实验,绿叶中色素的提取和分离.ppt

实验绿叶中色素的提取和分离,【实验原理】1.提取：绿叶中的色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水，可用无水乙醇提取色素。2.分离：各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相互分离。,【实验步骤】提取色素：称取5g绿叶，剪碎，放入研钵中，加入少量二氧化硅、碳酸钙和10mL无水乙醇研磨过滤收集到试管内并塞严试管口制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线,画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔线均匀地画一条细线，待滤液干后，再画一两次分离色素：将适量的层析液倒入试管中，装置如图所示,滤液细线,层析液,观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带，如图所示,橙黄色,叶黄素,叶绿素a,最多,黄绿色,1.为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料？提示：新鲜绿色的叶片中色素含量高，从而使滤液中色素含量较高，实验效果明显。2.为什么研磨时要迅速？为什么研磨时要加入少量的CaCO3和SiO2？提示：(1)叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅速、充分，以保证提取较多的色素。(2)二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。(3)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。,3.色素提取液呈现淡绿色的原因可能有哪些？提示：(1)叶片颜色太浅。(2)绿叶不新鲜。(3)研磨不充分。(4)未加碳酸钙或加入量太少。(5)加入无水乙醇量太多。(6)研磨时间过长，部分叶绿素被破坏。,4.为什么在制作滤纸条时，需将一端的两个角剪掉？提示：由于液面的不同位置表面张力不同，纸条接近液面时，其边缘表面的张力较大，层析液沿滤纸边缘扩散过快，从而导致色素带分离不整齐的现象。故需将插入层析液的滤纸条一端剪去两个角。,5.为什么滤液细线要重复画，且线要细、直？提示：重复画线是为了增加色素的浓度，使分离出的色素带清晰分明。画线细、直是为了防止色素带之间出现重叠。6.层析时，为什么不能让滤液细线触及层析液？提示：滤纸条上的滤液细线触及(或没入)层析液，会使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色素带，使实验失败。7.滤纸条上色素带宽窄不同的原因有哪些？提示：不同种类的色素在绿叶中的含量不同，含量多的在滤纸条上呈现的色素带宽，反之色素带窄。,实验中的注意事项及操作目的归纳,