实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)

撰写人：_日 期：_ 实验室常用溶液及试剂配制一、实验室常用溶液、试剂的配制-1 表一 普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三 混合酸碱指示剂配制 表四 容量分析基准物质的干燥 表五 缓冲溶液的配制 1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 8、 常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-4 1、硝酸银（CAgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（CI2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（CNa2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（CHClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（CHCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（CEDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（CK2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（CNaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法-6 1、柠檬酸（C6H8O7H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2H2O、钙粉等） 3、氟（F）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO45H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4）四、维生素检测-8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱 3、维生素B6 4、维生素B2（核黄素）5、维生素C（包被）五、氨基酸检测-101、赖氨酸硫酸盐含量的测定 2、苏氨酸的检测 3、赖氨酸4、 DL-蛋氨酸六、 抗生素测定-12七、 氮（N）含量的测定（鱼粉）-12精品范文模板 可修改删除一、 实验室常用溶液、试剂的配制 表一 普通酸碱溶液的配制 名 称（分子式）比重（g/ml）含量（w/w%）近似摩尔浓度（mol/L）欲配溶液的摩尔浓度（mol/L）6321配制1L溶液所用的ml数（或g）盐 酸（HcL）1.181.1936381250025016783硝 酸（HNO3）1.391.4065681538119112864硫 酸（H2SO4）1.831.8495981884422814冰醋酸（Hac）1.0599.91725317711859磷 酸（H3PO4）1.6985153919126氨水（NH3H2O）0.900.91281540020013477氢氧化钠（NaOH）（240）（120）（80）（40）氢氧化钾（KOH）（339）（170）（113）（56.5） 表二 常用酸碱指示剂 指示剂PKHIn变色范围pH酸色碱色配 制 方 法百里酚蓝（麝香草酚蓝）1.6512.2.8红黄0.1%的20%乙醇溶液甲基橙3.43.14.4红橙黄0.05%水溶液溴甲酚绿4.93.85.4黄蓝0.1%的20%乙醇溶液或者0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml甲基红5.04.46.2红黄0.1%的60%乙醇溶液溴百里酚蓝（麝香草酚蓝）7.36.27.3黄蓝0.1%的20%乙醇溶液中性红7.46.88.0红黄橙0.1%的60%乙醇溶液百里酚蓝（第二变色范围）9.28.09.6黄蓝0.1%的20%乙醇溶液酚酞9.48.010.0无色红0.5%的90%乙醇溶液百里酚酞10.09.410.6无色蓝0.1%的90%乙醇溶液 表三 混合酸碱指示剂 指示剂组成（体积比）变色点pH酸色碱色备注一份0.1%甲基橙水溶液一份0.25%靛蓝二磺酸钠水溶液4.1紫绿灯光下可滴定一份0.02%甲基橙水溶液一份0.1溴甲酚绿钠盐水溶液4.3橙蓝绿PH3.5黄色PH4.05绿黄PH4.3浅绿三份0.1%溴甲酚绿20%乙醇溶液一份0.2%甲基红60%乙醇溶液5.1酒红绿颜色变化极鲜明一份0.2%甲基红乙醇溶液一份0.1%次甲基蓝乙醇溶液5.4红紫绿PH5.2红紫PH5.4暗蓝PH5.6绿色一份0.1%溴甲酚绿钠盐水溶液一份0.1%绿酚红钠盐水溶液6.1黄绿蓝紫PH5.6蓝绿PH5.8蓝色PH6.0浅紫PH6.2蓝紫一份0.1%溴甲酚紫钠盐水溶液一份0.1溴百里酚蓝钠盐水溶液6.7黄紫蓝PH6.2黄紫PH6.6紫PH6.8蓝紫一份0.1中性红乙醇溶液一份0.1次甲基蓝乙醇溶液7.0蓝紫绿PH7.0为蓝绿必须保存在棕色瓶中一份0.1甲酚红钠盐水溶液三份0.1%百里酚蓝钠盐水溶液8.3黄紫PH8.2玫瑰色PH8.4紫色一份0.1%百里酚蓝50%乙醇溶液三份0.1酚酞50%乙醇溶液9.0黄紫PH9.0绿色 表四 容量分析基准物质的干燥 基准物质干燥温度和时间基准物质干燥温度和时间碳酸钠（NaCO3）500650，40-50min氯化物（NaCl）500-650，干燥40-50min草酸钠（H2C2O4）150-200，1-1.5h硝酸银（AgNO3）室温，硫酸干燥器中至恒温草酸（H2C22H2O）室温，空气干燥2-4h碳酸钙（CaCO3）120，干燥至恒重硼砂（Na2B2O10H2O）室温，在NaCl和蔗糖饱和液的干燥器中，4h氧化锌（ZnO）800灼烧至恒重邻苯二甲酸氢钾（KHC6H4O4）100-120干燥至恒重锌（Zn）室温，干燥器24h以上重铬酸钾（K2Cr2O7）100-110，干燥3-4h氧化镁（MgO）800灼烧至恒重 表五 缓冲溶液的配制 1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液 0.2mol/LKCl（ml）505050505050500.2mol/LHCl（ml）97.0 64.341.526.316.610.66.7水（ml）53.085.5108.5123.7133.4139.4143.3PH（20）1.01.21.41.61.82.02.2 2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 0.2mol/LKHC6H4O4（ml）50505050500.2mol/LHCl（ml）46.7032.9520.329.902.63水（ml）103.30117.05129.68140.10147.37PH（20）2.22.63.03.43.8 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 0.2mol/LKHC6H4O4（ml）50505050500.2mol/LHCl（ml）0.407.5017.7029.9539.85水（ml）149.60142.50132.20120.05110.15PH（20）4.04.44.85.25.6 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 0.2mol/LHAc（ml）1851641268042190.2mol/LNaAc（ml）153674120158181PH（20）3.64.04.44.85.25.6 5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 0.2mol/LKH2PO4（ml）5050505050500.2mol/LNaOH（ml）3.728.6017.8029.6339.5045.20水（ml）146.26141.20132.20120.37110.50104.80PH（20）5.86.26.67.07.47.8 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 0.2mol/L硼砂（ml）9080706050400.2mol/LNaOH（ml）102030405060PH（20）9.359.489.669.9411.0412.32 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 0.2mol/LNH3H2O（ml）11128320.2mol/LNH4Cl（ml）3282111PH（20）8.08.589.19.810.411.0 8、 常用缓冲溶液的配制 PH配制方法3.6NaAc3H2O 8g， 溶于适量水中，加6mol/LHAc 134ml，稀释至500ml4.0NaAc3H2O 20g 溶于适量水中，加6mol/LHAc 134ml，稀释至500ml4.5NaAc3H2O 32g 溶于适量水中，加6mol/LHAc 68ml，稀释至500ml5.0NaAc3H2O 50g 溶于适量水中，加6mol/LHAc 34ml，稀释至500ml8.0NH4Cl 50g 溶于适量水中，加15mol/LNH3H2O 3.5ml，稀释至500ml8.5NH4Cl 40g 溶于适量水中，加15mol/LNH3H2O 8.8ml，稀释至500ml9.0NH4Cl 35g 溶于适量水中，加15mol/LNH3H2O 24ml，稀释至500ml9.5NH4Cl 30g 溶于适量水中，加15mol/LNH3H2O 65ml，稀释至500ml10NH4Cl 27g 溶于适量水中，加15mol/LNH3H2O 197ml，稀释至500ml二、实验室常用标准溶液的配制及其标定 1、硝酸银（CAgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：称取硝酸银17.5g，溶于1000ml水中，摇匀，溶液保存于棕色瓶中。 标定：称取基准氯化钠（NaCl）0.2g（110高燥至恒重）（精确到0.0002g），加水50ml溶解， 再加2%淀粉（不含Cl-）溶液5ml，碳酸钙（CaCO3）0.1g与荧光黄指示剂8滴，用配制 好的硝酸银溶液滴定至溶液由黄绿色变成微红色。即为终点。 计算： CAgNO3= m（NaCl） / V（AgNO3）58.44 1000 C-硝酸银溶液的浓度，mol/L； m-氯化钠的质量，g； V-消耗硝酸银溶液的体积，ml； 58.44-每mol氯化钠的克数。 2、碘（CI2=0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：称取13g碘及35g碘化钾，溶于100ml水中，稀释至1000ml，摇匀，保存于棕色瓶中。 标定：称取0.15g基准三氧化二砷于碘量瓶中，加4ml氢氧化钠（1mol/L）溶解，加50ml水， 2滴酚酞指示剂（10g/L），用硫酸（1mol/L）中和，加碳酸氢钠（NaHCO3）3g及3ml淀 粉（5g/L），用配制好的碘液滴定至溶液为浅蓝色，同时作空白试验。 计算： CI2= m/ （V1-V2）0.04946 C-碘溶液的浓度，mol/L； V1-试验组消耗碘溶液的体积，ml； V2-空白组消耗碘溶液的体积，ml； m-三氧化二砷的质量，g。 3、硫代硫酸钠（CNa2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：称取26gNa2S2O35H2O或16g Na2S2O3，溶于1000ml水中，缓缓煮沸10min，冷却， 放置两周后过滤备用。 标定：称取0.15g（精确到0.0001g）于120烘至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于 25ml水，加2g碘化钾及20ml硫酸（20%），摇匀，于暗处放置10min，加150ml水， 用配制好的Na2S2O3（0.1mol/L）滴定，近终点时加3ml淀粉指示剂（5g/L），继续滴 定至溶液由蓝色变为亮绿色，同时作空白试验。 计算： C Na2S2O3= m/ （V1-V2）0.04903 C- Na2S2O3标准溶液的摩尔浓度，mol/L； V1-试验组消耗Na2S2O3溶液的体积，ml； V2-空白组消耗Na2S2O3溶液的体积，ml； m-重铬酸钾的质量，g。 0.04903-与1.00ml Na2S2O3标准溶液相当的以g表示的重铬酸钾的质量。 4、高氯酸（CHClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：量取8.5ml高氯酸，在搅拌下注入500ml冰乙酸中，混匀。在室温下滴加20ml乙酸酐， 搅拌至溶液均匀。冷却后用冰乙酸稀释至1000ml，摇匀。 标定：称取0.6g于105-110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾（精确到0.0001g），置于干燥的 锥形瓶中，加入50ml冰乙酸，温热溶解。加2-3滴结晶紫指示剂（5g/L），用配好的高 氯酸溶液滴定至溶液由紫色变为蓝色（微带紫色）。（注：本溶液使用前标定，标定高氯 酸标准溶液时的温度应与使用该标准溶液滴定时的温度相同。） 计算： C= m/ V0.2042 C-高氯酸标准溶液的浓度，mol/L； V-消耗高氯酸溶液的体积，ml； m-邻苯二甲酸氢钾的质量，g。 5、盐酸（CHCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：量取9.0ml盐酸，注入1000ml水，摇匀。 标定：称取于270-300灼烧至恒重的基准无水碳酸钠0.2g（精确到0.0001g），溶于50ml水 中，加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，用配好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗 红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时作空白。 计算： C= m/ （V1-V2）0.05299 C-盐酸标准溶液的浓度，mol/L； m-无水碳酸钠的质量，g； V1-试验组消耗盐酸溶液的体积，ml； V2-空白组消耗盐酸溶液的体积，ml； 6、乙二胺四乙酸二钠（CEDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：称取40g乙二胺四乙酸二钠，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。 标定：称取0.25g于800灼烧至恒重的基准氧化锌（精确到0.0001g），用少量水润湿，加2ml 盐酸溶液（20%）使样品溶解，加100ml水用氨水溶液（10%）中和至PH7-8，加10ml 氨-氯化铵缓冲溶液甲（PH10）及5滴铬黑体指示剂（5g/L），用配好的乙二胺四乙酸 二钠（0.1mol/L）溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时作空白。 计算： C= m/ （V1-V2）0.08138 C-乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度，mol/L； V1-试验组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积，ml； V2-空白组消耗乙二胺四乙酸二钠溶液的体积，ml； m-氧化锌的质量，g。 7、高锰酸钾（CK2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 配制：称取3.3g高锰酸钾，溶于1050ml水中，缓缓煮沸15min，冷却后置于暗处保存两周， 过滤于干燥的棕色瓶中。 标定：称取0.2g于105-110烘至恒重的基准草酸钠（精确到0.0001g），溶于100ml硫酸溶液 （8+92），用配好的高锰酸钾溶液滴定，近终点时加热至65，继续滴定至溶液呈粉红色 保持30秒，同时作空白。 计算：CK2MnO4= m/ （V1-V2）0.06700 C-高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L； V1-试验组消耗高锰酸钾溶液的体积，ml； V2-空白组消耗高锰酸钾溶液的体积，ml； m-草酸钠的质量，g。 8、氢氧化钠（CNaOH=1mol/L）标准溶液的配制 配制：称取100g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清 亮。用塑料管虹吸取52ml上清液，注入1000ml无二氧化碳的水中，摇匀。 标定：称取于105-110烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾6g（精确到0.0001g），溶于80ml无 二氧化碳的水中，加2滴酚酞指示剂（10g/L），用配好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉 红色，同时作空白试验。 计算：CNaOH= m/ （V1-V2）0.2042 C-氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L； V1-试验组消耗氢氧化钠溶液的体积，ml； V2-空白组消耗氢氧化钠溶液的体积，ml； m-邻苯二甲酸氢钾的质量，g。三、常见物质的实验室试验方法 1、柠檬酸（C6H8O7H2O） 实验：称取试样1.5g（精确到0.0002g）于三角瓶内，加入水50ml溶解，加酚酞指示剂3滴， 用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点，同时做空白试验。 计算：X%（一水）= （V1-V0）C0.06404/ m（1-0.08566）100 X%（无水）= （V1-V0）C0.06404/ m100 V1-消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml； V0-空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，ml； C-氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L； m-样品质量。 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2H2O、钙粉等） 实验：称取2g（精确到0.0002g）样品，用10ml盐酸（1+1）溶解，转移至100ml容量瓶中定溶， 用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中，加50ml水，5ml蔗糖溶液（25g/L），2ml三乙酸 胺（1+1），1ml乙二胺（1+1），1滴孔雀绿指示液（1g/L），滴加氢氧化钾溶液（200g/L） 至无色，再过量10ml，加0.1g盐酸羟胺（每加一种试剂都要摇匀），加钙黄绿素少许，在 黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。 计算：Ca%= CV0.4008/ m 100 C-EDTA标准溶液的浓度，mol/L； V-消耗EDTA标准溶液的体积，ml； m-样品质量。 3、氟（F）含量的测定： a、标准曲线的绘制； b、试样含量的测定： 实验：称取0.5g（精确到0.0002g）置于50ml纳氏比色管中，加1mol/L盐酸10ml，密闭提取 1h（不时摇动），避免粘于管壁，提取后加总离子强度缓冲液25ml，加水至刻度，以滤 纸过滤。以氟电极测平衡电位值。 计算：X= C501000 / m1000 = 50C m X-试样中氟含量， m-试样质量，g； C-据电位值查得的浓度， 总离子强度缓冲液：现配现用，3mol/L乙酸钠；0.75mol/L柠檬酸钠，配成（1+1）。 测定时，用蒸馏水洗电极装置至值为-370以后。 4、磷（P）的测定 磷标准曲线的绘制：准确移取磷标准溶液（分析纯的磷酸二氢钾，在105干燥1h，冷却后称 取0.2195g，溶于1L的容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻度，得到50ug/ml溶 液），分别吸取0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml于50ml容量瓶 中，各加入磷显色液（钒-钼酸铵显色液：偏钒酸铵1.25g，加250ml硝酸于1000ml 容量瓶中；钼酸铵25g于烧杯中，加400ml水溶解，冷却下，将此液倒入容量瓶中， 定容）10ml，用蒸馏水定容，摇匀放置10min以上，以0.0为参比，在400nm波长 测定各溶液的吸光度。以横坐标为磷含量，纵坐标为吸光度，作标准曲线。 样品的测定（磷酸氢钙）：移取测钙时所用的试样溶液5ml于100ml容量瓶中，用水定容，摇 匀，准确移取2ml于50ml容量瓶中，加磷显色液10ml，用水定容，测其吸光度。 计算： P%= W稀释倍数 /m106 100 W-以吸光度算出的浓度， m-试样质量，g。 5、硫酸铜（CuSO45H2O） 鉴别：1、Cu2+，取试样溶液，加0.5ml乙二胺四乙酸二钠溶液（15%，m/v），0.5ml氢氧化钠 溶液（0.1mol/L），1ml乙酸乙酯，振摇，有机层显黄棕色。 2、SO42-，取试样溶液，置于白色瓷板上，加BaCl2溶液（5%，m/v），即有白色沉淀生 成，在盐酸和硝酸中不溶。 测定：称取0.35g左右（精确到0.0002g）置于碘量瓶中，加50ml水溶解，40ml冰乙酸，2g碘 化钾（10mlKI溶液），摇匀，于暗处放置10min，用Na2S2O3标准溶液滴定至淡蓝色， 加2ml淀粉，继续滴定至无蓝色（或蓝色刚刚消失为终点）。 计算：硫酸铜%= CV0.06355/ m 100 C-Na2S2O3标准溶液的浓度，mol/L； V-消耗Na2S2O3标准溶液体积，ml； m-样品质量，g。 6、硫酸锌（ZnSO4H2O） 实验：称取0.2g试样，加50ml水溶解，加3g酒石酸钾钠，2ml浓氨水，50mg络黑体，用EDTA 标准溶液（0.05mol/L）滴定至紫色变为纯蓝色。 计算：ZnSO4%= CV0.06537/ m 100% C-EDTA标准溶液的浓度，mol/L； V-消耗EDTA标准溶液的体积，ml； m-样品质量。 7、硫酸亚铁（FeSO4H2O） 实验：称取0.35g试样于250ml三角瓶中，加50ml水，5ml浓硫酸（缓慢加入），2ml浓磷酸， 冷却至室温，用0.1mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至粉红色即为终点。 实验：FeSO4%= CV0.05585/ m100% C-高锰酸钾标准溶液的浓度，mol/L； V-消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml； m-试样的质量。 8、砷 原理：在酸性介质中，金属锌将砷化物还原为砷化氢，砷化氢在溴化汞试纸上形成棕黄色砷斑 与标准砷进行比较。 试剂：盐酸（HCl），碘化钾（KI），氧化亚锡盐酸溶液（40%、m/v），无砷金属锌，乙酸铅棉花溴 化汞试纸，砷标准溶液（1ug/ml）。 测定：称取1g试样（精确到0.01g）置于广口瓶中，用水稀释至70ml，加6ml盐酸，摇匀，加 1g碘化钾（5mlKI溶液、200g/L），再滴加氯化亚锡，直到溶液由黄色变成无色或白色， 摇匀，放置10min，加2.5g无砷金属锌，装好置于暗处25-30放置1-1.5h，溴化汞试纸 所呈棕黄色不得深于标准。 9、硫酸镁（MgSO4）：无色结晶或白色粉末。 实验：称取试样1g（精确到0.0002g），用水溶解，转移至100ml容量瓶中，定容，准确吸取 25ml溶液至250ml锥形瓶中，加30ml水，10ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH=10），及5滴 铬黑体指示剂（0.5%），用EDTA滴定至溶液由紫红色变为纯蓝色为终点。 计算：X%= CV0.02431 / m100 C-EDTA标准溶液的浓度，mol/L； V-消耗EDTA标准溶液的体积，ml； m-样品质量，g。 另：沸石粉、滑石粉、石膏粉和膨润土，只测Pb、Cd和As。四、维生素检测 1、甜菜碱盐酸盐 1）、原理：采用非水滴定法，用乙酸汞将甜菜碱盐酸盐转化为乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介 质中用高氯酸滴定溶液对生成的乙酸盐进行滴定。 2）、试剂：冰乙酸；乙酸汞溶液，将50g乙酸汞研细，加1000ml冰乙酸溶解，置棕色瓶中， 密闭保存。结晶紫指示剂；2g/L，取2g结晶紫加100ml冰乙酸；高氯酸标准滴定液， 0.1mol/L的溶液。 3）、测定：取试样预先在105烘箱中干燥至恒重，称取干燥试样0.4g（精确到0.0002g），加50ml 冰乙酸加热溶解，加25ml乙酸汞溶液，冷却，加结晶紫指示剂2滴，用0.1mol/L的高 氯酸标准溶液滴定到溶液呈绿色，同时作空白试验。 4）、计算： X%= （V-V0）C0.01536/ M100 C-高氯酸标准溶液的浓度mol/L V-试验组消耗高氯酸标准溶液的体积ml V0-空白组消耗高氯酸标准溶液的体积ml m-试样质量。 2、氯化胆碱 1）、操作步骤：称取经105干燥至恒重的试样1g（精确到0.0002g），置于100ml容量瓶中， 加水70ml混匀，在约80水浴上加热15min，取出，在电动振荡器振荡20min，用水定容 至100ml，过滤，吸取10ml滤液于100ml高型烧杯中，在冰箱内冷却到5以下，加10ml 雷氏盐溶液（2%），不时搅拌反应30min（再令沉淀静置陈化15min），然后将沉淀定量到 转移到事先在105烘干至恒重的玻璃砂芯坩埚中，减压抽滤，在用水洗涤沉淀3-4次， 每次10ml，将装有沉淀的坩埚滤器放入烘箱，105烘2h称重。 2）、试剂： 雷氏盐甲醇溶液（2%）：2g雷氏盐，溶于100ml甲醇中，放置于低温下保存。 氨制硝酸银溶液：取硝酸银1g，加水20ml，滴加氨试剂（取浓氨水400ml，加水至1000ml）， 边加边搅拌，至棕色沉淀将近全溶，过滤，置于棕色瓶中，在暗处保存。 胺盐定性分析：称取3-4g试样，煮50ml水至70-80，在加样品，摇匀充分溶解，过滤于150ml 三角瓶中，加入1ml浓硫酸，摇匀，将滤液煮沸，用氨制硝酸盐试剂沾滤纸测 其气，观察试纸颜色是否发黑，继续煮1-2min，从电炉上取下放冷，加40%氢 氧化钠5ml再煮沸，用PH湿润试纸测其蒸气的PH值，PH在7-8为合格。 3）、计算：氯化胆碱%= 沉淀重3.3045 / 样品重量100% 氯化胆碱仲裁法（非水滴定法）： 1、原理：采用非水滴定法，用乙酸汞将氯化胆碱转化成乙酸盐和难电离的氯化汞，在乙酸介 质中，以高氯酸对生成的乙酸盐进行滴定。 2、试剂：5%乙酸汞溶液、50g/L（称取5g乙酸汞研细，用微热的冰乙酸溶解并稀释至100ml， 在棕色瓶中密封保存；0.2%结晶紫、2g/L（称取0.2g，加100ml冰乙酸） 3、测定步骤：称取试样0.3g（精确到0.0002g）置于100ml锥形瓶中，加20ml冰乙酸，2ml 乙酸酐，10ml乙酸汞溶液和2滴结晶紫指示剂，摇匀，用高氯酸标准溶液滴定至溶 液呈纯蓝色。即为终点。同时做空白试验。 4、计算：X%= C（V1-V0）139.63 / m1000 100 C-高氯酸标准溶液的浓度，mol/L； V1-试验组消耗高氯酸溶液的体积，ml； V0-空白组消耗高氯酸溶液的体积，ml； m-样品的质量，g。 139.63-氯化胆碱的分子量。 3、维生素B6 1）步骤：称0.15g样品（精确到0.0002g），加冰乙酸20ml，乙酸汞溶液5ml，温热溶解，放冷， 加结晶紫指示剂1滴，用高氯酸标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色，同时做空白校正。 2）计算：VitB6%= （V-V0）F0.02056 / m100 V-样品溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml； V0-空白溶液耗高氯酸标准溶液的体积，ml； F-高氯酸标准溶液浓度，mol/L； m-样品重，g。 本法适用于化学合成制得的vitB6。 4、维生素B2（核黄素） 1）步骤：避光操作，称取0.075g（精确到0.0002g），置于烧杯中，加冰乙酸1ml和水75ml， 加热溶解后，加水稀释放冷，移置500ml容量瓶中，用水定容。摇匀，吸取10ml 于100ml容量瓶中，加1.4%乙酸钠溶液7ml。并用水定容，同时做空白试验作对 照。以444nm波长测吸光度。 2）计算： VitB2%= A / 323LC100= 50A 323m100% A-样品吸光度； 323-维生素B2的系数； L-光路长度1cm； C-100ml溶液中样品的g数。 5、维生素C（包被） 1）步骤：称取0.2g于250ml三角瓶中，加水100ml（煮沸，冷却），10ml冰乙酸，1ml1%淀 粉指示剂，用0.1mol/L碘标准溶液滴定至溶液为蓝色。 2）计算：VitC%= VF0.00886/ m100 V-消耗碘标准溶液的体积，ml； m-试样质量，g； F-浓度校正系数（碘标液/样品液浓度）碘标准溶液的浓度，mol/L。五、氨基酸检测1、赖氨酸硫酸盐含量的测定 1）原理：赖氨酸在PH3.0是与茚三酮反应生成红色化合物，其颜色深浅与赖氨酸含量存在性性关 系。 2）试剂：1、茚三酮A液：称取茚三酮1.50g于烧杯中，量取110ml乙二醇-甲谜于烧杯中，溶解。 2、茚三酮B液：称取1.80g二水氯化铜（CuCl22H2O）于烧杯中，再量取0.1mol/L柠檬 酸39ml于烧杯中，搅拌使其溶解。 3、将A、B两液全部转入1000ml容量瓶中定容，摇匀得茚三酮显色液。 4、赖氨酸空白显色液、称取1.80g二水氯化铜（CuCl22H2O）于烧杯中，再量取0.1mol/L 柠檬酸39ml于烧杯中，搅拌使其溶解。转移至1000ml容量瓶中定容，摇匀即可。 3）标准曲线的绘制 标准贮备液：称取L-赖氨酸2克左右于1000ml容量瓶中,加1mol/L盐酸1ml用水溶解，定容。 则浓度大约在0.2mg/ml. 标准曲线的绘制:分别吸取3.0,5.0,10.0,11.0,12.0,13.0和14.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中, 加水定容摇匀.在以上各容量瓶中分别吸取2.00ml于比色管中,然后在每只比色 管中再加10ml印三酮显色液,不定容,用力振摇.于沸水浴中水浴40分钟.立即冷 却至室温.同时作空白(只是不加分解液).在分光光度计上于475nm波长处,以空白 调零,测量各吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,作图. 4）、样品的测定： 称取样品1.5克左右,加1mol/L的盐酸7ml充分溶解样品，用水定容，过滤，吸 取2.00ml于100ml容量瓶中，加水定容，摇匀。其它同作标准曲线的步骤。测 出吸光度。 5）、计算：于标准曲线上查出所测样品的浓度，代入公式 X（%）= C500 / M C-为从标准曲线上查得的样品的浓度。 M-样品的质量。 500-为样品稀释的倍数和转变为百分含量的系数。（空白加样品液和空白试液。 2、苏氨酸的检测： 允许相对偏差不得超过0.3%. 项目指标一级二级含量985950比旋度-26.0-29.0-25.528.5干燥失重1.0铵盐0.040.50灼烧残渣0.30.5重金属(以铅计),20砷(以砷计)2 1）试剂和溶液：L-苏氨酸标准品:生化试剂BR, 硅胶GF254薄层层析板.若发现受潮,需要80度烘干30分钟,恢复活性后使用. 展开剂:正丁醇:醋酸:水=6.17:2.86:1(体积比) 显色剂:0.5%茚三酮丙酮溶液. 2） 鉴别步骤：取适量样品与L-苏氨酸标准品,用蒸馏水分别制成浓度30毫克每毫升的溶液,照 薄层色谱法试验.取上述两种溶液0.5毫升分别点样于同一硅胶薄层板上,将点好的 样的薄层板放入层析缸的展开剂中展开,展开后于70度烘干.以0.5%茚三酮显色剂 喷雾,70度烘干显色.供试品与L-苏氨酸标准品均显紫红色,两者主斑点位置相同,则 判定本品为L-苏氨酸 3）试剂： 盐酸：； 冰乙酸：（v/v）溶液； 硫化钠：克硫化钠溶于ml水中，临用时新配制； 铅标准溶液：ml 比旋度：称取干燥试样3g，用水溶解，转移至50ml容量瓶，加水定容，摇匀过滤， 测定，预热旋光仪后，用蒸馏水调零，润洗至少2遍。苏氨酸为右旋用“-” 4）含量：试样先在105度干燥至恒重，称取样品0.2克,置于250ml的三角瓶中,加3ml甲酸和 50ml冰乙酸使之溶解，5ml乙酸汞，10滴-奈酚苯基甲醇指示剂,用0.1mol/L的高氯 酸标液滴定至橙黄黄绿色为终点，并做空白试验校正. 若滴定样品时与标定高氯酸滴定液时的温度差在10度,则应重新标定,若未超过10度, 则可根据下式将高氯酸滴定浓度加以校正。 5）结果计算: C1= C0/ 1+0.0011(t1-t0) 样品中L-苏氨酸的含量按式计算: X%= 0.1191C1(V1-V0)100 m% 6）