新课标创新人教生物选修1 专题3 课题1 菊花的组织培养

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一、植物组织培养及其影响因素1植物组织培养(1)理论基础:细胞的全能性。(2)植物细胞的全能性当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。(3)基本过程2影响植物组织培养的因素(1)材料选取不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。(2)营养成分常用的一种培养基是 MS培养基,其主要成分包括:大量元素,如 N、P、K、Ca、Mg、S。微量元素,如 B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。(3)植物激素:生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,二者的浓度、使用顺序及用量比例等都会影响实验结果。(4)外界条件:如pH、温度、光照等环境条件。二、菊花组织培养的实验操作1制备MS固体培养基(1)配制各种母液:大量元素、微量元素,激素类、维生素类等有机物。(2)配制培养基。(3)灭菌:高压蒸汽灭菌。3接种 (2)菊花茎段插入培养基时注意方向,不要倒插。4培养:最好在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒。培养温度控制在1822_,pH控制在5.8左右,每日用日光灯光照12 h。5移栽和栽培(1)移栽前应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。然后用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中。(2)移栽后,每天观察并记录幼苗生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。 共研探究1植物组织培养(1)概念:在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。(2)原理:植物细胞的全能性。(3)基本过程根据植物组织培养的过程,回答下列问题:A过程表示脱分化,是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,又叫去分化。脱分化的实质是已分化的细胞回到未分化状态。B是愈伤组织,其特点是:细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。C过程表示再分化,是指愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。(4)影响植物组织培养的因素内因植物的种类、材料的年龄或保存时间的长短等都会影响实验结果。一般来说,容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。例如,菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝作材料(选取生长旺盛的嫩枝进行组织培养的原因是嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化)。外因c环境因素:pH、温度、光照等2细胞分化(1)概念:在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。(2)实质:基因的选择性表达。(3)结果:形成不同的细胞和组织。3植物细胞的全能性(1)概念:已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。(2)原因:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。(3)全能性大小:一般分化程度越低的细胞,全能性越高。特例:卵细胞的分化程度和全能性都比较高。(4)全能性表达的条件离体的植物组织或细胞(用于离体培养的植物器官或组织片段,叫做外植体)。一定的营养物质。植物激素。其他适宜的外界条件。(5)在生物体内,细胞并不表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官的原因是什么?提示:细胞全能性表达的基本条件之一是处于离体状态。例如,植株上的分生组织细胞在体内只能进行分裂分化,形成不同的组织,但不能表现出全能性,这是生物体内基因程序性表达的结果。总结升华1细胞全能性大小与细胞种类的关系(1)受精卵生殖细胞体细胞;植物细胞动物细胞;分化程度低的细胞分化程度高的细胞。(2)一般地说,离体后的植物细胞的全能性在一定条件下可充分体现。(3)离体的动物细胞的全能性受到限制,但其细胞核的全能性可借助卵细胞的细胞质体现出来。(4)未离体的细胞的全能性不能表达,只是在机体的调控下进行定向分化。2植物激素在组织培养过程中的重要作用(1)在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。(2)激素使用的先后顺序及同时使用时,两者用量的比例对细胞分裂和分化的影响激素使用的先后顺序产生的影响使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但细胞不分化先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高激素用量比例产生的影响生长素用量/细胞分裂素用量结果比值高时有利于根的分化,抑制芽的形成比值低时有利于芽的分化,抑制根的形成比值适中时促进愈伤组织的形成对点演练1回答下列有关植物组织培养的问题:(1)用于植物组织培养的植物材料称为_。(2)组织培养中的细胞,从分化状态转变为未分化状态的过程称为_。(3)在再分化阶段所用培养基中,含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比,未分化细胞群的变化情况如图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系:当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时,_;_;_。(4)若植物激素Y是生长素,其在植物组织培养中的主要作用是_;则植物激素X的名称是_。(5)生产上常用试管苗保存植物的优良性状,其原因是_。解析:(1)用于植物组织培养的植物材料叫外植体。(2)植物组织培养的核心过程是脱分化与再分化,脱分化指由分化状态变为未分化状态,再分化指由未分化状态变为分化状态。(3)仔细分析所给示意图,可知植物激素X与植物激素Y浓度比等于1时,未分化细胞群形成愈伤组织,大于1时细胞群分化出芽,小于1时细胞群分化出根。(4)生长素在植物组织培养中的主要作用是促进细胞生长、分裂和分化。植物组织培养过程中除需要生长素外还需要细胞分裂素,二者共同起作用。(5)植物组织培养是一种无性繁殖技术,能保持亲本的优良性状。答案:(1)外植体 (2)脱分化(3)未分化细胞群经分裂形成愈伤组织当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时,未分化细胞群分化形成芽当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时,未分化细胞群分化形成根 (4)促进细胞的生长(伸长)、分裂和分化细胞分裂素 (5)植物组织培养形成试管苗的过程属于无性生殖,后代不发生性状分离共研探究植物细胞具有全能性,利用菊花的组织或细胞能获得完整的幼苗,可以加快优良品种的繁殖速度。1菊花组织培养的操作过程2菊花组织培养的几个关键点(1)培养基微生物培养基以有机营养为主。MS培养基主要包括植物生长必需的大量元素和微量元素,能提供大量无机营养。植物组织培养利用离体的植物组织或细胞,在其脱分化过程中不能进行光合作用合成糖类,因此必须在培养基中添加糖类作为碳源和能源物质,同时维持培养基的渗透压。(2)外植体要经过严格消毒才能接种,因为一些异养型的细菌能在加入有机物的培养基中生长繁殖,细菌与培养的植物组织争夺营养,同时细胞代谢产生一些有毒物质,会导致培养物腐烂。(3)在植物组织培养过程中,脱分化过程不需要光;再分化过程中,细胞中叶绿素的形成需要光。(4)实验设计设置重复组:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验:取一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。总结升华1MS培养基中各成分的作用成分作用微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐蔗糖提供碳源,维持细胞渗透压甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇等满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求2.试管苗培养过程中应注意的问题(1)培养一株完整的试管苗,必须先进行生芽培养,然后进行生根培养,如果顺序颠倒,就不好诱导生芽了。(2)试管苗应该进行见光培养。(3)试管苗一般在高湿、弱光、恒温下异养生长,移出瓶后一定要保温、保湿。(4)试管苗光合作用能力低,在移栽前应给予较强光照且进行闭瓶炼苗,以促进小苗向自养转化。对点演练2辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域,辣椒素的获得途径如图所示:(1)图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的_和_过程。(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,应采取的灭菌方法是_。(3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_。解析:(1)由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化或去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可重新分化成根或芽等器官,这个过程叫再分化。(2)培养基中常用的凝固剂是琼脂。在使用生长素和细胞分裂素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。生长素和细胞分裂素用量的比值低时,有利于芽的分化;反之则有利于根的分化。培养基应用高压蒸汽灭菌法灭菌。(3)外植体消毒所用酒精的体积分数是70%。答案:(1)脱分化(或去分化)再分化(2)琼脂低高压蒸汽灭菌(3)70%1下列关于影响植物组织培养的因素的说法,正确的是()A不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同B在植物组织培养中,培养基中必须添加植物激素C植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的DpH、温度、光照等条件对植物组织培养特别重要解析:选D不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料也会因材料的年龄、保存时间的长短等影响实验结果;在植物组织培养中,培养基中常常要添加植物激素,但不是都必须添加植物激素,如菊花茎段组织培养不必添加植物激素;各种植物激素的作用是相互联系的,而不是互相独立的。2下列有关菊花的组织培养的说法,正确的是()A需要有三种培养基,其营养成分中的碳源应该是无机碳源B要用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,即在100 下保持1530 minC在培养过程中要先让愈伤组织生根后再使其生芽D用酒精对外植体进行消毒时,持续的时间不能太长解析:选D在菊花组织培养过程中,共需配制三种培养基,分别是脱分化培养基、生芽培养基和生根培养基,这些培养基需要的碳源是蔗糖,而不是无机碳源;在对培养基进行高压蒸汽灭菌时,要在121 下保持1530 min,以便杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子等,100 下不能杀死微生物的芽孢;在培养过程中要先让愈伤组织生芽后再使其生根;用酒精对外植体进行消毒时,持续的时间不能太长,否则容易杀死外植体细胞。3下列实例中能体现细胞全能性的是()用悬浮培养的胡萝卜单个细胞培养成可育的植株植物用种子繁殖后代用烟草组织培养出可育的完整植株ABC D解析:选B细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。其中和都是由已经分化的细胞经过离体培养形成了可育的植株,均体现了细胞的全能性。植物用种子繁殖后代,实际上是由未经分化的细胞(受精卵)发育成新个体的过程,属于植物的个体发育过程,因此不能体现细胞的全能性。4请回答下列有关植物组织培养的几个问题:(1)离体的植物组织或细胞培养常用的一种培养基是_,其主要成分中的大量元素有_,培养中常用的两种植物激素是_和_,两者使用时的_、_、_等,都会影响实验的结果。(2)植物组织培养的一般步骤为_。(3)如图为植物组织培养的部分过程:过程是_,过程是_,A是_。(4)组织培养过程中还需要维持一定的外界条件,一是要有适宜的_,二是_等。解析:(1)组织培养常用的基本培养基为MS培养基,其中含有N、P、K、Ca、Mg、S等大量元素;激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起到了重要的作用,尤其是生长素和细胞分裂素,二者的浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都会影响实验结果。(2)植物组织培养的一般步骤为:制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培。(3)植物组织培养的主要过程是先脱分化形成愈伤组织,然后再分化形成试管苗。(4)组织培养过程中需要保持适宜温度和无菌(环境)等外界条件。答案:(1)MS培养基N、P、K、Ca、Mg、S生长素(类)细胞分裂素(类) 浓度使用的先后顺序用量的比例(2)制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培(3)脱分化再分化愈伤组织(4)温度无菌环境【基础题组】1影响植物组织培养的因素包括()培养基的配制外植体的选取激素的运用消毒温度、pH、光照ABC D解析:选A植物组织培养过程受多种外界因素的影响,其中包括温度、光照、pH等,而培养基的成分、外植体的选取、激素的运用和消毒是否严格等也会影响组织培养。2下列是生长素和细胞分裂素使用顺序对实验结果的影响,表格中的分别是()使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素先使用细胞分裂素,后使用生长素同时使用A.分化频率提高、细胞既分裂也分化、有利于细胞分裂但细胞不分化B有利于细胞分裂但细胞不分化、细胞既分裂也分化、分化频率提高C细胞既分裂也分化、分化频率提高、有利于细胞分裂但细胞不分化D有利于细胞分裂但细胞不分化、分化频率提高、细胞既分裂也分化解析:选B在植物组织培养过程中,需要使用生长素和细胞分裂素,两种植物激素的使用顺序会影响培养的结果。如果先使用生长素再使用细胞分裂素,则有利于细胞分裂但不进行分化;先使用细胞分裂素后使用生长素,则细胞既分裂也分化;如果两种激素同时使用,则分化频率提高。3下列关于植物组织培养中无菌操作的叙述,错误的是()A外植体可以用酒精消毒B镊子等器械需酒精灭菌C操作前手需用酒精消毒D培养基需高压蒸汽灭菌解析:选B植物组织培养需要严格的无菌操作,包括培养基需要用高压蒸汽灭菌;操作前手需用酒精消毒,外植体应浸泡在酒精中消毒;整个操作过程在酒精灯火焰旁进行,同时对镊子等器械进行灼烧灭菌。4植物组织培养的过程可以归纳为:,对此叙述有误的是()A的再分化过程中,当细胞分裂素与生长素的浓度比低时,有利于根的分化B植物组织培养所依据的原理是细胞的全能性C过程指植物的营养生长和生殖生长阶段D植物组织培养获得的植株不能保持亲本性状解析:选D植物组织培养的原理是细胞具有全能性,其过程分为脱分化、再分化、植株的生长发育这几个阶段,生长发育包括营养生长和生殖生长两个阶段。再分化阶段,细胞分裂素与生长素浓度比低时,利于生根,浓度比高时利于生芽。植物组织培养过程是无性繁殖过程,子代可基本保持亲本性状。5植物细胞表现出全能性的必要条件是()A给予适宜的营养和外界条件B导入其他植物细胞的基因C脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件D将成熟植物的细胞核移到去核的卵细胞中解析:选C植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性,全能性表达的条件是脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件。6试管苗在移栽前进行一系列操作,使幼苗生长健壮,耐环境变化能力增强,这一过程叫“炼苗”。下列关于移栽的叙述,正确的是()A培养后的试管苗,打开封口膜后,直接移栽至大田B试管苗在移栽时不需在培养间进一步培养C试管苗在培养间培养一段时间后,用无菌水清洗根部培养基后,移栽入大田D试管苗在培养间培养一段时间后,最好用无菌水清洗根部培养基,再移入消过毒的蛭石、珍珠岩等环境炼苗解析:选D试管苗光合作用能力低,对不良环境的耐受能力差,在培养一段时间后,由异养苗向自养苗转化,并且要在蛭石、珍珠岩等无菌环境中培养一段时间,适应外界环境后再移至大田栽培。7在植物组织培养过程中,生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时,下列描述正确的是()A有利于根的分化和芽的形成B不利于根的分化和芽的形成C有利于芽的形成,抑制根的分化D有利于根的分化,抑制芽的形成解析:选D生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时,有利于根的分化,抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组织的形成。8下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法,不正确的是()A植物组织培养中的关键性激素是生长素和细胞分裂素B先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂和分化C先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂又分化D同时使用生长素和细胞分裂素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向解析:选B在植物组织培养中,培养基中除营养成分外还需添加植物激素,一般包括生长素和细胞分裂素,外植体脱分化、再分化的诱导方向取决于二者的比例。先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂,但细胞不分化;先使用细胞分裂素,后使用生长素,对细胞的分裂和分化均有利。【能力题组】9下面为植物组织培养过程图解,以下相关叙述错误的是()Ab过程发生了脱分化,在此过程中植物激素不发挥作用Bc过程发生了再分化,是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程Cd过程是在胚状结构外包裹人工胚乳和人工种皮制成人工种子D人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题解析:选A在植物脱分化的过程中,利用生长素、细胞分裂素等植物激素可以诱导植物细胞脱分化,因此在此过程中植物激素发挥重要作用。10下列需要采用植物组织培养技术的是()利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,获得多倍体植株获取大量的脱毒苗利用基因工程培育抗棉铃虫的植株单倍体育种无子西瓜的快速大量繁殖ABC D解析:选B植物组织培养主要用于获取脱毒苗、培育转基因植株、单倍体育种、快速大量繁殖植株等方面。利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,获得多倍体植株属于多倍体育种,不需要植物组织培养技术。11在植物组织培养再分化阶段中,逐渐改变培养基中植物激素X和植物激素Y的浓度比,细胞群的变化情况如图所示。若培养基中植物激素X的浓度为a、植物激素Y的浓度为a0.2,则细胞群分化的结果最可能是试管()解析:选C从图中可以看出,植物激素比例适中时有利于愈伤组织的形成,而当植物激素X与植物激素Y的比值大于1时有利于芽的分化,反之则有利于根的分化,所以当植物激素X的浓度为a、植物激素Y的浓度为a0.2时,培养结果应为试管C。12某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材消毒愈伤组织培养出芽生根移栽”。下列有关叙述错误的是()A消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害B在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞C出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控D生根时,培养基通常应含萘乙酸等生长素类调节剂解析:选B使用消毒剂时,既要杀死材料表面微生物,又要防止伤害组织细胞,影响组织培养,A项正确;植物细胞融合是指将经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体诱导融合,带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞,B项错误;出芽和生根都是细胞再分化的结果,其实质是基因的选择性表达,C项正确;萘乙酸为生长素类似物,可诱导愈伤组织生根,D项正确。13如图所示是蝴蝶兰芽尖通过无菌操作接入试管后,在一定条件下形成试管苗的培育过程。(1)芽尖组织在接种到培养基之前,必须进行_处理,整个组织培养过程需_操作,并控制好各个时期的培养条件。(2)要促使芽尖组织细胞分裂生长,培养基中应有细胞分裂素和_两类植物激素。当前者用量与后者用量的比值较_时,有利于芽的分化,抑制根的形成。(3)再分化时,除必要的营养供应和激素调节外,还必须给予光照,原因是_。(4)从高度分化的芽尖组织繁殖出大量具有亲代优良性状的蝴蝶兰植株,充分证明了植物细胞具有_。(5)植物组织培养的优点是_。(6)此过程培养的细胞始终受_调节。答案:(1)消毒无菌(2)生长素高(3)叶绿素的形成需要光照(4)全能性(5)取材少,培养周期短,繁殖率高,且便于自动化管理(且经济效益可观)(6)植物激素14为了探究6BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,某研究小组在MS培养基中加入6BA和IAA,配制成四种培养基(见表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。培养基编号浓度(mgL1)m(%)n(个)6BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列问题:(1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为_和_两类。上述培养基中,6BA属于_类生长调节剂。(2)在该实验中,自变量是_,因变量是_,自变量的取值范围_。(3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是_号培养基。(4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入_(填“6BA”或“IAA”)。解析:植物组织培养所用的培养基的主要成分有无机盐(大量元素和微量元素)、有机物,常常还需要添加植物激素。本实验所用培养基中加入的6BA 属于细胞分裂素类生长调节剂。根据表中所列数据及实验结果可知,本实验自变量是IAA浓度,其取值范围是 00.5 mgL1,因变量是再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)。当生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时,有利于根的分化,所以为了诱导菊花试管苗生根,培养基中一般不加入6BA。答案:(1)大量元素微量元素细胞分裂素(2)IAA的浓度再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)00.5 mgL1(3)1 (4)6BA15如图甲是植物组织培养过程示意图,图乙是植物激素对愈伤组织分化影响的示意图。据图回答下列问题: (1)植物组织培养的原理是植物细胞具有_。(2)在A过程中,为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织,常常需要在配制好的培养基中添加_,嫩枝组织细胞接种后25天时,若发现其边缘局部污染,原因可能是_。(3)在过程B中,若愈伤组织没有形成根,但分化出了芽,其原因可能是_;若要获得更多的愈伤组织,培养基中两种激素的含量应该是_。(4)切取经光照一段时间后的幼苗芽尖处的组织块,消毒后,接种到诱导再分化的培养基中培养,该培养基中两种植物激素浓度相同。从理论上分析,分化的结果是_;原因是_。解析:(1)植物细胞具有全能性,这是植物组织培养的理论基础。(2)植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、诱导脱分化和再分化的关键性激素。培养的嫩枝组织细胞边缘发生局部污染,可能是因为嫩枝组织细胞消毒不彻底。(3)(4)从图乙可知,植物激素的种类及其浓度配比都会影响愈伤组织分化的方向,具体结合图示和题干信息回答即可。答案:(1)全能性(2)植物激素嫩枝组织细胞消毒不彻底(3)培养基中生长素较少,细胞分裂素较多细胞分裂素与生长素比值适中(4)生根培养基中细胞分裂素与生长素的浓度相等,而经光照后的幼苗芽尖处组织块含较多生长素,因此组织块处的细胞分裂素相对较少,生长素相对较多,故诱导生根版权所有:中国好课堂
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