六大养分实验操作

418 室资料 更新时间： 2013/10/25饲料中含有六大养分测定试验操作饲料分析及饲料质量检测技术（杨胜编）饲料中含有六大养分组分成分水分水分（可能存在挥发性的酸和碱）粗灰分Ash必需有 ：大量兀素:K, Mg, Na,S,Ca,P,Cl1微:Fe,Mn,Co,I,Zn,Mo,Se,F,Br,Ba非必需自：Si,Cr,Ni,Ti,Al,V,B,Ph,Sn粗蛋白质CP蛋白质f氨基酸工非蛋白氮：胺类、含氮糖甘、糖脂、B族维生素粗脂肪EE（乙醛浸出物）脂肪、油类、蜡有机酸、色素、管（zai 一声）醇维生素A、DX E、K粗纤维（CF）纤维素、半纤维素、木质素无氮浸出物（NEH淀粉、糖、果聚糖、半纤维素、果胶、木质素、有机酸、树脂、单宁、 色素、水溶性维生素注：碳水化合物主要包括粗纤维和无氮浸出物7.41%8.46%一、水分饲料中的水分存在三种形式：游离水、吸附水（吸附在蛋白质、淀粉及细胞膜上的水）、 结合水（与糖和盐类结合的水） 风干样本：是指饲料原料样本中不含有游离水，仅含有一般吸附于饲料蛋白质、淀粉等的吸附水，而且吸附水的含量在15%A下的样本。例如：籽实、糠款、油饼、甘草、秸秆、孚L粉、血粉、肉骨粉等等。新鲜样本：含有大量的游离水和少量的吸附水，两者的含水量约占样本重的70唳90%这类饲料包括青饲料、多汁饲料（水生饲料）、青贮饲料等。初水分：是指新鲜样本在6065c的恒温干燥箱中烘干812h,除去部分水分，然后回潮,使其与周围环境条件的空气湿度保持平衡，在这种条件下所失去的水分称为初水分。去掉初水分之后的样本为半干样本。初水分测定：（1）瓷盘称重：在普通天平上称取瓷盘的重量（2）称样品重：用已知重量的瓷盘在普通天平上称取新鲜样品200300g（3）灭酶：将装有新鲜样本的瓷盘放入120c烘箱中烘1015min,目的是使新鲜饲料中存在的各种酶失活，以减少饲料养分分解造成的损失。（4）烘干：将瓷盘迅速转移入 6070c烘箱中烘一定时间，直到样品干燥容易磨碎为止， 烘干时间一般为 812h,取决于样品含水量和样品数量，含水低，数量少的样品也可能只 需要56h即可烘干。（5）回潮和称重：取出瓷盘放置在室内自然条件下冷却24h,使半干样品水分与室内温度平衡，充分回潮后称重。（6）再烘干：将瓷盘再次放入 6070 c烘箱中烘2h0.5g为止，并取（7）再回潮和称重：按上述方法回潮，称重，直至两次称重之差不超过 最低值进行初水分含量的计算。初水分 =错误！未找到引用源。X100%饲料中水分的测定： 一、适用范围本方法适用于测定配合饲料和单一饲料中水分的含量，但用做饲料的奶制品、动物、植物 油脂和矿物质除外。二、测定原理样品在（105 2） C烘箱内，在一个大气压下烘干，直到恒重，逸失的重量为水分，在该 温度下干燥，不仅饲料中可吸附水被蒸发，同时一部分胶体水也被蒸发，另外还有少量挥 发油挥发。三、测定步骤1、将洁净的塔蜗在（1052） C烘箱内烘1h,取出，在干燥器中冷却30min,称重，准至0.0002g ,重复以上操作，直至两次重量之差小于0.0005g为恒重。2、用已恒重的增期称取两份平行试样，每份25g （含水量0.1g以上，样品厚度4m一下），准确至0.0002g。3、将盛有样品的塔竭，半盖塔蜗盖在（1052） C烘箱中烘3h （以温度达到105c开始计时），取出，盖好堪蜗盖，在干燥器重冷却30min称重。4、在同样烘干1h,冷去称重，直至两次称重之差小于0.0002g （取小值）。粗水分 % = m1 m2 x 100% m1 -m0m: 105 C烘干前试样及日蜗重（g） m2 ： 105 C烘干后试样及土甘蜗重（g）- 2 -418 室资料 更新时间： 2013/10/25mo：已恒重土甘蜗重（g）注：两个平行样测定值相差不得超过0.2%,否则重做精密度：含水量 10% ,允许相对偏差为1%含水量510%允许相对偏差为 3%含水量 5% ,允许相对偏差为5%相对偏差=测定值二J均值 X 100%注：用65c和105c烘的结果没多少区别，105c烘可以省略，或者取少量样品进行105c烘干；但是，105c烘干的样品不能用于测定蛋白质。二、粗灰分（Ash）饲料中粗灰分的测定：一、适用范围：本方法适用于各种混合饲料，配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中粗灰分的测定二、测定原理：试样在550c灼烧后所得残渣，用质量百分率来表示，残渣中主要是氧化物， 盐类等矿物质， 也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。三、测定步骤：1、马福炉烘烤塔竭至恒重。将干净增竭和盖一起放入高温炉（马福炉），在550 c下灼烧30min,取出在空气中冷却约 1min,放入干燥器中冷却 30min,称重，再重复灼烧，冷却称 重，直至2次重量之差小于 0.0005为恒重。2、在已恒重的堪期中称取25g （灰分质量在 0.05g以上）试样，准确至 0.0002g ,在电炉上小心炭化。在炭化过程中，应将试样在较低温度状态下加热灼烧至无烟，然后升温灼烧至样品基本无炭粒（需 30min）,炭化过程应半盖日蜗盖。3、炭化后将增竭移入高温炉中， 半盖塔蜗盖，于550c下灼烧3h （升温至550c开始计时）， 冷却至200c以下，取出，在空气中冷却 1min,放入干燥器中，半盖塔期盖，冷却 30min , 称重。4、再同样灼烧1h,冷却，称重，直至两次质量之差小于0.001g为恒重。（这步可以不做）CA % = m2 m0 x 100 % m1 mm：堪蜗家试样重（g）m：灰化后堪竭家灰分重（g）允许误差：粗灰分含量 5%允许相偏差为1%粗灰分含量25%&许相对偏差为 1%CP% 1025% 允许相偏差为 2%CP%10%允许相对偏差为 3%用无水碳酸钠标定 0.05N盐酸的方法：1、试剂澳钾酚绿-甲基红混匀指示剂2、配制量取4.2mL浓HCl,加适量蒸储水并稀释至1000mL3、标定准确称取0.0130.015g基准无水碳酸钠，加50mL水使之溶解，加 2滴澳钾酚绿-甲基红混匀指示剂，用本溶液滴定至溶液由绿色转变成紫红色，同时做试剂空白试验。空白试验是指用 NaOH商定配无水碳酸钠的蒸储水，通常不做，用量 5 视为0即可。4、计算0.053 父（V1 -V2）c： HCl滴定溶液的实际浓度，单位为摩尔每升（ mol/L ）m 基准无水碳酸钠的质量，单位为克（g）V: HCl标准溶液用量，单位为（mDV：空白试样中NaOHfe准溶液用量，单位为（mL）;通常不做，视为 0即可0.053:与1.00mL HCl标准溶液相当的基准无水碳酸钠的质量，单位为克（ g）- 7 -418 室资料 更新时间： 2013/10/25四、粗脂肪饲料中脂肪的测定，通常是将试样放在特制的一起中，用脂溶性溶剂（乙醍、石油醍、氯 仿等）反复抽提，可把脂肪抽提出来。浸提出的物质除脂肪外，还有一部分类脂物质也被 浸提出来，如游离脂肪酸、磷脂、蜡、色素以及脂溶性维生素等，所以称为粗脂肪。饲料中粗脂肪的测定（鲁氏残余法）1、 适用范围 本方法适用于各种混合饲料和单一饲料。2、 测定原理索式脂肪提取器中用乙醛提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶 性维生素等、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醛提取物。3、 试剂 无水乙醛：分析纯四、测定步骤1、用硫酸纸称取试样 15g （一般称量1g;如果用做完脂肪的残渣测粗纤维，则需称量 1.5g左右），准确至0.002g ,然后用滤纸包好（切勿用手，必须戴乳胶手套或棉手套）放入称量瓶中，半开盖，放入105c烘箱中烘3h,干燥器中冷却30min,称重。（实际操作：戴手套，用铅笔给滤纸编号，准确称量 品，记m;滤纸和样品重，记 m）1g左右的风干样品，即 1.0XXXg风干样2、滤纸包将低于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醛中为准，将滤纸包放入抽提管，在抽提瓶内加无水乙醛 60100mL（占抽提瓶的 工2）,浸泡一夜（浸23泡可以缩短提取时间），在6075c的水浴（用蒸储水）上加热，使乙醛回流，控制乙醛回流次数为每小时 10次，共回流50次（含油高的试样约 70次），以检查抽提管 流出的乙醛挥发后不留下油迹为抽提终点。（乙醛易挥发，要及时添加，不用时，要从抽提瓶内倒出，回收。）3、取出试样包，仍用原抽提瓶回收乙醛直至抽提瓶中乙醛几乎全部收完。4、将滤纸包取出后放入原称量瓶中散醒（放在托盘中，置于通风处即可），然后在105 c烘箱中烘13h,半开盖，干燥器中冷却 30min,称重。（实际操作：滤纸和样品重， 记m。）EE （%=mmL错误！未找到引用源。 错误！未找到引用源 mm：浸提前烘干的称量并S及滤纸包重（ g）m：浸提后烘干的称量并S及滤纸包重（ g）重复性：EF% 100% 允许相对偏差为 3%EF%100%允许相对偏差为 5%注：称量瓶取不下来，所以不称。五、粗纤维（CE纤维素是植物细胞壁的主要成分，它是高分子化合物，不溶于水和任何有机溶剂，在稀酸或稀碱中也相当稳定，但与硫酸或盐酸共热时可水解为“-葡萄糖。根据纤维素的性质，测定时首先将其与淀粉、蛋白质等物质分离，然后定量。饲料中粗纤维的测定（酸碱法）一、适用范围本方法适用于各种混合饲料、配合饲料、浓缩饲料及单一饲料粗纤维的测定。二、 测定原理 用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去醇可溶物，经高温灼烧扣除矿 物质的量，所余量为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下, 测出的概略养分，其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素等。三、试剂及配制1、硫酸：0.255 0.005N ,每100 mL含硫酸1.25g （0.7mL）,应用氢氧化钠标准溶液标定。2、氢氧化钠：分析纯， 0.313 0.005N ,每100 mL含氢氧化钠1.25g应用邻苯二甲酸氢钾 法标定，不含或微含碳酸钠。3、酸洗石棉：市售或自制（中等长度酸洗石棉在 1:3的盐酸中煮沸45min,过滤后于550c 灼烧16h,用0.255N硫酸浸泡且煮沸30min,过滤，且用水洗净酸，同样用 0.313N氢氧化 钠溶液煮沸30min,用少量硫酸溶液洗一次，再用水洗净，烘干后于550 c灼烧2h,其空白试验结果为每克石棉含粗纤维值小于1mg ）4、95叱醇：化学醇5、乙醛：化学醇6、正辛醇：分析纯，防泡剂四、测定步骤1、酸处理：用分析天平称取12g试样，准确至 0.0002g，用乙醛脱脂，（含脂肪小于1%T不脱脂，含脂肪110却是必须的，但建议月脂，含脂肪在10%A上的必须脱脂或用测脂肪后的试样残渣）,放入烧杯中，加浓度准确为0.255N （1.25%）的且已沸腾的 H2SO 溶液200 mL,和1滴正辛醇，立即置于电炉上加热，应使其在2min内沸腾，且连续微沸301min,注意保持硫酸浓度不变（可补加沸的蒸储水）且试样不应离开溶液沾到瓶壁上， 随后用分子筛（40目）系于抽滤漏斗进行抽滤，56次，残渣用沸蒸储水冲洗， 至中性（用 蓝色石蕊试纸测试，不变红）后抽干。NaOHB200 mL30+ 1min,保证碱1进行抽滤，至2、碱处理：取下不溶物放入烧杯中，加准确浓度（0.313N）且已沸腾的和1滴正辛醇，立即置于电炉上加热，使其在 2min内沸腾，且连续微沸 浓度不变（可补加沸的蒸储水），试样不应离开溶液沾到瓶壁上，随后同 中性（红色石蕊试纸不变色）。3、醇、醛处理：将古氏堪蜗置于过滤装置上，加入适当的酸洗石棉悬浮液（以石棉厚度均匀，不透光为宜），抽滤，然后用量筒称取10 mL乙醇（脱水）冲洗塔竭残渣，再加 10 mL乙醍（脱脂）冲洗。4、烘干、灰化：取下古氏堪蜗进行散醒（乙醛易燃），然后将古氏堪蜗和残渣半开盖于105c烘箱中烘3h,取出置于干燥器中冷却30min,称重，记 m,再炭化，然后将古氏塔竭半开盖于550c马福炉中中灼烧 2h,然后降温（200c以下）1h ,取出在干燥器中冷却30min ,称日蜗及灰重，记m2。CF = mm2 x 100 %m： 105 c烘干后增期及试样残渣重（g）m： 550 C灼烧后土甘蜗及试样残渣重（g）m试样（未脱脂时）重（g）重复性：CF 10% ,允许相对偏差为 4%注意：古氏堪蜗不可以抽太干，特别是应当使用开关来停止抽滤，以免使用拔胶管结束抽 滤时，古氏塔端内样品腾起，翻转。- 20 -纤维素的分析测定:、测定原理:植物性饲料中性洗涤剂中性洗涤剂溶解物（NDS中性洗涤纤维（NDF（蛋白质、脂肪、淀粉、糖）（纤维素、半纤维素、木质素、硅酸盐）酸性洗涤剂酸性洗涤纤维（ADF）酸性洗涤剂溶解物（ADS（纤维素、木质素、硅酸盐）72陶酸（半纤维素）残渣溶解物（木质素、硅酸盐）（纤维素）550C, 2h,灰化烧尽（逸出）残渣酸性洗涤木质素（ADD（灰分，即硅酸盐）、试剂及配制1、中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸钠（EDTA）（GoHLNNa 2HQ 化学纯，372.84）和 6.8g 硼酸钠（NaBrO 10HQ 化学纯，381.37 ） 一同放入1000mL刻度烧杯中，加入少量蒸储水，加热溶解后，再加入 30g十二烷 基硫酸钠（G2H5NaOS,化学纯，2888.38 ）和10mL乙二醇乙醛（GH10Q,化学纯，90.12）; 称取4.56g无水磷酸氢二钠（NaHPO化学纯，141.96）置于另一烧杯中，加少量蒸储 水微微加热溶解后， 倾入第一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000mL,此溶液pH在6.97.1左右（pH一般不需要调整）2、酸性洗涤剂（2%F六烷三甲基澳化钱）：称取 20g十六烷三甲基澳化俊（CTAB化学纯, 364.47 ）溶于1000mL 1.00mol/L 硫酸溶液中，搅拌溶解，必要时过滤。（难溶解，需要 使用磁力搅拌器搅拌约1小时。）3、1.00mol/L硫酸：取约27.87mL浓硫酸(H2SO,化学纯，96%比重1.84 )慢慢加入已装有500mL蒸储水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶内定容，标定。(硫酸遇水放热，热胀冷缩，所以，标定硫酸必须要等到硫酸冷却了才可以。)4、无水亚硫酸钠：NaSO化学Z126.045、丙酮：CHCOCH化学纯，58.086、十氢化蔡： G0H8,化学纯，138.24三、测定步骤1、中性洗涤纤维测定步骤:(1)准确称取风干样(通过 40目)1.0g ,置于高脚烧杯中。(2)加入室温的中性洗涤剂100mL和数滴十氢化泰(消泡剂)以及 0.5g无水亚硫酸钠，不要求十分准确。(3)套上冷凝装置，立即将高脚烧杯置于调温电炉上加热，要求在 510min内煮沸，溶 解沸腾后调节电炉，使其始终保持在微沸状态1h,防止泡沫上升，注意经常摇动烧杯，使烧杯内样品与溶液充分混合和接触。(4)煮沸完毕后，离火冷却 10min,加入沸水，反复抽滤至中性，用试纸检测。(5)将杯中溶液缓慢倒入铺有干燥并称重后的定量滤纸的布氏漏斗上，将残渣全部移入, 抽滤，并用2倍于残渣的沸水冲洗抽滤。(6)用20mL的丙酮分2次冲洗，抽滤。(7)取下滤纸，在 105c烘干30min ,称重。2、酸性洗涤纤维测定步骤：(1)准确称取风干样(通过 40目)1.0g ,置于高脚烧杯中。(2)加入室温的酸性洗涤剂100mL和数滴十氢化蔡。(3)套上冷凝装置，立即将高脚烧杯置于调温电炉上加热，要求在 510min内煮沸，溶 解沸腾后调节电炉，使其始终保持在微沸状态1h,防止泡沫上升，注意经常摇动烧杯，使杯内样品与溶液充分混合和接触。(抽滤)，将残渣用玻璃棒打碎后,(4)趁热用干燥并称重后的定量滤纸在抽滤装置上过滤 用20mL沸水浸泡1530s后冲洗过滤，反复三次。(5)用少量丙酮(也是用 20mL的丙酮分2次冲洗)洗涤残渣，反复冲洗滤液至无色为止, 抽净全部丙酮。(6)取下滤纸，在 105 c烘干30min ,称重。四、计算结果1、NDF (% m：滤纸和NDF （ g）m：滤纸重（g）m 样品重（g）2、ADF (% m：滤纸和ADF重（g）m：滤纸重（g）m 样品重（g）3、半纤维素重（% =NDF%-ADF%4、酸性洗涤木质素（ADD %破%-灰分（硅酸盐） 5、纤维素（为=ADF%经72% HSO处理后的残渣六、饲料中热能的测定饲料的燃烧热即饲料所含的总能（ G6 ,是饲料在燃烧过程中，完全氧化成最终的尾产物 （COH2O及其它气体）所释放的热能。单位重量之物质的燃烧热即该物质的热价kJ/g （1kcal=4.18kJ ）一、测定原理有机物之燃烧系一克分子有机化合物完全氧化时，所能释放出的热量称为该物质的燃烧热。将由消化代谢实验所用的饲料（或日粮）制备成一定重量的测定样品，装于充有25 5atm春氧弹中进行燃烧，燃烧所生之热为氧弹周围已知重量的蒸馏水及热量计整个体系所吸收，并由数显温度计读出水温上升的度数，该上升的度数乘以热量计算体积系和水的热容量之和，即可得出样品的燃烧热。二、氧弹式热量计结构简介1、氧弹：为热量计的主要部分，由耐酸不锈钢所铸成，分弹头与弹体两部，弹体为一壁厚圆筒，筒口处有螺纹，借螺帽使弹头与筒体旋紧，螺帽与弹头间嵌有的耐酸皮圈，当物质燃烧时，弹内压力增加，迫使弹头压紧螺帽，使其间的橡皮垫圈向侧面膨胀而弹体筒口壁密合，弹内压力越大，则密性也就愈严。弹头上有进气阀，针形出气阀与电极栓，进气阀在弹头内有止固阀，停止充氧后，由于弹体内压力增大使止固阀上顶，防止氧气逸出，燃烧后废气田针形出气阀排出。进气阀向下有金属导气管，氧气由进气阀从导气管充入弹体；电极栓向下有一金属棒，与导气管一起构成两电极栓，坩埚悬于二电极之间，试样置于坩埚内，通电后由联在两电极的引火丝点火燃烧，进气管上固定有滤板，防止试样燃烧时火焰直接喷向弹头，并使产生的热流滤板反射后，较均匀地分布于弹内。2、外筒与内筒：为热量计的隔热装置，内筒为内外镀镍的铜制水容器，置于外筒中央的绝热三脚架上。3、搅拌系统：GR-3500 型氧弹式热量计是内外筒同步搅拌的，搅拌器由搅拌马达带动，外筒搅拌转速为 300r/min ，内筒 500r/min ，通过搅拌系统的运动，加速水的循环，使水的温度很快均匀一致。4、数显温度测定仪：点火，计时，搅拌。5、压样机：其用途将粉状试样压成饼状，使用时将压样机固定在桌上，如长期不用，应涂一层无酸凡士林以防生锈。6、弹头座：专供放置弹头之用，便于连接引火丝的操作。7、氧气减阀：一端直接与氧气钢瓶相连，另一端接氧气过滤器或氧弹进气阀，试验时氧弹仅需 25 5kg/cm 2压力而一般氧气钢瓶的压力都很高。因此，须装有减压装置，减压阀有二个压力表，第一表乃指示氧气钢瓶压力；第二表指示工作用的压力，氧弹充氧时所需的压力，可以调整减压阀的手扭来控制。三、对测热室的要求恒温条件下进行，最好选择无窗的或北屋工作室，门窗应严密，室内避免光照射，以及通风和暖气的影响。四、操作步骤1、准备工作：（1）将风干饲料样品称取 15g,再量取及称重10cm引火丝，用压样机将引火丝压入样品 内，将压成饼状的样品放入增期内，将引火丝固定在两电极之上，其中一端应距样品表面 12cm,引火丝切勿接触日竭。（2）加水及充氧：在弹头与弹体装配前，约取510mL蒸储水注入氧弹底部，以吸取燃烧过程中产生的 NO与SO气体，然后用螺帽将弹头与弹体扭紧，进气阀端连接氧气瓶的气 管接头，此时气管接头上的阀门应置于一端，充氧之前应先打开针型阀，先充氧约5kg/cm2左右（1分钟），使弹中空气排尽，然后将针型阀拧紧，充氧压力逐渐增至2530kg/cm2（5分钟左右）。但充氧之后将气管接头上的阀门置于中间，缓慢将充氧压力降至为0,取下氧弹。（3）内外水筒的准备，从外筒的注水口加入蒸储水至离上缘1.0cm处，外筒蒸储水不需要经常更换，待水温与气温一致时， 才能使用GR-3500型热量剂的内筒应加蒸储水3000g,内筒水温度低于外筒水温 0.50.7 C为宜，内筒灌水应在内筒放入外筒，并将氧弹放入内筒 后才可进行。氧弹在内筒应放置在适当的位置，勿使搅拌器的叶片与内筒或氧弹接触，抽 上电极，盖好盖子，将温度计放入内筒。2、测定工作：全部测定工作分为三期：燃烧前期（初期）、燃烧期（主期）及燃烧后期（末 期）。（1）初期：用以了解热由外筒传入内筒的速度、搅拌器开动35min,可开始记录温度，每分钟一次，每分钟温度上升几乎恒定时，可定为初期的起点，然后每隔一分钟读记一次 温度，如此连续 510min。（2）初期末按电钮点火：初期最后一次读温，也就是主期的第一次读温，主期内每半分钟 记录一次，直至温度不再上升为止。（3）末期：主期最后一次读温，也就是末期第一次读温，此期的目的在于测定由内筒传向 外筒的速度，亦每分钟读记温度一次，至每分钟温度变化不大时为止，约510min。3、结束工作：测定温度后，停止搅拌器。首先取下温度计，然后从内筒取出搅拌器，及氧弹，氧弹应静置1/2h，使能溶解的气体完全溶解， 然后将排气口打开，使氧弹剩余的 Q和CO在510min 内徐徐排出，拧开螺帽，取出弹头，小心取出烧剩的引火丝，精确测量其长度，用蒸储水 冲洗氧弹内壁，并用砂纸将进气管、导气管、珀摒擦干净。饲料燃烧热（总能）的计算：口_ T（W + W +C） - QH =m式中：H:饲料样品的燃烧热（cal/g ）T:校正后的实际升高温度（C）W内筒蒸储水重（g）1316C, +1.5 ; 1417C, +0.4 W水的比热校正（g） J1518C, -0.4 ; 1619C, -1.4 ; 1720 C, -2.0C:热容量（J/ C） Q:其它引起发热的热量（cal ）m:样品重量（g）式中T、 W G Q都须经过校正 T = t n-t 0+AtT:校正后的实际升高温度（C）t n:主期末温（C ）t。：主期始温（C） t :因辐射热而导致的温差（C） t= V V m Vr2V：末期温度平均上升的速度（负值）V：末期温度平均下降的速度（正值）m主期中，每1/2 min温度上升0.3 C以上的次数r ：主期中，每1/2 min温度下降0.3 C以上的次数 1316C, W=+1.5 c = ma + Q _（w +AW）T式中：m苯甲酸白质量（g）a:6324cal （苯甲酸的热价） Q:其它来源的热量（cal ）T：校正后的温度（C）W内筒水重（g） W水比热白校正（g）AQ= G+G+GG：引火丝本身燃烧的发热量G：酸的生成热及其在水中的溶解热G：因含硫不同而产生的不同硫酸生成热的校正0=单位长度的热价（cal/cm ） x实际燃烧长度（cm） =0.83cal/cm x长度G=1.43 x 0.1mol/L NaCO所用的 mL数G=1.35X5mg （一般 G、G 略去）”白 ，（T1 -丁4）3000换水量：V =1T1 -丁3T1：内筒水温度丁4：目标温度=外筒温度-0.7丁3：冷水温度六大养分准备猪：水、灰分、能量、脂肪、粗纤维（粗纤维用测过脂肪的样品）一一21/*3重复二65羊：水、灰分、能量、脂肪、中洗、酸洗14*3=42粗灰分马福炉、地摒和盖（34个地摒配1个盖，半盖盖）、干燥器、电炉 +通风橱粗脂肪硫酸纸（称样用）、滤纸、烘箱、干燥器、索氏提取器无水乙醴：每个抽提瓶（6个），可以塞67个脂肪包，无水乙醴 60100mL （占抽提瓶的12）,每次可以回收约 2, 一次约用1瓶多乙醴一一3瓶乙醴 233粗纤维使用测过粗脂肪的样品，以略去乙醴脱脂的步骤。1、硫酸：每 100 mL 含硫酸 1.25g （0.7mL）2、氢氧化钠：每100 mL含氢氧化钠1.25g硫酸：每个样品 200mL*3 个重复 *21 个样品=12600mL/100mL*0.7mL=88.2mL硫酸原液（96%的）氢氧化钠：每个样品200mL*3 个重复*21个样品二12600mL/100mL*1.25g=157.5g氢氧化钠95叱醇：每个样品10mL*3 个重复*21个样品=630mL , 95% 乙醇乙酿 每个样品10mL*3 个重复*21个样品=630mL 乙醴正辛醇：分析纯，防泡剂，每个样品加12滴烧瓶、石蕊试纸（蓝+红）、10mL量筒、古氏地摒、酸洗石棉、烘箱、干燥器、马福炉、胶头滴管、抽滤器中+酸性洗涤纤维 中性洗涤剂:18.6g 乙二胺四乙酸钠（ESTA *42 彳=781.2g6.8g硼酸钠*42彳音=285.6g30g十二烷基硫酸钠*42彳=1260g10mL乙二醇乙醴*42彳=420mL4.56g无水磷酸氢二钠*42彳=191.52g二100mL中性洗涤剂*42倍酸性洗涤剂：20g十六烷三甲基澳化镂+1000mL, 1.00mol/L硫酸溶液=1000mL酸性洗涤剂1.00mol/L 硫酸：取约27.87mL浓硫酸，1000mL容量瓶内定容=1000mL的1.00mol/L 硫 酸*4.2 倍硫酸原液 27.87*4.2=117.054mL丙酮：每个样20mL*3个重复*14个样=840mL丙酮十氢化蔡：每个样数滴无水亚硫酸钠：每个样 0.5g*3个重复*14个样=21g无水亚硫酸钠中性洗涤剂：每个样100mL*3个重复*14个样=4200mL中性洗涤剂酸性洗涤剂：每个样100mL*3个重复*14个样=4200mL酸性洗涤剂1000mL 烧杯（3个）、100mL 容量瓶、1000mL 容量并氏（12个）、高脚烧杯、 电炉、定量滤纸。布氏漏斗、烘箱、热水宝。能量引火丝、氧气瓶六大养分，用量大，必买的做纤维，溶液损失大，应按需要量的1.5倍准备。乙醴硫酸原液（96% 的）88.2mL+ 117.054mL=125.254mL （小半瓶）氢氧化钠一一157.5g （小半瓶）95%乙醇630mL （1.5 瓶）乙二胺四乙酸钠（ESTA）781.2g （1.5 瓶）硼酸钠 285.6g （半瓶）十二烷基硫酸钠1260g（ 2.5 瓶）乙二醇乙醚 420mL（ 1 瓶）无水磷酸氢二钠191.52g （半瓶）十六烷三甲基溴化铵 84g丙酮 840mL（ 2 瓶）测定不同紫花苜蓿品种的粗蛋白（CP）、粗纤维（CF）、粗脂肪（EE）和粗灰分（CA）含量，其中CP采用半微量凯氏定氮法测定，CF采用酸碱分次水解法测定，EE采用索氏浸提法测定，C A采用直接灰化法测定 ：4：粗蛋白用凯氏定氮法测定；粗纤2!用H2SO4和NaOH溶液煮沸消化法测定；粗脂肪用索氏提取法测定；粗灰分用直接灰化法测定。