《亚麻籽中α—亚麻酸含量的测定 液相色谱法》编制说明

亚麻籽中 亚麻酸含量的测定 液相色谱法 标准编制说明 一、标准制定的背景及任务来源 亚麻是我区的优势杂粮作物，亚麻籽中 一种必需脂肪酸，是一种生命核心物质，是构成人体脑细胞和组织细胞的重要成分。 无法由其他营养来合成的，必须要依靠膳食来获得。 为筛选出亚麻优良品种以指导生产，实现亚麻籽中 蒙古农牧业科学院资源环境与检测技术研究所起草并制定了“亚麻籽中 液相色谱法”标准。 二、本标准与国内现有分析方法的技术差异 经过对国内关于 前亚麻籽中 C 或 析过程中柱温高使目标组分易产生异构现象，且需用到数种高制毒试剂。液相标准还属空白。 三、标准编制概况 以内蒙古农牧业科学院资源环境与检测技术研究所近年来对农畜产品加工及农畜产品质量安全检测方法研究为基础，起草并拟订工作计划，具体分以下几个阶段进行： 2012 年上半年，主要通过实地调研及走访，掌握了亚麻品种及其种植范围的大概情况。查阅资料，完成相关资料的收 集、整理和实 施方案的确定工作。主要参考文献如下： （ 1）亚麻籽的保健功能和开发利用 J2006,31(3):71 2）亚麻油中 J2007，6(12):1 3） （ 4） 5512油检验 粮食中粗脂肪含量的测定 （ 5） 8404品安全国家标准 保健食品中 十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定 2012 年下半年，基本确定试验品种范围，样 品的采集和制备、试验设备准备及试剂耗材采购。并初步摸索亚麻籽中 2013 年上半年，以前一年初步摸索条件为基础，进行了改进优化，确定了标准方法，并以亚麻籽中 亚麻酸含量的测定 液相色谱法征求意见稿为标准，测定了种植范围较广较常见的 16 个品种亚麻籽中 亚麻酸的含量。 2013 年下半年，选取了“晋亚七号”、“轮选 2 号”两个品种与自治区级实验室进行了比对试验，对结果进行了统计，对标准方法进行了验证。 结合资料，对同一亚麻籽的超声波震荡提 取进行实验，最终确定提取两次，每次 30分钟，分别加石油醚 60 50 表 1 提取时间试验（称取 次加石油醚 100 提取 时间 15次 30次 45次 60次 15次 30次 45 次 60次 得油重（ g） %） 2 石油醚加入量试验（称取 声波提取 302次） 第 1次 第 2次 得油重 %） 100 100 00 75 00 50 00 25 0 75 0 50 0 75 0 50 0 75 0 50 0 25 使用 90 300 现最大吸收波长为 202.9 图 1。但因实测样品的不同，有时会存在干扰且太接近远紫外区，选择 205 目标组分响应基本不降低，且基线噪音明显减少，故此选择 205 图 1 9000描光谱图 动相选择 流动相只用甲醇和水，分离度不理想影响积分，调整水相为 酸水溶液后，峰型尖锐对称分离度好。当流动相甲醇与 酸水溶液比例为 90+10 时 0.4 图 2；流动相比例 95+5 时磷酸溶液保留时间 6.2 图 3。最终选择 95+5，分离 度好用时短。 图 2 甲醇 +酸水溶液 =90+10（上标品，下试样） 图 3 甲醇 +酸水溶液 =90+10（上标品，下试样） 表 3 北方地区种植面积较广的亚麻品种籽实油脂率 名称 称籽重（ g） 得油重（ g） 油脂率（ %） 晋亚七号 同亚 12号 陇亚八号 轮一号 轮三号 轮选 2号 9925991067 200093019910逐级稀释标准工作液，测定 到仪器响应限值为 g/即 2 从表 3 中大量实验看到，大部分亚麻籽油 脂率均在 40%左右，故此设定 50 %油脂率为极限值，即称取 公式 1 中的 故此根据公式 计算得到方法检出限为 g/100g。 计算公式： 1032 1213 X 样品中 含量，单位为克每百克（ g/100g） C 样液中 检出浓度，单位为微克每毫升（ g/；赋值 0.2 m 称取研磨好的亚麻籽重量，单位克（ g） ；赋值 形瓶干重，单位克（ g） 位克（ g） 位毫克（ 赋值 1 调至中性的定容体积，单位毫升 （ ；赋值 2 调至中性定容后从中吸取样液的体积，单位毫升 （ ；赋值 3 吸取样 液后定容体积，单位毫升 （ ；赋值 精密称取 甲醇定容至 浓度为 g/用 。以 浓度 g/标准品储备液为基础，用甲醇配置成 g/g/匀，分别进样 10 L。得到曲线 Y=104X+104， R = 次测定得到不同曲线， 间。 图 4 浓度为 g/ 次，测得峰面积，计算 制备晋亚七号亚麻籽平行样 6 份，分别进样 10 精密称取亚麻籽油脂适量，准确加入 得平均回收率 表 4 g/复 7次 表 5 六份“晋亚七号”试样 亚麻酸含量 实测值 ug/均值 ug/ %） 检测量 ug/脂中 含量 g/100g 籽实中 含量 g/100g 籽实中 含量 %） 平均值 表 6 “晋亚七号”加入 亚麻酸 油重 g 检测量 ug/测含量 g/100g 理论添加量 g/100g 实测量g/100g 回收率 % 1 1 2 2 3 3 收率 %） 四、标准编制原则 为保证 亚麻籽中 准确测定，确定优势品种的选择和后期的加工工艺，有效地指导种植，在制定本标准的过程中，汲取国内外同类相关先进的检测标准及编制的先进经验和方法，力求实事求是的原则，使本标准具有较强的科学性、先进性。 在进行大量实验室研究的基础上，参考国内相关资料，对 亚麻籽中 检测方法进行了大量试验摸索，确定了具体的、可操作性好的、高效可靠的快速检测方法。 五、采用国际标准 本标准的编制、编写、调研完全依照国际标准尺度，并遵照 求 进行 撰写 。 五、与现行法律法规和强制性标准的关系 本标准 完全符合现行法律法规和强制性标准，不存在任何与现行法律法规和强制性标准相违背之处。 六、重大分歧意见的处理经过和依据 亚麻籽中亚麻酸含量的测定液相色谱法目前在我区是一项空白，因此在编制“标准”中无重大的分歧意见。 七、标准作为强制性或推荐性标准的意见 本标准作为推荐性地方规范，发布实施后，对亚麻籽中 量的准确测定起到重要作用。极大的有利于亚麻的科学种植和优势品种的选育，及其 取工艺的优化。 八、贯彻标准的要求和措施建议 本标准在经相关部门批准发布实施后，需要行政部门的监督执行，保证“ 标准”制定的目的。“标准”在执行的过程中仍需要不断的完善和健全。 内蒙古自治区农牧业科学院资源环境与检测技术研究所 二 O 一三年十二月