有机化学：实验九 柱层析分离硝基苯胺混合物 - 副本

1实验九实验九 柱层析分离硝基苯胺混合物柱层析分离硝基苯胺混合物 一、教学目的与要求一、教学目的与要求 二、教学重点难点二、教学重点难点三、教学内容三、教学内容(一一)实验原理实验原理 1、学习柱色谱技术的原理和应用；2、掌握柱色谱分离技术和操作。重点：柱层析分离的操作技术难点：柱层析分离的原理 柱色谱分为吸附色谱和分配色谱两种。实验室常用的是吸附色谱，其原理是利用混合物中各组分在固定相上的吸附能力和流动相的解吸能力不同，让混合物随流动相流过固定相，发生反复多次的吸附和解吸过程，从而使混合物2分离成两种或多种单一的纯组分。样品中各组分在吸附剂上的吸附能力不同，一般来说，极性大的吸附能力强，极性小的吸附能力弱。各组分在洗脱剂中的溶解度不一样，被解吸的能力也就不同。非极性组分由于在固定相中的吸附能力弱，首先被解吸出来；而极性组分由于吸附能力强，因此不易被解吸出来，其随着流动相移动的速度要比非极性组分慢得多，这样经过反复的吸附和解吸，在色谱柱上形成层带，每一层带代表一个组分，分别收集，蒸发溶剂，即得到单一的纯净物。(二二)仪器与试剂仪器与试剂 仪器仪器：色谱柱，脱脂棉，胶头滴管，烧杯，锥形瓶，圆底烧瓶，旋转蒸发仪，橡胶塞试剂试剂：对硝基苯胺和邻硝基苯胺的乙酸乙酯溶液(0.5g/L)，洗脱剂I石油醚-乙酸乙酯3/1(体积比)，洗脱剂II石油醚-乙酸乙酯1/1(体积比)，石油醚，柱层析硅胶，31、湿法装柱：6g硅胶与20mL石油醚调成糊状，无气泡，快速转移至加有10mL石油醚的硅胶柱中，边转移边用橡胶塞轻敲柱体，柱壁上的硅胶用石油醚冲洗，装柱完毕后，在硅胶上层加薄薄一层脱脂棉。装柱要求：均匀、密实、无气泡、无裂缝。2、加样：当洗脱剂液面刚完全进入硅胶层时，沿柱壁加入1.5mL混合原料，待原料刚完全进入硅胶层时，用少量石油醚冲洗管壁原料。3、加洗脱剂：待所有原料刚完全进入硅胶层时，加洗脱剂I；待黄色组分流出柱体后，加洗脱剂II，洗脱淡黄色组分。4、点板：以洗脱剂II为展开剂，验证收集组分的纯度。5、旋转蒸发溶剂，得两种晶体。(三三)实验步骤实验步骤 41、仪器须干燥；2、任何时候液面不可低于硅胶柱；3、不能破坏硅胶柱表面。四、回答问题四、回答问题 1、为什么必须保证所装柱中没有空气泡？2、柱色谱所选择的洗脱剂为什么要先用非极性或弱极性的，然后再使用较强极性的洗脱剂洗脱？(四四)注意事项注意事项