白细胞计数ppt课件

临床基础检验学实验一 牛鲍计数板的使用和白细胞计数 1 实验一 白细胞计数 1 原理 血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞 在血细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数 换算成每升血液中白细胞数 2 试剂器材白细胞稀释液 冰乙酸2 0ml10g L亚甲蓝3滴加蒸馏水至100ml 2 器材改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片 微量吸管 带孔吸头 1ML刻度移液管 小试管 洁净软纱布 干棉球 光学显微镜 3 4 5 毛细血管采血标准操作程序 操作步骤 1采血部位成人以左手无名指内侧为宜 半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧采血 2轻轻按摩采血部位 3用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤 待干 6 4紧捏刺血部位 使其自然充血 5用无菌刺针穿刺取血 动作应迅速 深度2 3mm 稍加挤压以血液流出为宜 6用干棉球擦去第一滴血 7按需要依次采血 8采血完毕 用干棉球压住伤口 止血片刻 7 微量吸管的使用 1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上 连接紧密不漏气 2拇指和中指夹住吸头中下端 示指盖住吸头小孔 拇 中指轻微挤压排出适量空气 3将微量吸管插入抗凝血 拇 中指缓慢松劲 松动快血液会吸入吸头 吸取抗凝血至所需刻度略上方 不能有气泡 吸管呈水平略下垂 松开示指 4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血 保证血量准确 轻触吸管下口吸去多余血量 使管内抗凝血正处所需刻度 5将微量吸管插入小试管底部 三指轻微用力慢慢排出血液 用上清液冲洗管内余血2 3次 轻摇试管混匀 6拔出微量吸管弃入污物桶 8 3 操作步骤 1 加稀释液用移液管向小试管内加入0 38ml白细胞稀释液 2 采血 稀释用微量吸管采血20ul 拭去管外余血 释放于小试管底部 用上部稀释液洗净吸管内余血 轻摇试管混匀 静置等其溶血 3 清洁计数板及盖片 动作轻柔 夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上 4 充计数池将小试管轻微振荡2min 立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白细胞悬液 充入计数池内 静置2 3min 使细胞沉于计数池底面 5 调试显微镜将计数板放置载物台上 选择 4 低倍镜 调节聚光器使光线较暗 调节旋钮找到方格线 转至低倍镜 10 调节光亮 6 计数低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数 压线细胞数上不数下 数左不数右 9 10 血细胞计数板的方格 计数板上下各一个计数池计数区域分为9个大方格四角的大方格各划分为16个中方格中央大方格划分为25个中方格四角的大方格为白细胞计数区中央大方格四角和正中5个中方格为红细胞计数区 11 结果计算白细胞总数 4大格白细胞数 N 4 10 20 106 N 20 109 L用 109 L 小数点后一位 表示 12 注意事项 稀释液 小试管 计数板 采血 充池 计数原则 WBC过多 WBC过少 WBC校正 显微镜调试 13 5 注意事项 1 稀释液密封保存 防止污染 小试管 计数板 盖片均须清洁 以免杂质 微粒等被误认为细胞 2 采血时针刺深度必须适当 不能过度挤压 防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固 3 稀释液和采血量要准确 充分混匀 充液适量 无不足 外溢和气泡 细胞分布均匀 4 白细胞总数在参考范围内 大方格间的细胞数不得相差10个以上 两次重复计数误差不得超过10 5 白细胞数量过高时 可加大稀释倍数 白细胞数量过低时 可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量 14 6 一些贫血患者血液中有核红细胞增多 会计数在白细胞总数内 应校正 校正公式 白细胞校正数 L M 100 100 N M为未校正前白细胞数 N为在白细胞分类时 计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数 7 调试显微镜将血细胞计数板平放于载物台 低倍镜处所充计数池正中盖片略上方 向下微调载物台 防止压碎盖片 至看清计数区域内分隔线条为止 15 6 细胞计数原则 大方格四边压线细胞数左不数右 数上不数下 弓形移动 16 7 正常参考值成人 4 0 10 0 109 L新生儿 15 0 20 0 109 L 17 8 考核评价a 常规考核标准 RCS RCS 100 评价 白细胞 4 0 109 L者 RCS 30 白细胞在 4 1 14 9 109 L者RCS 20 白细胞 15 0 109 L者RCS 15 超过上述标准者为不合格b 其他方法 四大格所见白细胞最大值 最小值 四大格所见白细胞数平均值 18 9 思考题 1 某标本WBC为11 0 x109 L 分类100个WBC见到10个有核红细胞 试计算WBC的实际数目 2 某同学在进行白细胞计数时 一次计得四大格白细胞数最多为46 最少值为32 试判断该同学考评结果如何 19 实验报告内容 原理试剂器材操作步骤实验结果注意事项思考题 20