山茱萸核多酚对家兔和大鼠离体腹主动脉环的作用及机制探讨

河南 科 技大 学毕业 设 计（论文) 题目山茱萸核多酚对家兔和大鼠离体腹主动脉环的作用及机制探讨姓 名 学 院 医学院 专 业药 学指导教师 年 月15日山茱萸核多酚对家兔和大鼠离体腹主动脉环的作用及机制探讨 摘 要 目的:研究山茱萸核多酚的血管舒张作用，并探讨其可能机制.方法：采用大鼠腹主动脉环张力测定法。结果:山茱萸核多酚（0./ml)对大鼠和家兔腹主动脉内皮完整或去内皮血管环产生浓度依赖性的舒张作用；山茱萸核多酚对去甲肾上腺素（510 molL1）预收缩的内皮完整或去内皮血管环均产生浓度依赖性的舒张作用；山茱萸核多酚对kcl和kcIndo预收缩的内皮完整或去内皮血管环均产生浓度依赖性的舒张作用（p0.05）;山茱萸核多酚对cl（6- moL）预收缩的内皮完整或去内皮血管环均产生显著地阻断山茱萸核多酚的舒张血管的作用；结论：山茱萸核多酚的部分依赖性血管舒张作用的机制可能是对K通道有阻断作用。 关键词:山茱萸核多酚，腹主动脉，K+通道，内皮,受体CTIO F OGWOOD NUCLEA POPHENOLS ON D OR RABBABDOINAL AORIINGSABSTACTJECTIVE:TknhfectsadmechanimofDod nuclarlyphenos fobloodesel.ETO： Thetesinfratand abtabdomnaaortirgswameasured.RETS:god nuclpolyphenols （0.1ml)caused cocentationepdentrelaxationinE（07 olL1）or kc and kcl+Idopreconstricedabdminal aortcringswitorwithotenothelumeeaxationres-nefDooouclear olyphenos；Prcntrction fvasuaredoteliumintact r enude rigs caused by kc (02 molL1)were blocked sgnficntlb ood nar plyhenols;CONCLUION:Prlly deennt sodilaton mechansms of ogood nlar olphenols may be te boko chanl .EYWOR：Dogwod nclearoyphls ， domnl aortc , K+ anel Endotlil ， accept目 录第一章 综述.。.。.。.1 。1引言.。.。.。.。.。.。 1。山茱萸果核研究现状.。.。1 1。2.1化学成分的研究。.。.。.。.。.1 122现代药理研究.。.。.。21。3山茱萸核多酚的研究进展及意义。.。.。4第二章 前言 。.。.。.5第三章 材料与方法。.。.。6 3。材料。.。.。.。.。6 3.1。1 药品与溶液。.。.。.6 31.2 仪器。.。.。.。.。.。.6 3。2方法。.。.。.。.。.。6 。2。1大鼠(或家兔)腹主动脉环的制备.。.6 3. 山茱萸核多酚对腹主动脉环基础张力的影响.7 3.3山茱萸核多酚对预收缩主动脉环张力的影响 .。.。.。.。.。.。.。.。 .2.4山茱萸核多酚对KCl预收缩主动脉环张力的影 响 。.。.。.。.。. 5 山茱萸核多酚对KC+Ino预收缩主动脉环张力的影响。.。.。.。.。.。.。. 3.2。 数据处理。.。.。.。.。.。.。7第四章 山茱萸核多酚对腹主动脉环的作用及机制探讨74。1山茱萸核多酚对大鼠腹主动脉换的作用及机制探讨.。.。.。.。.。. 。.。.。.。.8 4.。1山茱萸核多酚对大鼠离体腹主动脉环基础张力的影响。.。.。.。.。.。.。.8 .1。2山茱萸核多酚对PE预收缩的大鼠腹主动脉环张力的影响。.。.。.。.。.。9 4.13山茱萸核多酚对KCl预收缩的大鼠腹主动脉环张力的影 响。.。.。12 4.1.山茱萸核多酚对KCl预收缩和IndKC预收缩大鼠腹主动脉环张力的影响。.。.。.。34。2山茱萸核多酚对大鼠腹主动脉换的作用及机制探讨1542.1山茱萸核多酚对大鼠离体腹主动脉环基础张力的影响。.。.。.。.。.。.。.。.。 。山茱萸核多酚对PE预收缩大鼠腹主动脉环张力的影响。.。.。.。.。.。1 。2。3山茱萸核多酚对Cl预收缩的大鼠腹主动脉环张力的影响.。.。.。.。.。8 .24山茱萸核多酚对KCl预收缩和nol预收缩大鼠腹主动脉环张力的影响.。.。.。.。.2第五章 结论。.。.。.。.2参考文献.。.。.。.。.。.。.。.。22 致谢.。.。.。.。.。.。.。.。 附录。.。.。.。.。.。.。.。237 / 46第一章 综述1.1引言 山茱萸，属山茱萸科落叶灌木或小乔木，其成熟果实为中药，又名枣皮、山芋、药枣，是我国传统的名贵滋补中药材，其应用历史悠久.其性酸、涩,微温，归肝、肾经，功能为补益肝肾，涩精固脱，其有效成分具有抗菌、利尿、降压、升白和免疫等多种生理活性，许多以六味地黄汤为基础的成药均以山茱萸为主药，如在六 味 地 黄丸 中 占 ,知 柏 地黄 丸中 占13. ,金 匮 肾 气 丸 中 占 14.83%，左 归丸 中 占10.55 ，杞菊地黄丸、桂附地黄丸、益明地黄丸、济阴地黄丸以及相应的汤剂中均为主要成分，是中医临床必不可少的一味中药.这些配方疗效可靠，远销东南 亚 各 国。我国 每 年山茱 萸全国 总产量 约50余吨，果肉约 00余吨，占山茱萸全果总重量8% 的果核则被废弃.目前,山茱萸果肉入药，只能满足国内市场需求量的 /3,随着出口量逐年增长和庞大的营养保健产品上市的开发,供不应求矛盾日益突出。解决矛盾的对策主要从两方面着手，一是扩大种植规模，二是开发山茱萸果核潜在的药用和保健价值。.2山茱萸果核研究现状1.2。化学成分的研究 山茱萸化学成分的研究始于20世纪 30 年代，现有研究表明，新鲜山茱萸果肉中的有机化学物质主要有还原糖、多糖、有机酸、酚类、苷类、环烯醚萜苷、皂苷、鞣质、蛋白质、氨基酸、维生素B1、维生素 C、黄酮、蒽醌、甾体、三萜、内酯、香豆素、挥发油、脂肪酸和微量元素等.果肉及果核均含有十几种氨基酸和丰富的维生素 B1、维生素 C 以及 2多种矿物质.果核中同样富含营养素，如蛋白质4.6% 、脂肪 5% 、糖 .3%、灰分.3 及粗纤维 512% ；1种矿物元素，其中磷的含量比果肉高,提示果核也有综合利用的价值。近年来,由于药源的紧张，所以山茱萸的去核问题又引起人们的关注,并有许多学者从事这方面的研究。尚遂存等首先从山茱萸核中分离到白桦脂酸,同时还测定了有机酸的含量，表明核中没食子酸含量明显高于果肉,还比较了果核、果肉的成分，并从果核中分离鉴定;余象煌等也先后比较了山茱萸果肉、果核的化学成分，发现它们同样含有大量的氨基酸及无机元素。故有人认为果核加工成粉后，可同果肉一样入药。12现代药理研究 山茱萸为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉，具有补益肝肾、涩精固脱的功能，临床上用于治疗眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿尿频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴等症。其中山茱萸果核内含多种有效成分,具有多种药理学活性,具有广泛潜在的临床应用. 心血管保护作用 马松峰等使用山茱萸乙醇提取物对山茱萸果核提取液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究显示,山茱萸果核提取液可明显降低MDA含量,提高超氧化物歧化酶（SOD）含量，清除自由基，维持细胞膜功能的稳定。这将为进一步利用山茱萸果核，开发一类用于预防和治疗心肌缺血再灌注损伤的有效制剂提供实验和理论依据。时艳等使用山茱萸环烯醚萜总苷进行山茱萸环烯醚萜总苷对实验性糖尿病心脏病变的保护作用研究发现,糖尿病大鼠血糖降低，血清一氧化氮(NO）、NS 水平升高，血浆 T 水平降低,心指数降低，心肌肥大程度减轻,表明山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病心脏病变有一定的保护作用. 抗氧化作用王新玲等研究显示,山茱萸果核提取物能够显著提高大鼠血液活性，抑制自由基生成并降低DA水平。谭峰等研究发现，山茱萸果核能明显升高实验大鼠血清及肝组织中 GSHX 活性,降低 MD含量，证明山茱萸果核提取物有较好的抗氧化的作用。张月娟等发现，含山茱萸果核提取物的制剂能增加老年小鼠超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性，加强清除活性氧的能力，并可能通过此作用延缓端粒的缩短,达到延缓衰老的目的。张瑶等采用 D半糖法制作衰老模型，以灌胃法给山茱萸多糖组小鼠灌服山茱萸多糖,采用分光光度法检测总抗氧化能力（TAOD)和 MnSOD活性水平，RT-PC 法检测Kotho和 nSO基因表达水平,Weern blot法检测 ltho 蛋白表达量。结果与对照组比较，衰老组小鼠肾组织中Koto 基因、nSOD活性和基因表达均下降，总抗氧化能力（T-AOC）下降;与衰老模型组比较，山茱萸多糖组小鼠 Kloho 基因和蛋白表达明显升高，MSOD基因表达和 nSOD活性明显增高,总机氧化能力也显著提高。调节免疫作用 将山茱萸及其果核中分离得到的各种不同成分进行免疫药理活性分析时,发现其对免疫活性的影响有一定的差别。其中多糖类有免疫兴奋作用而苷类有免疫抑制作用。张玉琴等研究发现山茱萸总苷等成分具有调节免疫作用。苗明三等研究山茱萸多糖对免疫抑制小鼠的免疫兴奋作用，通过观察山茱萸多糖对Y 致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、小鼠溶血素形成、小鼠溶血空斑形成及淋巴细胞转化的影响。而提示山茱萸多糖在山茱萸中含量较高,有较好免疫兴奋作用。吕晓东等以绵羊红细胞(SRC)诱导的脾细胞抗体生成反应为活性导向评价指标，结果除山茱萸总苷外，山茱萸中的鞣质成分 F1C也具有较强的免疫抑制活性,而且其活性比山茱萸总苷强。从而得出结论，山茱萸中具有免疫抑制作用的活性成分主要为-1 和山茱萸总苷。戴岳等报道，山茱萸水煎剂能使小鼠胸腺明显萎缩，减慢网状内皮系统对碳粒的廓清速率，升高小鼠血清沉血素抗体和血清抗体 IgG的含量，但能抑制绵羊红细胞所致小鼠迟发型足垫肿胀，减轻 ，4二硝基氯苯所致小鼠接触性皮炎。抗炎作用 付桂香等采用弗氏完全佐剂形成大鼠 AA模型,观察药物对踝关节组织病理的影响，对T淋巴细胞增殖、炎性细胞因子L-1、N、L6 及迟发型超敏反应（DTH)、前列腺素E2（PGE2）的作用的方法，发现山茱萸核总苷(CO）对A 大鼠的原发病变和继发病变均有明显的治疗作用,对造模引起的踝关节组织病理伤有明显的改善，且明显抑制 AA大鼠的T淋巴细胞增殖反应和DH,抑制 IL-1、NF、I-6 等炎性细胞因子及血浆GE 的产生,从而说明 O具有较好的抗炎作用.其他 综上所述，山茱萸及其果核提取物有效成分相似，除具有免疫调节、抗氧化、抗炎、心血管保护，还具有一定的抗肿瘤、治疗糖尿病、抗休克、强心作用、抗心律失常和保肝、治疗不育症等药理作用.山茱萸果核具有很强的潜在临床利用价值.山茱萸核多酚的研究进展及意义 山茱萸果核水提物或醇提物具有与山茱萸果肉类似的抗氧化作用；抗动脉粥样硬化作用；对高血压大鼠和家兔具有显著的降低血压作用.但这些药理效应的机制尚不清楚,而且果核水提物或醇提物成分极其复杂，这为进一步分析其作用机制带来不便。在前期工作中，我们采用大孔树脂技术建立了果核中多酚类成分的制备工艺。本课题组研究也发现山茱萸果核醇提物或水提物对高血压大鼠和家兔具有显著降压作用，改善心脏功能,减缓心肌重构。但这些药理效应的机制尚不清楚，而且果核水提物或醇提物成分极其复杂。现对所制备的多酚类成分进行研究,观察对家兔和大鼠离体腹主动脉环的作用及机制进行研究和探讨，这一研究对探讨山茱萸果核水提物或醇提物的降压机制提供实验和理论依据。 第二章 前言山茱萸是山茱萸科植物山茱萸(Corns offi ieb。 et c。）的干燥成熟果实，是我国传统的名贵滋补中药材，秋末冬初果皮变红时采收果实，主要分布在河南、浙江、陕西、山西、安徽、四川等地。其性味酸、涩， 微温,归肝、肾经, 中医认为山茱萸具有补益肝肾、涩精固脱的功效, 许多以六味地黄汤为基础的成药均以山茱萸为主药。临床上主治眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、崩漏带下、遗尿尿频、大汗虚脱、内热消渴等症。山茱萸因含有丰富的营养成分和多种有效成分，日渐成为研究热点.我国每年山茱萸全国总产量约5000余吨,果肉约1000余吨，占山茱萸全果总重量80%的果核则被废弃。目前,山茱萸果肉入药,只能满足国内市场需求量的1/3,随着出口量逐年增长和庞大的营养保健产品上市的开发,供不应求矛盾日益突出。为了充分利用山茱萸果核，满足目前的市场需求而不造成巨大浪费，因此丰富其使用方法具有极强的现实意义。 目前已有研究表明，山茱萸果核水提物或醇提物具有与山茱萸果肉类似的抗氧化作用；抗动脉粥样硬化作用;对高血压大鼠和家兔具有显著的降低血压作用.但这些药理效应的机制尚不清楚，而且果核水提物或醇提物成分极其复杂,这为进一步分析其作用机制带来不便。在前期工作中,我们采用大孔树脂技术建立了果核中多酚类成分的制备工艺，现在对所制备的多酚类成分进行研究，观察对家兔和大鼠离体腹主动脉环的作用及机制进行研究和探讨,这一研究对探讨山茱萸果核水提物或醇提物的降压机制提供实验和理论依据，同时为山茱萸果核的进一步开发和利用奠定了基础。第三章 材料与方法3. 材料.1。1 药品与溶液 吲哚美辛（indomethcin,Indo）;去甲肾上腺素（Phenlprn，PE）；山茱萸核多酚；KCl溶液（3o/L）; NaC固体、Kl固体、MC26H2、Cl2、NH2P422O、HEES、Gluc.1。2 仪器 G4型四腔器官浴槽系统V-4离体组织器官恒温灌流系统。2方法3.。 大鼠（或家兔)腹主动脉环的制备 清洁级prageawle(S)大鼠，体重20260g,迅速游离SD大鼠腹主动脉，置于4含5O2和5O2，混合气体预饱和的储存液中,剔除周围结缔组织,剪成4长的血管环。根据实验需要，采用机械法，用眼科镊磨擦血管环内表面去除内皮细胞,将部分血管环制备成去内皮的模型。将血管环悬挂于经37预热容量为10储存液液的浴槽内，一端固定,一端通过张力换能器连接Medlb生物信号采集系统。在持续通9O2和5O2混合气体的状态下，在37下，先于基础张力稳定30min,再逐渐调节至2。g,稳定60mn,期间每15mi换液1次。3.。山茱萸核多酚对腹主动脉环基础张力的影响组 山茱萸核多酚对内皮完整主动脉环基础张力的影响组:采用累积加药方法,使灌流液山茱萸核多酚的浓度分别达0。1、04、0。09、0.19、04910-3gL-1;山茱萸核多酚对去内皮主动脉环基础张力的影响组：方法同前组3.。3山茱萸核多酚对PE预收缩主动脉环张力的影响组 山茱萸核多酚对PE预收缩的内皮完整主动脉环张力的影响组:P(1molL)预收缩达稳态后,累积加入山茱萸核多酚；山茱萸核多酚对E预收缩的去内皮主动脉环张力的影响组：使用去除内皮血管环，加药方法同上。3山茱萸核多酚对KCl预收缩主动脉环张力的影响组 山茱萸核多酚对KCl预收缩的内皮完整主动脉环张力的影响组：KC（61mlL1)预收缩达稳态后,累积加入山茱萸核多酚;山茱萸核多酚对C预收缩的去内皮主动脉环张力的影响组:使用去除内皮血管环,加药方法同上。32. 山茱萸核多酚对C+nd预收缩主动脉环张力的影响组 山茱萸核多酚对Ino+KCl预收缩的内皮完整主动脉环张力的影响组：Indo（10-2olL1)、KC(610-moL1）预收缩达稳态后,累积加入山茱萸核多酚;3。6数据处理 所有数据均以均数标准差所有数据均ma%S表示，采用studentt检验和ANOVA进行显著性检验。第四章 山茱萸核多酚对腹主动脉环的作用及机制探讨4.1山茱萸核多酚对大鼠腹主动脉换的作用及机制探讨.1.山茱萸核多酚对大鼠离体腹主动脉环基础张力的影响 浓度为0.01、004、。09、0。19、490-3mgmL-1的山茱萸核多酚对内皮完整去内皮组的腹主动脉环的基础张力均无显著性影响（p0.)见(表41、图4)。表4 山茱萸核多酚对大鼠离体腹主动脉环的直接作用图41山茱萸核多酚对大鼠离体腹主动脉的直接作用41.2山茱萸核多酚对PE预收缩大鼠腹主动脉环张力的影响 浓度为001、004、00、09、.91-3gm-1的山茱萸核多酚可使去甲肾上腺素预收缩的内皮完整的腹主动脉环舒张，比去甲肾上腺素（molL1）预收缩时的张力明显降低与山茱萸核多酚的直接作用相比(p005），并呈现浓度依赖性。(表4-、图2） 山茱萸核多酚对去内皮腹动脉环去甲肾上腺素预收缩后的血管张力也具有明显的舒张效应，与山茱萸核多酚的直接作用相比（p.）,并呈现浓度依赖性。(表4-2、图4-）并且内皮完整和去内皮的腹主动脉环组间各数据无明显差异（0。0)见（表42、图4-4）。表2山茱萸核多酚对去甲肾上腺素预收缩主动脉环张力的图42山茱萸核多酚对有去甲和无去甲预处理的大鼠离体腹主动脉的作用(有内皮） 图3山茱萸核多酚对有去甲和无去甲预处理的大鼠离体腹主动脉的作用(无内皮）图44山茱萸核多酚对去甲肾上腺素预收缩主动脉环张力的影响1.3山茱萸核多酚对Cl预收缩的大鼠腹主动脉环张力的影 用6mmol1的KCl预收缩血管,结果显示山茱萸核多酚对KCl预收缩的内皮完整的动脉环有相当显的舒张作用，与山茱萸核多酚的直接作用相比（p.5）,并呈现浓度依赖性。（表-6、图410) 山茱萸核多酚对去内皮腹动脉环去甲肾上腺素预收缩后的血管张力也具有明显的舒张效应，与山茱萸核多酚的直接作用相比（p。5）,并呈现浓度依赖性.(表46、图1)并且内皮完整和去内皮的腹主动脉环组间各数据无明显差异(P.0）见（表-6、图-12）。表4-核多酚对去甲肾上腺素预收缩主动脉环张力的影响图4-10山茱萸核多酚对有去甲和无去甲预处理的家兔离体腹主动脉的作用（有内皮）图4-1山茱萸核多酚对有去甲和无去甲预处理的家兔离体腹主动脉的作用(无内皮）图12山茱萸核多酚对去甲肾上腺素预收缩主动脉环张力的影响4。23山茱萸核多酚对KCl预收缩的家兔腹主动脉环张力的影响 用 6molL1的KC预收缩血管,结果显示山茱萸核多酚对KCl预收缩的内皮完整的动脉环有相当显的舒张作用,与山茱萸核多酚的直接作用相比（p。05），并呈现浓度依赖性(见图413,表47)。去内皮腹主动脉环的张力比KC预收缩时的张力明显降低与山茱萸核多酚的直接作用相比(p0。0）并呈现浓度依赖性见（图4-14，表7)，并且内皮完整和去内皮的腹主动脉环组间各数据无明显差异（P05)见(图415，表47).表47山茱萸核多酚对l预收缩的腹主动脉环张力的影响 图413山茱萸核多酚对有kcl和无c预处理的家兔离体腹主动脉的作用(有内皮）图44山茱萸核多酚对有kcl和无kcl预处理的家兔离体腹主动脉的作用（无内皮)图4-1山茱萸核多酚对K预收缩的腹主动脉环张力的影响4。2。4山茱萸核多酚对KC预收缩和ndoKCl预收缩家兔腹主动脉环张力的影响 山茱萸核多酚对KCl预收缩和Id+l预收缩的腹主动脉环张力有舒张作用，且两组数据无明显差异（P05）。见（图1，表4-8) 表4核多酚对l预收缩和Indo+KCl预收缩的腹主动脉环张力的影响 图46山茱萸核多酚对kc和I、kcl作用于家兔离体腹主动脉后的作用第六章 结论本实验结果表明，山茱萸核多酚对腹主动脉环内皮完整或去内皮的直接作用和去甲肾上腺素预收缩的内皮完整或去内皮大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用,内皮完整或去内皮组无显著性差异,提示山茱萸核多酚舒血管作用是非内皮依赖性的。其舒血管作用与内皮源性的舒张因子如一氧化氮、前列环素等无明显关系，可能是直接作用于血管平滑肌所致。山茱萸核多酚对kcl预收缩腹主动脉血管环的实验数据处理显示0.05，这表明山茱萸核多酚的作用机制很可能是激活血管平滑肌上的K+ 通道，引起细胞膜超极化,从而抑制细胞外钙内流,引起血管舒张。在动脉平滑肌上有四类K+ 通道:(1)电压依赖性K+通道（volageeedet + cnnes，K)，加压或在血管收缩物质作用下,引起细胞膜除极化时通道开放，从而起着调节膜电位的作用。（2）内向整流 通道（indrcfed K+ chals,Kir），细胞膜超极化时通道开放，K+ 的内流大于外流，对维持静息电位起重要作用。（3)ATP敏感K+ 通道(ATPsensiti + chnels，KTP），无电压依赖性，在细胞内可被A抑制，被优降糖4A、P等激活.（4）钙激活K+ 通道（Ca2tiate K+ cannes，Kca)，分高电导（Bc)、中电导（Ica)、低电导(Skca)三种。本次实验由于重复实验做的并不是太多，由实验引起的误差的可能性是有的,这是客观真实的。要想说明山茱萸核多酚在腹主动脉血管平滑肌舒张的机制，需要进一步做实验并加以验证。总之,本研究结果表明,山茱萸核多酚具有剂量依赖性地舒血管作用，其作用机制可能是激活血管平滑肌上的K+ 通道，引起细胞膜超极化，从而抑制细胞外钙内流，引起血管舒张。至于作用于哪一类型的K+通道,需进一步研究证明.参考文献1潘扬,王天山 植物山茱萸化学成分的研究概况 南京中医药大学学报,1998，4 （）：162。2 HanoT，Tak T,e T，etl. gaolate onerpeneglucodad dirc hydrolsle tnn romcrs of icinas J.Phytochist，190，29（9）:297.3国家药典委员会编. 中华人民共和国药典一部S. 北京：化学工业出版社,000:24张玉琴，赵武述. 山茱萸总苷抑制免疫的体内效应及其对移植心脏存活的延长 J中华微生物学和免疫学杂志，1995,5（5）:3- .5苗明三，方晓燕,杨云，等。 山茱萸多糖免疫兴奋作用的研究J。 河南中医，02，2（3）：2-25。6吕晓东，张永祥,茹祥斌，等。 山茱萸体液免疫抑制活性成分的药理导向评价分离J解放军药学学报,200，1(6）：3535.7 郝海平,许惠琴，朱荃,等. 山茱萸环烯醚萜总苷对由链脲佐菌素诱导的糖尿病血管并发症大鼠血清 IC-、T 的影响J。中药药理与临床，002，18（4）：12-38 付桂香，李建民,周勇，等。山茱萸总苷抗炎免疫抑制作用及其机理的大鼠实验研究J。 中华微生物学和免疫杂志，007，2（4)：3160.9马松峰，王红伟,路西明.山茱萸果核提取液对大鼠心肌缺血再灌注损 伤 的 保 护 作用J. 陕 西 医 学 杂 志，200，8(5)：2-524.10时艳,许惠琴。 山茱萸环烯醚萜总苷对实验性糖尿病心脏 病变的保护作用J. 南京中医药大学学报，2006,22(1)：5-37。11 王新玲，李月彩. 金匮肾气丸抗自由基和细胞凋亡的作用J. 第四军 医大学学报，2000，1（10）：201211.12谭峰,刘群良援 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EFFET O SBACTLED ACA ADMINISTRATIO NITRIC XDE AND CYCLXYGENASEPATWAS IR SOLATE AORTIC RING ,2002，6(3)。致谢在论文基本定稿的时候，我心里夹杂着难以表达的伤感和欣喜，毕业论文是我即将毕业的主要任务之一，这一个任务饱含了指导老师的诲人不倦、朋友同学的帮助以及自己一点一滴的努力。回首大学生活，医学院承载了我最美年华里的四个春翡夏翠秋金冬银，有过欢笑也曾留下遗憾，但庆幸的是,此时此刻我们还能聚首一起畅想未来.借此机会，我想对我的指导老师以及帮助过我的同学朋友致以最真挚的谢意. 最想感谢的是我的指导教师-杜景霞老师,一位见闻广博而又耐心细致的良师。他在本文的选题、构思和撰写等方面给以了我很好的指导、极大的帮助，也在我论文的修改上给予了许多好的建议，多次认真的审阅和耐心的指导使我的论文得到了不断的完善,乃至终于定稿。这些都多亏了闭老师的辛勤指导和教诲。此外,路西明老师、李艳老师等也曾在开题报告时对我的论文提纲结构的完善提出了宝贵建议，使我进入初稿写作前有了一个更清晰的思路，对此我内心也充满了感激。 另外，我也要感刘瑜、陈丽、张万里等我亲爱的同学朋友们,对我论文的资料来源收集与格式规范化提供了一些帮助;他们在我繁忙时提醒我要注意的论文事项以及需要及时完成的任务，有利于我顺利完稿、交稿。总之，感谢所有帮助过我、给予我善意微笑的所有同学们，在这四年里给了我莫大的帮助和关怀，让我的青春岁月充满友谊的光辉和温暖。附录工作液液体配方： 分质量 m g20ml NaCl 58.44 13 15.79 KCl 74.55 54 0.8052gl2 。 2O 03. 1 0.06 CaCl2 110.9 18 0.4N2PO4 。 H2O 156.1 0。33 0.103 EPS 2 10 .766Gluco 。 HO 198.2 1 4 用N调PH至73 。4。文中如有不足，请您指教！