消毒与灭菌效果监测方法简介

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,消毒与灭菌效果监测,方法简介,在消毒与灭菌效果监测方法中，研究最多、应用较普遍的为压力蒸汽、电离辐射与环氧乙烷三大灭菌技术灭菌效果的监测方法。对紫外线与其它化学消毒剂消毒效果的监测方法也有研究与应用。除电离辐射外，其它方法消毒与灭菌效果的监测，在医院中较常见。,方法可归纳为,4,类：,1.,仪表监测,2.,化学监测,3.,生物监测,4.,程序监测,1,仪表监测,通过仪表测定有关参数，间接了解是否可达到消毒或灭菌的要求。,1.1,常用仪表,温度计,(,留点温度计,),压力计,(,负压压力计,),湿度计,压力、温度、时间自动记录仪,紫外线强度计,电离辐射强度计,电离辐射剂量仪,乙醇水溶液比重计,水中臭氧检测仪,1.2,注意事项,(1),用前应校正或定期校正,(2),布放于有代表性部位,2,化学监测,根据化学物质的物理化学变化，测知杀菌因子的剂量，间接判断是否达到消毒或灭菌的效果。,2.1,监测对象,压力蒸汽灭菌 干热灭菌 紫外线强度 电离辐射剂量 化学消毒剂,2.2,指示材料,2.2.1,压力蒸汽灭菌常用指示材料 化学指示胶带,(,签,),化学指示卡,(,管,),综合性化学指示剂,(,移动式化学指示剂,),化学指示试纸,BD,试验指示图,2.2.2,干热灭菌常用指示材料,化学指示剂 移动式化学指示剂,2.2.3,化学消毒剂常用指示材料,环氧乙烷指示卡 蒸汽,-,甲醛气体灭菌化学指示剂 空气臭氧浓度检测仪,(,管,),消毒剂浓度试纸 戊二醛浓度监测卡,(,管,),2.2.4,其它指示材料,紫外线强度指示卡 电离辐射指示剂,2.3,监测方法,2.3.1,压力蒸汽灭菌监测,硫磺管、苯甲酸管不能用,BD,试验每天一次，用,30cm25cm 2528cm,布巾包 每包外用胶带、内放卡,美国医疗器械改进协会规定：,每包外用胶带、内放卡 每天第一次用预真空压力蒸 汽灭菌器时，,BD,试验,2.3.2,干热或消毒剂气体灭菌监测,将化学指示剂放于包中央 布放于最难达到灭菌的部位,(,或消毒器内各层中央与四角,),2.3.3,紫外线强度监测,开灯照,5 min,后无异常 置卡于灯中央下方垂直,1 m,处 照射,1 min,避免日光直射到卡,2.3.4,消毒液浓度监测,试纸浸湿后,0.51.0 min,比色,3,生物监测,在监测灭菌效果时，用菌的存活与否直接证明是否达到要求。在监测消毒效果时，用测定对菌的杀灭率判断是否达到要求。,3.1,基本要求,灭菌 用菌片,(510,5,510,6,cfu/,片）消毒 用菌片或菌悬液,(,菌药混合液 中含菌量,510,5,510,6,cfu/ml),不同灭菌方法的效果监测，应采用不同的菌种，并对其抗力有一定要求。,灭 菌 生 物,D,值 存活时间 杀灭时间 方 法,指示剂,(min)(min)(min),压力蒸汽 嗜热脂肪杆菌,(1210.5,饱 灭菌,(ATCC 7953),芽胞 和蒸汽条件下,)1.31.9 3.9 19.0,干热灭菌 枯草杆菌黑色变种,(1605 (ATCC 9372),芽胞 条件下,)1.31.9 3.9 19.0,环氧乙烷 枯草杆菌黑色变种,(EO 600mg/L30mg/L,54,灭菌,(ATCC 9372),芽胞,2,RH60%10%,条件下,),2.55.8 7.5 58.0,3.2,监测方法,3.2.1,压力蒸汽灭菌监测,单片菌片装于牛皮纸袋中 放入标准测试包,(30cm30cm25cm),中央或最难透汽处,(2,片,/,包,),，同时 放化学指示卡 置于灭菌器近排气口处,(,上方,),灭菌后，接种于溴甲酚紫蛋白胨培养 液中，,56,培养,7 d(24 h,初步看,),设阴性、阳性对照,美国医疗器械改进协会规定生物指示剂应在下列情况下使用,:,(1),新灭菌器装置后检查,(2),灭菌器大修后验收,(3),常规监测 每周,(,最好每天,)1,次,(4),灭菌人体移植器材,(,待培养结果阴性后，器材才可使用,)(5),周期性质量检测,美国所用标准测试包分两种：,吸水手术巾包 混装包,吸水手术巾包：,含,16,条吸水手术巾，外包以双层布,23cm23cm15cm(1.5 kg),生物指示剂放于,8,与,9,条手术巾间中央 同时放化学指示卡于其侧,混装包：含棉布手术衣,3,件以上，吸水手术巾,12,条，,30,个纱布方，,5,个纱布卷，一条手术大单，外以布包两层。,30cm30cm50cm(4.55.5kg),生物指示剂放于包中央 同时将化学指示卡放于其上方或下方隔一手术巾处,3.2.2,干热或消毒剂气体灭菌监测,干热 菌片装入无菌试管,(1,片,/,管,),布于消毒器内各层对角线内、外角,(2,管,/,点,),消毒剂 菌片装入布,(,纸,),袋 布于器内各层最难达到灭菌处,(,或中央与 四角,),的物品中间灭菌后，接种于营养肉汤中,(,消毒剂需含中和剂,),，,37,培养,7 d(3 d,初步看,),设阴性、阳性对照,3.2.3,物品,(,手,),表面消毒效果监测,物品、手表面可染试验菌或用其含自然菌,(1),物理因子或消毒剂气体：菌片放入无菌平皿中,(2,片,/,皿,),，小型染菌物品 直接布放 消毒器每层布放,2,份,(,内、外,)5,份,(,中央、四角,)(2),消毒液：平皿或适当容器盛消毒液 菌片或小型染菌物品,(,手,),浸泡消毒液中 对大型染菌物品表面喷消毒液 消毒后，对菌片或涂抹采样作活菌计数 设阳性,(,不消毒,),、阴性对照,采样、活菌计数：,菌片投入含,10 ml,采样液试管中 物品、手在采样部位用棉拭往返涂擦,2,次，将棉拭头放入含,10 ml,采样液试管中 振打试管以洗脱菌 取洗脱液培养,48 h,计数菌落数 计算杀灭率,3.2.4,空气,(,自然菌,),消毒效果监测,消毒前、后分别用平板沉降,15 min,采样,37,培养,48 h,平板直径,9 cm,，距地面,1.5 m,布于中央、四角,(30 m,2,布中央与对角线二角,),有条件者可用,FA-1,型多级撞击式采样器,3.2.5,监测消毒液微生物污染,取消毒液,1.0 ml,加入含,9.0 ml,相应中和剂试管中混匀取,0.2 ml,涂抹平板或,0.5 ml,倾注琼脂混匀,20,培养,7 d,：霉菌,37,培养,72 h,：细菌总数细菌总数,(cfu/ml)=,平板菌落数,20(,或,50),3.3,注意事项,(1),检测化学消毒剂效果要用中和剂 消毒 加于采样液中 灭菌 加于培养基中,(2),复方中和剂应注意成分间拮抗,(3),中和剂应经试验证明合适,附表,XXX,中和剂试验结果,组 别 平均菌数,(cfu/ml),消毒剂,+,菌液,(,片,)0 4.5 0.5,消毒剂,+,菌液,(,片,)+,中和剂,20 0.5 4.5,中和剂,+,菌液,(,片,)204 000(,中和剂,+,消毒剂,)+,菌液,(,片,)168 000,正常菌液,(,片,),对照,202 000,未接种菌培养基对照,0,（接种平皿,0.5 ml,，结果为,3,次试验平均）,4,程序监测,依消毒或灭菌处理程序，作回顾性或前瞻性监测。回顾性 据仪表的自动记录或工作人员的现场记录，判断是否达到消毒或灭菌的要求。前瞻性 据拟灭菌物品原始污染菌量、灭菌处理方法的杀菌,D,值和灭菌保证水平,(10,-6,),，设计处理剂量。,结 语,消毒与灭菌效果监测，尤其是生物监测，是一件技术性较强的工作，稍有差错即得不出正确的结论。因此，负责监测的工作人员责任心要强，要经过培训。,