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地衣芽孢杆菌的研究进展应用生物科学一班,卜亚平,01142102 摘要:地衣芽孢杆菌在作用机理,饲料中应用,医药研究,环境污染防治研究,病虫害防治研究方面做一综述。关键词:地衣芽孢杆菌,作用机理,饲料,医药,环境污染,病虫害防治。 地衣芽孢杆菌为中生芽孢的革兰氏阳性需氧菌, 是芽孢杆菌中目前较具有应用潜力的菌种之一,具有调节动物微生态平衡,促进肠道有益菌生长,降低病原菌的数量,增加动物机体的抗病力,提高机体的免疫功能。在自然界分布非常广泛, 生理特性丰富多样 , 是土壤和植物微生态优势种群之一。它可产生多种抗生素, 包括脂肽类、肽类、磷脂类、多烯类、氨基酸类、核酸类物质, 对多种动、植物及人类病原菌起到很好的抑制作用。而且芽孢杆菌还具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性 1 。因此, 芽孢杆菌被广泛应用于医药、农药、食品、饲料加工、环境污染治理等各个行业。本文就地衣芽孢杆菌在作用机理,饲料中应用,医药研究,环境污染防治研究,病虫害防治研究方面做一综述。地衣芽孢杆菌( Bacillus licheniformis) 是芽孢杆菌中较具应用潜力的菌种之一。近年来, 国内外对于地衣芽孢杆菌各方面应用的报道日益增多。在医药、饲料加工、农药等行业 , 取得了较好的研究成果。根据文献显示, 关于地衣芽孢杆菌的专利有: 用地衣芽孢杆菌生产生物农药的方法; 地衣芽孢杆菌新菌株及其微生态制剂; 地衣芽孢杆菌 T1 菌株的术, 改变地衣芽孢杆菌 NCIB8061 a- 淀粉酶的耐温性和耐酸性酶的性质等。1地衣芽孢杆菌的生物学特性 地衣芽孢杆菌是兼性厌氧菌,属于益生菌。细胞形态排列呈杆状,单生,细胞内无聚PHB颗粒芽孢形态,产生近中生的椭圆形芽孢,孢囊稍膨大;在肉质培养基上菌落为扁平,边缘不整齐,白色,表面皱褶,24小时后菌落直径3mm,推荐精选适生长温度大约为 50但也能在更高的温度下存活。 酶分泌的最适温度为37。 可能以孢子形式存在, 从而抵抗恶劣的环境;在良好环境下,则可以生长态存在。 地衣芽孢杆菌是我国农业部 2003 年 3l8 号公告批准使用的饲料级菌株之一。 与传统的益生菌、双歧杆菌和乳酸菌相比, 地衣芽孢杆菌的活菌成分是芽孢休眠体,并具有耐高温、耐干燥、耐酸性、耐胆盐和人工胃液等特点 23,不能定植于动物消化道2地衣芽孢杆菌的作用机理2.1拮抗有害微生物生物 氧 地衣芽孢杆菌为需氧菌,在生长菌过程中消耗大量的氧气, 使得肠道内氧气浓度降低,为肠道内的生理性厌氧菌,如双歧杆菌、乳酸杆菌、消化链球菌、类杆菌等菌的生长繁殖创造有利条件。 同时使得需氧的有害病原菌 (如大肠杆菌) 的生长由于缺氧受到抑制。 通过支持生理性厌氧菌的增殖,抑制致病菌的生长,使菌群失调得以调整,使肠道功能得以恢复,最终使胃肠道的微生态体系处在健康平衡的状态, 动物的免疫力得到提高 45。生物拮抗 体外试验表明,地农芽孢杆菌对葡萄球菌、白色念珠菌有很强的拮抗作用。地衣芽孢杆菌在生长代谢过程能产生多种抗菌物质,如短杆菌肽、枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素和头孢菌素 C 等。 因此,其对常见的致病性大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均有较强的抑制作用。2.2产生多种酶,调节动物营养代谢在生长过程中,可分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等多种有助于消化吸收的酶类,此外,在降低和消除抗营养因子上也发挥了重要作用。 地衣芽孢杆菌DSM13 含有高度保守的蛋白分泌系统,没有聚酮体合成体系,但能形成脂肽性地衣素。已经确定的胞外酶有淀粉酶、-半乳糖苷酶、纤维素酶、几丁质酶、果聚糖酶、麦芽糖淀粉酶、多聚糖降解酶、碱性蛋白酶、锌蛋白酶等。 目前,已经从地衣芽孢杆不同菌株中克隆出的有关重要酶编码基因有:青霉素酶、-淀粉酶 、果胶裂解酶、多酚氧化酶、-谷氨酰转肽酶、-1,3-1,4-葡聚糖酶、蛋白酶、纤维素酶、-半乳糖苷酶 、 碱性磷酸酶等编码基因67。 这些酶具有降解饲料中复杂碳水化合物,如果胶、葡聚糖、纤维素等。推荐精选地衣芽孢杆菌在一定条件下能产生抗逆性内生孢子,可以产生脂肽类、肽类、磷脂类、多烯类和氨基酸类等多种抗生素, 对多种病原菌起到很好的抑制作用。 地衣芽孢杆菌同时能产生多种营养物质,如维生素、氨基酸、有机酸、促生长因子等,参与动物机体新陈代谢, 为机体提供营养物质82.3提高机体免疫功能 地衣芽孢杆菌生长条件要求低,繁殖快,能迅速定植在肠黏膜上,在短时间内成为肠道的优势菌群。 能调节动物肠道菌群平衡,改善肠道微生态环境,促进动物生长、减少动物肠道疾病的发生,提高动物机体的抗病力;同时其还具有免疫抑制、 竞争性吸附及合成抑菌物质等多方面的作用。 地衣芽孢杆菌能刺激动物免疫器官的生长发育,激活淋巴细胞,提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高机体免疫力9。 有试验发现,仔兔饲喂地衣芽孢杆菌 20 d 及 40 d 后, 其免疫器官生长发育较对照组迅速,成熟快,并且胸腺、脾脏重量等显著提高10,11。 刘克琳12和李福彬13用地衣芽孢杆菌制剂饲喂肉鸡,结果肉鸡中枢免疫器官生长迅速,成熟快,免疫器官内组织细胞发育正常和免疫功能的成熟程度高,血中T淋巴细胞值亦较对照组高。地衣芽孢杆菌的免疫促进作用的机理是:口服芽孢杆菌后,其作用于肠道集合,作用于肠道集合淋巴结的抗原结合位点或通过调整动物的微生物菌群,尤其是增加双歧杆菌菌群数量,从而间接地发挥免疫赋活的作用, 提高机体的局部或整体防御功能,从而达到抗应激、防病和抗病的作用。2.4促进动物器官生理机能成熟并改善动物生理状态研究表明,地衣芽孢杆菌具有促进动物道结构和机能成熟的作用。陈家祥等和李福彬报道14,15,在鸡肉饲料添加不同水平的地衣芽孢杆菌后,发现长绒毛高度增高,隐藏深度降低,肠粘膜厚度增加,说明地衣芽孢杆菌有保护肠粘膜,促进绒毛生长和改善肠道结构的作用。符运勤研究后发现后背牛日粮中添加地衣芽孢杆菌及复合菌,可以改变瘤胃内环境参数,增加后备牛瘤胃优势菌群的种类,促进瘤胃纤维分解菌的定植和生长16。以上研究的发现,为阐明地衣芽孢杆菌促进幼龄动物生长,提高增重和饲料利用率提供生理学理论依据。推荐精选2.5改善环境地衣芽孢杆菌可通过抑制革兰氏阴性菌的生长繁殖,降低革兰氏阴性菌所产生的脲酶活性,从而降低脲酶对粪便中含氮物质的分解,导致氨气产生量减少,提高含氮物质的消化吸收率,降低粪氮含量,抑制大肠杆菌的活动,扭转蛋白质转化为胺和氨,使粪便和尿液中氨的浓度下降,发挥除臭功能。张西雷(2010)通过实验验证了地衣芽孢杆菌能有效降低鸡的氨气排放,净化禽兽舍内空气。刘朝阳(2007)研究发现地衣芽孢杆菌可降解水体中的有机碎屑,减少氨氮,亚硝酸盐,硫化氢等有毒有害物质,起到优化养殖环境,促进水环境生态良性循环等功能。17曹煜成(2005)结果表明,施用地衣芽孢杆菌De株可在一定程度上使水体环境和养殖生产性能得到优化,提高养殖草鱼的成活率,显著降低水体透明度及水中氨氮,硝酸盐含量,使水体PH,溶解氧有利于草鱼的生长18。3地衣芽孢杆菌在饲料中的应用根据我国农业部公布的结果, 允许饲用的芽孢杆菌菌种有枯草芽孢杆菌 ( Bacillus subtilis) 、纳豆芽孢杆菌 ( Bacillus natto) 、蜡样芽孢杆菌( Bacilluscereus) 、凝结芽孢杆菌( Bacillus coagulans) 、缓慢芽孢杆菌 ( Bacillus lentus) 、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌( Bacillus pumilus) 等 12 种。3.1芽孢杆菌在饲料中使用的必要性芽孢杆菌能调节饲养动物肠道菌群平衡,改善胃肠道微生态环境,有效维持畜禽健康状态,提高其免疫力、抗病能力和抗应激能力; 提高饲料消化率,促进饲料养分吸收和利用,缓解饲料原料短缺与日益增长的饲料产量的矛盾,降低养殖成本,提高经济效益; 有效避免抗生素和重金属滥用导致的各种养殖问题 促进养殖业健康发展 。地衣芽孢杆菌属于芽孢杆菌属,属好氧有益菌,以内生孢子形式存在,其典型特点是抗逆性强、耐酸、耐盐及耐高温,但产酸性能差。因此试验项目将筛选到的高产酸性能地衣芽孢杆菌株为对象,进行高效发酵工艺、组合配套及应用技术等研究,高产酸性能地衣芽孢杆菌应用在畜牧养殖业中,不仅能解决乳酸菌抗逆性差的问题,还能弥补一般芽孢杆菌不产酸的缺点。枯草芽孢杆菌具有高产蛋白酶特性,产生的蛋白酶具有良好的抗逆性,广泛的 pH 条件下具有高酶活表现的特性。随着饲料工业的快速发展,饲料原料的短缺特别是蛋白资源的短缺已经成为困扰饲料厂的重要问题,蛋白饲料原料价格快速上升,影响到饲料工业的平稳高效发展。我国每年被迫进口大量大豆以满足饲料豆粕需求,影响到我国农民种粮积极性。高产蛋白酶枯草芽孢杆菌在饲料中的应用,可提高饲料中粗蛋白在动物肠道中的消化和吸收,提高蛋白资源的吸收和利用,提高饲料营养价值,缓解蛋白原料短缺,维护我国农业健康大力发展生物技术,我国将生物技术安全发展作为国家新兴发展战略产业,推动生物技术领域的全面发展。依据我国国家政策的支持和发展重心,研究低成本高效微生态饲料添加剂具有时代特征,符合国家产业发展方向和当前畜牧业发展需求,具有未来发展和应用前途的潜力。我国饲用微生态制剂的需求迅速增长,呈现出广阔的市场发展前景,饲料工业和畜牧养殖业对微生态制剂的需求呈爆发式增长,2012 年,中国微生态制剂销量约为 15 万t,市场规模 39 40 亿元; 至 2015 年,中国微生态制剂需求量增至 20 万 t,市场规模 53 55 亿元,市场前景非常广阔,潜力巨大推荐精选44。3.2研究现状与发展趋势地衣芽孢杆菌是中华人民共和国农业部公告第1126 号公布 饲料添加剂品种目录( 2008) 批准使用的饲料级菌株之一。地衣芽孢杆菌属于能产生芽孢的兼性厌氧微生物。菌体繁殖速度快及抗逆性强,能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及多种氨基酸。地衣芽孢杆菌治疗下痢和腹泻的效果很好,是制造微生态制剂的理想菌株。地衣芽孢杆菌可通过促进肠道优势菌群的生长进一步提高营养物质的消化和吸收,具有明显促生长作用和降低料重比的功能,作为医药的研究较为成熟,已经形成较完整的生产工艺,且其医药商品整肠生的应用也较成熟。枯草芽孢杆菌在制剂中以内生孢子形式存在,孢子进入动物肠道后,在肠道上部能迅速复活并分泌活性很强的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶,有助于植物性饲料中某些复杂的糖类降解,产生具有颉颃肠道致病菌的多类物质,同时通过生物夺氧消耗肠道内的氧气形成厌氧环境,有利于持肠道生态平衡45。3.3作用机制芽孢杆菌在制剂中以内生孢子形式存在。推荐精选孢子进入动物肠道后, 在肠道上部能迅速复活并分泌活性很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶, 有助于降解植物性饲料中某些复杂的碳水化合物, 产生具有拮抗肠道致病菌的多种物质; 同时通过生物夺氧消耗肠道内的氧气造成厌氧环境, 肠道原籍优势菌大多属厌氧菌 , 而有害菌和外来菌多为需氧菌 , 从而有利于维持肠道生态平衡19 。3.4 国内外研究动态目前国内外研究表明, 地衣芽孢杆菌有很强的生命活力、具备产生各种酶的能力, 而且有耐高温、耐酸碱、耐挤压等特性, 饲料加工过程对其损失小。进入 21 世纪以来,关于地衣芽孢杆菌在饲料工业上的应用研究较多。3.4.1 在养禽业中的应用 牛天贵通过试验发现, 芽孢杆菌的发酵上清液能降低蛋黄中的胆固醇含量, 且胆固醇发酵液添加量的增加而减少。卜祥斌等 20 通过在肉鸡日粮中添加沸石粉、低聚木糖和地衣芽孢杆菌试验 ,发现此配方能提高肉鸡生产性能, 且效果优于沸石粉、低聚木糖单独添加或二者联合添加。地衣芽孢杆菌有望成为鸡饲料的良好添加剂。3.4.2在养牛业中的应用周振峰21 报道, 在奶牛饲料中添加地衣芽孢杆菌制剂能增强奶牛抵抗热应激的能力, 可起到防病、抗病的作用。其机理是由于口服芽孢杆菌后, 其作用于肠道集合淋巴结的抗原结合位点 , 或通过调整动物的微生物群 ( 尤其是增加双歧杆菌菌群数量) , 从而间接地发挥免疫赋活的作用, 提高机体的局部或全部防御功能。3.4.3 应用于鱼饲料 Rengpipat、刘克琳、刘小刚研究发现, 在鱼饲料中添加芽孢杆菌 , 可提高鱼体消化酶活性与抗病力, 促进生长。刘波等 22 通过在异育银鲫饲料中添加地衣芽孢杆菌进行试验, 结果表明, 可促进鱼体生长。刘文斌等23 通过将地衣芽孢杆菌分别与低聚木糖、复合酶制剂适量混合后加入异育银鲫饲料中, 不仅可以提高饲料的利用率,促进肠道有益微生物的生长和抑制有害微生物, 并且能提高肝胰脏蛋白酶 mRNA 表达量和肠道酶活性。还有报道指出, 地衣芽孢杆菌能分泌高活性的胞外酶系, 可将水体中的有机残余物迅速降解为无机物, 有效地促进养殖水体的生态良性循环 24 。因此, 将地衣芽孢杆菌作为鱼饲料添加剂 , 不仅可以促进鱼体生长, 而且益于养殖水体的保护。推荐精选4. 地衣芽孢杆菌应用于医药研究据报道, 目前登记的地衣芽孢杆菌医药商品名为整肠生, 是以地衣芽孢杆菌无毒菌株 BL2 活体菌株制成的胶囊, 主要用于治疗一些肠道疾病。4.1 作用机制与传统的化学药物、抗生素、中药相比较, 其作用机制完全不同。整肠生主要是通过以菌治菌的方法 25 , 地衣芽孢杆菌口服以后以活菌形式进入肠道内 , 在生长代谢中能产生多种抗菌活性物质 , 如短杆菌肽、枯草杆菌素、制霉菌素和头孢菌素 C 等, 可抑制肠道中的致病菌。而其是兼性厌氧菌, 具有生物夺氧的作用, 可促进益生菌生长而使肠道中微生态环境达到平衡, 使腹泻等症状缓解或消失。地衣芽孢杆菌尚有促进巨嗜细胞非特异性吞噬作用 , 由于该菌不是肠道固有细菌 ,不会在肠道中长期定植, 一般在停药后 10 d 即全部排出体外, 仅起治疗作用而不会造成远期不良反应。4.2 临床试验4.2.1无锡市东亭医院, 在 2000 年 5 月至 2003 年 8月对整肠生胶囊进行临床试验, 应用整肠生治疗顽固性腹泻 38 例, 经过观察病例在服用中未发现有任何不良反应26 。证实了整肠生胶囊的安全可靠性。此外, 为了满足不便服用胶囊的患者而研制开发了地衣芽孢杆菌颗粒剂, 是以地衣芽孢杆菌活菌为主药, 乳糖、甘露醇等为辅料的微生态制剂。在北京协和医院、中国医科大学附属第二医院和沈阳医学院附属中心医院进行临床验证, 地衣芽孢杆菌颗粒剂治疗急性感染性腹泻、急性细菌性痢疾非常有效而且安全。4.2.2选择 2013 年 12 月 -2015 年 1 月在笔者所在医院就诊的患有肠功能紊乱的患者 68 例,将其随机分为两组,观察组和对照组,各 34 例。对照组患者应用复方谷氨酰胺治疗,观察组患者在复方谷氨酰胺治疗的基础上联合地衣芽孢杆菌进行治疗,治疗 6 周后,观察比较两组患者的疗效。结果:经过 6 周的治疗,观察组的总有效率为 94.12%,对照组患者的总有效率为 52.95%,前者高于后者,差异有统计学意义 (P0.05)。观察组患者在治疗期间有 1 例 (2.94%) 患者出现腹泻情况,后缓解。对照组在治疗过程中有 5 例 (14.70%) 患者出现恶心、呕吐等不良反应,后缓解。不良反应发生率比较,观察组低于对照组,差异有统计学意义 (P0.05)。结论:采用地衣芽孢杆菌联合复方谷氨酰胺治疗肠功能紊乱临床效果明显,明显优于单纯使用复方谷氨酰胺,可将其广泛地推广至临床治疗中40。推荐精选4.2.3探讨地衣芽孢杆菌联合肠宁舒颗粒治疗肠易激综合征的临床疗效选择 2015 年 1 月至 2016 年 1 月收治的腹泻型肠易激综合征患者 160 例,采用数字表法随机分为联合治疗组( A 组) 与地衣芽孢杆菌治疗组( B 组) 。证明地衣芽孢杆菌联合肠宁舒颗粒治疗肠易激综合征的临床疗效显著,值得临床上应用与推广414.2.4,在结肠内乳果糖能使微生态系统中的有益菌数量增加,从而促进宿主与结肠微生物区的共生效应而地衣芽孢菌活菌胶囊作为肠道益生菌亦有良好的协同作用。研究运用乳果糖联合地衣芽孢菌活菌胶囊治疗老年功能性便秘在近期、远期的有效率及便次、便性的改善方面均优于单用其中一种对照组,提示联合用药治疗老年功能性便秘疗效肯定,安全性较高,是一种较好的治疗方案,值得临床推广42。4.3 新型药剂的研究翟少华将双歧杆菌和地衣芽孢杆菌的肠生态制剂, 联合应用于患有荷 H22 腹水癌小鼠, 进行了一系列的试验27 。在研究中发现, 对荷 H 腹水癌小鼠22进行化疗后, 此种联合的肠生态制剂与化疗药物同时使用, 不仅对 H22 腹水癌细胞具有杀伤和促进凋亡作用, 并可延长荷瘤小鼠生存天数 , 提高化疗的效果。由此证实了双歧杆菌和地衣芽孢杆菌的肠生态制剂的协同作用, 并为将来的临床试验奠定了基础。5 地衣芽孢杆菌应用于环境污染防治研究5.1 降解拟除虫菊酯类农药残留丁海涛等 28 在拟除虫菊酯类农药残留降解菌筛选试验中, 筛选出地衣芽孢杆菌 qw5 所产生的特异性酶可与氰戊菊酯羧酸酯键断裂的相应产物发生作用, 加速其分解。田间试验结果表明, qw5 菌对于田间拟除虫菊酯残留 , 5 d 内的去除率可达 90%以上, 效果好于实验室摇瓶培养降解拟除虫菊酯的效果。其原因可能是田间试验条件下降解菌与土著微生物的协同作用, 有助于降解菌更有效地降解农药残留, 直到最后矿化。推荐精选5.2 对于重金属的吸附周鸣【29】 研究采用地衣芽孢杆菌死菌体吸附水中的 Cr6+, 其研究结果与报道的同类研究相较。地衣芽孢杆菌死菌体对 Cr6+具有更好的吸附效果, 在优化条件下, 即温度为 50, 摇床转速 140 rmin- 1, 溶液 pH 值 2.5, 吸附时间 2 h, 菌体浓度 1 gL- 1, Cr6+ 起始浓度 300 mgL- 1, 菌体对 Cr6+ 有最大吸附量 60.5 mgg- 1。胡洪波等30 报道了利用微生物吸附回收金、银、铂、铅等贵金属研究结果。地衣芽孢杆菌R08 死菌体吸附 Pd2+,吸附量可以达到每克菌体吸附 224.8mg Pd2+。6 地衣芽孢杆菌应用于植物病害防治研究地衣芽孢杆菌能产生多种抗菌物质, 对一些植物病原菌有较好的抑制作用。因此, 将其抗菌物质开发为生物农药, 成为研究的热点。从 20 世纪 80年代开始, 将地衣芽孢杆菌应用于植物病害防治的研究已经起步。目前, 登记的地衣芽孢杆菌农药制剂为地衣芽孢杆菌水剂, 每毫升含 80 亿个活芽孢,由广西金燕子农药有限公司生产 , 用于防治黄瓜( 保护地) 霜霉病。但是总的来看, 发展比较慢。分析原因可能是: 提取抗菌物质及其组分鉴定较困难由于生物农药本身的特性所致 , 在进行大田试验时, 防效受多种因素的影响而波动较大。母乳性黄疸是新生儿黄疸常见病因之一,目前发病率逐年提高。田杰等在2012年1月至2015年 4 月在北京师范大学一元儿科门诊治疗的患儿应用整肠生 (地衣芽孢杆菌活菌胶囊)加茵栀黄颗粒治疗母乳性黄疸,取得较满意疗效43。6.1抗菌物质的作用机制衣芽孢杆菌所产生的抗菌物质主要是一些蛋白类抗菌物质( 几丁质酶、抗菌蛋白、多肽类)31 国外还有报道指出, 地衣芽孢杆菌可产生苯乙酸一类的抗菌物质32。抗菌物质抑制植物病原菌的途径有: 作用于病原菌的细胞壁、细胞膜; 与膜相关的受体蛋白相互作用 ; 作用于能量代谢系统 ; 提高植物的抗病力。6.2国内外研究动态推荐精选目前, 国内外关于地衣芽孢杆菌应用于植物病害防治的报道比较多。综合大量文献可知, 地衣芽孢杆菌对植物的真菌性病害有较好的抑制效果。如烟草黑胫病、番茄灰霉病、棉花枯萎和黄萎病等。6.2.1 防治烟草黑胫病 方敦煌等33 从 1998 年开始了筛选利用土壤拮抗细菌防治烟草黑胫病的研究。最后分离出对黑胫病菌有较好抑制效果的地衣芽孢杆菌 GP13, 并对该菌进行了生物测定和田间小区试验。通过两年的大田试验示范表明, 地衣芽孢杆菌 GP13 的效果较好, 防效稳定保持在 50%60%。但是, 在使用 GP13 防治烟草黑胫病示范推广过程中发现 , GP13 的防治效果在地区间的差异较大。这可能是生物农药普遍存在的不稳定性所致。该研究指出, 要进一步示范推广 GP13, 有必要开展一些应用基础方面的研究。如了解 GP13 在烟草根际的定殖及定殖影响因子, 增强定殖、存活能力; 同时改进 GP13 发酵条件, 提高效价, 延长作用时限,进一步提高防治效果。6.2.2 防治番茄灰霉病 童蕴慧等34 首次报道, 地衣芽孢杆菌 W10 能诱导番茄植株对灰霉病的系统抗性, 这种诱导抗性可以持续 12 d 以上。且 W10 培养液去菌后仍有较强的诱抗作用, 说明 W10 分泌的某些物质或一些次生代谢物具有诱导抗性的活性。但是, 这类物质还有待进一步鉴定。唐丽娟等报道,地衣芽孢杆菌 W10 在番茄叶面的定殖能力很强, 与灰霉病菌发生营养和空间竞争, 对灰霉病菌有较好的抑制作用。而且 , 在研究中发现 , 地衣芽孢杆菌 W10 所产生的抗菌蛋白对灰葡萄孢也有较强的抑制作用。6.2.3防治棉花枯萎、黄萎病齐东梅等35报道, 通过对棉花枯萎、黄萎病菌拮抗细菌的筛选 , 分离出几株对此病菌有较强抑制作用的芽孢杆菌。经鉴定, 其中之一为地衣芽孢杆菌 , 它产生的抗菌蛋白对棉花枯萎、黄萎病原菌有较明显的抑制作用。但是 , 抗菌蛋白的组成还不清楚 , 且对于此两种棉花病害的防治还没有进行田间药效试验, 都尚需进一步研究。6.2.4防治水稻稻瘟病 彭化贤等36 从水稻作物根际分离筛选得到 1 株地衣芽孢杆菌, 其对稻瘟病病菌具有较强的抑制能力, 经测定该菌的拮抗性, 发现较稳定; 通过连续两年的田间防病效果测试, 防效一直在 50%以上。因此, 该菌作为生防菌是很有希望的。但是有关菌株在水稻上的定殖、作用机制和菌株特性需做进一步的研究。推荐精选6.2.5防治辣椒病害 SID A 等37从不同区域采集的辣椒植株根际中分离得到 500 株细菌。经过生物活性测定, 发现有 10 个菌株对辣椒根腐病和辣椒叶斑病均表现较强的抑制作用, 其中 HS93、LS234、LS674、LS523 4 个菌株的抑制率可达到 50%80%。经鉴定 4 个菌株均为地衣芽孢杆菌。通过盆栽试验发现, 用这 4 个菌株的菌悬液浸泡辣椒种子 , 可降低根腐病和叶斑病的发病率, 提高辣椒幼苗的成活率。Sid Ahmed 等 38通过试验发现 , 地衣芽孢杆菌可增强角素( Sigma) 抑制辣椒根腐病的活性。由此表明, 地衣芽孢杆菌对某些药剂具有一定增效作用,但是具体起增效作用的物质及其机理还有待进一步研究。6.2.6防治采后水果病害 纪兆林等39 报道了地衣芽孢杆菌 W10 对苹果轮纹病菌、柑橘炭疽病菌和青霉病菌具有明显的抑制作用。通过果实离体试验, 该菌株明显地推迟果实腐烂, 降低果腐率, 抑制病斑扩展。因此它在采后水果病害的防治上具有较大的应用潜力。他们还发现, 该菌移接时间与其对病菌的抑制效果关系密切, 提前移接对病菌的抑制率明显高于两者同时移接以及延后移接。这可能是存在营养和空间竞争的原因。参考文献 1 蒙显英, 黎起秦 , 冯家勋 , 等.芽孢杆菌产生的抗菌物质的研究进展 J .中国植保导刊, 2004, 12: 13- 15. 2董尚智,等。饲用地衣芽孢杆菌的生物学特性研究 J饲料研究,2009,7:1418 3全艳玲,地衣芽孢杆菌的生物学特性研究 J。食品科学,2002,23(8):6769 4唐娟, 毅,李雷雷,等.地衣芽 杆菌 用研究 展J.湖北 科学,2008,47(3):351 354.5 Verschuere L,Rombaut G,Sorgeloos P.Probiotic Bacteria as Biological Control Agents in Aquaculture JMicrobiol Mol Biol Rev,2000,64(4):4655 4671.推荐精选6牛丹丹,石阳,王正祥.分泌高效蛋白的地衣芽杆菌及其工用J.生物技 通 .2009,6:45 50.7 Veith B,Herzberg C,Steckel S,et al.The Complete Genome Sequence of Bacillus licheniformis DSM13,an Organism with Great Industrial Potential J.J Mol Microbiol Biotechnol,2004,7(4):204 211.8 Kim Y,Cho J Y,Ku K J H,et alIdentification and Antimicrobial Activi-ty of Phenylacetic Acid Produced by Bacillus licheniformis Isolated from Fer-mented Soybean,Chungkook-JangJ.Current Microbiology,2004,48(4):3129 Duc L H,Hong H A ,Barbosa T M,et alCharacterization of Bacillus Probiotics Available for Human UseJ.Appl Environ Microbiol,2004,70(4):2161 2171.10潘康成,何明洁.地衣芽 杆菌 家兔体液免疫功能的影晌研究J.中国微生 学 志,1998,10(4):204 206.11潘康成,博 用芽 菌作用机理的研究 展 J. 料工 ,1997,18(9):32 3412刘克琳,何明清,余成瑶等,鸡微生物饲料添加剂对肉鸡免疫功能影响的研究J.四川农业大学学报,1994,12s.60661213李福彬, 宝江,梁 冲,等.地 芽 杆菌 蛋 生 性能、蛋品 及血清相关指 的影响J.中国 料,2010,13:5 8.14李福彬,地衣芽孢杆菌的理化特性及蛋鸡生产性能影响及机理的研究D。河北农业大学硕士论文,201015陈家祥,张仁义,王全溪,等,地衣芽孢杆菌对麻羽肉鸡肠道组织结构及盲肠微生物区系的影响J。动物营养学报,2010,22(3);75776116符运勤,地衣芽孢杆菌及复合菌后备牛生长性能和瘤胃内环境的影响J。四川农业大学学报,1994,12(s);549,55055317贺永明。地衣芽孢杆菌在肉鸡模拟消化环境中的活力,代谢物及对有害菌抑制的研究D。山西农业大学硕士论文,2004.推荐精选18曹煜成,李卓佳,冯娟,等,地衣芽孢杆菌胞外产物消化活性的研究J。热带海洋学报,2005,24(6);712 19蔡雁 , 郝勃 ,喻子牛.抗动物病原菌芽孢杆菌的筛选、初步鉴定和抗菌活性 J .微生物学杂志, 2005, 25( 5) : 19- 22.20卜祥斌, 陈洁 , 刘红艳 , 等.沸石粉、寡糖及益生素在黄鸡饲料中的应用效果研究 J .家畜生态学报, 2006, 27( 1) : 37- 40. 21周振峰.地衣芽孢杆菌对奶牛泌乳性能的影响 J .中国奶牛 ,2006( 5) : 13- 14.22刘波 , 刘文斌 , 王恬.地衣芽孢杆菌在异育银鲫日粮中的应用 J .湛江海洋大学学报, 2005, 25( 6) : 31- 35.23 刘文斌, 尹 君, 方星星, 等.3 种益生素配伍对异育银鲫生长、消化及肠道菌群组成的影响 J . 海洋与湖沼, 2007, 38( 1) :29- 35. 24 曹煜成, 李卓佳, 冯 娟, 等.地衣芽孢杆菌胞外产物消化活性的研究 J .热带海洋学报, 2005, 24( 6) : 6- 11.25 郭贵海, 王崇文. 肠道菌群调节剂的研究进展 J .临床内科杂志, 2002, 19( 2) : 88- 90. 26袁锦平.整肠生治疗慢性顽固性腹泻 38 例 J .现代医药卫生,2005, 21( 2) : 195. 27翟少华.肠生态制剂诱导 H22 细胞凋亡的实验研究 J .徐州医学院学报, 2005, 25( 4) : 292- 294. 28丁海涛, 李顺鹏, 沈标, 等.拟除虫菊酯类农药残留降解菌的筛选及其生理特性研究 J .土壤学报, 2003, 40( 1) : 123- 129. 29周 鸣, 刘云国, 李 欣, 等.地衣芽孢杆菌对 Cr6+的吸附动力学研究 J .应用与环境生物学报, 2006, 12( 1) : 84- 87. 30胡洪波, 梁 洁, 刘月英, 等.微生物吸附贵金属的研究与应用 J .微生物学通报, 2002, 29( 3) : 94- 97.31 唐丽娟, 纪兆林, 徐敬友, 等.地衣芽孢杆菌 W10 对灰葡萄孢的抑制作用及其抗菌物质 J .中国生物防治 , 2005, 21( 3) : 203-205.推荐精选 32 YOON KIM, JEONG - YONG CHO, JU - HEE KUK, et al. 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