家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文.doc

毕业论文/毕业论文范文 家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文 所有动物的饲养及处死均按照nih的实验动物管理及使用指南进行。卡波姆(carbomer一940,美国古立德化学公司);质量分数0.15%地塞米松(江苏连水制药厂);sabc法免疫组织化学试剂盒、aqp一1多克隆抗体(武汉博士德公司);trizol一步法组织总rna提取试剂盒、一步法逆转录聚合酶链反应(one-stepreverse transcription polymerase chain reaction.rt-pc r)试剂盒(美国invitrogen公司)。3o只家兔按完全随机原则分为5组，分别为对照组，2、3、4、5周组，每组6只。家兔经25 g/l异戊巴比妥钠60 mg/kg耳缘静脉注射进行全身麻醉，质量分数0.4% 盐酸奥布卡因滴眼液点眼2次进行表面麻醉，实验组用1 ml消毒空针自家兔左眼角膜缘内1 mm刺入前房，抽出房水0.2 ml,注入0.2 ml复方卡波姆溶液(含质量分数0.3% 卡波姆和0.025%地塞米松)制作高眼压模型。对照组左眼同法注入平衡盐液0.2 ml.术毕，双眼点用氯霉素滴眼液。造模后每日测量眼压1次，裂隙灯下观察眼结膜、角膜及虹膜等的反应。将h艮压升高至22 mmhg(1 mmhg=0.133 kpa)，并能持续1周以上者为高眼压模型制作成功。建模后2周，处死对照组和2周组动物，3、4、5周时分别处死相应组动物，摘除左眼眼球。各组取3只眼球储存于一70 冰箱中用于rt-pcr检测;另外3只眼用质量分数4% 多聚甲醛溶液固定，石蜡包埋，用于免疫组织化学检测。*l