度测定六、注意事项1. 如样品中有机酸含量过高，应在滴定前适当稀释，计算时将稀释倍数带入 公式。2. 如果试液颜色较深，影响滴定终点的观察，应采用电位滴定法。3. 般果蔬中含酸量较少，利用0.lmol/L NaOH溶液进行滴定时，NaOH所消 耗的体积较少，容易引起误差。实操中，可以将NaOH适当稀释后使用。例如用 0.05mol/L甚至0.01mol/L的NaOH溶液进行滴定。七、作业与思考1. 园艺产品中的主要有机酸有哪些？计算时如何选择折算系数？2. 对于颜色较深的样品，测定有机酸时终点不易观察，应如何处理？3. 如果邻苯二甲酸氢钾未烘干，将使标准溶液浓度的标定结果偏高还是偏低？溶解 邻苯二甲酸氢钾时加入80mL水，是用量筒量取，还是用移液管移取？为什么？