肿瘤生物治疗CAPRI技术ppt课件

肿瘤的生物治疗 CAPRI生物治疗技术 1 肿瘤生物治疗 肿瘤基因治疗 1 肿瘤免疫细胞治疗 2 细胞因子治疗 3 分子靶向药物治疗 4 肿瘤疫苗 5 肿瘤生物治疗 定义：主要是通过机体防御机制或生物制剂的作用以调节机体自身 的生物学反应，从而达到治疗肿瘤的目的。 2 肿瘤生物治疗历史 . 4 contents 目录 肿瘤生物治疗策略 . 14 各种治疗方式的不足 . 31 CAPRI. 35 肿瘤的生物治疗 CAPRI生物治疗 3 04 03 02 01 开始阶段 19世纪末 ， 肿瘤合并感染患者瘤体缩小 尝试阶段 （ 50S） 制备肿瘤疫苗 ， TSA、 TAA概念确立 奠基阶段（ 60-70S） 非 /特异性免疫治疗；过继免疫细胞治疗 发展阶段（ 80S-） 生物调节剂概念的提出，靶向及抗血管治疗 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 4 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 “ 科莱毒素 ” ： 1891年美国骨科医师威廉 .科莱创立的治疗方法 。 化脓链球菌和粘质沙雷菌替代治疗 肿瘤灶注射细菌感染基础上改进 诱发与细菌相似的全身或局部反应 没有急性化脓性感染的风险 5 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 短小棒状杆菌和卡介苗 （ BCG） 等用于治 疗恶性肿瘤 短小棒状杆菌： （ CP） G+， 其表面的脂多糖具 有较强的免疫刺激作用 ， 释放单核细胞活化因 子 ， 激活巨噬细胞 ， 增强其对肿瘤细胞的杀伤 作用 。 试用于恶性黑色素瘤 、 乳腺癌及肺小细胞型未 分化癌 卡介苗 （ BCG） ：能导致 CK的分泌和 DC的激活 。 临床常通过皮肤划痕法和皮内注射法 ， 膀胱肿 瘤可采用膀胱内灌注 。 恶性黑色素瘤 、 肺癌 、 急性白血病 、 恶性淋巴 瘤等辅助治疗 。 6 肿瘤细胞疫苗 1 基因疫苗 2 多肽疫苗 3 树突状细胞疫苗 4 CTL表位肽疫苗 5 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 肿瘤疫苗 (1902S) 原理：利用肿瘤细胞或肿瘤抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫和体液免疫 反应，增强机体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或 控制肿瘤的目的。 根 据 肿 瘤 疫 苗 的 来 源 分 类 7 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 肿瘤抗原 (50S) 肿瘤抗原 （ tumor antigen） 泛指在肿瘤发生 、 发展过程中新出现或过度表达 的抗原物质 。 TSA(Tumor-specific Antigen)：肿瘤特异性抗原 。 只存在于某种癌变细胞表 面而不存在于相应正常细胞或其他种类肿瘤细胞表面的新抗原 细胞在癌变过程中由原癌基因激活或抑癌基因突变 、 缺失等所导致的肿瘤细 胞表达的异常蛋白被认为是 TSA， 如突变的 Ras、 EGFR、 P53、 DPC4等 。 TSA在细胞内被降解后 ， 其抗原肽可与 MHC I类分子在内质网中结合 ， 并共表 达于细胞表面 ， 被 CD8+CTL所识别 ， 因此是诱发 T细胞免疫应答的主要肿瘤抗 原 。 8 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 TAA （ Tumor-associated Antigen） 非肿瘤细胞特有 ， 正常细胞上也 存在的抗原 ， 只是在细胞癌变时其 含量明显增加 。 肿瘤标志物的影响因素 肝肾功能 、 胆汁淤积 标本采集过程 肿瘤病人自身状况 炎症反应导致假阳性或假阴性 孕妇及吸烟等 项目名称 临床意义 癌胚抗原 （ CEA） 原发性结肠癌 、 胃癌 、肠梗阻 甲胎蛋白 （ AFP） 原发性肝癌 、 胃癌 、 胰腺癌 前列腺特异性抗原 （ PSA） 前列腺癌 糖链抗原 CA-125 广谱 卵巢癌 ， 乳腺癌 ，胰腺癌 ， 胃癌 ， 肺癌 糖链抗原 CA-153 多种腺癌 乳腺癌 、 肺腺癌 、 卵巢癌 糖链抗原 CA-199 消化道癌相关抗原 结直肠癌 胃癌 胆囊癌等 神经元特异性烯醇 化酶 （ NSE） 神经内分泌肿瘤的特异 性标志 神经母细胞瘤 小细胞肺癌 等 9 某些真菌及多糖 免疫低下治疗 免疫亢进治疗 免疫双向调节剂 肾上腺皮质激素 硫唑嘌呤 氨甲喋呤 雷帕霉素 ATG、 ALG 他克莫司 （ FK506） 咪唑立宾 免疫抑制剂 胸腺制剂 白介素 2 特异性免疫核糖核酸 特异性转移因子 干扰素 左旋咪唑 云芝多糖 猪苓多糖银耳多糖等 某些中药如党参 、 刺 五加 、 灵芝 免疫增强剂 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 免疫调节剂 增强及调节免疫功能的药物 多为生物制品 ， 少数为人工合成化学药物 10 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 生物反应调节剂 （ biological response modifier, BMR) 凡某一类物质主要通过免疫系统直接或间接增强机体的抗肿瘤效应 ， 并对肿 瘤有治疗效果的药剂或方法 ， 都可称为生物反应调节剂 。 直接增强宿主抗肿瘤反应 1 减少抑制性机制增强宿主抗肿瘤反应 2 增强肿瘤免疫原性 3 增加机体对细胞毒物质耐受性 4 预防或逆转细胞转化 5 生 物 反 应 调 节 剂 11 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 生物反应调节剂 细胞因子：天然或基因重组 ， IL, TNF, IFN, CSF。 效应细胞：抗肿瘤的各类体细胞和造血干细胞如 LAK, 骨髓干细胞 、 外周血或 脐带血干细胞 。 抗体：包括各类抗肿瘤单克隆抗体 、 CD3抗体 。 免疫调节剂：某些菌类及其有效成分； BCG、 短小棒状杆菌 （ CP） 、 香菇多糖 、 左旋米唑 、 冬虫夏草等 。 肿瘤疫苗 蛋白酶抑制剂 癌变抑制和细胞分化诱导剂 基因治疗 血管生成抑制剂 其他 12 一、肿瘤生物免疫治疗的历史 BRM临床应用举例 卡介苗 （ BCG） 能导致 CK的分泌和 DC的激活 临床常通过皮肤划痕法和皮内注射法 ， 膀胱肿瘤可采用膀胱内灌注 短小棒状杆菌 （ CP） G(+)厌氧杆菌 ， 具有免疫佐剂的作用 激活 M， 增强溶酶体活性 ， 诱导 IFN和提高 NK细胞活性 多糖类：香菇多糖 、 云芝 多糖等 能刺激单核巨噬细胞的增殖 ， 增强 T和 NK细胞活性 免疫组织和细胞提取物： 胸腺素 、 转移因子 ， 免疫 核糖核酸等 来源于免疫组织 （ 胸腺 、 脾 、 淋巴结 ） 和外周淋巴细胞 促进 T细胞分化成熟和增强 T 细胞对抗原的应答反应 ， 增强 CTL和 NK细胞活性 协助 T细胞功能低下者免疫功能的恢复 ， 以及宿主抗病毒 感染和抗肿瘤 13 二、肿瘤生物治疗的的策略 生物治疗：是一个广泛的概念 ， 涉及一切应用生物大分子治疗的方法 ， 种类十分繁多 。 细胞因子治疗 1 免疫细胞治疗 2 基因治疗 3 分子靶向治疗 4 肿瘤疫苗 5 14 肿瘤的过继免疫细胞治疗 肿瘤的过继细胞免疫治疗 (ACI或 AIT） 向肿瘤患者转输具有抗肿瘤活性的免疫细胞直接杀伤肿瘤或激发机体免疫反 应杀伤肿瘤细胞 ， 达到治疗肿瘤的目的 。 简要历史回顾 20世纪 60年代：发现细胞免疫引起组织器官移植排斥启发人们应用过继性细 胞免疫治疗肿瘤 。 20世纪 80年代： 85年 ， Rosenberg报道 LAK/IL-2治疗晚期恶性肿瘤具有疗效 。 86年 ， 报道 TIL。 15 肿瘤的过继免疫细胞治疗 历史回顾 柳叶刀 报道 76位 根治性术后的肝癌患 者接受了 DC-CIK细胞 免疫治疗，其肝癌复 发率比之于对照组降 低了 51%， 卫生部将自 身免疫治疗技 术纳入第三类 医疗技术 其他如 iAPA-细胞 、 CAPRI细胞 、 粒福特 、 TCR、 CAR-T、 T细胞 等 。 非特异性： NK,CIK,LAK等 特异性： CTL,TIL等 肿 瘤 浸 润 淋 巴 细 胞 （ TIL ） 细 胞 因 子 诱 导 的 杀 伤 细 胞 树 突 状 细 胞 淋 巴 因 子 激 活 的 杀 伤 细 胞 自 然 杀 伤 细 胞 其 他 16 细胞因子治疗 细胞因子 （ cytokines） 是由细胞产生 的可溶性蛋白 。 它们通过作用于细胞表 面的相应受体 ， 影响自身细胞或其他细 胞的生长和代谢 。 目前 FDA批准临床使用的细胞因子 CK的抗肿瘤作用机制 诱导免疫效应细胞的激活 、 增殖与分化 ， 增强免疫效应细胞的功能与活性 抑制肿瘤病毒的增殖和肿瘤细胞的分裂 促进肿瘤细胞抗原递呈和共刺激分子表 达 直接杀伤肿瘤细胞或诱导肿瘤细胞凋亡 抑制肿瘤血管生成 ， 诱导肿瘤细胞分化 细胞因 子 适应症 IFN- 毛细胞白血病 、 慢粒 、 Kaposi 肉瘤 、 尖锐湿疣 、 慢性乙型 、 丙型肝炎 IFN- 多发性硬化症 IFN- 慢性肉芽肿性疾病 IL-2 转移性肾细胞癌 G-CSF 中性粒细胞减少 、 非骨髓性恶 性疾病 GM-CSF 淋巴瘤 、 急淋 、 骨髓移植 EPO 贫血 17 细胞因子治疗 副作用 细胞因子 流感样症状：寒战 、 发热 、 肌痛 、 头痛 、 乏力等 多数 CK 毛细血管渗漏综合征：低血压 、 浆膜腔积液 、 组织水肿 等 IL-2， IL-11 胃肠道反应：恶心 、 食欲减退 、 呕吐等 IFN 神经精神症状：抑郁 、 躁狂 、 人格改变等 IFN 血液学毒性：白细胞减少 ， 血小板减少 ， 贫血 IFN 肝肾功能损害 IFN 骨痛 G-CSF 诱发自身免疫反应 IFN等 CK的毒副反应 18 基因治疗 通过对人体遗传物质进行修正 、 补 充或改造以达到治疗疾病的目的 ， 或将遗传物质导入人体组织或细胞 所进行的疾病治疗方法 。 基因治疗的策略 A. 基因替换 B. 基因修饰 C. 基因添加和补充 D. 基因封闭 目的基因 A.免疫相关基因 B.抑癌基因和癌基因 C.抗血管生成基因 D.自杀基因 E.其它基因 基因导入方法 A.非病毒载体： B.病毒载体： 非病毒载体 裸 DNA直接注射 脂质体共转染 受体介导基因导入 病毒载体 逆转录病毒载体 腺病毒载体 腺相关病毒载体 单纯疱疹病毒载体 痘病毒载体 19 基因治疗 基因治疗应用举例 今又生 重组人 P53腺病毒 安柯瑞 今又生对晚期鼻咽癌 40余 种人类主要实体瘤有明确疗 效 术中、术后使用可消灭残 留癌，预防复収与放 /化疗联 合应用具有协同作 用药途径为瘤内注射 以 5-FU、顺铂化疗方案进 行姑息治疗的晚期鼻咽癌患 者可 联合 试用本品 与化疗药物同步使用，直 接瘤内注射 限于鼻咽癌高収地区三级 甲等医院使用 E1B缺陷腺病毒 20 肿瘤疫苗 定义：利用肿瘤抗原 ， 通过主动免疫方式诱导机体产生特异性抗肿瘤 效应 ,激収机体自身的免疫保护机制 ,达到治疗肿瘤或预防复収的作用 。 主动免疫 抗原佐剂 目前除了治疗晚期前列腺癌的疫苗 Provenge及治疗晚期恶性黑色素瘤的抗 CTL-4单抗 Ipilimumab外 ， 肿瘤疫苗尚未广泛应用 。 肿瘤疫苗设计策略 选择合适的肿瘤抗原 选择肿瘤抗原的给予方式 21 肿瘤疫苗 肿瘤疫苗来源于自体或异体肿瘤细胞或其粗提取物，带有 TSA或 TAA 经灭活处理后丧失致瘤性，但仍保持其免疫原性 对机体进行主动免疫 蛋白 /多肽 疫苗 抗独特型抗 体疫苗 病毒疫苗 DNA疫苗 DC疫苗 全细胞肿瘤 疫苗 22 分子靶向治疗 肿瘤分子靶向治疗：利用肿瘤组织或细胞所具有的特异性结构分子作 为靶点 ， 使用某些能与这些靶分子特异结合的抗体 、 配体等达到直接 治疗或导向治疗目的的一大类治疗方法 。 分子靶向治疗的靶点 细胞受体 信号转导 细胞周期 血管生成 23 单克隆抗体 目前上市的肿瘤分子靶向药物主要有单克隆抗体和小分子化合物 单克隆抗体 单 克 隆 抗 体 裸单抗 抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用 （ ADCC效应 ） 聚集和活化宿主的效应细胞 通过补体介导的细胞毒作用 （ CDC效应 ） 阻断受体 -配体的相互作用 诱导细胞凋亡等机制杀伤肿瘤细胞 修饰的 单 抗 不具有裸抗体的免疫效应和直接杀伤肿瘤的作用 通过自身对肿瘤抗原的识别 ， 将偶联上的放射性同位素 、 毒素 、 药物 、 酶等带至肿瘤局部 ， 起到特异性载体作用 。 24 单克隆抗体 名称 主要靶点 类型 适应症 裸单抗 利 妥 昔 单 抗 （ rituximab） 美罗华 CD-20 人 /鼠嵌合抗体 B-NHL 曲 妥 珠 单 抗 （ trastuzumab） HER-2 人源化抗体 乳腺癌 贝 伐 珠 单 抗 （ bevacizumab） VEGF 人源化抗体 CRC 、 NSCLC 乳腺癌 西 妥 昔 单 抗 （ cetuximab） EGFR 人 /鼠嵌合抗体 NSCLC、 CRC HNSCC 修饰的单抗 替 伊 莫 单 抗 （ 90Y - ibritumomab） CD-20 放射性物质标 记的鼠源性抗 体 B-NHL 托 西 莫 单 抗 （ 131I - tositumomab） CD-20 放射性物质标 记的鼠源性抗 体 B-NHL 25 单克隆抗体 肿瘤抗体靶向治疗的发展历史 鼠源性多克隆抗血清是最早被用于治疗肿瘤的抗体分子 1975年利用杂交瘤技术成功地制备 McAb， 大大推动了肿瘤生物靶向治疗的进 展 近十年来已研究制备出人鼠嵌合抗体 、 人源化抗体和完全人源抗体 通过克隆化可使杂交细胞成为单纯的细胞系 ， 由此单克隆系就可以获得结构 与各种特性完全相同的高纯度抗体 ， 即单克隆抗体 （ Monoclonal Antiboby, McAb） 。 26 单克隆抗体 抗体的基本结构 人 -鼠嵌合抗体 人源化抗体 完全人源化抗体 27 单克隆抗体 人 -鼠嵌合抗体 人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体 人源化抗体 进一步降低抗体的鼠源成分 ， 发展出 CDR移植技术 。 CDR移植即把鼠抗体的 CDR序列移植到人抗体的可变区内 完全人源化抗体 将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术 ， 将人类编码抗体的基因全部转 移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中 ， 使动物表达人类抗体 ， 达到抗体 全人源化的目的 . 28 小分子化合物 酪氨酸激酶抑制剂 （ TKI） 名 称 主要靶点 适应症 Gefitinib（ Iressa） EGFR-TK NSCLC Erlotinib（ Tarceva） EGFR-TK NSCLC Imatinib（ Gleevec） Bortezomib（ Velcade)万珂 Bcr/Abl, c-kit, PDGFR 蛋白酶体 CML GIST MM Sorafenib（ Nexavar） 多吉美 C-Raf， B-Raf， VEGFR,PDGFR 、 FLT-3， c-KIT RCC,HCC Sunitinib（ Sutent） 舒尼替尼 VEGFR/PDGFR 、 FLT-3, KIT, FMS RCC, GIST 29 分子靶向治疗 在临床应用方面 ， 抗肿瘤单抗分子质量大 ， 半衰期长 ， 但易受胃液酸性环境 的破坏 ， 故常采用静脉每 13周给予 1次 。 因其单药治疗疗效不理想 ， 多与化 疗联合应用 。 小分子化合物的半衰期短 ， 口服稳定 ， 且多数临床研究未显示出与化疗的协 同作用 ， 故常单药每日 1次口服 。 30 三、各种治疗方式的不足 过继性免疫疗法存在的问题 由于肿瘤细胞的不均一性及效应细胞的异质性造成疗效的不确定性 ; 体 外大量扩增过继免疫细胞技术有待开发； 输注的细胞向肿瘤组织的聚集性弱 ; 体内过继免疫机制的进一步明确； 与其它肿瘤治疗方法的有机整合需要进一步完善； 缺乏统一的能指示临床转归的的免疫检测指标； 31 三、各种治疗方式的不足 肿瘤单克隆抗体靶向治疗的缺点 一是实体肿瘤的细胞被致密的基质包裹 ， 抗体难以穿透这一屏障；大多数实体 肿瘤都存在淋巴回流障碍 ， 导致间质内压力升高 ， 阻止了抗体进入肿瘤实质 。 二是由于治疗肿瘤的抗体需要量极多 ， 要求产品纯度极高 ， 目前的生物工程生 产比较困难 ， 因此其产品生产成本及价格均非常昂贵 三是肿瘤细胞的异质性 ， 目前的抗体治疗是针对肿瘤细胞某个特异性受体 ， 而 肿瘤细胞并非均一 ， 因此单一清除含有某种受体的肿瘤细胞并不代表能治愈 了肿瘤 ， 目前一些治疗方法是在抗体中标上同位素或毒素 ， 尽管提高疗效 ， 但其副作 用亦随着增加 。 32 三、各种治疗方式的不足 基因治疗的不足 安全性是基因治疗的第一要素 。 有接受以腺病毒为载体的 OTC 基因治疗 4天后 死亡 。 体内靶向基因治疗办法不多 。 若治疗基因不只进入肿瘤细胞 ， 也进入正常细 胞 ， 使后者功能异常 。 治疗基因若误入生殖细胞 ， 影响将传给下一代 。 大力加强外源基因在不同组织学类型肿瘤中特异表达和调控途径的研究 ， 当 下的艰巨任务 。 33 三、各种治疗方式的不足 肿瘤疫苗的潜在危险 以照射 、 病毒感染 、 基因重组后的肿瘤细胞为疫苗者 ， 肿瘤细胞的致瘤性虽 大大降低 ， 但也不完全排除其注入体内致瘤的可能性； 各种疫苗载体注入体内 ， 有将传染性或其他毒性分子带给病人的潜在危险； 机体产生的肿瘤抗原抗体有引起自身正常组织产生过敏反应或自身免疫性疾 病的可能； 利用基因工程肿瘤疫苗时 ， 外源基因持续表达外源抗原或插入激活内源性致 癌基因 ， 有引起新的疾病和致癌的可能 。 34 四、 CAPRI 链 式 激 活 的 免 疫 细 胞 （ cascade primed immune cells， CAPRI） 徳国慕尼黑大学医学院免疫研究所 Rudolf Wank 教授的一项用于肿瘤生物治疗的专利 技术 该技术是应用患者的外周血淋巴细胞 ， 经 活化刺激 ， 获得对肿瘤的特异性杀伤功能 ， 回输后可在体内杀伤肿瘤 。 35 CAPRI 细胞治疗疗效的限制因素 确定诱导免疫反应和应答的抗原是哪一种抗原是很困难的 。 既使这个问题得到解决 ， 肿瘤细胞经常选择性地丢失肿瘤特异性抗原 肿瘤细胞可在局部产生细胞因子来降低效应细胞的杀肿瘤能力 需要大量细胞因子的参与和刺激免疫效应 ， 传统方法里面 ， 刺激因子是不充 分的 因此 ， 难以达到理想的杀伤效果 。 36 CAPRI 针对以上问题 ， Wank教授发明了通过级联引发的刺激外周血单个核细 胞的 CAPRI细胞 。 病人外周血经分离 获得单个核细胞 经固化的抗 CD3单 克隆抗体及细胞因子 激活 ， 使 DC成熟 再次加入未经激活的 外周血淋巴细胞 加入细胞因子 ， 整个 过程 5天 37 CAPRI CAPRI解决问题 初级刺激所激活的抗原呈递细胞本身在体内已接触过肿瘤抗原 ， 且具有记忆 功能 ， 因此可在体外有效地诱导对自身病人特异性的免疫应答 ， 所以本方法 无需确定病人的肿瘤抗原 肿瘤细胞经常有意识地丢失掉表面 HLA（ 人类白细胞抗原 ） 的表达 ， 从而逃避 杀伤细胞尤其 CTL细胞的杀伤 。 实验表明 ， CAPRI细胞可以显著上调肿瘤细胞 表面的 HLA表达 ， 使杀伤细胞很容易识别并启动免疫杀伤过程 CAPRI细胞在体外已被有效活化 ， 进入体内后将不受细胞因子及共刺激因子的 限制 38 CAPRI CAPRI的四大优势 39 CAPRI 与 CIK细胞疗法的比较 项目 CIK CAPRI 说明 培养过程 一步培养扩增获得效应细胞 ） 第一步培养的目的 不是获得效应细胞 ， 而 是具有抗原提呈功能的 DC和下一步刺激的细胞 因子环境； ） 初步刺 激激活的 DC在体内接触 过抗原 ， 具有记忆功能 ， 可有效刺激 PBMC的激 活； 从 CIK基础上改进的方法 MHC限制性 只杀伤不表达 MHC分子的肿瘤细胞 CTL、 Th杀伤表达或高 表达 MHC分子的肿瘤细 胞 ， NK、 NKT杀伤不表 达 MHC的肿瘤细胞 人类肿瘤细胞中 ， 表达 MHC分子的肿瘤细胞约 占 80%， 不表达 MHC分 子的细胞约占 20% 效应细胞效应细胞 CD3+和 CD56+细胞 ， 即 NKT细胞；记忆细胞： 29% Th和 CTL细胞为主 ， 另 有少量 NK、 NKT、 DC细 胞等；记忆细胞： 49% CAPRI的效应细胞中 NKT 细胞约占 20%， CTL和 Th 细胞约占 80%， 而 CIK效 应细胞均为 NKT细胞； 40 CAPRI 恢复和上调 HLA 在肿瘤 细胞表面的表达 在效应细胞：肿瘤细胞 （ E:T， 或效靶比 ） 为 1： 5条件下 ， CIK细胞与乳 腺癌细胞共同孵育 5小时 ， 乳腺癌细胞的 HLA表达 无变化 在 E:T 1： 5条件下 ， CAPRI细胞与乳腺癌细胞 共同孵育 5小时 ， 乳腺癌 细胞的 H L A 表达上升 100%， 即 5个 CAPRI细胞 可上调 5个癌细胞的 HLA 表达 肿瘤细胞 HLA表达的下 调使得肿瘤细胞无法 被效应细胞识别并杀 伤 ， 因此 ， 肿瘤细胞 表面 HLA表达的下调或 丧失是肿瘤细胞逃避 CTL细胞杀伤的重要手 段 效应细胞的反复利用 CIK细胞只能一次性杀伤肿瘤细胞 CAPRI细胞的效应细胞在 消灭肿瘤细胞系后可以 被再次利用 ， 可连续 7次 用于同种肿瘤细胞系 ， 而杀伤活性不减 用于 CAPRI细胞反复利 用试验的肿瘤为：黑 色素瘤 （ 1个细胞系 ） 、 乳腺癌 （ 9个细胞系 ） 、 结肠癌 （ 3个细胞系 ） 、 多形性恶性胶质瘤 （ 2 个细胞系 ） 、 乳头状 瘤 （ 1个细胞系 ） 成纤维细胞包裹的肿瘤 完全无效 有效杀伤包裹的肿瘤细胞 肿瘤在体内的转移病 灶通常是被成纤维细 胞所包裹的 ， 因此 ， CAPRI细胞对于转移瘤 具有显著的杀伤力 41 CAPRI CAPRI的效应细胞中 ， 记忆细胞占据了将近一半 （ 49%） 的比例 ， 这 些记忆细胞有三大特点： 其一 、 高表达抗凋零分子 ， 不易在外界因素的作用下凋零 。 其二 、 非抗原依赖性增殖 ， 即不需要抗原的存在即可以不断增殖 ， 保持相应 的数量 。 其三 、 也是最重要的一点 ， 再刺激阈值下降 ， 就是说 ， 回输到体内后 ， 即使 极少量的抗原信息的刺激 ， 都可以引起记忆细胞强烈 、 快速 、 有效的免疫应 答 ， 从而启动整个杀伤过程 。 42 CAPRI临床应用 病人的选择 1、 感染甲肝 、 乙肝 、 丙肝和艾滋病的肿瘤病人应在有单独培养条件下进行细 胞的制备 2、 细菌感染的病人应在开展免疫疗法前用抗生素进行对症治疗 3、 WHO生存质量在 0-3 4、 白细胞计数大于 4000/mm3 5、 肌酐小于 2.0mg/DL 6、 如果使用了升白药 GMCSF或大剂量的 IL-2， 需要停药后 2周再采血 7、 如果患有自身免疫性疾病如多发性硬化 （ MS） 、 肌萎缩侧索硬化症 （ ALS） 、 系统性红斑狼疮 （ SLE） 、 哮喘 、 桥本病等 ， 应禁用 43 CAPRI临床应用 CAPRI临床适应症 适应征广泛 ， 目前的临床经验表明这项治疗对多种实体肿瘤有效 ， 肺癌 、 乳 腺癌 、 卵巢癌 、 胃癌 、 肠癌 、 脑瘤 、 黑色素瘤 、 前列腺癌 、 头颈部肿瘤 、 食 道癌 、 肾癌 、 肝癌 、 膀胱癌 、 宫颈癌 、 子宫内膜癌 、 胆囊癌 、 肉瘤 、 皮肤癌 等二十多种实体肿瘤和血液肿瘤 （ T淋巴细胞瘤除外 ） CAPRI细胞治疗的副作用 CAPRI细胞是经过诱导 、 激活的患者自身的细胞 ， 治疗相当安全 ， 仅有少量 病例 （ 约 3%的患者 ） 在细胞回输后 2-10小时注射局部出现红肿等轻度局部过 敏症状 ， 一般不需治疗 ， 12小时内症状消失 。 44 CAPRI临床疗效 (1)增强免疫力和机体抵抗力； (2)提高生活质量：疼痛减轻 、 睡眠改善 、 食欲增加 、 体重恢复 （ 经 WHO标准 统计 ， 有显著优 p0.05） ；大部分经该方法治疗的病人保持了工作能力 。 (3)特异性杀伤患者体内残存的肿瘤细胞； (4)预防 、 延缓复发与转移； (5)增强放 、 化疗的敏感性 ， 巩固和强化其他治疗的效果； (6)延长生存期 。 肺癌三年 、 卵巢癌四年 、 乳腺癌十年存活率比传统疗法有显 著性提高 （ p0.05） 。 45 CAPRI临床疗效 有转移病灶的晚期乳腺癌 CAPRI疗法治疗的 晚期乳腺癌病人平均 无进展生存期（ PFS） 为 68.96 7.58个月， 未联合者 23.67 5.52个月。 长达十年的二期临床 观察表明， CAPRI 疗法可将病人的平均 寿命从 36 2个月 （ 428例未进行 CAPRI疗法的病例 对照）提高到 81 7 个月（见左图）。 Log Rank 统计结果 p0.0001 46 CAPRI临床疗效 淋巴侵润的肺癌 300例未进行 CAPRI 疗法的病例，平均生 存期为 15 1个月， 21例经 CAPRI细胞治 疗的病例的平均寿命 为 33 2个月 Log Rank 统计结果 p Log Rank 统计结 果 p 0.0002，二者 有显著性差异 47 CAPRI临床疗效 48 谢 谢 49