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撰写人:_日 期:_ 实验室常用溶液及试剂配制一、实验室常用溶液、试剂的配制-1 表一 普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三 混合酸碱指示剂配制 表四 容量分析基准物质的干燥 表五 缓冲溶液的配制 1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 8、 常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-4 1、硝酸银(CAgNO3=0.1mol/L)标准溶液的配制 2、碘(CI2=0.1mol/L)标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠(CNa2S2O3=0.1mol/L)标准溶液的配制 4、高氯酸(CHClO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 5、盐酸(CHCl=0.1mol/L)标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠(CEDTA =0.1mol/L)标准溶液的配制 7、高锰酸钾(CK2MnO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 8、氢氧化钠(CNaOH=1mol/L)标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法-6 1、柠檬酸(C6H8O7H2O) 2、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2H2O、钙粉等) 3、氟(F)含量的测定 4、磷(P)的测定 5、硫酸铜(CuSO45H2O) 6、硫酸锌(ZnSO4H2O) 7、硫酸亚铁(FeSO4H2O) 8、砷 9、硫酸镁(MgSO4)四、维生素检测-8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱 3、维生素B6 4、维生素B2(核黄素)5、维生素C(包被)五、氨基酸检测-101、赖氨酸硫酸盐含量的测定 2、苏氨酸的检测 3、赖氨酸4、 DL-蛋氨酸六、 抗生素测定-12七、 氮(N)含量的测定(鱼粉)-12精品范文模板 可修改删除一、 实验室常用溶液、试剂的配制 表一 普通酸碱溶液的配制 名 称(分子式)比重(g/ml)含量(w/w%)近似摩尔浓度(mol/L)欲配溶液的摩尔浓度(mol/L)6321配制1L溶液所用的ml数(或g)盐 酸(HcL)1.181.1936381250025016783硝 酸(HNO3)1.391.4065681538119112864硫 酸(H2SO4)1.831.8495981884422814冰醋酸(Hac)1.0599.91725317711859磷 酸(H3PO4)1.6985153919126氨水(NH3H2O)0.900.91281540020013477氢氧化钠(NaOH)(240)(120)(80)(40)氢氧化钾(KOH)(339)(170)(113)(56.5) 表二 常用酸碱指示剂 指示剂PKHIn变色范围pH酸色碱色配 制 方 法百里酚蓝(麝香草酚蓝)1.6512.2.8红黄0.1%的20%乙醇溶液甲基橙3.43.14.4红橙黄0.05%水溶液溴甲酚绿4.93.85.4黄蓝0.1%的20%乙醇溶液或者0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml甲基红5.04.46.2红黄0.1%的60%乙醇溶液溴百里酚蓝(麝香草酚蓝)7.36.27.3黄蓝0.1%的20%乙醇溶液中性红7.46.88.0红黄橙0.1%的60%乙醇溶液百里酚蓝(第二变色范围)9.28.09.6黄蓝0.1%的20%乙醇溶液酚酞9.48.010.0无色红0.5%的90%乙醇溶液百里酚酞10.09.410.6无色蓝0.1%的90%乙醇溶液 表三 混合酸碱指示剂 指示剂组成(体积比)变色点pH酸色碱色备注一份0.1%甲基橙水溶液一份0.25%靛蓝二磺酸钠水溶液4.1紫绿灯光下可滴定一份0.02%甲基橙水溶液一份0.1溴甲酚绿钠盐水溶液4.3橙蓝绿PH3.5黄色PH4.05绿黄PH4.3浅绿三份0.1%溴甲酚绿20%乙醇溶液一份0.2%甲基红60%乙醇溶液5.1酒红绿颜色变化极鲜明一份0.2%甲基红乙醇溶液一份0.1%次甲基蓝乙醇溶液5.4红紫绿PH5.2红紫PH5.4暗蓝PH5.6绿色一份0.1%溴甲酚绿钠盐水溶液一份0.1%绿酚红钠盐水溶液6.1黄绿蓝紫PH5.6蓝绿PH5.8蓝色PH6.0浅紫PH6.2蓝紫一份0.1%溴甲酚紫钠盐水溶液一份0.1溴百里酚蓝钠盐水溶液6.7黄紫蓝PH6.2黄紫PH6.6紫PH6.8蓝紫一份0.1中性红乙醇溶液一份0.1次甲基蓝乙醇溶液7.0蓝紫绿PH7.0为蓝绿必须保存在棕色瓶中一份0.1甲酚红钠盐水溶液三份0.1%百里酚蓝钠盐水溶液8.3黄紫PH8.2玫瑰色PH8.4紫色一份0.1%百里酚蓝50%乙醇溶液三份0.1酚酞50%乙醇溶液9.0黄紫PH9.0绿色 表四 容量分析基准物质的干燥 基准物质干燥温度和时间基准物质干燥温度和时间碳酸钠(NaCO3)500650,40-50min氯化物(NaCl)500-650,干燥40-50min草酸钠(H2C2O4)150-200,1-1.5h硝酸银(AgNO3)室温,硫酸干燥器中至恒温草酸(H2C22H2O)室温,空气干燥2-4h碳酸钙(CaCO3)120,干燥至恒重硼砂(Na2B2O10H2O)室温,在NaCl和蔗糖饱和液的干燥器中,4h氧化锌(ZnO)800灼烧至恒重邻苯二甲酸氢钾(KHC6H4O4)100-120干燥至恒重锌(Zn)室温,干燥器24h以上重铬酸钾(K2Cr2O7)100-110,干燥3-4h氧化镁(MgO)800灼烧至恒重 表五 缓冲溶液的配制 1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液 0.2mol/LKCl(ml)505050505050500.2mol/LHCl(ml)97.0 64.341.526.316.610.66.7水(ml)53.085.5108.5123.7133.4139.4143.3PH(20)1.01.21.41.61.82.02.2 2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 0.2mol/LKHC6H4O4(ml)50505050500.2mol/LHCl(ml)46.7032.9520.329.902.63水(ml)103.30117.05129.68140.10147.37PH(20)2.22.63.03.43.8 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 0.2mol/LKHC6H4O4(ml)50505050500.2mol/LHCl(ml)0.407.5017.7029.9539.85水(ml)149.60142.50132.20120.05110.15PH(20)4.04.44.85.25.6 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 0.2mol/LHAc(ml)1851641268042190.2mol/LNaAc(ml)153674120158181PH(20)3.64.04.44.85.25.6 5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 0.2mol/LKH2PO4(ml)5050505050500.2mol/LNaOH(ml)3.728.6017.8029.6339.5045.20水(ml)146.26141.20132.20120.37110.50104.80PH(20)5.86.26.67.07.47.8 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 0.2mol/L硼砂(ml)9080706050400.2mol/LNaOH(ml)102030405060PH(20)9.359.489.669.9411.0412.32 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 0.2mol/LNH3H2O(ml)11128320.2mol/LNH4Cl(ml)3282111PH(20)8.08.589.19.810.411.0 8、 常用缓冲溶液的配制 PH配制方法3.6NaAc3H2O 8g, 溶于适量水中,加6mol/LHAc 134ml,稀释至500ml4.0NaAc3H2O 20g 溶于适量水中,加6mol/LHAc 134ml,稀释至500ml4.5NaAc3H2O 32g 溶于适量水中,加6mol/LHAc 68ml,稀释至500ml5.0NaAc3H2O 50g 溶于适量水中,加6mol/LHAc 34ml,稀释至500ml8.0NH4Cl 50g 溶于适量水中,加15mol/LNH3H2O 3.5ml,稀释至500ml8.5NH4Cl 40g 溶于适量水中,加15mol/LNH3H2O 8.8ml,稀释至500ml9.0NH4Cl 35g 溶于适量水中,加15mol/LNH3H2O 24ml,稀释至500ml9.5NH4Cl 30g 溶于适量水中,加15mol/LNH3H2O 65ml,稀释至500ml10NH4Cl 27g 溶于适量水中,加15mol/LNH3H2O 197ml,稀释至500ml二、实验室常用标准溶液的配制及其标定 1、硝酸银(CAgNO3=0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:称取硝酸银17.5g,溶于1000ml水中,摇匀,溶液保存于棕色瓶中。 标定:称取基准氯化钠(NaCl)0.2g(110高燥至恒重)(精确到0.0002g),加水50ml溶解, 再加2%淀粉(不含Cl-)溶液5ml,碳酸钙(CaCO3)0.1g与荧光黄指示剂8滴,用配制 好的硝酸银溶液滴定至溶液由黄绿色变成微红色。即为终点。 计算: CAgNO3= m(NaCl) / V(AgNO3)58.44 1000 C-硝酸银溶液的浓度,mol/L; m-氯化钠的质量,g; V-消耗硝酸银溶液的体积,ml; 58.44-每mol氯化钠的克数。 2、碘(CI2=0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:称取13g碘及35g碘化钾,溶于100ml水中,稀释至1000ml,摇匀,保存于棕色瓶中。 标定:称取0.15g基准三氧化二砷于碘量瓶中,加4ml氢氧化钠(1mol/L)溶解,加50ml水, 2滴酚酞指示剂(10g/L),用硫酸(1mol/L)中和,加碳酸氢钠(NaHCO3)3g及3ml淀 粉(5g/L),用配制好的碘液滴定至溶液为浅蓝色,同时作空白试验。 计算: CI2= m/ (V1-V2)0.04946 C-碘溶液的浓度,mol/L; V1-试验组消耗碘溶液的体积,ml; V2-空白组消耗碘溶液的体积,ml; m-三氧化二砷的质量,g。 3、硫代硫酸钠(CNa2S2O3=0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:称取26gNa2S2O35H2O或16g Na2S2O3,溶于1000ml水中,缓缓煮沸10min,冷却, 放置两周后过滤备用。 标定:称取0.15g(精确到0.0001g)于120烘至恒重的基准重铬酸钾,置于碘量瓶中,溶于 25ml水,加2g碘化钾及20ml硫酸(20%),摇匀,于暗处放置10min,加150ml水, 用配制好的Na2S2O3(0.1mol/L)滴定,近终点时加3ml淀粉指示剂(5g/L),继续滴 定至溶液由蓝色变为亮绿色,同时作空白试验。 计算: C Na2S2O3= m/ (V1-V2)0.04903 C- Na2S2O3标准溶液的摩尔浓度,mol/L; V1-试验组消耗Na2S2O3溶液的体积,ml; V2-空白组消耗Na2S2O3溶液的体积,ml; m-重铬酸钾的质量,g。 0.04903-与1.00ml Na2S2O3标准溶液相当的以g表示的重铬酸钾的质量。 4、高氯酸(CHClO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:量取8.5ml高氯酸,在搅拌下注入500ml冰乙酸中,混匀。在室温下滴加20ml乙酸酐, 搅拌至溶液均匀。冷却后用冰乙酸稀释至1000ml,摇匀。 标定:称取0.6g于105-110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾(精确到0.0001g),置于干燥的 锥形瓶中,加入50ml冰乙酸,温热溶解。加2-3滴结晶紫指示剂(5g/L),用配好的高 氯酸溶液滴定至溶液由紫色变为蓝色(微带紫色)。(注:本溶液使用前标定,标定高氯 酸标准溶液时的温度应与使用该标准溶液滴定时的温度相同。) 计算: C= m/ V0.2042 C-高氯酸标准溶液的浓度,mol/L; V-消耗高氯酸溶液的体积,ml; m-邻苯二甲酸氢钾的质量,g。 5、盐酸(CHCl=0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:量取9.0ml盐酸,注入1000ml水,摇匀。 标定:称取于270-300灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.2g(精确到0.0001g),溶于50ml水 中,加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,用配好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗 红色,煮沸2min,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时作空白。 计算: C= m/ (V1-V2)0.05299 C-盐酸标准溶液的浓度,mol/L; m-无水碳酸钠的质量,g; V1-试验组消耗盐酸溶液的体积,ml; V2-空白组消耗盐酸溶液的体积,ml; 6、乙二胺四乙酸二钠(CEDTA =0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:称取40g乙二胺四乙酸二钠,加热溶于1000ml水中,冷却,摇匀。 标定:称取0.25g于800灼烧至恒重的基准氧化锌(精确到0.0001g),用少量水润湿,加2ml 盐酸溶液(20%)使样品溶解,加100ml水用氨水溶液(10%)中和至PH7-8,加10ml 氨-氯化铵缓冲溶液甲(PH10)及5滴铬黑体指示剂(5g/L),用配好的乙二胺四乙酸 二钠(0.1mol/L)溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时作空白。 计算: C= m/ (V1-V2)0.08138 C-乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度,mol/L; V1-试验组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积,ml; V2-空白组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积,ml; m-氧化锌的质量,g。 7、高锰酸钾(CK2MnO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 配制:称取3.3g高锰酸钾,溶于1050ml水中,缓缓煮沸15min,冷却后置于暗处保存两周, 过滤于干燥的棕色瓶中。 标定:称取0.2g于105-110烘至恒重的基准草酸钠(精确到0.0001g),溶于100ml硫酸溶液 (8+92),用配好的高锰酸钾溶液滴定,近终点时加热至65,继续滴定至溶液呈粉红色 保持30秒,同时作空白。 计算:CK2MnO4= m/ (V1-V2)0.06700 C-高锰酸钾标准溶液的浓度,mol/L; V1-试验组消耗高锰酸钾溶液的体积,ml; V2-空白组消耗高锰酸钾溶液的体积,ml; m-草酸钠的质量,g。 8、氢氧化钠(CNaOH=1mol/L)标准溶液的配制 配制:称取100g氢氧化钠,溶于100ml水中,摇匀,注入聚乙烯容器中,密闭放置至溶液清 亮。用塑料管虹吸取52ml上清液,注入1000ml无二氧化碳的水中,摇匀。 标定:称取于105-110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾6g(精确到0.0001g),溶于80ml无 二氧化碳的水中,加2滴酚酞指示剂(10g/L),用配好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉 红色,同时作空白试验。 计算:CNaOH= m/ (V1-V2)0.2042 C-氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L; V1-试验组消耗氢氧化钠溶液的体积,ml; V2-空白组消耗氢氧化钠溶液的体积,ml; m-邻苯二甲酸氢钾的质量,g。三、常见物质的实验室试验方法 1、柠檬酸(C6H8O7H2O) 实验:称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三角瓶内,加入水50ml溶解,加酚酞指示剂3滴, 用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点,同时做空白试验。 计算:X%(一水)= (V1-V0)C0.06404/ m(1-0.08566)100 X%(无水)= (V1-V0)C0.06404/ m100 V1-消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml; V0-空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml; C-氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L; m-样品质量。 2、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2H2O、钙粉等) 实验:称取2g(精确到0.0002g)样品,用10ml盐酸(1+1)溶解,转移至100ml容量瓶中定溶, 用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中,加50ml水,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三乙酸 胺(1+1),1ml乙二胺(1+1),1滴孔雀绿指示液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L) 至无色,再过量10ml,加0.1g盐酸羟胺(每加一种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在 黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。 计算:Ca%= CV0.4008/ m 100 C-EDTA标准溶液的浓度,mol/L; V-消耗EDTA标准溶液的体积,ml; m-样品质量。 3、氟(F)含量的测定: a、标准曲线的绘制; b、试样含量的测定: 实验:称取0.5g(精确到0.0002g)置于50ml纳氏比色管中,加1mol/L盐酸10ml,密闭提取 1h(不时摇动),避免粘于管壁,提取后加总离子强度缓冲液25ml,加水至刻度,以滤 纸过滤。以氟电极测平衡电位值。 计算:X= C501000 / m1000 = 50C m X-试样中氟含量, m-试样质量,g; C-据电位值查得的浓度, 总离子强度缓冲液:现配现用,3mol/L乙酸钠;0.75mol/L柠檬酸钠,配成(1+1)。 测定时,用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。 4、磷(P)的测定 磷标准曲线的绘制:准确移取磷标准溶液(分析纯的磷酸二氢钾,在105干燥1h,冷却后称 取0.2195g,溶于1L的容量瓶中,加硝酸3ml,用水稀释至刻度,得到50ug/ml溶 液),分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶 中,各加入磷显色液(钒-钼酸铵显色液:偏钒酸铵1.25g,加250ml硝酸于1000ml 容量瓶中;钼酸铵25g于烧杯中,加400ml水溶解,冷却下,将此液倒入容量瓶中, 定容)10ml,用蒸馏水定容,摇匀放置10min以上,以0.0为参比,在400nm波长 测定各溶液的吸光度。以横坐标为磷含量,纵坐标为吸光度,作标准曲线。 样品的测定(磷酸氢钙):移取测钙时所用的试样溶液5ml于100ml容量瓶中,用水定容,摇 匀,准确移取2ml于50ml容量瓶中,加磷显色液10ml,用水定容,测其吸光度。 计算: P%= W稀释倍数 /m106 100 W-以吸光度算出的浓度, m-试样质量,g。 5、硫酸铜(CuSO45H2O) 鉴别:1、Cu2+,取试样溶液,加0.5ml乙二胺四乙酸二钠溶液(15%,m/v),0.5ml氢氧化钠 溶液(0.1mol/L),1ml乙酸乙酯,振摇,有机层显黄棕色。 2、SO42-,取试样溶液,置于白色瓷板上,加BaCl2溶液(5%,m/v),即有白色沉淀生 成,在盐酸和硝酸中不溶。 测定:称取0.35g左右(精确到0.0002g)置于碘量瓶中,加50ml水溶解,40ml冰乙酸,2g碘 化钾(10mlKI溶液),摇匀,于暗处放置10min,用Na2S2O3标准溶液滴定至淡蓝色, 加2ml淀粉,继续滴定至无蓝色(或蓝色刚刚消失为终点)。 计算:硫酸铜%= CV0.06355/ m 100 C-Na2S2O3标准溶液的浓度,mol/L; V-消耗Na2S2O3标准溶液体积,ml; m-样品质量,g。 6、硫酸锌(ZnSO4H2O) 实验:称取0.2g试样,加50ml水溶解,加3g酒石酸钾钠,2ml浓氨水,50mg络黑体,用EDTA 标准溶液(0.05mol/L)滴定至紫色变为纯蓝色。 计算:ZnSO4%= CV0.06537/ m 100% C-EDTA标准溶液的浓度,mol/L; V-消耗EDTA标准溶液的体积,ml; m-样品质量。 7、硫酸亚铁(FeSO4H2O) 实验:称取0.35g试样于250ml三角瓶中,加50ml水,5ml浓硫酸(缓慢加入),2ml浓磷酸, 冷却至室温,用0.1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至粉红色即为终点。 实验:FeSO4%= CV0.05585/ m100% C-高锰酸钾标准溶液的浓度,mol/L; V-消耗高锰酸钾标准溶液的体积,ml; m-试样的质量。 8、砷 原理:在酸性介质中,金属锌将砷化物还原为砷化氢,砷化氢在溴化汞试纸上形成棕黄色砷斑 与标准砷进行比较。 试剂:盐酸(HCl),碘化钾(KI),氧化亚锡盐酸溶液(40%、m/v),无砷金属锌,乙酸铅棉花溴 化汞试纸,砷标准溶液(1ug/ml)。 测定:称取1g试样(精确到0.01g)置于广口瓶中,用水稀释至70ml,加6ml盐酸,摇匀,加 1g碘化钾(5mlKI溶液、200g/L),再滴加氯化亚锡,直到溶液由黄色变成无色或白色, 摇匀,放置10min,加2.5g无砷金属锌,装好置于暗处25-30放置1-1.5h,溴化汞试纸 所呈棕黄色不得深于标准。 9、硫酸镁(MgSO4):无色结晶或白色粉末。 实验:称取试样1g(精确到0.0002g),用水溶解,转移至100ml容量瓶中,定容,准确吸取 25ml溶液至250ml锥形瓶中,加30ml水,10ml氨-氯化铵缓冲溶液(PH=10),及5滴 铬黑体指示剂(0.5%),用EDTA滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点。 计算:X%= CV0.02431 / m100 C-EDTA标准溶液的浓度,mol/L; V-消耗EDTA标准溶液的体积,ml; m-样品质量,g。 另:沸石粉、滑石粉、石膏粉和膨润土,只测Pb、Cd和As。四、维生素检测 1、甜菜碱盐酸盐 1)、原理:采用非水滴定法,用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞,在乙酸介 质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。 2)、试剂:冰乙酸;乙酸汞溶液,将50g乙酸汞研细,加1000ml冰乙酸溶解,置棕色瓶中, 密闭保存。结晶紫指示剂;2g/L,取2g结晶紫加100ml冰乙酸;高氯酸标准滴定液, 0.1mol/L的溶液。 3)、测定:取试样预先在105烘箱中干燥至恒重,称取干燥试样0.4g(精确到0.0002g),加50ml 冰乙酸加热溶解,加25ml乙酸汞溶液,冷却,加结晶紫指示剂2滴,用0.1mol/L的高 氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色,同时作空白试验。 4)、计算: X%= (V-V0)C0.01536/ M100 C-高氯酸标准溶液的浓度mol/L V-试验组消耗高氯酸标准溶液的体积ml V0-空白组消耗高氯酸标准溶液的体积ml m-试样质量。 2、氯化胆碱 1)、操作步骤:称取经105干燥至恒重的试样1g(精确到0.0002g),置于100ml容量瓶中, 加水70ml混匀,在约80水浴上加热15min,取出,在电动振荡器振荡20min,用水定容 至100ml,过滤,吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中,在冰箱内冷却到5以下,加10ml 雷氏盐溶液(2%),不时搅拌反应30min(再令沉淀静置陈化15min),然后将沉淀定量到 转移到事先在105烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中,减压抽滤,在用水洗涤沉淀3-4次, 每次10ml,将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱,105烘2h称重。 2)、试剂: 雷氏盐甲醇溶液(2%):2g雷氏盐,溶于100ml甲醇中,放置于低温下保存。 氨制硝酸银溶液:取硝酸银1g,加水20ml,滴加氨试剂(取浓氨水400ml,加水至1000ml), 边加边搅拌,至棕色沉淀将近全溶,过滤,置于棕色瓶中,在暗处保存。 胺盐定性分析:称取3-4g试样,煮50ml水至70-80,在加样品,摇匀充分溶解,过滤于150ml 三角瓶中,加入1ml浓硫酸,摇匀,将滤液煮沸,用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测 其气,观察试纸颜色是否发黑,继续煮1-2min,从电炉上取下放冷,加40%氢 氧化钠5ml再煮沸,用PH湿润试纸测其蒸气的PH值,PH在7-8为合格。 3)、计算:氯化胆碱%= 沉淀重3.3045 / 样品重量100% 氯化胆碱仲裁法(非水滴定法): 1、原理:采用非水滴定法,用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞,在乙酸介 质中,以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定。 2、试剂:5%乙酸汞溶液、50g/L(称取5g乙酸汞研细,用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml, 在棕色瓶中密封保存;0.2%结晶紫、2g/L(称取0.2g,加100ml冰乙酸) 3、测定步骤:称取试样0.3g(精确到0.0002g)置于100ml锥形瓶中,加20ml冰乙酸,2ml 乙酸酐,10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂,摇匀,用高氯酸标准溶液滴定至溶 液呈纯蓝色。即为终点。同时做空白试验。 4、计算:X%= C(V1-V0)139.63 / m1000 100 C-高氯酸标准溶液的浓度,mol/L; V1-试验组消耗高氯酸溶液的体积,ml; V0-空白组消耗高氯酸溶液的体积,ml; m-样品的质量,g。 139.63-氯化胆碱的分子量。 3、维生素B6 1)步骤:称0.15g样品(精确到0.0002g),加冰乙酸20ml,乙酸汞溶液5ml,温热溶解,放冷, 加结晶紫指示剂1滴,用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色,同时做空白校正。 2)计算:VitB6%= (V-V0)F0.02056 / m100 V-样品溶液耗高氯酸标准溶液的体积,ml; V0-空白溶液耗高氯酸标准溶液的体积,ml; F-高氯酸标准溶液浓度,mol/L; m-样品重,g。 本法适用于化学合成制得的vitB6。 4、维生素B2(核黄素) 1)步骤:避光操作,称取0.075g(精确到0.0002g),置于烧杯中,加冰乙酸1ml和水75ml, 加热溶解后,加水稀释放冷,移置500ml容量瓶中,用水定容。摇匀,吸取10ml 于100ml容量瓶中,加1.4%乙酸钠溶液7ml。并用水定容,同时做空白试验作对 照。以444nm波长测吸光度。 2)计算: VitB2%= A / 323LC100= 50A 323m100% A-样品吸光度; 323-维生素B2的系数; L-光路长度1cm; C-100ml溶液中样品的g数。 5、维生素C(包被) 1)步骤:称取0.2g于250ml三角瓶中,加水100ml(煮沸,冷却),10ml冰乙酸,1ml1%淀 粉指示剂,用0.1mol/L碘标准溶液滴定至溶液为蓝色。 2)计算:VitC%= VF0.00886/ m100 V-消耗碘标准溶液的体积,ml; m-试样质量,g; F-浓度校正系数(碘标液/样品液浓度)碘标准溶液的浓度,mol/L。五、氨基酸检测1、赖氨酸硫酸盐含量的测定 1)原理:赖氨酸在PH3.0是与茚三酮反应生成红色化合物,其颜色深浅与赖氨酸含量存在性性关 系。 2)试剂:1、茚三酮A液:称取茚三酮1.50g于烧杯中,量取110ml乙二醇-甲谜于烧杯中,溶解。 2、茚三酮B液:称取1.80g二水氯化铜(CuCl22H2O)于烧杯中,再量取0.1mol/L柠檬 酸39ml于烧杯中,搅拌使其溶解。 3、将A、B两液全部转入1000ml容量瓶中定容,摇匀得茚三酮显色液。 4、赖氨酸空白显色液、称取1.80g二水氯化铜(CuCl22H2O)于烧杯中,再量取0.1mol/L 柠檬酸39ml于烧杯中,搅拌使其溶解。转移至1000ml容量瓶中定容,摇匀即可。 3)标准曲线的绘制 标准贮备液:称取L-赖氨酸2克左右于1000ml容量瓶中,加1mol/L盐酸1ml用水溶解,定容。 则浓度大约在0.2mg/ml. 标准曲线的绘制:分别吸取3.0,5.0,10.0,11.0,12.0,13.0和14.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中, 加水定容摇匀.在以上各容量瓶中分别吸取2.00ml于比色管中,然后在每只比色 管中再加10ml印三酮显色液,不定容,用力振摇.于沸水浴中水浴40分钟.立即冷 却至室温.同时作空白(只是不加分解液).在分光光度计上于475nm波长处,以空白 调零,测量各吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,作图. 4)、样品的测定: 称取样品1.5克左右,加1mol/L的盐酸7ml充分溶解样品,用水定容,过滤,吸 取2.00ml于100ml容量瓶中,加水定容,摇匀。其它同作标准曲线的步骤。测 出吸光度。 5)、计算:于标准曲线上查出所测样品的浓度,代入公式 X(%)= C500 / M C-为从标准曲线上查得的样品的浓度。 M-样品的质量。 500-为样品稀释的倍数和转变为百分含量的系数。(空白加样品液和空白试液。 2、苏氨酸的检测: 允许相对偏差不得超过0.3%. 项目指标一级二级含量985950比旋度-26.0-29.0-25.528.5干燥失重1.0铵盐0.040.50灼烧残渣0.30.5重金属(以铅计),20砷(以砷计)2 1)试剂和溶液:L-苏氨酸标准品:生化试剂BR, 硅胶GF254薄层层析板.若发现受潮,需要80度烘干30分钟,恢复活性后使用. 展开剂:正丁醇:醋酸:水=6.17:2.86:1(体积比) 显色剂:0.5%茚三酮丙酮溶液. 2) 鉴别步骤:取适量样品与L-苏氨酸标准品,用蒸馏水分别制成浓度30毫克每毫升的溶液,照 薄层色谱法试验.取上述两种溶液0.5毫升分别点样于同一硅胶薄层板上,将点好的 样的薄层板放入层析缸的展开剂中展开,展开后于70度烘干.以0.5%茚三酮显色剂 喷雾,70度烘干显色.供试品与L-苏氨酸标准品均显紫红色,两者主斑点位置相同,则 判定本品为L-苏氨酸 3)试剂: 盐酸:; 冰乙酸:(v/v)溶液; 硫化钠:克硫化钠溶于ml水中,临用时新配制; 铅标准溶液:ml 比旋度:称取干燥试样3g,用水溶解,转移至50ml容量瓶,加水定容,摇匀过滤, 测定,预热旋光仪后,用蒸馏水调零,润洗至少2遍。苏氨酸为右旋用“-” 4)含量:试样先在105度干燥至恒重,称取样品0.2克,置于250ml的三角瓶中,加3ml甲酸和 50ml冰乙酸使之溶解,5ml乙酸汞,10滴-奈酚苯基甲醇指示剂,用0.1mol/L的高氯 酸标液滴定至橙黄黄绿色为终点,并做空白试验校正. 若滴定样品时与标定高氯酸滴定液时的温度差在10度,则应重新标定,若未超过10度, 则可根据下式将高氯酸滴定浓度加以校正。 5)结果计算: C1= C0/ 1+0.0011(t1-t0) 样品中L-苏氨酸的含量按式计算: X%= 0.1191C1(V1-V0)100 m% 6)
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